Поли(амидоамин)

Полиамидоамин , или ПАМАМ , представляет собой класс дендримеров , которые состоят из повторяюще разветвленных субъединиц с амидной и аминной функциональностью . Дендримеры ПАМАМ, иногда называемые торговым названием Starburst, широко изучались с момента их синтеза в 1985 году. и представляют собой наиболее хорошо изученное семейство дендримеров, а также первое, выпущенное на рынок. Как и другие дендримеры, ПАМАМ в целом имеют сферическую форму и характеризуются внутренней молекулярной архитектурой, состоящей из древовидного разветвления, при этом каждый внешний «слой» или поколение содержит экспоненциально больше точек ветвления. Эта разветвленная архитектура отличает ПАМАМ и другие дендримеры от традиционных полимеров , поскольку она обеспечивает низкую полидисперсность и высокий уровень структурного контроля во время синтеза, а также приводит к образованию большого количества поверхностных участков по отношению к общему молекулярному объему. Более того, дендримеры ПАМАМ демонстрируют большую биосовместимость, чем другие семейства дендримеров, возможно, из-за комбинации поверхностных аминов и внутренних амидных связей; эти связывающие мотивы очень напоминают врожденную биологическую химию и наделяют дендримеры PAMAM свойствами, подобными свойствам глобулярных белков . Относительная простота/низкая стоимость синтеза дендримеров ПАМАМ (особенно по сравнению с биологическими молекулами аналогичного размера, такими как белки и антитела), а также их биосовместимость, структурный контроль и функционализируемость сделали ПАМАМ жизнеспособными кандидатами для применения в разработке лекарств и биохимии. и нанотехнологии .

Синтез

Дивергентный синтез

Общая схема дивергентного синтеза дендримеров ПАМАМ с этилендиамином в качестве основного инициатора. Схема имеет цветовую кодировку по номеру поколения: красное ядро ​​из этилендиамина служит ядром инициатора, оранжевое - для поколения 0 и оранжево-зеленое - для поколения 1 соответственно. Показанная схема в настоящее время является наиболее широко распространенным подходом в коммерческом синтезе ПАМАМ.

Дивергентный синтез относится к последовательному «росту» дендримера слой за слоем, начиная с основной молекулы-инициатора, которая содержит функциональные группы, способные действовать как активные центры в начальной реакции. Каждая последующая реакция в серии экспоненциально увеличивает количество доступных поверхностных групп. Молекулы ядра, которые дают начало дендримерам ПАМАМ, могут различаться, но наиболее основными инициаторами являются аммиак и этилендиамин. Внешний рост дендримеров ПАМАМ осуществляется путем чередования двух реакций:

1. Добавление по Михаэлю поверхности с концевыми аминогруппами к метилакрилату, что приводит к образованию внешнего слоя с концевыми эфирными группами, и
2. Соединение с этилендиамином для получения новой поверхности с концевыми аминогруппами.

Каждый раунд реакций образует новое «поколение», и дендримеры ПАМАМ часто классифицируются по номеру поколения; обычное сокращение для этой классификации — «GX» или «GX PAMAM», где X — номер, относящийся к номеру поколения. Первый полный цикл присоединения Михаэля с последующим сочетанием с этилендиамином образует ПАМАМ поколения 0, при этом последующие присоединения Михаэля приводят к «половинным» поколениям, а последующее амидное сочетание приводит к «полным» (целым) поколениям.

При дивергентном синтезе дендримеров чрезвычайно важно дать возможность каждой реакции дойти до завершения; любые дефекты, вызванные незавершенной реакцией или внутримолекулярным сочетанием новых поверхностных аминов с непрореагировавшими поверхностными группами метилового эфира, могут вызвать «отстающие» поколения, задерживающие дальнейший рост определенных ветвей. Эти примеси трудно удалить при использовании дивергентного синтетического подхода, поскольку молекулярная масса, физический размер и химические свойства дефектных дендримеров по своей природе очень похожи на желаемый продукт. По мере увеличения количества поколений становится все труднее своевременно производить чистые продукты из-за стерических ограничений. В результате синтез дендримеров PAMAM более высокого поколения может занять месяцы.

Конвергентный синтез

Конвергентный синтез дендримера начинается с того, что в конечном итоге станет поверхностью дендримера, и продолжается внутрь. Конвергентный синтетический подход использует ортогональные защитные группы (две защитные группы, условия снятия защиты которых не удаляют друг друга); это дополнительное соображение, которого нет при использовании дивергентного подхода. На рисунке ниже изображена общая схема конвергентного синтетического подхода.

Обобщенная схема, описывающая использование ортогональных защитных групп для конвергентного синтеза дендримеров ПАМАМ.

Конвергентный синтез, как показано выше, начинается с дендритной субъединицы, состоящей из реактивной «фокусной группы» A и разветвленной группы B ( B может быть многократно разветвленной в наиболее обобщенном сценарии, но PAMAM расщепляются только один раз в каждой точке ветвления). Во-первых, A ортогонально защищают и откладывают для дальнейших реакций. B также ортогонально защищен, в результате чего незащищенный A в этой молекуле может связываться с каждой из незащищенных групп B исходного соединения. В результате появился новый вид более высокого поколения, который защищен как на , так и на B. A Избирательное снятие защиты с А приводит к образованию новой молекулы, которая снова может быть присоединена к исходному мономеру, образуя, таким образом, еще одно новое поколение. Затем этот процесс можно повторить, чтобы сформировать все больше и больше слоев.

• Обратите внимание, что черные защитные группы группы B представляют собой то, что станет самым внешним слоем конечной молекулы, и остаются прикрепленными на протяжении всего процесса синтеза; их цель - гарантировать, что распространение роста дендримеров может происходить контролируемым образом, предотвращая нежелательные побочные реакции.
• При формировании каждого нового слоя количество связей A B ограничивается двумя, что резко контрастирует с дивергентным синтетическим подходом, который предполагает экспоненциально большее количество связей на слой.
• Продукты неполной реакции (аддукт однократного присоединения, непрореагировавшие исходные материалы) будут иметь заметно отличающуюся молекулярную массу от желаемого продукта, особенно для соединений более высокого поколения, что делает очистку более простой.
• Реактивная фокальная группа А должна быть терминирована на конечном акцепторе в какой-то момент синтетического процесса; до тех пор каждое соединение можно считать только дендроном, а не полным дендримером (значения см. на странице).
• Преимуществом синтеза дендронов с фокальной группой А в качестве химической ручки является возможность присоединения нескольких эквивалентов дендрона к полифункциональной основной молекуле; изменение основного элемента не требует перестройки всего дендримера. В случае ПАМАМ фокальные точки конвергентно синтезированных фрагментов использовались для создания несимметричных дендримеров. а также дендримеры с различной базовой функционализацией.
• Поскольку каждое последующее поколение дендронов становится все более объемистым, а окончательное прикрепление к ядру дендримера является самым трудным этапом из всех, стерические ограничения могут серьезно повлиять на урожайность.

Токсичность

in vitro

Установлено, что катионные макромолекулы в целом дестабилизируют клеточную мембрану , что может привести к лизису и гибели клеток . Общий вывод, представленный в текущей работе, перекликается с этим наблюдением: увеличение молекулярной массы дендримеров и поверхностного заряда (оба зависят от поколения) увеличивает их цитотоксическое поведение.

Первоначальные исследования токсичности ПАМАМ показали, что ПАМАМ менее токсичен (в некоторых случаях гораздо менее токсичен), чем родственные дендримеры. демонстрируя минимальную цитотоксичность при множественных скринингах токсичности, включая тесты метаболической активности ( анализ МТТ ), разрушение клеток ( анализ ЛДГ ) и морфологию ядра ( DAPI ). окрашивание Однако в других клеточных линиях анализ МТТ и несколько других анализов выявили некоторую цитотоксичность. Эти разрозненные наблюдения могут быть связаны с различиями в чувствительности различных клеточных линий, использованных в каждом исследовании, к ПАМАМ; хотя цитотоксичность ПАМАМ варьируется в зависимости от клеточной линии, они остаются менее токсичными, чем другие семейства дендримеров в целом.

Совсем недавно серия исследований Mukherjee et al. пролили некоторый свет на механизм цитотоксичности ПАМАМ, предоставив доказательства того, что дендримеры вырываются из своей инкапсулирующей мембраны ( эндосомы клетки ) после поглощения клеткой, вызывая повреждение митохондрий и в конечном итоге приводя к гибели клетки. Дальнейшее выяснение механизма цитотоксичности ПАМАМ поможет разрешить спор о том, насколько именно токсичны дендримеры.

Что касается нейрональной токсичности, было показано, что ПАМАМ четвертого поколения разрушает транзиторные вещества кальция, изменяя динамику везикул нейромедиаторов и синаптическую передачу. Все вышеперечисленное можно предотвратить, заменив поверхностные амины фолатом или полиэтиленгликолем.

Также было показано, что дендримеры ПАМАМ вызывают разрыв эритроцитов или гемолиз . Таким образом, если дендримеры ПАМАМ следует рассматривать в биологических приложениях, в которых дендримеры или дендримерные комплексы перемещаются по кровотоку, следует учитывать концентрацию и количество поколений немодифицированного ПАМАМ в кровотоке.

живой

мало углубленных исследований поведения дендримеров ПАМАМ in vivo На сегодняшний день проведено . Частично это может быть связано с разнообразным поведением ПАМАМ в зависимости от модификации поверхности (см. Ниже), что делает характеристику их свойств in vivo во многом зависящими от случая. Тем не менее, судьба и транспорт немодифицированных дендримеров ПАМАМ являются важным тематическим исследованием, поскольку любые биологические применения могут включать немодифицированный ПАМАМ в качестве побочного продукта метаболизма. В единственном крупном систематическом исследовании поведения ПАМАМ in vivo инъекции высоких уровней голых ПАМАМ в течение длительных периодов времени мышам не выявили признаков токсичности вплоть до G5-ПАМАМ, а для G3-G7-ПАМАМ низкая иммуногенность . наблюдалась Эти наблюдения системного уровня, по-видимому, согласуются с наблюдением о том, что дендримеры PAMAM в целом не являются чрезвычайно цитотоксичными; однако необходимы более глубокие исследования фармакокинетики и биораспределения ПАМАМ, прежде чем in vivo можно будет сделать переход к применению .

Модификация поверхности

Одним из уникальных свойств дендримеров, таких как ПАМАМ, является высокая плотность поверхностных функциональных групп , которая позволяет вносить множество изменений на поверхность каждой молекулы дендримера. Поверхность предполагаемых дендримеров ПАМАМ изобилует первичными аминами, причем более высокие поколения имеют экспоненциально большую плотность аминогрупп. Хотя возможность присоединения множества элементов к каждому дендримеру является одним из их величайших преимуществ, наличие высоко локализованных положительных зарядов может быть токсичным для клеток. Модификация поверхности путем присоединения ацетила и лауроил группы помогают маскировать эти положительные заряды, уменьшая цитотоксичность и увеличивая проницаемость для клеток. Таким образом, эти типы модификаций особенно полезны для биологических применений. Также обнаружено, что вторичные и третичные поверхностные аминогруппы менее токсичны, чем первичные поверхностные аминогруппы. предполагая, что именно экранирование заряда имеет основное влияние на цитотоксичность, а не какой-то вторичный эффект со стороны определенной функциональной группы. Более того, другие исследования указывают на хрупкий баланс, которого необходимо достичь для достижения минимальной цитотоксичности. Гидрофобные взаимодействия также могут вызывать лизис клеток, а дендримеры ПАМАМ, поверхность которых насыщена неполярными модификациями, такими как липиды или полиэтиленгликоль (ПЭГ), страдают от более высокой цитотоксичности, чем их частично замещенные аналоги. Также было показано, что дендримеры ПАМАМ с неполярными внутренними компонентами индуцируют гемолиз.

Приложения

Приложения, связанные с дендримерами, как правило, используют преимущества либо помещения груза внутрь дендримера (иногда называемого «дендритным ящиком»), либо прикрепления груза к поверхности дендримера. Применения дендримеров ПАМАМ обычно сосредоточены на модификации поверхности, используя преимущества как электростатических, так и ковалентных методов связывания груза. В настоящее время основные области исследований с использованием дендримеров ПАМАМ и их функционализированных производных включают доставку лекарств и доставку генов.

Доставка лекарств

Поскольку дендримеры ПАМАМ продемонстрировали способность проникать в широкий спектр клеточных линий, простые комплексы ПАМАМ-лекарство будут влиять на широкий спектр клеток при введении в живую систему. дополнительные нацеливающие лиганды Таким образом, для избирательного проникновения в разные типы клеток необходимы . Например, ПАМАМ, производный фолиевой кислоты, предпочтительно поглощается раковыми клетками , которые, как известно, сверхэкспрессируют рецептор фолиевой кислоты на своей поверхности. Присоединение дополнительных методов лечения наряду с фолиевой кислотой, например, изотопами бора . цисплатин , и метотрексат оказались весьма эффективными. В будущем, когда синтетический контроль над химией поверхности дендримеров станет более надежным, PAMAM и другие семейства дендримеров могут занять видное место наряду с другими основными подходами к таргетной терапии рака.

В исследовании ПАМАМ, функционализированного фолиевой кислотой, метотрексат комбинировали либо в виде комплекса включения внутри дендримера, либо в виде ковалентного поверхностного присоединения. В случае комплекса включения лекарственное средство высвобождалось из внутренней части дендримера при воздействии биологических условий и действовало аналогично свободному лекарственному средству. Подход к поверхностному прикреплению позволил получить стабильные растворимые комплексы, которые были способны избирательно воздействовать на раковые клетки и не высвобождали преждевременно их груз. Высвобождение лекарственного средства в случае комплекса включения можно объяснить протонированием поверхностных и внутренних аминов в биологических условиях, что приводит к распаковке конформации дендримера и последующему высвобождению внутреннего груза. Аналогичное явление наблюдалось и с комплексами ПАМАМ и цисплатина.

Дендримеры ПАМАМ также продемонстрировали собственные лекарственные свойства. Одним из весьма примечательных примеров является способность дендримеров ПАМАМ удалять агрегаты прионных белков. смертельные белковые агрегаты, ответственные за губчатую энцефалопатию крупного рогатого скота («коровье бешенство») и болезнь Крейцфельдта-Якоба у людей. Солюбилизация прионов объясняется поликатионной и дендримерной природой ПАМАМ, при этом дендримеры более высокого поколения (>G3) являются наиболее эффективными; ПАМАМ с концевыми гидроксильными группами, а также линейные полимеры практически не показали эффекта. Поскольку других известных соединений, способных растворять уже агрегированные прионы, не существует, дендримеры ПАМАМ предоставили некоторую отсрочку в изучении таких смертельных заболеваний и могут дать дополнительное понимание механизма образования прионов.

Генная терапия

Поверхностные аминные остатки на дендримерах ПАМАМ связываются с фосфатным остовом нуклеиновых кислот посредством заряженных взаимодействий (справа, вставка). Обычно для трансфекции генов используются дендримеры G6-7 PAMAM; эти дендримеры обычно имеют длину 6–10 нм (охватывают ~ 20–30 пар оснований) и имеют молекулярную массу 30–50 кДа.

Открытие того, что наличие положительного заряда на поверхности дендримеров PAMAM снижает их цитотоксичность, имеет интересные последствия для применений трансфекции ДНК . Поскольку клеточная мембрана имеет отрицательно заряженную внешнюю поверхность, а фосфатный остов ДНК также заряжен отрицательно, трансфекция свободной ДНК не очень эффективна просто из-за отталкивания заряда. Однако было бы разумно ожидать заряженных взаимодействий между анионным фосфатным остовом ДНК и поверхностными группами ПАМАМ-дендримеров с концевыми аминогруппами, которые положительно ионизированы в физиологических условиях. Это может привести к образованию комплекса ПАМАМ-ДНК, который сделает трансфекцию ДНК более эффективной за счет нейтрализации зарядов обоих элементов, в то время как цитотоксичность дендримера ПАМАМ также будет снижена. Действительно, несколько отчетов подтвердили, что дендримеры PAMAM являются эффективными агентами трансфекции ДНК.

Когда баланс зарядов между фосфатами ДНК и поверхностными аминами ПАМАМ слегка положительный, достигается максимальная эффективность трансфекции; это открытие подтверждает идею о том, что комплекс связывается с поверхностью клетки посредством взаимодействия зарядов. Поразительное наблюдение состоит в том, что «активация» ПАМАМ путем частичной деградации посредством гидролиза повышает эффективность трансфекции на 2-3 порядка. предоставляя дополнительные доказательства, подтверждающие существование электростатически связанного комплекса. Считается, что фрагментация некоторых ветвей дендримера ослабляет общую структуру (меньше амидных связей и пространственных ограничений), что теоретически приведет к лучшему контакту между дендримером и ДНК-субстратом, поскольку дендример не принимает жесткую сферическую конформацию из-за к стерикам . Это, в свою очередь, приводит к образованию более компактных комплексов ДНК, которые легче подвергаются эндоцитозу. После эндоцитоза комплексы подвергаются воздействию кислых условий клеточной эндосомы . Дендримеры PAMAM действуют как буфер в этой среде, поглощая избыточные протоны множеством аминных остатков, что приводит к ингибированию рН-зависимой активности эндосомальной нуклеазы и, таким образом, защищает ДНК-груз. Третичные амины внутри дендримера также могут участвовать в буферной активности, вызывая набухание молекулы; кроме того, поскольку ПАМАМ приобретают все больше и больше положительного заряда, для оптимального взаимодействия ПАМАМ с ДНК требуется меньшее их количество, и из комплекса высвобождаются свободные дендримеры. Высвобождение и набухание дендримера могут в конечном итоге лизировать эндосому, что приводит к высвобождению ДНК-груза. Активированные дендримеры ПАМАМ имеют меньший пространственный барьер для внутреннего протонирования амина, что считается основным источником их преимущества перед неактивированным ПАМАМ.

Дендримеры ПАМАМ можно «активировать» для применения в целях переноса генов посредством гидролиза, ускоряемого нагреванием, - процесса, который можно рассматривать как аналог стрижки кустов. Во время этого процесса амидные связи разрываются и заменяются карбоксильными группами (см. вставку), в результате чего некоторые ветви дендримера отпадают. Общая молекулярная масса дендримера снижается на 20-25%, в результате получается более гибкий дендример с эффективностью трансфекции, улучшенной на 2-3 порядка.

В контексте существующих подходов к переносу генов дендримеры ПАМАМ занимают сильные позиции по сравнению с основными классическими технологиями, такими как электропорация , микроинъекция и вирусные методы . Электропорация, которая включает в себя пропускание электричества через клетки с целью создания отверстий в мембране, через которые может проникнуть ДНК, имеет очевидные цитотоксические эффекты и не подходит для in vivo применения . С другой стороны, микроинъекция, использование тонких игл для физического введения генетического материала в ядро ​​клетки, обеспечивает больший контроль, но представляет собой кропотливую работу, требующую высокой квалификации, при которой можно трансфицировать относительно небольшое количество клеток. Хотя вирусные векторы могут обеспечить высокоспецифичную и высокоэффективную трансфекцию, создание таких вирусов является дорогостоящим и требует много времени; кроме того, присущая вирусам природа переноса генов часто вызывает иммунный ответ, что ограничивает in vivo применение . Фактически, многие современные технологии трансфекции основаны на искусственно собранных липосомах. (и липосомы, и ПАМАМ представляют собой положительно заряженные макромолекулы). Поскольку дендримеры ПАМАМ и их комплексы с ДНК обладают низкой цитотоксичностью, более высокой эффективностью трансфекции, чем методы на основе липосом, и эффективны в широком диапазоне клеточных линий, они заняли важное место в современных методологиях генной терапии. Биотехнологическая компания Qiagen в настоящее время предлагает две линии продуктов для трансфекции ДНК (SuperFect и PolyFect), основанных на технологии активированных дендримеров PAMAM.

Еще предстоит много работы, прежде чем активированные дендримеры PAMAM можно будет использовать в качестве in vivo агентов генной терапии . Хотя дендримеры оказались высокоэффективными и нетоксичными in vitro , стабильность, поведение и транспорт трансфекционного комплекса в биологических системах еще предстоит охарактеризовать и оптимизировать. Как и в случае с приложениями для доставки лекарств, специфическое нацеливание на трансфекционный комплекс является идеальным и также должно быть изучено.

См. также

• Амидоамин

Библиография

• Питтельков М., Кристенсен Дж.Б. (март 2005 г.). «Конвергентный синтез внутренне разветвленных дендримеров ПАМАМ». Органические письма . 7 (7): 1295–8. дои : 10.1021/ol050040d . ПМИД   15787490 .
• Ли Дж., Пилер Л.Т., Цинь Д., Бейкер Дж.Р., Томалия Д.А., Мейер DJ (2000). «Визуализация и характеристика поли(амидоаминовых) дендримеров с помощью атомно-силовой микроскопии». Ленгмюр . 16 (13): 5613–5616. дои : 10.1021/la000035c .
• Садекар С., Гандехари Х. (май 2012 г.). «Трансэпителиальный транспорт и токсичность дендримеров ПАМАМ: значение для пероральной доставки лекарств» . Обзоры расширенной доставки лекарств . 64 (6): 571–88. дои : 10.1016/j.addr.2011.09.010 . ПМЦ   3305851 . ПМИД   21983078 .
• Тоно Ю, Кодзима С, Хаба Ю, Такахаши Т, Харада А, Яги С, Коно К (май 2006 г.). «Термочувствительные свойства полиамидоаминовых дендримеров с периферическими остатками фенилаланина». Ленгмюр . 22 (11): 4920–2. дои : 10.1021/la060066t . ПМИД   16700575 .
• Сингх П., Молл Ф., Лин Ш., Ферзли С., Ю.К.С., Коски Р.К. и др. (сентябрь 1994 г.). «Звездные дендримеры: повышенная производительность и гибкость для иммуноанализов» . Клиническая химия . 40 (9): 1845–9. дои : 10.1093/clinchem/40.9.1845 . ПМИД   8070111 .
• Лами С.М., Саллин О., Луссерт С., Чаттон Дж.Ю. (февраль 2012 г.). «Обнаружение натрия в нейронах с помощью нанозонда на основе дендримера» (PDF) . АСУ Нано . 6 (2): 1176–87. дои : 10.1021/nn203822t . ПМИД   22288942 .
• Крастева Н., Беснард И., Гусе Б., Бауэр Р.Э., Мюллен К., Ясуда А., Воссмайер Т. (2002). «Самособранные композитные пленки наночастиц золота и дендримеров для целей измерения пара». Нано-буквы . 2 (5): 551–5. Бибкод : 2002NanoL...2..551K . дои : 10.1021/nl020242s .
• Грабчев И., Сумиллион Ж.П., Мулс Б., Иванова Г. (2004). «Поли(амидоамин) дендример, периферически модифицированный 4-N,N-диметиламиноэтиленамино-1,8-нафталимидом в качестве сенсора катионов металлов и протонов». Фотохимические и фотобиологические науки . 3 (11–12): 1032–7. дои : 10.1039/B412384K . ПМИД   15570391 . S2CID   115521 .
• Ву С., Брехбил М.В., Козак Р.В., Гансов О.А. (1994). «Конструкции металл-хелат-дендример-антитело для использования в радиоиммунотерапии и визуализации» . Письма по биоорганической и медицинской химии . 4 (3): 449–54. дои : 10.1016/0960-894X(94)80014-6 .
• Уэллс М., Крукс Р.М. (1996). «Взаимодействие между организованными, ограниченными поверхностью монослоями и молекулами-зондами паровой фазы. 10. Получение и свойства химически чувствительных поверхностей дендримеров». Журнал Американского химического общества . 118 (16): 3988–9. дои : 10.1021/ja960097i .
• Чаухан А.С., Шридеви С., Чаласани К.Б., Джайн А.К., Джайн С.К., Джайн Н.К., Диван П.В. (июль 2003 г.). «Дендример-опосредованная трансдермальная доставка: повышенная биодоступность индометацина». Журнал контролируемого выпуска . 90 (3): 335–43. дои : 10.1016/S0168-3659(03)00200-1 . ПМИД   12880700 .
• Мик А., Майорос И.Дж., Томас Т.П., Бейкер Дж.Р. (январь 2007 г.). «Направленная доставка апоптотического сенсора в раковые клетки на основе дендримеров». Биомакромолекулы . 8 (1): 13–8. дои : 10.1021/bm060815l . ПМИД   17206782 .
• Марк С.С., Сандхьярани Н., Чжу С., Кампаньоло С., Батт К.А. (август 2004 г.). «Самосборные монослои, функционализированные дендримерами, как поверхность датчика поверхностного плазмонного резонанса». Ленгмюр . 20 (16): 6808–17. дои : 10.1021/la0495276 . ПМИД   15274589 .
• Альбертацци Л., Сторти Б., Маркетти Л., Бельтрам Ф. (декабрь 2010 г.). «Доставка и субклеточное нацеливание флуоресцентных датчиков pH на основе дендримеров в живые клетки». Журнал Американского химического общества . 132 (51): 18158–67. дои : 10.1021/ja105689u . ПМИД   21141854 .
• Робертс Дж.К., Бхалгат М.К., Зера РТ (январь 1996 г.). «Предварительная биологическая оценка дендримеров звездообразования полиамидоамина (ПАМАМ)». Журнал исследований биомедицинских материалов . 30 (1): 53–65. doi : 10.1002/(SICI)1097-4636(199601)30:1<53::AID-JBM8>3.0.CO;2-Q . ПМИД   8788106 .
• Ли С, Лю Х, Сунь Ю, Ван Х, Го Ф, Рао С и др. (октябрь 2009 г.). «Наночастицы ПАМАМ способствуют острому повреждению легких, вызывая аутофагическую гибель клеток через сигнальный путь Akt-TSC2-mTOR» . Журнал молекулярно-клеточной биологии . 1 (1): 37–45. дои : 10.1093/jmcb/mjp002 . ПМИД   19516051 .
• Майорос И.Дж., Мик А., Томас Т., Мехта С.Б., Бейкер Дж.Р. (февраль 2006 г.). «Мультифункциональный конъюгат на основе дендримера ПАМАМ для терапии рака: синтез, характеристика и функциональность». Биомакромолекулы . 7 (2): 572–9. дои : 10.1021/bm0506142 . ПМИД   16471932 .
• Куковска-Латалло Дж.Ф., Кандидо К.А., Цао З., Нигавекар С.С., Майорос И.Дж., Томас Т.П. и др. (июнь 2005 г.). «Нацеливание наночастиц на противораковый препарат улучшает терапевтический ответ на животной модели эпителиального рака человека» . Исследования рака . 65 (12): 5317–24. дои : 10.1158/0008-5472.CAN-04-3921 . ПМИД   15958579 .