Мой тег
Тег myc представляет собой полипептидный белковый тег, полученный из продукта гена c-myc , который можно добавлять к белку с использованием технологии рекомбинантной ДНК . Его можно использовать для аффинной хроматографии , а затем использовать для отделения рекомбинантного сверхэкспрессированного белка от белка дикого типа, экспрессируемого организмом-хозяином. Его также можно использовать для выделения белковых комплексов с множеством субъединиц.
Тег myc можно использовать во многих различных анализах, требующих распознавания антителами , и он был первоначально идентифицирован в 1985 году. [ 1 ] Если антитела против исследуемого белка нет, добавление myc-метки позволяет следить за белком с помощью антитела против эпитопа Myc. Примерами являются исследования клеточной локализации с помощью иммунофлуоресценции или обнаружение с помощью вестерн-блоттинга .
Пептидная последовательность myc-тега имеет вид (в 1- и 3-буквенном коде соответственно): EQKLISEEDL и Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu. Атомная масса метки составляет примерно 1202 дальтон и содержит 10 аминокислот.
Он может быть слит с С-концом и N-концом белка. Целесообразно не присоединять myc-тег непосредственно к сигнальному пептиду секреторного белка, поскольку он может препятствовать транслокации в секреторный путь . [ 2 ]
Моноклональное антитело против эпитопа myc , названное 9E10, доступно в некоммерческом банке гибридомных исследований развития . [ 3 ]
См. также
[ редактировать ]Ссылки
[ редактировать ]- ^ Эван Дж.И., Льюис Г.К., Рамзи Дж., Бишоп Дж.М. (1985). «Выделение моноклональных антител, специфичных к продукту протоонкогена c-myc человека» . Молекулярная и клеточная биология . 5 (12): 3610–6. дои : 10.1128/mcb.5.12.3610-3616.1985 . ПМК 369192 . ПМИД 3915782 .
- ^ «Лентивирусный вектор pLV-C-Myc» . sinobiological.com . Китайско-биологический . Проверено 1 ноября 2021 г.
- ^ «Источник анти-myc-гибридомы 9E10» . 22 сентября 2009 г.