Нитроцефин
 | |
| Идентификаторы | |
|---|---|
| Номер CAS | |
| ПабХим CID | |
| ХимическийПаук | |
| НЕКОТОРЫЙ | |
| ХЭМБЛ | |
| Панель управления CompTox ( EPA ) | |
| Информационная карта ECHA | 100.164.734 |
| Химические и физические данные | |
| Формула | С 21 Ч 16 Н 4 О 8 С 2 |
| Молярная масса | 516.50 g·mol −1 |
| 3D model ( JSmol ) | |
| (проверять) | |
Нитроцефин представляет собой хромогенный субстрат цефалоспоринов, который обычно используется для обнаружения присутствия ферментов бета-лактамаз, продуцируемых различными микробами. бета-лактамазами Устойчивость, опосредованная , к бета-лактамным антибиотикам, таким как пенициллин, является широко распространенным механизмом устойчивости для ряда бактерий, включая членов семейства Enterobacteriaceae , основной группы кишечных грамотрицательных бактерий . Существуют и другие методы обнаружения бета-лактамаз , включая ПЦР ; однако нитроцефин позволяет быстро обнаружить бета-лактамазы с использованием небольшого количества материалов и недорогого оборудования. [ 1 ] [ 2 ]
Структура
[ редактировать ]Как цефалоспорин , нитроцефин содержит бета-лактамное кольцо, которое подвержено бета-лактамазами , опосредованному гидролизу . После гидролиза разложившееся соединение нитроцефина быстро меняет цвет с желтого на красный. Хотя нитроцефин считается цефалоспорином , он, по-видимому, не обладает противомикробными свойствами. [ 1 ]
Деградация и хромогенные свойства
[ редактировать ]Интактные бета-лактамные антибиотики действуют путем связывания с пенициллинсвязывающими белками (PBP), участвующими в синтезе пептидогликана . Бета-лактамазы гидролизуют амидную связь между карбонильным углеродом и азотом в бета-лактамном кольце чувствительных бета-лактамов и представителей подклассов бета-лактамов (включая некоторые цефалоспорины). После гидролиза амидной связи антибиотик теряет способность связывать бактериальные PBP и становится бесполезным. Визуальное обнаружение этого процесса практически невозможно для большинства цефалоспоринов , поскольку сдвиг поглощения ультрафиолета от интактного продукта по сравнению с гидролизованным происходит за пределами видимого спектра . Однако гидролиз нитроцефина вызывает сдвиг ультрафиолетового поглощения внутри спектра видимого света от интактного (желтого) нитроцефина (~ 380 нм) к деградированному (красному) нитроцефину (~ 500 нм), что позволяет визуально обнаружить активность бета-лактамаз на макроскопическом уровне. . [ 1 ]
Анализы обнаружения
[ редактировать ]Следующие анализы описывают методы, в которых нитроцефин можно использовать для обнаружения ферментов бета-лактамаз с использованием недорогих материалов и оборудования. [ 3 ] Рабочие растворы нитроцефина лежат в пределах 0,5–1,0 мг/мл.
Анализ поверхности слайдов
- Нанесите одну каплю нитроцефина 0,5 мг/мл на поверхность чистого предметного стекла.
- Выберите колонию с поверхности агара с помощью стерильной петли и смешайте с каплей.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамаз .
Прямой контактный анализ
- Нанесите одну каплю нитроцефина 0,5 мг/мл непосредственно на поверхность изолированной колонии .
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамаз .
Анализ суспензии бульона
- К 1 мл бульонной суспензии добавить 3-5 капель нитроцефина 0,5 мг/мл.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамаз .
Анализ лизированных клеток
- Лизируйте 1 мл клеточной суспензии путем обработки ультразвуком.
- К лизированной клеточной суспензии добавляют 3-5 капель нитроцефина 0,5 мг/мл.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамаз .
Анализ фильтровальной бумаги
- Поместите небольшой кусочек фильтровальной бумаги (~3 х 3 см) в чистую чашку Петри или другую чистую изолированную поверхность и насытите (3-5 мл) нитроцефином в концентрации 0,5 мг/мл.
- Выберите изолированную колонию и нанесите ее на поверхность пропитанной фильтровальной бумаги.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает на бета-лактамаз активность
См. также
[ редактировать ]- Устойчивость к антибиотикам
- противомикробный
- Бета-лактам
- β-лактамный антибиотик
- Бета-лактамазы
- Цефалоспорин
- Пептидогликан
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Jump up to: а б с О'Каллаган CH, Моррис А., Кирби С.М., Шинглер А.Х. (апрель 1972 г.). «Новый метод обнаружения бета-лактамаз с использованием хромогенного цефалоспоринового субстрата» . Антимикробные средства и химиотерапия . 1 (4): 283–8. дои : 10.1128/AAC.1.4.283 . ПМК 444209 . ПМИД 4208895 .
- ^ Кудрон П.Е., Моланд Э.С., Сандерс CC (октябрь 1997 г.). «Встреча и обнаружение бета-лактамаз расширенного спектра у представителей семейства Enterobacteriaceae в медицинском центре ветеранов: ищите и можете найти» . Журнал клинической микробиологии . 35 (10): 2593–7. doi : 10.1128/jcm.35.10.2593-2597.1997 . ПМК 230016 . ПМИД 9316913 .
- ^ Парр Т.Р., Пай Ч., Брайан Л.Е. (июль 1984 г.). «Простой метод скрининга бета-лактамаз-положительных и -отрицательных, устойчивых к ампициллину изолятов Haemophilus influenzae» . Журнал клинической микробиологии . 20 (1): 131–2. doi : 10.1128/jcm.20.1.131-132.1984 . ПМК 271264 . ПМИД 6378964 .
- ^ «Нитроцефиновый протокол» (PDF) . ТОКУ-E.com . Архивировано из оригинала (PDF) 17 апреля 2016 года.