КОЕ-Э
CFU-E означает «колониеобразующая единица-эритроид» . [1] Возникает из CFU-GEMM (через BFU-E, [2] что означает «единицы, образующие эритроидный взрыв». [3] ) и дает начало проэритробластам .
Мышиный анализ CFU-E
[ редактировать ]CFU-E представляет собой стадию развития эритроида между стадией BFU-E и стадией проэритробластов. Анализ колоний CFU-E предназначен для определения количества колониеобразующих единиц эритроидного ряда в кроветворной ткани (костном мозге, селезенке или печени плода), что может отражать потребность организма в доставке кислорода к тканям. или нарушение кроветворения.
Ранние предшественники эритроида обнаруживаются с довольно низкой частотой по сравнению с более поздними стадиями дифференцировки эритроида, такими как стадии проэритробластов и базофильных эритробластов, которые можно обнаружить с помощью проточной цитометрии непосредственно ex vivo. [4] Кроме того, в отличие от проэритробластов и более поздних стадий развития эритроидов, не существует по-настоящему надежных и уникальных положительных маркеров проточной цитометрии, хотя можно использовать отрицательные маркеры исключения для истощения клеточной популяции других предшественников и дифференцированных клеток путем сортировки клеток. , тем самым значительно обогащая его активностью CFU-E. [5] Клетки CFU-E экспрессируют рецептор Epo, c-Kit (рецептор фактора стволовых клеток), рецептор трансферрина (CD71+) и являются Ter119 (гликофорин-А-ассоциированный антиген)-отрицательными. По вышеуказанным причинам анализ CFU-E, каким бы неэффективным и изменчивым он ни был, все еще используется сегодня.
Клетки на стадии CFU-E экспрессируют некоторое количество рецептора эритропоэтина (EpoR) и, таким образом, могут быть индуцированы для окончательной дифференцировки in vitro за 2–3 дня в присутствии только эритропоэтина (Epo) (вместе с основным содержимым культуральной среды: FBS). , BSA в IMDM). Метилцеллюлоза представляет собой полутвердую добавку к среде, которая позволяет исследователю окрашивать (диаминобензидиновым реагентом на гемоглобин) и затем подсчитывать отдельные колонии, каждая из которых возникает из одного высеянного предшественника, находящегося на стадии CFU-E. Ко второму дню с момента посева каждая колония CFU-E будет содержать от 8 (минимум) до 64 гемоглобинизированных клеток, большинство из которых находятся на конечной стадии эритроидной дифференцировки. Можно увидеть небольшой спектр уровня гемоглобинизации и, возможно, размера клеток, что указывает на то, что некоторые клетки в колонии достигли конечной стадии быстрее, чем другие.
Количество клеток в колонии важно, поскольку стадия проэритробластов также реагирует на Эпо (экспрессирует рецептор ЭПО), но пролиферативная способность этих клеток не так высока, что приводит к образованию колонии с менее чем 8 клетками. Аналогичным образом, более ранняя стадия эритроидной дифференцировки также может давать колонии в среде, содержащей только Эпо, но эти колонии, вероятно, будут меньшими по размеру и/или не гемоглобинизированными, поскольку стадии, предшествующие стадии CFU-E (MEP и BFU-E), требуют других факторов. (IL-3 и т. д.) и больше времени для роста, что также задержит терминальную дифференцировку и гемоглобинизацию.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Миллер, Синди Л.; Дикстра, Брэд; Ивз, Конни Дж. (2008). «Характеристика мышиных гемопоэтических стволовых и клеток-предшественников». Современные протоколы в иммунологии . 80 (1): 22Б.2.1–22Б.2.31. дои : 10.1002/0471142735.im22b02s80 . ISSN 1934-368X . ПМИД 18432636 .
- ^ Ву Х, Лю X, Джениш Р., Лодиш Х.Ф. (октябрь 1995 г.). «Поколение коммитированных эритроидных предшественников BFU-E и CFU-E не требует эритропоэтина или рецептора эритропоэтина» . Клетка . 83 (1): 59–67. дои : 10.1016/0092-8674(95)90234-1 . ПМИД 7553874 .
- ^ Марли С.Б., Льюис Дж.Л., Голдман Дж.М., Гордон М.Ю. (июнь 1996 г.). «Аномальная кинетика образования колоний эритроидными взрывообразующими единицами (BFU-E) при хроническом миелолейкозе». Бр. Дж. Гематол . 93 (4): 878–83. дои : 10.1046/j.1365-2141.1996.d01-1738.x . ПМИД 8703820 .
- ^ Соколовский, Мерав; Нам, Хён Сон; Флеминг, Марк Д.; Хаазе, Фолькер Х.; Бругнара, Карло; Лодиш, Харви Ф. (1 декабря 2001 г.). «Неэффективный эритропоэз у мышей Stat5a-/-5b-/- из-за снижения выживаемости ранних эритробластов» . Кровь . 98 (12): 3261–3273. дои : 10.1182/blood.V98.12.3261 . ISSN 0006-4971 .
- ^ Тершовский, Гжегож; Васков, Клаудия; Конрадт, Питер; Ленце, Дидона; Кенигсманн, Джессика; Карстаньен, Дирк; Горак, Иван; Родевальд, Ханс-Реймер (01 марта 2005 г.). «Проспективная изоляция и глобальный анализ экспрессии генов колониеобразующей единицы эритроцитов (КОЕ-Е)» . Кровь . 105 (5): 1937–1945. дои : 10.1182/blood-2004-09-3459 . ISSN 0006-4971 .
Внешние ссылки
[ редактировать ]- CFU-E в Национальной медицинской библиотеке США по медицинским предметным рубрикам (MeSH)