Конструкция Коде «функция-спейсер-липид»

Коде «Функция-спейсер-липид» (FSL) (Kode Technology) представляют собой амфифатические вододиспергируемые Конструкции инженерные конструкции биоповерхностей, которые можно использовать для конструирования поверхности клеток , вирусов и организмов или для модификации растворов и небиологических поверхностей с помощью биологически активных веществ. ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]}^{[ 3 ]} Конструкции FSL Kode спонтанно и стабильно встраиваются в клеточные мембраны. Конструкции FSL Kode со всеми этими вышеупомянутыми функциями также известны как конструкции Kode. ^{[ 1 ]} Процесс модификации поверхностей с помощью конструкций FSL Kode известен как «кодирование», а полученные в результате «кодированные ячейки » ^{[ 1 ]} Вирусы и липосомы называются соответственно кодецитами . ^{[ 1 ]}^{[ 4 ]} и кодевирионы . ^{[ 1 ]}^{[ 5 ]}

Описание технологии

Все живые поверхности украшены разнообразным набором сложных молекул, которые являются ключевыми модуляторами химических связей и других функций, таких как защита, адгезия , инфекционность , апоптоз и т. д. Конструкции Функционально-спейсер-липид (FSL) Коде могут быть синтезированы для имитации биоактивные компоненты присутствуют на биологических поверхностях, а затем представляют их новыми способами. ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]} Архитектура конструкции FSL Kode, как следует из названия, состоит из трех компонентов - функциональной головной группы, спейсера и липидного хвоста. ^{[ 3 ]} Эта структура аналогична минифигурке Lego в том смысле, что она состоит из трех структурных компонентов, каждый из которых имеет отдельное назначение. ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]} В примерах, показанных на всех рисунках, минифигурка для аналогии использовалась Lego. Однако следует понимать, что это всего лишь представление, и истинное структурное сходство между минифигурками Lego и конструкциями FSL Kode значительно различается (рис. 1) . Функциональная группа FSL эквивалентна голове минифигурки Lego, причем обе части находятся на конце и несут функциональные компоненты персонажа. Прокладка FSL эквивалентна телу минифигурки Lego, а руки на минифигурке представляют собой замены, которые могут быть встроены в химический состав прокладки. Липид FSL прикрепляет его к липидным мембранам и придает конструкции FSL амфифатическую природу, что может привести к ее самосборке. Поскольку липидный хвост может действовать непосредственно как якорь, он аналогичен ногам минифигурки Lego.

Гибкий дизайн

Функциональная группа, спейсер и компоненты липидного хвоста конструкции FSL Kode могут быть разработаны индивидуально, в результате чего получаются конструкции FSL Kode со специфическими биологическими функциями. ^{[ 2 ]} Функциональная головная группа обычно представляет собой биоактивный компонент конструкции, а различные спейсеры и липиды влияют на ее представление, ориентацию и расположение на поверхности. Критическим для определения конструкции FSL Kode является требование быть диспергируемым в воде и спонтанно и стабильно включаться в клеточные мембраны. Другие липидные биоконъюгаты , которые включают компоненты, подобные FSL, но не обладают этими свойствами, не называются конструкциями Коде «Функция-спейсер-липид». ^{[ 2 ]}

Функциональные группы

Источник: ^{[ 3 ]}

Большой набор функциональных групп уже включен в конструкции FSL Kode. К ним относятся:

Углеводы – от моносахаридов до полисахаридов групп крови , включая антигены . ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]}^{[ 6 ]}^{[ 7 ]}^{[ 8 ]}^{[ 9 ]}^{[ 10 ]}^{[ 11 ]}^{[ 12 ]} гиалуроновой кислоты олигомеры и сиаловой кислоты остатки ^{[ 2 ]}
Пептид/белок – начиная от отдельных аминокислот ^{[ 8 ]}^{[ 13 ]}^{[ 14 ]}^{[ 15 ]} к белкам размером с антитела ^{[ 1 ]}
Этикетки – включая флуорофоры , ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]}^{[ 5 ]}^{[ 9 ]}^{[ 10 ]}^{[ 16 ]}^{[ 17 ]} радиоизотопы , ^{[ 1 ]}^{[ 5 ]} биотин , ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]}^{[ 9 ]}^{[ 10 ]} и т. д.
Другое – химические фрагменты, такие как малеимид , ^{[ 15 ]}^{[ 18 ]} кликов остатки , ПЭГ , заряженные соединения

Примечание 1: Мультимерный – остаток F может быть представлен в виде мультимеров с контролируемым интервалом и быть переменным.

Примечание 2. Масса. Масса, которую можно закрепить с помощью конструкций FSL Kode, может варьироваться от 200 до >1x10. ⁶ И

Проставки

Источник: ^{[ 3 ]}

Прокладка является неотъемлемой частью конструкции FSL Kode и придает ей несколько важных характеристик, включая вододиспергируемость . ^{[ 2 ]}

Длина – длина спейсера может варьироваться, например 1,9 нм (Ad), 7,2 нм (CMG2), 11,5 нм (CMG4), ^{[ 2 ]} что позволяет улучшить представление функциональных групп на биоповерхности.
Оптимизирует презентацию «F» — презентация биоактивного вещества (функциональной группы) на спейсере уменьшает стерические препятствия и увеличивает количество биологически активных поверхностей, открытых и доступных для взаимодействия.
Жесткость – проставка может быть модифицирована как гибкая, так и жесткая в зависимости от желаемых характеристик.
Замены (представлены листьями на стебле) – проставка может изменяться как по заряду , так и по полярности .
Ветви - обычно спейсер линейный, но он также может быть разветвленным, включая определенное расстояние между ветвями для оптимизации представления и взаимодействия группы F.
Инертность . Для проектирования конструкций FSL Коде важна биологическая инертность спейсера. Важно отметить, что эта особенность означает, что SL-компоненты конструкций не реагируют с неразбавленной сывороткой. Следовательно, конструкции совместимы при использовании in vivo и могут улучшить чувствительность диагностического анализа, позволяя использовать неразбавленную сыворотку.

Липиды

Источник: ^{[ 3 ]}

Липидный амфифильных хвост необходим для обеспечения возможности внедрения и удержания липидной мембраны , а также для придания конструкции характеристик , которые обеспечивают гидрофильное поверхностное покрытие (за счет образования билипидных слоев ). Различные мембранные липиды , которые можно использовать для создания FSL, имеют разные физико-химические характеристики мембран и, таким образом, могут влиять на биологическую функцию FSL. Липиды в конструкциях FSL Kode включают: ^{[ 2 ]}

Диацил/диакил, например, DOPE
Стеролы, например холестерин
Керамиды

Оптимизация представления функциональной группы (F)

Рис. 3 Схема сравнения презентации антигенов в иммуноанализах при типичном прямом присоединении и в функции-спейсер-липид (по аналогии с цветком).

На верхнем изображении показан антиген (цветочная головка), представленный в различных форматах непосредственно на твердой поверхности. Конструкция случайным образом прикрепляется к твердой поверхности.

На нижнем изображении показан тот же антиген (головка цветка), представленный в оптимальной ориентации в виде конструкции FSL со спейсером (стебельком), удерживающим его от твердой поверхности. Липидный хвост (корни) заставляет конструкцию прикрепляться к твердой поверхности.

Рис. 4. Комбинации различных спейсеров, липидов и других модификаций можно использовать для оптимизации функциональности функциональной группы конструкции FSL.

На всех схемах одна и та же функциональная группа представлена головкой подсолнуха. Первые четыре примера демонстрируют мономерное представление F, причем первый пример представляет собой короткую прокладку (Ad) размером 1,9 нм (цветочный стебель). Второй и четвертый с более длинными ножками (прокладками) представляют собой прокладки CMG2 7,2 нм и прокладки CMG4 11,5 нм соответственно. Вторая и третья конструкции имеют одинаковые спейсеры, но липидный хвост третьей конструкции представляет собой холестерин , а не ДОФЭ .

Последние три примера, все основанные на спейсерах CMG2 (стебли), с липидным хвостом DOPE (корни), представляют собой мультимерные представления F. Первый из них представляет собой простое дублирование группы F, а следующий имеет дополнительный спейсер между F. группы. Окончательная конструкция представляет собой презентацию кластера.

Одной из важных функций конструкции FSL является то, что она может оптимизировать презентацию антигенов как на поверхности клеток, так и на твердофазных мембранах. Такая оптимизация достигается в первую очередь за счет спейсера и во вторую очередь за счет липидного хвоста. В типичном иммуноанализе антиген наносится непосредственно на поверхность микропланшета и связывается с поверхностью либо случайным образом, либо в предпочтительной ориентации в зависимости от остатков, присутствующих на поверхности этого антигена. Обычно этот процесс осаждения является неконтролируемым. Напротив, конструкция FSL Kode, связанная с микропланшетом, представляет антиген вдали от поверхности в ориентации с высоким уровнем воздействия окружающей среды. Более того, в типичных иммуноанализах используются рекомбинантные пептиды , а не отдельные пептидные антигены. Поскольку рекомбинантный пептид во много раз больше интересующего эпитопа , на микропланшете также представлено множество нежелательных и нежелательных пептидных последовательностей. Эти дополнительные последовательности могут включать нежелательные последовательности, связанные с микробами (как определено BLAST- анализ), что может вызвать проблемы низкого уровня перекрестной реактивности. Часто механизм, с помощью которого иммуноанализ способен преодолеть этот низкий уровень активности, заключается в разбавлении сыворотки так, чтобы не были видны низкие уровни микробных реактивных антител , и только высокие уровни специфических антител приводят к интерпретируемому результату. Напротив, конструкции FSL Kode обычно используют специально выбранные пептидные фрагменты (до 40 аминокислот), ^{[ 15 ]}^{[ 18 ]} тем самым преодолевая перекрестную реактивность с микробными последовательностями и позволяя использовать неразбавленную сыворотку (что повышает чувствительность ).

Компонент F можно дополнительно расширить, представив его в мультимерных форматах и с определенным интервалом. Четыре типа мультимерного формата включают линейные повторяющиеся единицы, линейные повторяющиеся единицы с интервалом, кластеры и разветвления (рис. 4) .

Механизмы взаимодействия

Рис. 5а. Схематическое поперечное сечение мицелл FSL . Конструкция FSL по природе своего состава, обладая как гидрофобными , так и гидрофильными участками, является амфифильной (или амфифатической). Эта характеристика определяет способ взаимодействия конструкции с поверхностями. Присутствуя в растворе, они могут образовывать простые мицеллы или принимать более сложные двухслойные структуры.

Рис. 5б. Гидрофобное поверхностное покрытие FSL. Гидрофобный липидный хвост конструкции FSL будет взаимодействовать и закреплять конструкции FSL непосредственно на гидрофобных поверхностях.

Рис. 5в. Гидрофильное поверхностное покрытие FSL. Гидрофобный . липидный хвост конструкции FSL не будет напрямую взаимодействовать с гидрофильными поверхностями Вместо этого из-за амфифильной природы FSL конструкция спонтанно образует бислой. Поверхность бислоя будет гидрофильной, что позволит ему взаимодействовать и закреплять FSL на гидрофильной поверхности.

Амфифильная конструкция FSL Kode

Конструкция FSL Коде по природе своего состава, обладая как гидрофобными, так и гидрофильными участками, является амфифильной (или амфипатической). Эта характеристика определяет способ взаимодействия конструкции с поверхностями. Когда они присутствуют в растворе, они могут образовывать простые мицеллы или принимать более сложные двухслойные структуры (два упрощенных примера показаны на рис. 5а) . Ожидаются более сложные конструкции. Фактическая природа мицелл FSL не определена. Однако, исходя из нормальной структурной функции мицелл, ожидается, что она будет частично определяться комбинацией функциональной группы, спейсера и липида вместе с температурой, концентрацией , размером и гидрофобностью/гидрофильностью для каждого типа конструкции FSL Коде.

Поверхностное покрытие будет происходить посредством двух теоретических механизмов, первый из которых представляет собой прямое гидрофобное взаимодействие липидного хвоста с гидрофобной поверхностью, приводящее к образованию монослоя FSL на поверхности (рис. 5b) . Гидрофобное связывание FSL будет осуществляться через его гидрофобный липидный хвост, непосредственно взаимодействующий с гидрофобной ( липофильной ) поверхностью. Второе поверхностное покрытие будет происходить за счет образования бислоев, поскольку липидный хвост не может вступать в реакцию с гидрофильной поверхностью. В этом случае липиды будут индуцировать образование бислоя, поверхность которого будет гидрофильной. Эта гидрофильная мембрана затем будет напрямую взаимодействовать с гидрофильной поверхностью и, вероятно, будет инкапсулировать волокна . Это гидрофильное двухслойное связывание является ожидаемым механизмом, с помощью которого FSL способны связываться с волокнистыми мембранами, такими как бумага. ^{[ 19 ]} и стекловолокна (рис. 5в) и (рис. 9) .

Модификация липидной мембраны

Рис. 6а. Плазматическая мембрана, модифицированная конструкциями FSL (по аналогии с подсолнечником), образующая мембрану кодецита .

Рис. 6б. Конструкции FSL (по аналогии с подсолнечником), вставленные через свой липидный хвост (корни) в липосому . Прокладка FSL (стебель) удерживает функциональную группу FSL (головка цветка) на расстоянии от поверхности.

После маркировки поверхности выбранными биоактивными веществами F конструкции будут присутствовать и ориентироваться на поверхности мембраны. Ожидается, что FSL будет очень мобильным внутри мембраны, и выбор липидного хвоста будет влиять на относительное распределение внутри мембраны. ^{[ 2 ]}^{[ 7 ]} Ожидается, что конструкция, если она не имеет триггерного поведения, останется поверхностной. Однако модификация не является постоянной в живых клетках, и конструкции будут потеряны (израсходованы) со скоростью, пропорциональной активности мембраны и скорости деления клетки (при этом мертвые клетки остаются высокомаркированными). ^{[ 1 ]} Кроме того, при присутствии in vivo с липидами сыворотки FSL будут элюироваться из мембраны в плазму со скоростью около 1% в час. ^{[ 5 ]}^{[ 10 ]} В фиксированных клетках или неактивных клетках (например, эритроцитах), хранящихся в бессывороточной среде, конструкции сохраняются нормально. ^{[ 1 ]}

Липосомы легко кодировать, просто добавляя в препарат конструкции FSL Kode. Контакт кодированных липосом с микропланшетами или другими поверхностями может привести к образованию меток на поверхности микропланшета.

Небиологическое поверхностное взаимодействие

Небиологические поверхностные покрытия будут возникать посредством двух механизмов, первый из которых представляет собой прямое гидрофобное взаимодействие липидного хвоста с гидрофобной поверхностью, приводящее к образованию монослоя FSL на поверхности. Второе поверхностное покрытие будет происходить за счет образования бислоев, которые, вероятно, либо инкапсулируют волокна, либо образуют гидрофильную F-группу. Это ожидаемый механизм, с помощью которого FSL связываются с волокнистыми мембранами, такими как бумага. ^{[ 19 ]} и стекловолокна. Недавнее исследование показало, что при оптимизации конструкций FSL Kode они могут за несколько секунд гликозилировать практически любую небиологическую поверхность, включая металлы, стекло, пластик, резину и другие полимеры. ^{[ 20 ]}

Особенности технологии

Технологические особенности конструкций FSL Kode и процесса кодирования можно резюмировать следующим образом:

Быстро и просто – простой контакт в течение 10–120 минут, конструкции спонтанно и стабильно соединяются – промывка не требуется. ^{[ 1 ]}
Воспроизводимость – одни и те же переменные (время, температура, концентрация) дают один и тот же результат. ^{[ 1 ]}^{[ 6 ]}
Токсичность – конструкции FSL биосовместимы , диспергируются в биологических растворах без растворителей , моющих средств. Они метят нековалентно и не являются генетическими. нормальная жизнеспособность и функциональность. В модифицированных клетках/вирионах/организмах сохраняется ^{[ 7 ]}^{[ 9 ]}^{[ 10 ]}^{[ 16 ]} Эксперименты по изучению токсичности/жизнеспособности на мелких лабораторных животных, рыбках данио , клеточных культурах , сперматозоидах и эмбрионах не выявили токсических эффектов в физиологических пределах.
Амфифильность – амфифильная природа конструкции FSL Kode делает их диспергируемыми в воде (прозрачный раствор мицелл), однако при взаимодействии с мембраной они внедряются/покрываются и становятся водостойкими.
Вариативный дизайн : одну букву F можно представить более чем 100 способами, варьируя спейсер и липид.
Высокая биовидимость – поскольку спейсер удерживает фрагмент F от мембраны, он способен достигать повышенной чувствительности, специфичности и реактивности, которые можно оптимизировать за счет использования нескольких и переменных представлений биомаркеров на одной и той же поверхности.
Аддитивность – модификация FSL совместима с другими технологиями, что позволяет пользователям добавлять дополнительные функции к клеткам/вирусам/организмам/поверхностям, уже модифицированным более традиционными методами. К поверхности можно одновременно добавить несколько конструкций FSL, просто создав смесь конструкций FSL Kode. Конструкции встраиваются в мембраны живых или фиксированных клеток ( глутаральдегид ).

Простой синтез пептида FSL - существует конструкция FSL Kode с реактивной функциональной группой с малеимидом в качестве функциональной группы, которую можно использовать для получения FSL из цистеинсодержащих пептидов, белков или любых других тиолов , представляющих биологический интерес. ^{[ 15 ]}^{[ 18 ]} Эффективный синтетический подход основан на хорошо известном нуклеофильном присоединении Михаэля к малеимидам (рис. 7) .
Синтетические «гликолипиды» - одно семейство конструкций FSL представляет собой синтетические гликолипиды с четко выраженными гидрофобными хвостами и головными углеводными группами.

Поверхности и решения мембран Koded

Конструкции FSL имеют широкий спектр применения и используются для изменения следующего:

Клетки – клетки крови , ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]}^{[ 4 ]}^{[ 6 ]}^{[ 8 ]}^{[ 9 ]}^{[ 10 ]}^{[ 11 ]}^{[ 12 ]}^{[ 13 ]}^{[ 14 ]}^{[ 15 ]}^{[ 17 ]}^{[ 19 ]}^{[ 21 ]} линии культуры , ^{[ 1 ]} эмбрионы , ^{[ 1 ]} сперматозоиды ^{[ 1 ]}
Вирусы ^{[ 5 ]} - грипп, ^{[ 2 ]} корь , ветряная оспа
Организмы – паразиты , микробы , рыбки данио. ^{[ 16 ]}
Липосомы – также мицеллы, липидные частицы ^{[ 9 ]}
Поверхности/волокна – гидрофобные или гидрофильные мембраны/волокна, бумага, ^{[ 19 ]} нитроцеллюлоза , хлопок, шелк, стекло, тефлон , диоксид кремния , магнитные шарики (микросферы) ^{[ 22 ]} и т. д.
Растворы – физиологический раствор, плазма/сыворотка, питательные среды.

Методика использования FSL (кодирование)

Конструкции FSL в растворе ( физрастворе ) и при контакте спонтанно включаются в клеточные и вирусные мембраны. ^{[ 1 ]} Методика предполагает простое приготовление раствора конструкций FSL в диапазоне 1–1000 мкг / мл . Фактическая концентрация будет зависеть от конструкции и количества конструкции, необходимой в мембране. К одной части клеток добавляют одну часть раствора FSL (до 100% суспензии ) и инкубируют при заданной температуре в диапазоне 4–37 °C (39–99 °F) в зависимости от температурной совместимости клеток. модифицируется. Чем выше температура, тем быстрее скорость внедрения FSL в мембрану. Для эритроцитов инкубация при 37 ° C в течение 2 часов обеспечивает вставку> 95%, при этом вставка не менее 50% достигается в течение 20 минут. В целом, время введения FSL, составляющее 4 часа при комнатной температуре или 20 часов при 4 °C, дает результаты, аналогичные 1 часу при 37 °C для внедрения FSL на основе углеводов в эритроциты. ^{[ 1 ]} Полученные кодециты или кодевирионы не требуется отмывать, однако этот вариант следует рассмотреть, если в процессе кодирования используется избыток конструкции FSL.

Приложения

Конструкции FSL Kode использовались для исследований и разработок, диагностических продуктов и в настоящее время исследуются в качестве потенциальных терапевтических агентов.

Кодециты

FSL использовались для создания кодецитов эритроцитов человека, которые использовались для обнаружения и идентификации аллоантител к группе крови. ^{[ 13 ]}^{[ 14 ]}^{[ 15 ]} как АВО , имитаторы подгруппы ^{[ 11 ]} системы контроля качества АВО, ^{[ 4 ]} серологические обучающие наборы ^{[ 12 ]} и диагностика сифилиса . ^{[ 21 ]} Kodecytes также продемонстрировали, что FSL-FLRO4 является подходящим реагентом для маркировки эритроцитов (PRBC) на любом этапе обычного хранения, и стремятся облегчить разработку иммунных анализов и моделей трансфузии, ориентированных на изучение механизмов, участвующих в иммуномодуляции, связанной с переливанием крови ( ПОДРЕЗАТЬ). ^{[ 17 ]} Мышиные кодециты были экспериментально использованы для определения in vivo . выживаемости клеток ^{[ 10 ]} и создать модели трансфузионных реакций . ^{[ 9 ]}^{[ 10 ]} Кодециты рыбок данио использовались для определения миграции клеток in vivo в реальном времени . ^{[ 16 ]} Кодециты были использованы для создания диагностики гриппа. ^{[ 2 ]} Кодециты, модифицированные FSL-GB3, не смогли заразиться вирусом ВИЧ . ^{[ 7 ]}^{[ 23 ]}

Кодевирионы

Кодевирионы — это модифицированные вирусы FSL. Несколько конструкций FSL Kode использовались для маркировки вирусов для облегчения их проточной цитометрической визуализации. ^{[ 5 ]} и отслеживать их распределение в реальном времени на животных моделях. ^{[ 5 ]} Их также использовали для модификации поверхности вирусов с целью нацеливания на них для прикрепления опухолей ( онколитические ). ^{[ 5 ]}

Кодсомы

Кодесомы представляют собой липосомы, декорированные конструкциями FSL Kode. Они использовались для нанесения конструкций FSL на микропланшеты для создания диагностических тестов . Они также имеют потенциал для терапевтического использования. ^{[ 24 ]}

Кодированные решения

Это растворы, содержащие конструкции FSL Kode, где конструкция существует в виде прозрачной мицеллюлярной дисперсии. FSL-GB3 в виде раствора/геля использовался для подавления ВИЧ-инфекции. ^{[ 7 ]} и нейтрализовать токсин Шига . ^{[ 7 ]} Группа крови A FSL в виде раствора использовалась для нейтрализации циркулирующих антител на мышиной модели и обеспечения возможности переливания несовместимой группы крови A ( мышиных кодецитов). ^{[ 9 ]} Этот модельный эксперимент был использован для демонстрации способности FSL нейтрализовать циркулирующие антитела и обеспечить возможность переливания несовместимой крови или трансплантации органов . ^{[ 19 ]}

Кодированные поверхности

Все конструкции FSL Kode диспергируются в воде и поэтому совместимы со струйными принтерами . Конструкции FSL можно распечатать на стандартном настольном струйном принтере непосредственно на бумаге для проведения иммуноанализов. ^{[ 19 ]} Пустой чернильный картридж заполняется конструкцией FSL, и слова, штрих-коды печатаются лунок . или графика. К поверхности прикрепляется шаблон из плексигласа для создания реакционных В этом случае метод представляет собой стандартную процедуру ИФА , но блокирование сыворотки не требуется и можно использовать неразбавленную сыворотку. Типичная процедура следующая: добавляют сыворотку, инкубируют, промывают погружением, добавляют вторичный конъюгат EIA, инкубируют, промывают, добавляют осаждающий субстрат NBT / BCIP и останавливают реакцию при проявке промыванием (рис. 9) . Результат стабилен в течение многих лет.

См. также

Внешние ссылки

Конструкции FSL: простой метод модификации поверхности клеток/вирионов с помощью ряда биологических маркеров без ущерба для их жизнеспособности - бесплатная видеостатья журнала Visualized Experiments (JOVE)
[1] kodecyte.org — академический ресурс по Kode Technology.

Ссылки

^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час ^я ^дж ^к ^л ^м ^н ^тот ^п ^д ^р ^с ^т ^в ^v Блейк, Дебби А; Бовин, Николай V; Бесс, Дэн; Генри, Стивен М (2011). «Конструкции FSL: простой метод модификации поверхности клеток/вирионов с помощью ряда биологических маркеров без влияния на их жизнеспособность» . Журнал визуализированных экспериментов . 54 (е3289). дои : 10.3791/3289 . ПМЦ 3211133 . ПМИД 21847082 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час ^я ^дж ^к ^л ^м ^н ^тот ^п Корчагина Елена; Тузиков, Александр; Формановский Андрей; Попова, Инна; Генри, Стивен; Бовин, Николай (2012). «На пути к созданию гликоландшафтов клеточных мембран с помощью гликан-липидных конструкций». Исследование углеводов . 356 : 238–46. дои : 10.1016/j.carres.2012.03.044 . ПМИД 22551471 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и Корчагина Е.Ю.; Генри, С.М. (16 июля 2015 г.). «Синтетические гликолипидоподобные конструкции как инструменты гликобиологических исследований, диагностики и как потенциальные терапевтические средства». Биохимия (Москва) . 80 (7): 857–871. дои : 10.1134/S0006297915070068 . ISSN 0006-2979 . ПМИД 26542000 . S2CID 14965044 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Генри, Стивен М (2009). «Модификация эритроцитов для использования в лабораторном контроле качества». Современное мнение в гематологии . 16 (6): 467–472. дои : 10.1097/MOH.0b013e328331257e . ПМИД 19680123 . S2CID 37416831 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час Хадак, Элизабет М; Федершпиль, Марк Дж; Черный, Евгений; Тузиков, Александр; Корчагина Елена; Бовин, Николай V; Рассел, Стивен; Генри, Стивен М (2011). «Флуоресцеин и меченные радиоактивным изотопом конструкции Function-Spacer-Lipid позволяют проводить простую биовизуализацию вирионов в оболочке in vitro и in vivo». Журнал вирусологических методов . 176 (1–2): 78–84. дои : 10.1016/j.jviromet.2011.06.005 . ПМИД 21703308 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Фрейм, Том; Кэрролл, Тим; Корчагина Елена; Бовин, Николай; Генри, Стивен (2007). «Синтетическая гликолипидная модификация мембран эритроцитов». Переливание . 47 (5): 876–882. CiteSeerX 10.1.1.494.2776 . дои : 10.1111/j.1537-2995.2007.01204.x . ПМИД 17465953 . S2CID 18086433 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж Харрисон, Аманда Л; Олссон, Мартин Л; Брэд Джонс, R; Рамкумар, Стефани; Сакач, Даринка; Биннингтон, Бет; Генри, Стивен; Лингвуд, Клиффорд А; Бранч, Дональд Р. (2010). «Синтетический аналог глоботриаозилцерамида ингибирует инфекцию ВИЧ-1 in vitro с помощью двух механизмов». Гликобиология . 27 (5): 515–524. дои : 10.1007/s10719-010-9297-y . ПМИД 20582467 . S2CID 1422452 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Георгакопулос, Т; Комарраджу, Сарвани; Генри, Стивен; Бертолини, Джозеф (2011). «Улучшенный анализ функции Fc с использованием эритроцитов, покрытых антигеном CMV, полученных с помощью синтетических конструкций Function-Spacer-Lipid». Вокс Сангвинис . 102 (1): 72–78. дои : 10.1111/j.1423-0410.2011.01512.x . ПМИД 21749406 . S2CID 9758322 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час Оливер, Кэролайн; Блейк, Дебби; Генри, Стивен (2011). «In vivo нейтрализация анти-А и успешное переливание эритроцитов, несовместимых с антигеном А, на животной модели». Переливание . 51 (12): 2664–2675. дои : 10.1111/j.1537-2995.2011.03184.x . ПМИД 21599675 . S2CID 205724219 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час Оливер, Кэролайн; Блейк, Дебби; Генри, Стивен (2011). «Моделирование трансфузионных реакций и прогнозирование выживаемости клеток in vivo с помощью кодецитов». Переливание . 51 (8): 1723–1730. дои : 10.1111/j.1537-2995.2010.03034.x . ПМИД 21303367 . S2CID 24736518 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Хульт, Анника К; Фрейм, Тим; Чесла, Скотт; Генри, Стивен; Олссон, Мартин Л. (2012). «Оценка проточной цитометрией эритроцитов, имитирующих естественные подгруппы АВО, после модификации переменными количествами конструкций FSL-A и B». Переливание . 52 (2): 247–251. дои : 10.1111/j.1537-2995.2011.03268.x . ПМИД 21812783 . S2CID 5984970 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Генри, Стивен; Перри, Холли (2012). Технический бюллетень FSL-A+B(tri) Серологического учебного комплекта . Научное сообщество. hdl : 10292/2827 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Хиткот, Дэмиен; Кэррол, Тим; Ван, Джуй-Жен; Флауэр, Роберт; Родионов Игорь; Тузиков, Александр; Бовин, Николай; Генри, Стивен (2010). «Новые клетки для скрининга антител, кодоциты MUT + Mur, созданные путем прикрепления пептидов к эритроцитам». Переливание . 50 (3): 635–641. дои : 10.1111/j.1537-2995.2009.02480.x . ПМИД 19912581 . S2CID 20952307 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Надараджан, В.С.; Лэнг, А.А.; Саад, С.М.; Усин, М (2011). «Распространенность и специфичность антител к эритроцитам в многоэтнической популяции пациентов из Южной и Восточной Азии и влияние использования новых кодецитов MUT+Mur+ на их обнаружение» . Вокс Сангвинис . 102 (1): 65–71. дои : 10.1111/j.1423-0410.2011.01507.x . ПМИД 21592136 . S2CID 20297050 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж Генри, Стивен; Комарраджу, Сарвани; Хиткот, Дэмиен; Родинов, Игорь Л (2011). «Разработка конструкций FSL на основе пептидов для создания кодоцитов Мильтенбергера» . Научная серия ISBT . 6 (2): 306–312. дои : 10.1111/j.1751-2824.2011.01505.x .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д Лан, CC; Блейк, Д; Генри, С; Любовь, ДР (2012). «Маркировка конструкции флуоресцентной функции-спейсера-липида позволяет в режиме реального времени визуализировать миграцию и поведение клеток у рыбок данио (Danio rerio)». Журнал флуоресценции . 22 (4): 1055–63. дои : 10.1007/s10895-012-1043-3 . hdl : 10292/3475 . ПМИД 22434405 . S2CID 14406691 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Ки, Катрина К.; Флауэр, Роберт Л.; Фадди, Хелен М.; Дин, Мелинда М. (7 января 2016 г.). «Включение конъюгированных с флуоресцеином конструкций «функция-спейсер-липид» в мембрану эритроцитов облегчает обнаружение меченых клеток на время хранения ex-vivo» (PDF) . Журнал иммунологических методов . 429 : 66–70. дои : 10.1016/j.jim.2016.01.003 . ПМИД 26773455 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с Генри, Стивен; Родионов, Игорь (2012). «Технический бюллетень строительного комплекта FSL FSL-RFG (малеимид)» . Научное сообщество. hdl : 10292/2241 . {{cite journal}}: Для цитирования журнала требуется |journal= ( помощь )
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж Генри, Стивен; Барр, Кэти; Оливер, Кэролайн (2012). «Моделирование трансфузионных реакций с помощью кодецитов и обеспечение АВО-несовместимой трансфузии с конструкциями «Функция-спейсер-липид»». Научная серия ISBT . 7 (1): 106–111. дои : 10.1111/j.1751-2824.2012.01563.x . S2CID 73310504 .
^ Уильямс, Элеонора; Барр, Кэти; Корчагина Елена; Тузиков, Александр; Генри, Стивен; Бовин, Николай (16 января 2016 г.). «Сверхбыстрое гликопокрытие небиологических поверхностей» . Международный журнал молекулярных наук . 17 (1): 118. дои : 10.3390/ijms17010118 . ПМЦ 4730359 . ПМИД 26784187 .
^ Jump up to: ^а ^б Чесла, С; Генри, С; Итц, Р; Синор, Л. (2010). «Твердофазный тест на сифилис с использованием технологии KODE». Переливание . 50 : 196А–197А. дои : 10.1111/j.1537-2995.2010.02833_1.x . ПМИД 20815863 .
^ «Быстрая биофункционализация магнитных шариков с помощью конструкций функция-спейсер-липид» . sepmag.eu . 17 декабря 2014 года . Проверено 1 декабря 2015 г.
^ Филиал, ДР; Харрисон, А; Сакач, Д; Лингвуд, К; Генри, С. (2008). «Синтетический вододиспергируемый гликолипидный аналог антигена группы крови Pk полностью блокирует инфекцию ВИЧ-1». Переливание . 48 (2С): 1–325. дои : 10.1111/j.1537-2995.2008.01891.x . hdl : 10292/4136 . ПМИД 18783347 . S2CID 222199165 .
^ Харрисон, Алабама; Генри, С; Махфуд, Р; Манис, А; Альбертини, А; Годен, Ю; Лингвуд, Калифорния; Филиал, ДР (2010). «Новый подход псевдотипа VSV/ВИЧ для изучения микробицидов ВИЧ без требования биосдерживания уровня 3». Будущая вирусология . 6 (10): 1241–1259. дои : 10.2217/fvl.11.88 .

[Blake2011-1] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час ^я ^дж ^к ^л ^м ^н ^тот ^п ^д ^р ^с ^т ^в ^v Блейк, Дебби А; Бовин, Николай V; Бесс, Дэн; Генри, Стивен М (2011). «Конструкции FSL: простой метод модификации поверхности клеток/вирионов с помощью ряда биологических маркеров без влияния на их жизнеспособность» . Журнал визуализированных экспериментов . 54 (е3289). дои : 10.3791/3289 . ПМЦ 3211133 . ПМИД 21847082 .

[Korchagina2012-2] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час ^я ^дж ^к ^л ^м ^н ^тот ^п Корчагина Елена; Тузиков, Александр; Формановский Андрей; Попова, Инна; Генри, Стивен; Бовин, Николай (2012). «На пути к созданию гликоландшафтов клеточных мембран с помощью гликан-липидных конструкций». Исследование углеводов . 356 : 238–46. дои : 10.1016/j.carres.2012.03.044 . ПМИД 22551471 .

[:0-3] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и Корчагина Е.Ю.; Генри, С.М. (16 июля 2015 г.). «Синтетические гликолипидоподобные конструкции как инструменты гликобиологических исследований, диагностики и как потенциальные терапевтические средства». Биохимия (Москва) . 80 (7): 857–871. дои : 10.1134/S0006297915070068 . ISSN 0006-2979 . ПМИД 26542000 . S2CID 14965044 .

[Henry2009-4] Jump up to: ^а ^б ^с Генри, Стивен М (2009). «Модификация эритроцитов для использования в лабораторном контроле качества». Современное мнение в гематологии . 16 (6): 467–472. дои : 10.1097/MOH.0b013e328331257e . ПМИД 19680123 . S2CID 37416831 .

[Hadac2011-5] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час Хадак, Элизабет М; Федершпиль, Марк Дж; Черный, Евгений; Тузиков, Александр; Корчагина Елена; Бовин, Николай V; Рассел, Стивен; Генри, Стивен М (2011). «Флуоресцеин и меченные радиоактивным изотопом конструкции Function-Spacer-Lipid позволяют проводить простую биовизуализацию вирионов в оболочке in vitro и in vivo». Журнал вирусологических методов . 176 (1–2): 78–84. дои : 10.1016/j.jviromet.2011.06.005 . ПМИД 21703308 .

[Frame2007-6] Jump up to: ^а ^б ^с Фрейм, Том; Кэрролл, Тим; Корчагина Елена; Бовин, Николай; Генри, Стивен (2007). «Синтетическая гликолипидная модификация мембран эритроцитов». Переливание . 47 (5): 876–882. CiteSeerX 10.1.1.494.2776 . дои : 10.1111/j.1537-2995.2007.01204.x . ПМИД 17465953 . S2CID 18086433 .

[Harrison2010-7] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж Харрисон, Аманда Л; Олссон, Мартин Л; Брэд Джонс, R; Рамкумар, Стефани; Сакач, Даринка; Биннингтон, Бет; Генри, Стивен; Лингвуд, Клиффорд А; Бранч, Дональд Р. (2010). «Синтетический аналог глоботриаозилцерамида ингибирует инфекцию ВИЧ-1 in vitro с помощью двух механизмов». Гликобиология . 27 (5): 515–524. дои : 10.1007/s10719-010-9297-y . ПМИД 20582467 . S2CID 1422452 .

[Georgakopoulos2011-8] Jump up to: ^а ^б ^с Георгакопулос, Т; Комарраджу, Сарвани; Генри, Стивен; Бертолини, Джозеф (2011). «Улучшенный анализ функции Fc с использованием эритроцитов, покрытых антигеном CMV, полученных с помощью синтетических конструкций Function-Spacer-Lipid». Вокс Сангвинис . 102 (1): 72–78. дои : 10.1111/j.1423-0410.2011.01512.x . ПМИД 21749406 . S2CID 9758322 .

[Oliver2011a-9] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час Оливер, Кэролайн; Блейк, Дебби; Генри, Стивен (2011). «In vivo нейтрализация анти-А и успешное переливание эритроцитов, несовместимых с антигеном А, на животной модели». Переливание . 51 (12): 2664–2675. дои : 10.1111/j.1537-2995.2011.03184.x . ПМИД 21599675 . S2CID 205724219 .

[Oliver2011b-10] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж ^г ^час Оливер, Кэролайн; Блейк, Дебби; Генри, Стивен (2011). «Моделирование трансфузионных реакций и прогнозирование выживаемости клеток in vivo с помощью кодецитов». Переливание . 51 (8): 1723–1730. дои : 10.1111/j.1537-2995.2010.03034.x . ПМИД 21303367 . S2CID 24736518 .

[Hult2012-11] Jump up to: ^а ^б ^с Хульт, Анника К; Фрейм, Тим; Чесла, Скотт; Генри, Стивен; Олссон, Мартин Л. (2012). «Оценка проточной цитометрией эритроцитов, имитирующих естественные подгруппы АВО, после модификации переменными количествами конструкций FSL-A и B». Переливание . 52 (2): 247–251. дои : 10.1111/j.1537-2995.2011.03268.x . ПМИД 21812783 . S2CID 5984970 .

[Henry2012b-12] Jump up to: ^а ^б ^с Генри, Стивен; Перри, Холли (2012). Технический бюллетень FSL-A+B(tri) Серологического учебного комплекта . Научное сообщество. hdl : 10292/2827 .

[Heathcote2010-13] Jump up to: ^а ^б ^с Хиткот, Дэмиен; Кэррол, Тим; Ван, Джуй-Жен; Флауэр, Роберт; Родионов Игорь; Тузиков, Александр; Бовин, Николай; Генри, Стивен (2010). «Новые клетки для скрининга антител, кодоциты MUT + Mur, созданные путем прикрепления пептидов к эритроцитам». Переливание . 50 (3): 635–641. дои : 10.1111/j.1537-2995.2009.02480.x . ПМИД 19912581 . S2CID 20952307 .

[Nadarajan2011-14] Jump up to: ^а ^б ^с Надараджан, В.С.; Лэнг, А.А.; Саад, С.М.; Усин, М (2011). «Распространенность и специфичность антител к эритроцитам в многоэтнической популяции пациентов из Южной и Восточной Азии и влияние использования новых кодецитов MUT+Mur+ на их обнаружение» . Вокс Сангвинис . 102 (1): 65–71. дои : 10.1111/j.1423-0410.2011.01507.x . ПМИД 21592136 . S2CID 20297050 .

[Henry2011-15] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж Генри, Стивен; Комарраджу, Сарвани; Хиткот, Дэмиен; Родинов, Игорь Л (2011). «Разработка конструкций FSL на основе пептидов для создания кодоцитов Мильтенбергера» . Научная серия ISBT . 6 (2): 306–312. дои : 10.1111/j.1751-2824.2011.01505.x .

[Lan2012-16] Jump up to: ^а ^б ^с ^д Лан, CC; Блейк, Д; Генри, С; Любовь, ДР (2012). «Маркировка конструкции флуоресцентной функции-спейсера-липида позволяет в режиме реального времени визуализировать миграцию и поведение клеток у рыбок данио (Danio rerio)». Журнал флуоресценции . 22 (4): 1055–63. дои : 10.1007/s10895-012-1043-3 . hdl : 10292/3475 . ПМИД 22434405 . S2CID 14406691 .

[:1-17] Jump up to: ^а ^б ^с Ки, Катрина К.; Флауэр, Роберт Л.; Фадди, Хелен М.; Дин, Мелинда М. (7 января 2016 г.). «Включение конъюгированных с флуоресцеином конструкций «функция-спейсер-липид» в мембрану эритроцитов облегчает обнаружение меченых клеток на время хранения ex-vivo» (PDF) . Журнал иммунологических методов . 429 : 66–70. дои : 10.1016/j.jim.2016.01.003 . ПМИД 26773455 .

[Henry2012a-18] Jump up to: ^а ^б ^с Генри, Стивен; Родионов, Игорь (2012). «Технический бюллетень строительного комплекта FSL FSL-RFG (малеимид)» . Научное сообщество. hdl : 10292/2241 . {{cite journal}}: Для цитирования журнала требуется |journal= ( помощь )

[Henry2012c-19] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и ^ж Генри, Стивен; Барр, Кэти; Оливер, Кэролайн (2012). «Моделирование трансфузионных реакций с помощью кодецитов и обеспечение АВО-несовместимой трансфузии с конструкциями «Функция-спейсер-липид»». Научная серия ISBT . 7 (1): 106–111. дои : 10.1111/j.1751-2824.2012.01563.x . S2CID 73310504 .

[20] Уильямс, Элеонора; Барр, Кэти; Корчагина Елена; Тузиков, Александр; Генри, Стивен; Бовин, Николай (16 января 2016 г.). «Сверхбыстрое гликопокрытие небиологических поверхностей» . Международный журнал молекулярных наук . 17 (1): 118. дои : 10.3390/ijms17010118 . ПМЦ 4730359 . ПМИД 26784187 .

[Chesla2010-21] Jump up to: ^а ^б Чесла, С; Генри, С; Итц, Р; Синор, Л. (2010). «Твердофазный тест на сифилис с использованием технологии KODE». Переливание . 50 : 196А–197А. дои : 10.1111/j.1537-2995.2010.02833_1.x . ПМИД 20815863 .

[22] «Быстрая биофункционализация магнитных шариков с помощью конструкций функция-спейсер-липид» . sepmag.eu . 17 декабря 2014 года . Проверено 1 декабря 2015 г.

[Branch2008-23] Филиал, ДР; Харрисон, А; Сакач, Д; Лингвуд, К; Генри, С. (2008). «Синтетический вододиспергируемый гликолипидный аналог антигена группы крови Pk полностью блокирует инфекцию ВИЧ-1». Переливание . 48 (2С): 1–325. дои : 10.1111/j.1537-2995.2008.01891.x . hdl : 10292/4136 . ПМИД 18783347 . S2CID 222199165 .

[Harrison2011-24] Харрисон, Алабама; Генри, С; Махфуд, Р; Манис, А; Альбертини, А; Годен, Ю; Лингвуд, Калифорния; Филиал, ДР (2010). «Новый подход псевдотипа VSV/ВИЧ для изучения микробицидов ВИЧ без требования биосдерживания уровня 3». Будущая вирусология . 6 (10): 1241–1259. дои : 10.2217/fvl.11.88 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]

[ 7 ]

[ 8 ]

[ 9 ]

[ 10 ]

[ 11 ]

[ 12 ]

[ 13 ]

[ 14 ]

[ 15 ]

[ 16 ]

[ 17 ]

[ 18 ]

[ 19 ]

[ 20 ]

[ 21 ]

[ 22 ]

[ 23 ]

[ 24 ]