Пункт III
Nla III типа II, представляет собой фермент рестрикции выделенный из Neisseria Lactamica . [ 1 ] Являясь частью системы модификации рестрикции , Nla III способен предотвращать интеграцию чужеродной ДНК в геном хозяина, разрезая двухцепочечную ДНК на фрагменты в определенных последовательностях. [ 2 ] Это приводит к дальнейшей деградации фрагментированной чужеродной ДНК и предотвращает ее заражение генома хозяина. [ 3 ]
Nla III распознает палиндромную и комплементарную последовательность ДНК CATG/GTAC и разрезает за пределами пар оснований GC. Такая схема резки приводит к образованию липких концов с выступами GTAC на 3-футовом конце . [ 4 ]
Характеристики
[ редактировать ]Nla III из N. Lactamica содержит два ключевых компонента: метилазу и эндонуклеазу. [ 5 ] Метилаза имеет решающее значение для распознавания, а эндонуклеаза используется для разрезания. [ 5 ] Ген ( Nla IIIR) имеет длину 693 п.н. и создает специфическую эндонуклеазу 5'-CATG-3'. [ 6 ] Гомологом Nla IIIR является IceA1 Helicobacter pylori . [ 6 ] У H. pylori существует аналогичный ген метилазы, называемый hpyIM , который находится ниже IceA1 . [ 7 ] ICEA1 представляет собой эндонуклеазу, которая также распознает последовательность 5'-CATG-3'. [ 6 ] IceA1 у H. pylori аналогичен таковому NlaIII у N. Lactamica .
Nla III содержит белок ICEA , который включает область от 4 до 225 аминокислот. [ 6 ] [ 8 ] H. pylori также содержит тот же белок. [ 9 ] Инфекция H. pylori часто приводит к желудочно-кишечным заболеваниям, таким как язвенная болезнь, аденокарцинома желудка и лимфома. [ 10 ] Исследователи предполагают, что белки ICEA служат потенциальными маркерами рака желудка. [ 7 ]
Изошизомеры
[ редактировать ]Nla III Изошизомеры распознают и разрезают одну и ту же последовательность узнавания 5'-CATG-3'. [ 11 ] Эндонуклеазы, разрезающие эту последовательность, включают:
- Фаэль
- Фатл
- Хин1 II
- Hsp92 II
- ЦвиА II
- ЛедА1
Приложения
[ редактировать ]NlaIII можно использовать во многих различных экспериментальных процедурах. [ 12 ] такой как:
- Серийный анализ экспрессии генов [ 4 ]
- Молекулярное клонирование
- Сопоставление сайтов ограничений
- Генотипирование
- Саузерн-блоттинг
- Анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ)
Ссылки
[ редактировать ]- ^ «nlaIIIR - фермент рестрикции типа 2 NlaIII - Neisseria Lactamica - ген и белок nlaIIIR» . www.uniprot.org . Проверено 5 ноября 2020 г.
- ^ Ситараман, Рамакришнан (2016). «Роль систем рестрикции-модификации ДНК в биологии Bacillus anthracis» . Границы микробиологии . 7:11 . дои : 10.3389/fmicb.2016.00011 . ISSN 1664-302X . ПМК 4722110 . ПМИД 26834729 .
- ^ Берг, Джереми М.; Тимочко, Джон Л.; Страйер, Люберт (2002). «Ферменты рестрикции: выполнение высокоспецифичных реакций расщепления ДНК» . Биохимия. 5-е издание .
- ^ Jump up to: а б Джек Дж. Пастернак (14 июня 2005 г.). Введение в молекулярную генетику человека: механизмы наследственных заболеваний . Джон Уайли и сыновья. ISBN 978-0-471-71917-5 .
- ^ Jump up to: а б Морган, доктор медицинских наук; Лагерь, РР; Уилсон, Г.Г.; Сюй, СЮ (12 декабря 1996 г.). «Молекулярное клонирование и экспрессия системы рестрикции-модификации NlaIII в E. coli» . Джин . 183 (1–2): 215–218. дои : 10.1016/s0378-1119(96)00561-6 . ISSN 0378-1119 . ПМИД 8996109 .
- ^ Jump up to: а б с д Сюй, Цин; Морган, доктор медицинских наук; Робертс, Р.Дж.; Сюй, С.Ю.; ван Доорн, LJ; Донахью, JP; Миллер, Г.Г.; Блазер, Мартин Дж. (1 сентября 2002 г.). «Функциональный анализ IceA1, гена CATG-распознающей эндонуклеазы рестрикции Helicobacter pylori» . Исследования нуклеиновых кислот . 30 (17): 3839–3847. дои : 10.1093/nar/gkf504 . ISSN 0305-1048 . ПМК 137426 . ПМИД 12202769 .
- ^ Jump up to: а б Сюй, Кью; Пик, Р.М.; Миллер, Г.Г.; Блазер, MJ (1 ноября 1997 г.). «Геном Helicobacter pylori модифицируется в CATG продуктом hpyIM» . Журнал бактериологии . 179 (21): 6807–6815. дои : 10.1128/jb.179.21.6807-6815.1997 . ISSN 0021-9193 . ПМК 179612 . ПМИД 9352933 .
- ^ «UniProtKB — Q51083 (T2N3_NEILA)» . ЮниПрот . Проверено 2 декабря 2020 г.
- ^ Вонг, Бенджамин Чун Юй; Берг, Дуглас Э.; Гарри Чжан, Цзянь Чжун; Хуан, Сяо Ру; , Шиу Кум (2001). «Распространение различных аллелей vacA, cagA и IceA у Helicobacter pylori в Гонконге» . Хеликобактер . 6 (4): 317–324 doi : 10.1046 . ISSN 1523-5378 . PMID 11843964 . / j.1523-5378.2001.00040.x .
- ^ Кустерс, Йоханнес Г.; Влит, фургон Arnoud HM; Кейперс, Эрнст Дж. (1 июля 2006 г.). «Патогенез инфекции Helicobacter pylori» . Обзоры клинической микробиологии . 19 (3): 449–490. дои : 10.1128/CMR.00054-05 . ISSN 0893-8512 . ПМЦ 1539101 . ПМИД 16847081 .
- ^ «Искатель ферментов» . Биолаборатории Новой Англии . Проверено 23 октября 2020 г.
- ^ «Hin1II (NlaIII) (5 ед/мкл)» . Термо Фишер Сайентифик . Проверено 3 ноября 2020 г.