Хориоаллантоисная мембрана
Хориоаллантоисная мембрана | |
---|---|
![]() Хориоаллантоисная оболочка развивающегося цыпленка, покрытая вируса оспы . оспинами | |
Идентификаторы | |
МеШ | D049033 |
Анатомическая терминология |
Хориоаллантоисная мембрана (САМ) , также известная как хориоаллантоис, представляет собой сильно васкуляризированную мембрану , обнаруженную в яйцах некоторых амниот, таких как птицы и рептилии . Он образуется путем слияния мезодермальных слоев двух внезародышевых оболочек — хориона и аллантоиса . [ 1 ] Это гомолог плаценты млекопитающих . птичий Это самая внешняя внеэмбриональная мембрана, выстилающая бессосудистую оболочку яичной скорлупы.
Структура
[ редактировать ]Хориоаллантоисная мембрана состоит из трех слоев. Первый — это хорионический эпителий , который представляет собой внешний слой, расположенный непосредственно под скорлуповой мембраной. [ 2 ] Он состоит из эпителиальных клеток, возникающих из хорионической эктодермы . Второй — промежуточный мезодермальный слой, состоящий из мезенхимальной ткани, образующейся в результате слияния мезодермального слоя хориона и мезодермального слоя аллантоиса. Этот слой сильно васкуляризирован и богат стромальными компонентами. Третий — аллантоисный эпителий, состоящий из эпителиальных клеток, возникающих из аллантоисной эктодермы. Он образует часть стенки аллантоисного мешка.
Оба эпителиальных слоя отделены от мезодермального слоя базальными мембранами . [ 3 ]
Функция
[ редактировать ]Хориоаллантоисная мембрана выполняет следующие функции:
САМ функционирует как место газообмена кислорода между и углекислого газа растущим эмбрионом и окружающей средой. Кровеносные капилляры и синусы , находящиеся в промежуточном мезодермальном слое, обеспечивают тесный контакт (в пределах 0,2 мкм) с воздухом, находящимся в порах скорлуповой оболочки яйца. [ 4 ]
Эпителиальный слой хориона содержит область САМ, переносящую кальций, и, таким образом, отвечает за транспорт ионов кальция из яичной скорлупы в эмбрион с целью окостенения костей развивающегося эмбриона . [ 2 ] [ 5 ] САМ также помогает поддерживать кислотно-щелочной гомеостаз эмбриона. [ 6 ] Наконец, аллантоисный эпителий служит барьером для аллантоисной полости и действует избирательно проницаемо , обеспечивая абсорбцию воды и электролитов , а также поддерживает барьер против токсинов и отходов, хранящихся внутри аллантоисной полости. [ 2 ]
Разработка
[ редактировать ]Развитие САМ аналогично развитию аллантоиса млекопитающих. Его рост начинается с 3-го дня эмбрионального развития. Развитие аллантоиса происходит внеэмбрионально из вентральной стенки энтодермальной задней кишки . Частичное сращение хориона и аллантоиса происходит между 5 и 6 сутками. К 10 суткам происходит обширное формирование капиллярной сети. Полная дифференциация САМ завершается к 13 дню. [ 7 ] [ 5 ]
Протоколы культивирования
[ редактировать ]Хориоаллантоисные мембраны можно культивировать как снаружи (ex-ovo), так и внутри оболочки (in-ovo).
Экс-яйцо
[ редактировать ]Здесь эмбрион выращивается вне скорлупы. При этом методе яйца сначала выдерживают во влажном инкубаторе на срок до 3 дней, чтобы гарантировать, что положение эмбриона противоположно положению, в котором яйцо впоследствии будет разбито. Сбоку воздушной камеры делается небольшое отверстие для уравновешивания давления, после чего происходит разбивание яйца на чашке Петри . [ 8 ]
Этот метод идеально подходит для визуализации растущего эмбриона и манипуляций с ним без ограничений доступа к эмбриону на разных стадиях развития. Однако процесс требует асептических условий. Существуют также проблемы, связанные с обращением с эмбрионом, поскольку желточная оболочка склонна к разрыву как во время, так и после культивирования. [ 7 ]
Ин-ово
[ редактировать ]Здесь эмбрион выращивается в пределах яичной скорлупы. При этом методе оплодотворенные яйца вращают внутри инкубатора в течение трех дней, чтобы предотвратить прилипание эмбриона к оболочкам скорлупы. Затем в яичной скорлупе проделывают отверстие и оборачивают пленкой, чтобы предотвратить обезвоживание и инфекции . Затем яйцо выдерживают в статическом положении до дальнейшего использования. Этот шаг предотвращает прилипание CAM к мембране скорлупы. На 7-й день после оплодотворения отверстие расширяется, чтобы получить доступ к САМ. [ 9 ]
Этот метод имеет ряд преимуществ перед методом ex-vivo, поскольку физиологическая среда для развивающегося эмбриона остается практически неизменной. Легче поддерживать стерильность, а также целостность САМ и эмбриона, когда они находятся внутри скорлупы. [ 7 ] Однако для этого метода необходимы хорошие технические навыки. Наличие оболочки вокруг развивающегося эмбриона затрудняет доступ к эмбриону. Существуют также ограничения в наблюдении и визуализации развивающегося эмбриона.
Приложения
[ редактировать ]САМ обеспечивает несколько особенностей, таких как легкость доступа и быстрое развитие структуры мембраны, наличие иммунодефицитной среды, [ 10 ] простота визуализации для методов визуализации, начиная от микроскопического и заканчивая ПЭТ-сканированием. [ 7 ] Таким образом, это делает модель подходящей для ряда исследовательских приложений в области биологических и биомедицинских исследований:
- Развитие сосудов и ангиогенез.
- Исследования ксенотрансплантата . [ 10 ]
- Изучение опухолей . роста и дифференцировки [ 11 ]
- Исследования по восстановлению ран .
- Токсикологические исследования.
- наноматериалов . Оценка [ 12 ]
- Доставка лекарств .
- Изучение молекул, обладающих ангиогенной и антиангиогенной активностью.
- Культивирование вирусов , таких как вирус простого герпеса и т. д. [ 13 ] [ 14 ]
- Скрининговые исследования на наркотики.
- Исследования, связанные с лучевой терапией .
- Исследования аллергенности и токсичности.
- Выращивание гельминтов . [ 15 ]
- Онкологические исследования. [ 16 ]
Преимущества
[ редактировать ]Преимущества использования CAM:
- Он прост в использовании по сравнению с другими моделями животных .
- Анализы можно визуализировать в режиме реального времени, используя как очень простые, так и очень сложные методы визуализации. [ 7 ]
- Быстрый рост сосудов.
- Экономично, легкодоступно.
- Система кровообращения полностью доступна, что упрощает доставку внутривенных молекул.
- Анализы занимают относительно меньше времени.
- Легко воспроизводимо и надежно.
Недостатки
[ редактировать ]Несмотря на многочисленные преимущества, существует ряд недостатков, связанных с использованием CAM:
- Чувствительность к изменениям условий окружающей среды. [ 5 ]
- Ограниченная доступность реагентов, таких как антитела, из-за птичьего происхождения.
- Неспецифическая воспалительная реакция через 15 дней развития. [ 5 ]
- Трудность отличить образование новых капилляров от уже существующей сосудистой сети. [ 7 ]
- Различия в метаболизме лекарств по сравнению с млекопитающими.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Гилберт С.Ф. (2003). Биология развития (7-е изд.). Сандерленд, Массачусетс: Sinauer Associates. ISBN 0-87893-258-5 . OCLC 51544170 .
- ^ Jump up to: а б с Габриэлли М.Г., Акчили Д. (21 марта 2010 г.). «Хориоаллантоисная мембрана цыпленка: модель молекулярной, структурной и функциональной адаптации к трансэпителиальному транспорту ионов и барьерной функции во время эмбрионального развития» . Журнал биомедицины и биотехнологии . 2010 : 940741. doi : 10.1155/2010/940741 . ПМЦ 2842975 . ПМИД 20339524 .
- ^ Лусимбо В.С., Лейтон Ф.А., Вобесер Г.А. (май 2000 г.). «Гистология и ультраструктура хориоаллантоисной оболочки кряквы (Anas platyrhynchos)». Анатомическая запись . 259 (1): 25–34. doi : 10.1002/(SICI)1097-0185(20000501)259:1<25::AID-AR3>3.0.CO;2-Y . ПМИД 10760740 . S2CID 25097099 .
- ^ Фанци Т., Фехер Г. (июнь 1979 г.). «Ультраструктурные исследования хориоаллантоисной мембраны куриного эмбриона в период инкубации». Анатомия, Гистология, Эмбриология . 8 (2): 151–9. дои : 10.1111/j.1439-0264.1979.tb00687.x . ПМИД 159001 . S2CID 9045456 .
- ^ Jump up to: а б с д Рибатти Д. (август 2016 г.). «Хориоаллантоисная мембрана куриного эмбриона (ХАМ). Многогранная экспериментальная модель» . Механизмы развития . 141 : 70–77. дои : 10.1016/j.mod.2016.05.003 . hdl : 11586/191156 . ПМИД 27178379 . S2CID 7106191 .
- ^ Габриэлли М.Г. (июнь 2004 г.). «Карбоангидразы во внеэмбриональных структурах кур: роль СА в реабсорбции бикарбоната через хориоаллантоисную мембрану». Журнал ингибирования ферментов и медицинской химии . 19 (3): 283–6. дои : 10.1080/14756360410001689568 . ПМИД 15500002 . S2CID 11697041 .
- ^ Jump up to: а б с д и ж Новак-Сливинска П., Сегура Т., Ируэла-Ариспе М.Л. (октябрь 2014 г.). «Модель хориоаллантоисной мембраны курицы в биологии, медицине и биоинженерии» . Ангиогенез . 17 (4): 779–804. дои : 10.1007/s10456-014-9440-7 . ПМЦ 4583126 . ПМИД 25138280 .
- ^ Шоманн Т, Куннейс Ф, Видера Д, Кальчмидт С, Кальчмидт Б (11 марта 2013 г.). «Улучшенный метод ex ovo-культивирования развивающихся куриных эмбрионов для получения ксенотрансплантатов стволовых клеток человека» . Стволовые клетки Интернешнл . 2013 : 960958. doi : 10.1155/2013/960958 . ПМЦ 3608262 . ПМИД 23554818 .
- ^ Эль-Гали Н., Рабади М., Эзин А.М., Де Беллард М.Е. (январь 2010 г.). «Новые методы манипуляций с куриными эмбрионами» . Микроскопические исследования и техника . 73 (1): 58–66. дои : 10.1002/jemt.20753 . ПМЦ 2797828 . ПМИД 19582831 .
- ^ Jump up to: а б Эндо Ю (2019). «История разработки моделей ксенотрансплантатов опухолей куриных эмбрионов». Ферменты . Том. 46. Эльзевир. стр. 11–22. дои : 10.1016/bs.enz.2019.08.005 . ISBN 978-0-12-817398-5 . ПМИД 31727272 . S2CID 208036926 .
- ^ ДеБорд Л.С., Патак Р.Р., Вилланева М., Лю Х.К., Харрингтон Д.А., Ю В. и др. (2018). «Хориоаллантоисная мембрана цыпленка (CAM) как универсальная платформа ксенотрансплантата, полученного от пациента (PDX), для точной медицины и доклинических исследований» . Американский журнал исследований рака . 8 (8): 1642–1660. ПМК 6129484 . ПМИД 30210932 .
- ^ Мапанао, Ана Катрина; Че, Пей Пей; Сароньи, Патриция; Сминия, Петр; Джованнетти, Элиза; Волиани, Валерио (10 февраля 2021 г.). «Привитая опухоль – хориоаллантоисная мембрана цыпленка как альтернативная модель для биологических исследований рака и оценки традиционной/наноматериальной тераностики» . Экспертное заключение по метаболизму и токсикологии лекарственных средств . 17 (8): 947–968. дои : 10.1080/17425255.2021.1879047 . ISSN 1742-5255 . PMID 33565346 .
- ^ Рибатти Д. (август 2018 г.). «Использование хориоаллантоисной мембраны куриного эмбриона в качестве экспериментальной модели для изучения роста вируса и проверки гипотезы клонального отбора. Вклад сэра Мака Фарлейна Бернета» . Письма по иммунологии . 200 : 1–4. дои : 10.1016/j.imlet.2018.05.005 . ПМИД 29886119 . S2CID 47013406 .
- ^ Гай Дж.С. (2008). «Выделение и распространение коронавирусов в эмбриональных яйцах». Выделение и размножение коронавирусов в яйцах с эмбрионами . Методы молекулярной биологии. Том. 454. стр. 109–17. дои : 10.1007/978-1-59745-181-9_10 . ISBN 978-1-58829-867-6 . ПМЦ 7122360 . ПМИД 19057881 .
- ^ Фрид Б., Стейблфорд LT (1991). «Культивирование гельминтов в куриных эмбрионах». Достижения паразитологии . 30 : 108–65. ПМИД 2069072 .
- ^ Сароньи, Патриция; Мапанао, Ана Катрина; Маркетти, Сабрина; Кусмик, Клаудия; Волиани, Валерио (14 апреля 2021 г.). «Стандартный протокол для производства и биооценки этических моделей in vivo плоскоклеточного рака головы и шеи, отрицательного к ВПЧ» . ACS Фармакология и трансляционная наука . 4 (3): 1227–1234. дои : 10.1021/acptsci.1c00083 . ISSN 2575-9108 . ПМК 8205242 . ПМИД 34151212 .