НК-92

иммортализованную клеточную Клеточная линия NK-92 представляет собой линию , которая обладает характеристиками типа иммунных клеток, обнаруженных в крови человека, называемых « естественными киллерами » (NK-клетками). NK-клетки крови и клетки NK-92 распознают и атакуют раковые клетки , а также клетки, инфицированные вирусом , бактерией или грибком . ^[1] Клетки NK-92 были впервые выделены в 1992 году в лаборатории Ганса Клингеманна в Онкологическом агентстве Британской Колумбии в Ванкувере, Канада, от пациента, у которого была редкая NK-клеточная неходжкинская лимфома . ^[2] Эти клетки впоследствии превратились в постоянно растущую клеточную линию. Клетки NK-92 отличаются способностью к размножению в больших количествах, способностью последовательно убивать раковые клетки и проходить клинические испытания. Когда клетки NK-92 распознают раковую или инфицированную клетку, они выделяют перфорин , который открывает отверстия в больных клетках и высвобождает гранзимы , убивающие клетки-мишени. Клетки NK-92 также способны продуцировать цитокины, такие как фактор некроза опухоли альфа (TNF-a) и гамма-интерферон (IFN-y). ^[3] который стимулирует пролиферацию и активацию других иммунных клеток.

В клинических испытаниях

Экспертами в области адоптивной иммунотерапии рака было проведено несколько клинических испытаний фазы 1. Ханс Клингеманн и Салли Араи завершили исследование в США в Медицинском центре Университета Раша ( Чикаго ) на пациентах с почечно-клеточным раком и меланомой в 2008 году. ^[4] и Торстен Тонн, доктор медицинских наук, и Оливер Оттманн, доктор медицинских наук, завершили европейское исследование во Франкфуртском университете на пациентах с различными солидными и гематологическими злокачественными новообразованиями в 2013 году. ^[5] Арманд Китинг в больнице Принцессы Маргарет в Торонто провел исследование, в ходе которого клетки NK-92 давались пациентам, у которых случился рецидив после аутологичной трансплантации костного мозга по поводу лейкемии или лимфомы. Во всех клинических исследованиях клетки NK-92 вводились в виде простой внутривенной инфузии два или три раза за курс лечения и вводились в амбулаторных условиях.

Из 39 пациентов, включенных в три исследования, у 2 серьезных побочных эффектов (3–4 степени) возникли во время или после инфузии клеток NK-92, после чего побочные эффекты исчезли. Дозы, назначаемые пациентам, варьировались от 1x10 ⁸ клеток/м ² до 1x10 ¹⁰ клеток/м ² за инфузию. Пациенты получали от двух до трех инфузий в течение периода менее недели. Около трети пролеченных пациентов имели клинически значимый ответ, причем некоторые из них полностью выздоровели.

Сравнение с другими NK-клетками

В исследовании 2017 года, проведенном Конгконгом Чжаном и Винфридом С. Вельсом, клетки NK-92 были генетически сконструированы для распознавания и уничтожения конкретных видов рака человека путем экспрессии химерных антигенных рецепторов (CAR). ^[6] CAR-сконструированные Т-лимфоциты (CAR-T) привлекли внимание в иммуноонкологии, поскольку было показано, что введение CAR-T-клеток вызывает ремиссии у некоторых пациентов с острым и хроническим лейкозом и лимфомой . Однако CAR-T-клетки могут вызывать синдром высвобождения цитокинов (CRS). CAR-инженерные NK-клетки из периферической или пуповинной крови не оказались пригодными для использования для лечения заболеваний, поскольку их трудно размножить для получения достаточного количества, а выходы могут быть переменными и/или слишком низкими. Кроме того, генетическая трансдукция для введения CAR в NK-клетки крови требует лентивирусных или ретровирусных векторов, эффективность которых лишь умеренно.

Клетки NK-92, в отличие от клеток NK-92 CAR-T, имеют предсказуемую кинетику размножения и могут выращиваться в биореакторах, производящих миллиарды клеток в течение пары недель. ^[7] Кроме того, клетки NK-92 можно легко трансдуцировать физическими методами, а мРНК можно с высокой эффективностью переносить в клетки NK-92. CAR-экспрессирующие NK-92 были созданы для воздействия на ряд поверхностных рецепторов рака. ^[8] такие как лиганд 1 домена запрограммированной смерти (PD-L1), CD19 (тип рецептора B-клеток), ^[9]^[10] рецептор 2 эпидермального фактора роста человека (HER2/ErbB2) и рецептор эпидермального фактора роста (EGFR, также известный как HER1); и многие из этих сконструированных клеток NK-92 в настоящее время проходят клинические испытания для лечения рака. ^[11]

Вариант НК-92.

Клетки NK-92, которым для роста необходим интерлейкин-2 (IL-2), также были генетически изменены с помощью гена IL-2, что позволяет им расти в культуре без добавления IL-2. ^[12] Они также были созданы для экспрессии высокоаффинного Fc-рецептора , который является основным рецептором для моноклональных антител , связывающихся с NK-92 и использующих их цитотоксическую нагрузку для уничтожения раковых клеток. ^[13]^[14] Клетки были дополнительно сконструированы для экспрессии химерных антигенных рецепторов (CAR), таких как лиганд 1 домена программируемой смерти (PD-L1). ^[15] В ходе разработки клетки NK-92 были переименованы в активированные NK-клетки (aNK), а различные варианты были обозначены следующим образом:

NK-92 = родительские клетки, позже обозначенные как aNK.

NK-92ci = клетки NK-92, трансфицированные эписомальным вектором для экспрессии IL-2.

NK-92 mi = клетки NK-92, трансфицированные вектором MFG для экспрессии IL-2.

haNK = NK-92 (aNK), трансфицированный плазмидой, экспрессирующей высокоаффинный FcR CD16 и erIL-2.

taNK = NK-92 (aNK), трансфицированный либо плазмидным, либо лентивирусным вектором, экспрессирующим CAR.

t-haNK = NK-92 (aNK), трансфицированный плазмидой, экспрессирующей CAR и CD16 FcR erIL-2.

qt-haNK = NK-92 (aNK), трансфицированный плазмидой, экспрессирующей 4-й ген в дополнение к CAR, FcR CD16 и erIL-2 : примеры: хоминг-рецептор семейства CXCR или иммуноактивные цитокины.

NK-клетки с высокой аффинностью, экспрессирующие Fc-рецептор (haNK), вводили пациентам с распространенной карциномой Меркеля (MCC), и наблюдались некоторые заметные ответы. В настоящее время линия aNK (taNK), нацеленная на HER2, и различные клеточные линии t-haNK (экспрессирующие CAR и Fc-рецепторы) проходят клинические испытания на пациентах с различными видами рака, как описано в обзоре «Клеточная линия NK-92 30 лет». позже: его влияние на исследования естественных клеток-киллеров и лечение рака». ^[16]

Право собственности и лицензии

Глобальные права на линию клеток NK-92 были переданы компании ImmunityBio Inc. (ранее NantKwest, Inc.). Единственным авторизованным дистрибьютором NK-92 компании ImmunityBio является компания Brink Biologics, Inc. (Сан-Диего), которая делает клетки NK-92 и некоторые генетически модифицированные варианты CD16+ доступными третьим сторонам для доклинических исследований в соответствии с лицензионным соглашением об ограниченном использовании.

Ссылки

^ Моди Ч., Огбомо Х., Сян Р.Ф., Кьеи С.К., Фихан Д., Ислам А., Ли СС (июнь 2019 г.). «Микробное уничтожение NK-клетками». Журнал биологии лейкоцитов . 105 (6): 1285–1296. дои : 10.1002/JLB.MR0718-298R . ПМИД 30821868 . S2CID 73461723 .
^ Гонг Дж.Х., Маки Дж., Клингеманн Х.Г. (апрель 1994 г.). «Характеристика линии клеток человека (NK-92) с фенотипическими и функциональными характеристиками активированных естественных клеток-киллеров». Лейкемия . 8 (4): 652–658. ПМИД 8152260 .
^ Пол С., Лал Дж. (2017). «Молекулярный механизм функции естественных клеток-киллеров и его значение в иммунотерапии рака» . Границы в иммунологии . 8 : 1124. дои : 10.3389/fimmu.2017.01124 . ПМК 5601256 . ПМИД 28955340 .
^ Арай С., Мигер Р., Сверинген М., Мьинт Х., Рич Э., Мартинсон Дж., Клингеманн Х. (2008). «Инфузия аллогенной клеточной линии NK-92 пациентам с распространенным почечно-клеточным раком или меланомой: исследование фазы I». Цитотерапия . 10 (6): 625–632. дои : 10.1080/14653240802301872 . ПМИД 18836917 .
^ Тонн Т., Швабе Д., Клингеманн Х.Г., Беккер С., Эссер Р., Кёль У. и др. (декабрь 2013 г.). «Лечение больных раком на поздних стадиях с использованием линии естественных клеток-киллеров NK-92». Цитотерапия . 15 (12): 1563–1570. дои : 10.1016/j.jcyt.2013.06.017 . ПМИД 24094496 .
^ Чжан С., Оберой П., Ольснер С., Вальдманн А., Линднер А., Тонн Т., Вельс В.С. (2017). «Клетки NK-92, созданные с помощью химерного антигенного рецептора: готовый клеточный терапевтический препарат для целенаправленного уничтожения раковых клеток и индукции защитного противоопухолевого иммунитета» . Границы в иммунологии . 8 : 533. дои : 10.3389/fimmu.2017.00533 . ПМЦ 5435757 . ПМИД 28572802 .
^ Клингеманн Х., Буассель Л., Тонегуззо Ф. (2016). «Натуральные клетки-киллеры для иммунотерапии - преимущества клеточной линии NK-92 перед NK-клетками крови» . Границы в иммунологии . 7:91 . дои : 10.3389/fimmu.2016.00091 . ПМК 4789404 . ПМИД 27014270 .
^ Клингеманн Х (2014). «Являются ли естественные клетки-киллеры лучшими драйверами CAR?» . Онкоиммунология . 3 (4): e28147. дои : 10.4161/onci.28147 . ПМК 4203506 . ПМИД 25340009 .
^ Романски А., Ухерек С., Баг Г., Зейфрид Е., Клингеманн Х., Вельс В.С. и др. (июль 2016 г.). «Сконструированные CD19-CAR NK-92-клетки достаточны для преодоления устойчивости NK-клеток при B-клеточных злокачественных новообразованиях» . Журнал клеточной и молекулярной медицины . 20 (7): 1287–1294. дои : 10.1111/jcmm.12810 . ПМЦ 4929308 . ПМИД 27008316 .
^ Буассель Л., Бетанкур-Буассель М., Лу В., Краузе Д.С., Ван Эттен Р.А., Вельс В.С., Клингеманн Х. (октябрь 2013 г.). «Перенацеливание на клетки NK-92 с помощью CD19- и CD20-специфичных химерных антигенных рецепторов выгодно отличается от антителозависимой клеточной цитотоксичности» . Онкоиммунология . 2 (10): е26527. дои : 10.4161/onci.26527 . ПМЦ 3881109 . ПМИД 24404423 .
^ Фабиан К.П., Ходж Дж.В. (декабрь 2021 г.). «Новая роль готовых сконструированных естественных клеток-киллеров в таргетной иммунотерапии рака» . Молекулярная терапия онколитики . 23 : 266–276. дои : 10.1016/j.omto.2021.10.001 . ПМЦ 8560822 . ПМИД 34761106 .
^ Там Ю.К., Маки Г., Миягава Б., Хеннеманн Б., Тонн Т., Клингеманн Х.Г. (май 1999 г.). «Характеристика генетически измененных, независимых от интерлейкина 2 линий естественных клеток-киллеров, пригодных для адоптивной клеточной иммунотерапии». Генная терапия человека . 10 (8): 1359–1373. дои : 10.1089/10430349950018030 . ПМИД 10365666 .
^ Йохемс С., Ходж Дж.В., Фантини М., Фуджи Р., Мориллон Ю.М., Грейнер Дж.В. и др. (декабрь 2016 г.). «Линия NK-клеток (haNK), экспрессирующая высокие уровни гранзима и созданная для экспрессии аллели CD16 с высоким сродством» . Онкотаргет . 7 (52): 86359–86373. дои : 10.18632/oncotarget.13411 . ПМЦ 5341330 . ПМИД 27861156 .
^ Солочински К., Пэджет М.Р., Фабиан К.П., Вольфсон Б., Чекки Ф., Хембро Т. и др. (апрель 2020 г.). «Преодоление функционального подавления NK-клеток, вызванного гипоксией» . Журнал иммунотерапии рака . 8 (1): e000246. дои : 10.1136/jitc-2019-000246 . ПМК 7213912 . ПМИД 32345623 .
^ Фабиан К.П., Пэджет М.Р., Донахью Р.Н., Солочински К., Роббинс Ю., Аллен К.Т. (май 2020 г.). «PD-L1, нацеленный на высокоаффинные NK-клетки (t-haNK), индуцирует прямые противоопухолевые эффекты и нацелен на супрессивные популяции MDSC» . Журнал иммунотерапии рака . 8 (1). {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
^ Клингеманн, Х. (май 2023 г.). «Клеточная линия NK-92 — 30 лет спустя: ее влияние на исследования естественных клеток-киллеров и лечение рака» . Цитотерапия . 25 (5): 451–457.

Внешние ссылки

Запись о целлозавре для НК-92

[pmid30821868-1] Моди Ч., Огбомо Х., Сян Р.Ф., Кьеи С.К., Фихан Д., Ислам А., Ли СС (июнь 2019 г.). «Микробное уничтожение NK-клетками». Журнал биологии лейкоцитов . 105 (6): 1285–1296. дои : 10.1002/JLB.MR0718-298R . ПМИД 30821868 . S2CID 73461723 .

[pmid8152260-2] Гонг Дж.Х., Маки Дж., Клингеманн Х.Г. (апрель 1994 г.). «Характеристика линии клеток человека (NK-92) с фенотипическими и функциональными характеристиками активированных естественных клеток-киллеров». Лейкемия . 8 (4): 652–658. ПМИД 8152260 .

[pmid28955340-3] Пол С., Лал Дж. (2017). «Молекулярный механизм функции естественных клеток-киллеров и его значение в иммунотерапии рака» . Границы в иммунологии . 8 : 1124. дои : 10.3389/fimmu.2017.01124 . ПМК 5601256 . ПМИД 28955340 .

[pmid18836917-4] Арай С., Мигер Р., Сверинген М., Мьинт Х., Рич Э., Мартинсон Дж., Клингеманн Х. (2008). «Инфузия аллогенной клеточной линии NK-92 пациентам с распространенным почечно-клеточным раком или меланомой: исследование фазы I». Цитотерапия . 10 (6): 625–632. дои : 10.1080/14653240802301872 . ПМИД 18836917 .

[pmid24094496-5] Тонн Т., Швабе Д., Клингеманн Х.Г., Беккер С., Эссер Р., Кёль У. и др. (декабрь 2013 г.). «Лечение больных раком на поздних стадиях с использованием линии естественных клеток-киллеров NK-92». Цитотерапия . 15 (12): 1563–1570. дои : 10.1016/j.jcyt.2013.06.017 . ПМИД 24094496 .

[6] Чжан С., Оберой П., Ольснер С., Вальдманн А., Линднер А., Тонн Т., Вельс В.С. (2017). «Клетки NK-92, созданные с помощью химерного антигенного рецептора: готовый клеточный терапевтический препарат для целенаправленного уничтожения раковых клеток и индукции защитного противоопухолевого иммунитета» . Границы в иммунологии . 8 : 533. дои : 10.3389/fimmu.2017.00533 . ПМЦ 5435757 . ПМИД 28572802 .

[pmid27014270-7] Клингеманн Х., Буассель Л., Тонегуззо Ф. (2016). «Натуральные клетки-киллеры для иммунотерапии - преимущества клеточной линии NK-92 перед NK-клетками крови» . Границы в иммунологии . 7:91 . дои : 10.3389/fimmu.2016.00091 . ПМК 4789404 . ПМИД 27014270 .

[pmid25340009-8] Клингеманн Х (2014). «Являются ли естественные клетки-киллеры лучшими драйверами CAR?» . Онкоиммунология . 3 (4): e28147. дои : 10.4161/onci.28147 . ПМК 4203506 . ПМИД 25340009 .

[pmid27008316-9] Романски А., Ухерек С., Баг Г., Зейфрид Е., Клингеманн Х., Вельс В.С. и др. (июль 2016 г.). «Сконструированные CD19-CAR NK-92-клетки достаточны для преодоления устойчивости NK-клеток при B-клеточных злокачественных новообразованиях» . Журнал клеточной и молекулярной медицины . 20 (7): 1287–1294. дои : 10.1111/jcmm.12810 . ПМЦ 4929308 . ПМИД 27008316 .

[pmid24404423-10] Буассель Л., Бетанкур-Буассель М., Лу В., Краузе Д.С., Ван Эттен Р.А., Вельс В.С., Клингеманн Х. (октябрь 2013 г.). «Перенацеливание на клетки NK-92 с помощью CD19- и CD20-специфичных химерных антигенных рецепторов выгодно отличается от антителозависимой клеточной цитотоксичности» . Онкоиммунология . 2 (10): е26527. дои : 10.4161/onci.26527 . ПМЦ 3881109 . ПМИД 24404423 .

[pmid34761106-11] Фабиан К.П., Ходж Дж.В. (декабрь 2021 г.). «Новая роль готовых сконструированных естественных клеток-киллеров в таргетной иммунотерапии рака» . Молекулярная терапия онколитики . 23 : 266–276. дои : 10.1016/j.omto.2021.10.001 . ПМЦ 8560822 . ПМИД 34761106 .

[pmid10365666-12] Там Ю.К., Маки Г., Миягава Б., Хеннеманн Б., Тонн Т., Клингеманн Х.Г. (май 1999 г.). «Характеристика генетически измененных, независимых от интерлейкина 2 линий естественных клеток-киллеров, пригодных для адоптивной клеточной иммунотерапии». Генная терапия человека . 10 (8): 1359–1373. дои : 10.1089/10430349950018030 . ПМИД 10365666 .

[pmid27861156-13] Йохемс С., Ходж Дж.В., Фантини М., Фуджи Р., Мориллон Ю.М., Грейнер Дж.В. и др. (декабрь 2016 г.). «Линия NK-клеток (haNK), экспрессирующая высокие уровни гранзима и созданная для экспрессии аллели CD16 с высоким сродством» . Онкотаргет . 7 (52): 86359–86373. дои : 10.18632/oncotarget.13411 . ПМЦ 5341330 . ПМИД 27861156 .

[pmid32345623-14] Солочински К., Пэджет М.Р., Фабиан К.П., Вольфсон Б., Чекки Ф., Хембро Т. и др. (апрель 2020 г.). «Преодоление функционального подавления NK-клеток, вызванного гипоксией» . Журнал иммунотерапии рака . 8 (1): e000246. дои : 10.1136/jitc-2019-000246 . ПМК 7213912 . ПМИД 32345623 .

[15] Фабиан К.П., Пэджет М.Р., Донахью Р.Н., Солочински К., Роббинс Ю., Аллен К.Т. (май 2020 г.). «PD-L1, нацеленный на высокоаффинные NK-клетки (t-haNK), индуцирует прямые противоопухолевые эффекты и нацелен на супрессивные популяции MDSC» . Журнал иммунотерапии рака . 8 (1). {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )

[16] Клингеманн, Х. (май 2023 г.). «Клеточная линия NK-92 — 30 лет спустя: ее влияние на исследования естественных клеток-киллеров и лечение рака» . Цитотерапия . 25 (5): 451–457.

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]

[7]

[8]

[9]

[10]

[11]

[12]

[13]

[14]

[15]

[16]