секвенатор ДНК
Производители | Roche , Illumina , Life Technologies , Beckman Coulter , Pacific Biosciences , MGI/BGI , Oxford Nanopore Technologies |
---|
Секвенатор ДНК — это научный инструмент , используемый для автоматизации процесса секвенирования ДНК . Учитывая образец ДНК , секвенатор ДНК используется для определения порядка четырех оснований: G ( гуанин ), C ( цитозин ), A ( аденин ) и T ( тимин ). Затем об этом сообщается в виде текстовой строки , называемой чтением. Некоторые секвенаторы ДНК также можно рассматривать как оптические инструменты , поскольку они анализируют световые сигналы, исходящие от флуорохромов , прикрепленных к нуклеотидам .
Первый автоматизированный секвенатор ДНК, изобретенный Ллойдом М. Смитом , был представлен компанией Applied Biosystems в 1987 году. [1] Он использовал метод секвенирования Сэнгера , технологию, которая легла в основу «первого поколения» секвенаторов ДНК. [2] [3] и позволило завершить проект генома человека в 2001 году. [4] Это первое поколение секвенаторов ДНК представляет собой, по сути, автоматизированные системы электрофореза , которые обнаруживают миграцию меченых фрагментов ДНК. Следовательно, эти секвенаторы также можно использовать при генотипировании генетических маркеров, где необходимо определить только длину фрагмента(ов) ДНК (например, микросателлиты , AFLP ).
Проект «Геном человека» стимулировал разработку более дешевых, высокопроизводительных и более точных платформ, известных как секвенаторы следующего поколения (NGS), для секвенирования генома человека . К ним относятся платформы для секвенирования ДНК 454, SOLiD и Illumina . Секвенирующие машины нового поколения существенно увеличили скорость секвенирования ДНК по сравнению с предыдущими методами Сэнгера. Образцы ДНК можно подготовить автоматически всего за 90 минут. [5] в то время как геном человека можно секвенировать с 15-кратным охватом за считанные дни. [6]
Более поздние секвенаторы ДНК третьего поколения, такие как PacBio SMRT и Oxford Nanopore, предлагают возможность секвенирования длинных молекул по сравнению с технологиями короткого считывания, такими как Illumina SBS или DNBSEQ от MGI Tech.
Из-за ограничений технологии секвенирования ДНК прочтения многих из этих технологий короткие по сравнению с длиной генома, поэтому прочтения необходимо собирать в более длинные контиги . [7] Данные также могут содержать ошибки, вызванные ограничениями техники секвенирования ДНК или ошибками во время ПЦР-амплификации . Производители секвенаторов ДНК используют ряд различных методов для определения наличия оснований ДНК. Конкретные протоколы, применяемые на разных платформах секвенирования, влияют на генерируемые конечные данные. Поэтому сравнение качества данных и стоимости различных технологий может оказаться непростой задачей. Каждый производитель предоставляет свои собственные способы информирования об ошибках секвенирования и оценках. Однако ошибки и оценки на разных платформах не всегда можно сравнивать напрямую. Поскольку эти системы основаны на разных подходах к секвенированию ДНК, выбор лучшего секвенатора и метода ДНК обычно зависит от целей эксперимента и имеющегося бюджета. [2]
История
[ редактировать ]Первые методы секвенирования ДНК были разработаны Гилбертом (1973). [8] и Сэнгер (1975). [9] Гилберт представил метод секвенирования, основанный на химической модификации ДНК с последующим расщеплением по определенным основаниям, тогда как метод Сэнгера основан на обрыве цепи дидезоксинуклеотида . Метод Сэнгера стал популярным благодаря своей повышенной эффективности и низкой радиоактивности. Первым автоматизированным секвенатором ДНК был AB370A, представленный в 1986 году компанией Applied Biosystems . AB370A мог секвенировать 96 образцов одновременно, 500 килобаз в день и достигать длины чтения до 600 нуклеотидов. Это было началом «первого поколения» секвенаторов ДНК. [2] [3] который реализовал секвенирование по Сэнгеру, флуоресцентные дидезоксинуклеотиды и полиакриламидный гель, зажатый между стеклянными пластинами - пластинчатые гели. Следующим крупным достижением стал выпуск в 1995 году модели AB310, в которой для разделения цепей ДНК методом электрофореза использовался линейный полимер в капилляре вместо пластинчатого геля. Эти методы легли в основу завершения проекта генома человека в 2001 году. [4] Проект генома человека стимулировал разработку более дешевых, высокопроизводительных и точных платформ, известных как секвенаторы следующего поколения (NGS). В 2005 году компания 454 Life Sciences выпустила секвенатор 454, за ней последовал анализатор генома Solexa и SOLiD (поддерживаемое обнаружение лигирования олиго) от Agencourt в 2006 году. Applied Biosystems приобрела Agencourt в 2006 году, а в 2007 году Roche купила 454 Life Sciences, а Illumina приобрела Solexa. . Ion Torrent вышел на рынок в 2010 году и был приобретен компанией Life Technologies (ныне Thermo Fisher Scientific ). А BGI начала производство секвенаторов в Китае после приобретения компании Complete Genomics под своим крылом MGI . Это по-прежнему наиболее распространенные системы NGS благодаря их конкурентоспособной стоимости, точности и производительности.
Совсем недавно было представлено третье поколение секвенаторов ДНК. Методы секвенирования, применяемые этими секвенаторами, не требуют амплификации ДНК (полимеразная цепная реакция – ПЦР), что ускоряет подготовку проб перед секвенированием и снижает количество ошибок. Кроме того, в режиме реального времени собираются данные секвенирования реакций, вызванных добавлением нуклеотидов в комплементарную цепь. Две компании представили разные подходы в своих секвенаторах третьего поколения. Секвенаторы Pacific Biosciences используют метод под названием «Одномолекулярный режим реального времени» (SMRT), при котором данные секвенирования производятся с помощью света (захватываемого камерой), излучаемого при добавлении нуклеотида к комплементарной цепи ферментами, содержащими флуоресцентные красители. Oxford Nanopore Technologies — еще одна компания, разрабатывающая секвенаторы третьего поколения с использованием электронных систем, основанных на технологиях обнаружения нанопор.
Производители секвенаторов ДНК
[ редактировать ]Секвенаторы ДНК были разработаны, произведены и проданы, в частности, следующими компаниями.
Рош
[ редактировать ]Секвенатор ДНК 454 стал первым секвенатором нового поколения, добившимся коммерческого успеха. [10] Он был разработан компанией 454 Life Sciences и приобретен компанией Roche в 2007 году. 454 использует обнаружение пирофосфата, высвобождаемого в результате реакции ДНК-полимеразы при добавлении нуклеотида к матричному штамму.
В настоящее время компания Roche производит две системы на основе своей технологии пиросеквенирования: GS FLX+ и GS Junior System. [11] Система GS FLX+ обещает длину чтения примерно 1000 пар оснований, а система GS Junior обещает 400 пар оснований. [12] [13] Предшественница GS FLX+, система 454 GS FLX Titanium, выпущенная в 2008 году, обеспечивала выдачу 0,7 ГБ данных за один проход, точность 99,9% после качественного фильтра и длину считывания до 700 бит в секунду. В 2009 году компания Roche выпустила GS Junior, настольную версию секвенатора 454 с длиной считывания до 400 пар оснований и упрощенной подготовкой библиотеки и обработкой данных.
Одним из преимуществ систем 454 является скорость их работы. Трудозатраты можно сократить за счет автоматизации подготовки библиотек и полуавтоматизации эмульсионной ПЦР. Недостатком системы 454 является то, что она склонна к ошибкам при оценке количества оснований в длинной цепочке идентичных нуклеотидов. Это называется гомополимерной ошибкой и возникает, когда в ряду находится 6 или более одинаковых оснований. [14] Еще одним недостатком является то, что цена реагентов относительно выше по сравнению с другими секвенаторами следующего поколения.
В 2013 году компания Roche объявила, что прекратит разработку технологии 454 и полностью выведет из эксплуатации машины 454 в 2016 году, когда ее технология станет неконкурентоспособной. [15] [16]
Компания «Рош» производит ряд программных инструментов, оптимизированных для анализа данных секвенирования 454. [17] Такой как,
- GS Run Processor преобразует необработанные изображения, созданные в ходе секвенирования, в значения интенсивности. [18] Процесс состоит из двух основных этапов: обработка изображения и обработка сигнала. Программное обеспечение также применяет нормализацию, коррекцию сигнала, определение оснований и оценку качества для отдельных считываний. Программное обеспечение выводит данные в файлах стандартного формата блок-схемы (или SFF), которые можно использовать в приложениях анализа данных (GS De Novo Assembler, GS Reference Mapper или GS Amplicon Variant Analyser).
- GS De Novo Assembler — это инструмент для сборки de novo целых геномов размером до 3 ГБ из дробовых считываний отдельно или в сочетании с парными конечными данными, генерируемыми секвенаторами 454. Он также поддерживает сборку транскриптов de novo (включая анализ), а также обнаружение вариантов изоформ. [17]
- GS Reference Mapper сопоставляет короткие чтения с эталонным геномом, генерируя консенсусную последовательность. Программное обеспечение способно генерировать выходные файлы для оценки с указанием вставок, удалений и SNP. Может обрабатывать большие и сложные геномы любого размера. [17]
- Наконец, анализатор вариантов GS Amplicon сравнивает показания образцов ампликонов с эталоном, определяя варианты (связанные или нет) и их частоты. Его также можно использовать для обнаружения неизвестных и низкочастотных вариантов. Он включает в себя графические инструменты для анализа выравниваний. [17]
Иллюмина
[ редактировать ]Illumina производит ряд секвенаторов нового поколения, используя технологию, приобретенную у Manteia Predictive Medicine и разработанную Solexa. [19] Illumina производит ряд секвенаторов следующего поколения, использующих эту технологию, включая HiSeq, Genome Analyser IIx, MiSeq и HiScanSQ, которые также могут обрабатывать микрочипы . [20]
Технология, лежащая в основе создания этих секвенаторов ДНК, была впервые выпущена компанией Solexa в 2006 году под названием «Анализатор генома». [10] Illumina приобрела Solexa в 2007 году. Анализатор генома использует метод секвенирования методом синтеза. Первая модель производила 1G за прогон. В течение 2009 года производительность была увеличена с 20G за прогон в августе до 50G за прогон в декабре. В 2010 году Illumina выпустила HiSeq 2000 с производительностью 200, а затем 600G за цикл, что заняло 8 дней. На момент своего выпуска HiSeq 2000 представлял собой одну из самых дешевых платформ для секвенирования по цене 0,02 доллара за миллион оснований по цене Пекинского института геномики .
В 2011 году Illumina выпустила настольный секвенатор MiSeq. На момент выпуска MiSeq мог генерировать 1,5 ГБ за цикл с парными чтениями на концах по 150 бит в секунду. При использовании автоматизированной подготовки образцов ДНК цикл секвенирования можно выполнить за 10 часов. [10]
Illumina HiSeq использует два программных инструмента для расчета количества и положения кластеров ДНК для оценки качества секвенирования: систему управления HiSeq и анализатор реального времени. Эти методы помогают оценить, мешают ли соседние кластеры друг другу. [10]
Жизненные Технологии
[ редактировать ]Life Technologies (ныне Thermo Fisher Scientific ) производит секвенаторы ДНК под брендами Applied Biosystems и Ion Torrent . Компания Applied Biosystems создает платформу для секвенирования нового поколения SOLiD. [21] и секвенаторы ДНК на основе Сэнгера, такие как генетический анализатор 3500. [22] Под брендом Ion Torrent компания Applied Biosystems производит четыре секвенатора нового поколения: системы Ion PGM, Ion Proton System, Ion S5 и Ion S5xl. [23] Предполагается, что компания также разрабатывает свой новый секвенатор капиллярной ДНК под названием SeqStudio, который будет выпущен в начале 2018 года. [24]
Системы SOLiD были приобретены Applied Biosystems в 2006 году. SOLiD применяет секвенирование путем лигирования и двухосновного кодирования . Первая система SOLiD была запущена в 2007 году и генерировала данные длиной 35 бит в секунду и 3G за один проход. После пяти обновлений в 2010 году была выпущена система секвенирования 5500xl, которая значительно увеличила длину считывания до 85 пар оснований, повысила точность до 99,99% и произвела 30G за 7-дневный цикл. [10]
Ограниченная длина чтения SOLiD остается существенным недостатком. [25] и в некоторой степени ограничил его использование экспериментами, где длина считывания менее важна, такими как повторное секвенирование и анализ транскриптома, а в последнее время эксперименты с ChIP-Seq и метилированием. [10] Время подготовки образцов ДНК для систем SOLiD стало намного быстрее благодаря автоматизации подготовки библиотек секвенирования, такой как система Tecan. [10]
Данные цветового пространства, создаваемые платформой SOLiD, можно декодировать в базы ДНК для дальнейшего анализа, однако программное обеспечение, учитывающее исходную информацию о цветовом пространстве, может дать более точные результаты. Life Technologies выпустила BioScope, [26] пакет анализа данных для повторного секвенирования, ChiP-Seq и анализа транскриптома. Он использует алгоритм MaxMapper для отображения чтения цветового пространства.
Бекман Коултер
[ редактировать ]Компания Beckman Coulter (ныне Danaher ) ранее производила секвенаторы ДНК на основе терминации цепи и капиллярного электрофореза под модельным названием CEQ, включая CEQ 8000. [27] Сейчас компания производит систему генетического анализа GeXP, которая использует секвенирование терминаторов красителей . [28] В этом методе термоциклер используется почти так же, как и в ПЦР, для денатурации, отжига и удлинения фрагментов ДНК, амплификации секвенированных фрагментов. [29] [30]
Тихоокеанские биологические науки
[ редактировать ]Компания Pacific Biosciences производит системы секвенирования PacBio RS и Sequel, используя метод секвенирования одной молекулы в реальном времени , или SMRT. [31] Эта система может производить длины чтения в несколько тысяч пар оснований. Более высокие необработанные ошибки чтения исправляются либо с помощью циклического консенсуса, когда одна и та же цепочка считывается снова и снова, либо с использованием оптимизированных сборки . стратегий [32] Ученые сообщили о точности этих стратегий на уровне 99,9999%. [33] Система Sequel была запущена в 2015 году с увеличенной мощностью и более низкой ценой. [34] [35]
Оксфорд Нанопор
[ редактировать ]Секвенатор MinION компании Oxford Nanopore Technologies основан на развивающейся технологии секвенирования нанопор для анализа нуклеиновых кислот. [37] Устройство имеет длину четыре дюйма и получает питание от порта USB . MinION декодирует ДНК напрямую, когда молекула проходит со скоростью 450 оснований в секунду через нанопоры, подвешенные в мембране. [38] Изменения электрического тока указывают на наличие базы. Первоначально точность устройства составляла от 60 до 85 процентов по сравнению с 99,9 процентами у обычных машин. [39] Даже неточные результаты могут оказаться полезными, поскольку они приводят к большой длине чтения. [40] В начале 2021 года исследователи из Университета Британской Колумбии использовали специальные молекулярные метки и смогли снизить частоту ошибок устройства от 5 до 15 процентов до менее чем 0,005 процента даже при одновременном секвенировании многих длинных участков ДНК. [41] Есть еще две итерации продукта на базе MinION; первым из них является GridION, который представляет собой секвенатор немного большего размера, который обрабатывает до пяти проточных ячеек MinION одновременно. А второй — PromethION, который параллельно использует до 100 000 пор, что больше подходит для секвенирования больших объемов. [42]
МГИ
[ редактировать ]MGI производит высокопроизводительные секвенаторы для научных исследований и клинических применений, такие как DNBSEQ-G50, DNBSEQ-G400 и DNBSEQ-T7, по запатентованной технологии DNBSEQ. [43] Он основан на технологиях секвенирования наношариков ДНК и технологиях комбинаторного синтеза якорных зондов, в которых наношарики ДНК (DNB) загружаются на чип с узорчатым массивом через жидкостную систему, а затем праймер для секвенирования добавляется к адаптерной области DNB для гибридизации . DNBSEQ-T7 может генерировать короткие чтения в очень больших масштабах — до 60 геномов человека в день. [44] DNBSEQ-T7 использовался для генерации парных концевых считываний длиной 150 пар оснований, 30-кратного секвенирования для секвенирования генома SARS-CoV-2 или COVID-19 для выявления предрасположенности к генетическим вариантам при тяжелом заболевании COVID-19. [45] Используя новую технику, исследователи из Китайского национального банка генов секвенировали библиотеки, свободные от ПЦР , на массивах MGI DNBSEQ без ПЦР, чтобы впервые получить истинное полногеномное секвенирование без ПЦР . [46] MGISEQ-2000 использовался при секвенировании одноклеточной РНК для изучения основного патогенеза и выздоровления пациентов с COVID-19, как опубликовано в журнале Nature Medicine . [47]
Сравнение
[ редактировать ]Текущие предложения в области технологии секвенирования ДНК показывают доминирующего игрока: Illumina (декабрь 2019 г.), за ней следуют PacBio , MGI и Oxford Nanopore .
Секвенсор | Ион Торрент ПГМ [5] [49] [50] | 454 GS ФЛКС [10] | ХайСек 2000 [5] [10] | SOLiDv4 [10] | ПакБио [5] [51] | Певица 3730xl [10] | МГИ DNBSEQ-G400 [52] |
---|---|---|---|---|---|---|---|
Производитель | Ионный Торрент (Life Technologies) | 454 Науки о жизни (Рош) | Иллюмина | Прикладные биосистемы (технологии жизни) | Тихоокеанские биологические науки | Прикладные биосистемы (технологии жизни) | МГИ |
Секвенирование химии | Ионно-полупроводниковое секвенирование | Пиросеквенирование | Последовательность синтеза на основе полимеразы | Секвенирование на основе лигирования | Фосфолосвязанные флуоресцентные нуклеотиды | Обрыв дидезоксицепи | Последовательность синтеза на основе полимеразы |
Подход усиления | Эмульсионная ПЦР | Эмульсионная ПЦР | Мостовое усиление | Эмульсионная ПЦР | Одномолекулярные; без усиления | ПЦР | Генерация наношариков ДНК (DNB) |
Вывод данных за прогон | 100-200 Мб | 0,7 ГБ | 600 ГБ | 120 ГБ | 0,5 - 1,0 Гб | 1,9~84 Кб | 1440 ГБ / 1500-1800М операций чтения |
Точность | 99% | 99.9% | 99.9% | 99.94% | 88,0% (>99,9999% CCS или HGAP) | 99.999% | 99.90% |
Время за прогон | 2 часа | 24 часа | 3–10 дней | 7–14 дней | 2–4 часа | 20 минут - 3 часа | 3–5 дней |
Длина чтения | 200-400 б.п. | 700 б.п. | 100x100 п.н., парный конец | 50x50 в.п., парный конец | 14000 п.н. ( N50 ) | 400-900 б.п. | парный конец 100/150/200 п.н. |
Стоимость за прогон | 350 долларов США | 7000 долларов США | 6000 долларов США (30-кратный геном человека) | 4000 долларов США | 125–300 долларов США | 4 доллара США (однократное чтение/реакция) | Н/Д |
Стоимость за Мб | 1,00 доллара США | 10 долларов США | 0,07 доллара США | 0,13 доллара США | 0,13–0,60 доллара США | 2400 долларов США | $0.007 |
Стоимость за инструмент | 80 000 долларов США | 500 000 долларов США | 690 000 долларов США | 495 000 долларов США | 695 000 долларов США | 95 000 долларов США | Н/Д |
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Кук-Диган, Роберт Муллан (1991). «Истоки проекта генома человека» . Журнал ФАСЭБ . 5 (1). Вашингтонский университет: 8–11. дои : 10.1096/fasebj.5.1.1991595 . ПМИД 1991595 . S2CID 37792736 . Проверено 20 октября 2014 г.
- ^ Перейти обратно: а б с Мецкер, М.Л. (2005). «Новые технологии секвенирования ДНК» . Геном Рез . 15 (12): 1767–1776. дои : 10.1101/гр.3770505 . ПМИД 16339375 .
- ^ Перейти обратно: а б Хатчисон, Калифорния III. (2007). «Секвенирование ДНК: от стола до постели и за его пределами» . Нуклеиновые кислоты Рез . 35 (18): 6227–6237. дои : 10.1093/нар/gkm688 . ПМК 2094077 . ПМИД 17855400 .
- ^ Перейти обратно: а б Ф.С. Коллинз; М. Морган; А. Патринос (2003). «Проект «Геном человека: уроки крупномасштабной биологии» . Наука . 300 (5617): 286–290. Бибкод : 2003Sci...300..286C . дои : 10.1126/science.1084564 . ПМИД 12690187 . S2CID 22423746 .
- ^ Перейти обратно: а б с д Перепел, Майкл А.; Смит, Мириам; Купленд, Пол; Отто, Томас Д.; Харрис, Саймон Р.; Коннор, Томас Р.; Бертони, Анна; Свердлов, Гарольд П.; Гу, Юн (24 июля 2012 г.). «Рассказ о трех платформах секвенирования следующего поколения: сравнение секвенаторов Ion Torrent, Pacific Biosciences и Illumina MiSeq» . БМК Геномика . 13 (1): 341. дои : 10.1186/1471-2164-13-341 . ISSN 1471-2164 . ПМЦ 3431227 . ПМИД 22827831 .
- ^ Майкл А. Куэйл; Иванка Козарева; Фрэнсис Смит; Эйлвин Скалли; Филип Дж. Стивенс; Ричард Дурбин; Гарольд Свердлов; Дэниел Дж. Тернер (2008). «Усовершенствования крупного геномного центра в системе секвенирования Illumina» . Нат-методы . 5 (12): 1005–1010. дои : 10.1038/nmeth.1270 . ПМК 2610436 . ПМИД 19034268 .
- ^ Ли, Хэн; Жуан, Цзюэ; Дурбин, Ричард (1 ноября 2008 г.). «Картирование коротких прочтений секвенирования ДНК и вызов вариантов с использованием показателей качества картирования» . Геномные исследования . 18 (11): 1851–1858. дои : 10.1101/гр.078212.108 . ISSN 1088-9051 . ПМК 2577856 . ПМИД 18714091 .
- ^ Гилберт В., Максам А. (1973). «Нуклеотидная последовательность оператора lac» . Proc Natl Acad Sci США . 70 (12): 13581–3584. Бибкод : 1973PNAS...70.3581G . дои : 10.1073/pnas.70.12.3581 . ПМК 427284 . ПМИД 4587255 .
- ^ Сэнгер Ф., Коулсон А.Р. (май 1975 г.). «Быстрый метод определения последовательностей ДНК путем синтеза с помощью ДНК-полимеразы». Дж. Мол. Биол . 94 (3): 441–8. дои : 10.1016/0022-2836(75)90213-2 . ПМИД 1100841 .
- ^ Перейти обратно: а б с д и ж г час я дж к Линь Лю; Иньху Ли; Силян Ли; Ни Ху; Йимин Хэ; Рэй Понг; Дэнни Лин; Лихуа Лу; Мэгги Лоу (2012). «Сравнение систем секвенирования следующего поколения» . Журнал биомедицины и биотехнологии . 2012 : 251364. дои : 10.1155/2012/251364 . ПМЦ 3398667 . ПМИД 22829749 .
- ^ «Продукты: 454 Life Sciences, компания Roche» . Архивировано из оригинала 13 сентября 2012 г. Проверено 5 сентября 2012 г.
- ^ «Продукты — система GS FLX+: 454 Life Sciences, компания Roche» . Архивировано из оригинала 5 сентября 2012 г. Проверено 5 сентября 2012 г.
- ^ «Продукты — GS Junior System: 454 Life Sciences, компания Roche» . Архивировано из оригинала 13 сентября 2012 г. Проверено 5 сентября 2012 г.
- ^ Мардис, Элейн Р. (1 сентября 2008 г.). «Методы секвенирования ДНК нового поколения». Ежегодный обзор геномики и генетики человека . 9 (1): 387–402. дои : 10.1146/annurev.genom.9.081307.164359 . ПМИД 18576944 . S2CID 2484571 .
- ^ «Рош закрывает бизнес по секвенированию 454» . ГеномВеб . 15 октября 2013 г.
- ^ Дэвис, Кевин (23 апреля 2013 г.). «Roche закрывает исследовательские программы NGS третьего поколения» . Пабы — Мир БиоИТ .
- ^ Перейти обратно: а б с д «Продукты — Программное обеспечение для анализа: 454 Life Science, компания Roche» . Архивировано из оригинала 19 февраля 2009 г. Проверено 23 октября 2013 г.
- ^ Руководство по системному программному обеспечению геномного секвенатора FLX, версия 2.3.
- ^ Марсиал, Джин Г. (6 ноября 2006 г.). «Прогресс Solexa заложен в генах» . Блумберг . Проверено 10 января 2022 г.
- ^ «Системы секвенирования и микрочипов» . www.illumina.com .
- ^ «Прикладные биосистемы – США» . www.thermofisher.com .
- ^ «Секвенирование по Сэнгеру и анализ фрагментов, проведенный CE - США» . www.thermofisher.com .
- ^ «Ионный Торрент» .
- ^ «Генетический анализатор Applied Biosystems SeqStudio — США» .
- ^ «Прикладные биосистемы – США» . www.thermofisher.com .
- ^ «Секвенирование – США» . www.thermofisher.com .
- ^ Браун, Росс Д.; Хо, П. Джой (1 февраля 2008 г.). Множественная миелома: методы и протоколы . Springer Science & Business Media. ISBN 978-1-59259-916-5 .
- ^ «Руководство GenomeLab GeXP» (PDF) . Колледж Медгара Эверса , Городской университет Нью-Йорка . Август 2014 г. Архивировано (PDF) из оригинала 05 декабря 2021 г.
- ^ Рай, Алекс Дж.; Камат, Рашми М.; Джеральд, Уильям; Флейшер, Мартин (29 октября 2008 г.). «Аналитическая проверка анализатора GeXP и разработка рабочего процесса для обнаружения раковых биомаркеров с использованием мультиплексного профилирования экспрессии генов». Аналитическая и биоаналитическая химия . 393 (5): 1505–1511. дои : 10.1007/s00216-008-2436-7 . ПМИД 18958454 . S2CID 46721686 .
- ^ Beckman Coulter, Inc - Система генетического анализа GenomeLab GeXP [ мертвая ссылка ]
- ^ «Системы сиквелов PacBio» .
- ^ Корен, С; Шац, MC; Валенц, BP; Мартин, Дж; Ховард, Джей Ти; Ганапати, Дж; Ван, З; Раско, Д.А.; МакКомби, WR; Джарвис, Эд; Филиппи, AM (1 июля 2012 г.). «Гибридная коррекция ошибок и сборка de novo считываний секвенирования одиночных молекул» . Природная биотехнология . 30 (7): 693–700. дои : 10.1038/nbt.2280 . ПМК 3707490 . ПМИД 22750884 .
- ^ Чин, Чэнь-Шань; Александр, Дэвид Х.; Маркс, Патрик; Кламмер, Аарон А.; Дрейк, Джеймс; Хайнер, Шерил; Клам, Алисия; Коупленд, Алекс; Хаддлстон, Джон; Эйхлер, Эван Э.; Тернер, Стивен В.; Корлах, Йонас (2013). «Негибридные готовые сборки микробного генома на основе давно считанных данных секвенирования SMRT». Природные методы . 10 (6): 563–569. дои : 10.1038/nmeth.2474 . ПМИД 23644548 . S2CID 205421576 .
- ^ Крол, Аарон (1 октября 2015 г.). «Достойное продолжение: новая система секвенирования PacBio» .
- ^ «PacBio представляет высокопроизводительную и недорогую систему секвенирования одиночных молекул» . Октябрь 2015.
- ^ Гаскилл, Мелисса (29 августа 2016 г.). «Первое секвенирование ДНК в космосе изменило правила игры» . НАСА . Проверено 26 октября 2016 г.
- ^ Тайлер, Андреа Д.; Матасехе, Лаура; Урфано, Шантель Дж.; Шмидт, Лиза; Антонация, Ким С.; Малви, Майкл Р.; Корбетт, Синди Р. (19 июля 2018 г.). «Оценка устройства секвенирования MinION компании Oxford Nanopore для приложений секвенирования всего генома микробов» . Научные отчеты . 8 (1): 10931. Бибкод : 2018NatSR...810931T . дои : 10.1038/s41598-018-29334-5 . ISSN 2045-2322 . ПМК 6053456 . ПМИД 30026559 .
- ^ Джайн, Митен; Корень, Сергей; Мига, Карен Х .; Быстрее, Джош; Рэнд, Артур К.; Сасани, Томас А.; Тайсон, Джон Р.; Беггс, Эндрю Д.; Дилтей, Александр Т.; Фиддес, Ян Т.; Малла, Сунир (29 января 2018 г.). «Нанопоровое секвенирование и сборка генома человека сверхдлинными считываниями» . Природная биотехнология . 36 (4): 338–345. дои : 10.1038/nbt.4060 . ISSN 1546-1696 . ПМЦ 5889714 . ПМИД 29431738 .
- ^ «Секвенатор ДНК MinION USB-размера проходит испытания в реальных условиях» . Engadget . 19 сентября 2014 года . Проверено 5 декабря 2021 г.
- ^ Лу, Хэнъюнь; Джордано, Франческа; Нин, Цзэминь (01 октября 2016 г.). «Секвенирование и сборка генома Oxford Nanopore MinION» . Геномика, протеомика и биоинформатика . SI: Большие данные и точная медицина. 14 (5): 265–279. дои : 10.1016/j.gpb.2016.05.004 . ISSN 1672-0229 . ПМК 5093776 . ПМИД 27646134 .
- ^ «Новый метод помогает карманному секвенатору ДНК достичь почти идеальной точности» . ScienceDaily . Проверено 5 декабря 2021 г.
- ^ Регаладо, Антонио (17 сентября 2014 г.). «Радикально новый секвенатор ДНК наконец попадает в руки исследователей» . Обзор технологий . Проверено 3 октября 2014 г.
- ^ ЛеМье, Джулианна; Кандидат наук (03.12.2020). «Геномный анализ переходит на новый уровень» . GEN – Новости генной инженерии и биотехнологии . Проверено 20 декабря 2021 г.
- ^ Ким, Хак-Мин; Чон, Сунгвон; Чунг, Оксунг; Джун, Дже Хун; Ким, Хуэй-Су; Блазите, Аста; Ли, Хван Ёль; Ю, Ёнсок; Чо, Юн Сун; Болсер, Дэн М; Бхак, Чон (01 марта 2021 г.). «Сравнительный анализ 7 платформ секвенирования короткого чтения с использованием корейского эталонного генома: эталон секвенирования MGI и Illumina для полногеномного секвенирования» . ГигаСайенс . 10 (3): giab014. doi : 10.1093/gigascience/giab014 . ISSN 2047-217X . ПМЦ 7953489 . ПМИД 33710328 .
- ^ C Анукам, Кингсли; Э. Бэсси, Бэсси (2020). «Предрасположенность генетических вариантов к тяжелому заболеванию COVID-19 выявлена у здорового нигерийского мужчины с использованием платформы Nebula Genomics Gene.iobio» (PDF) . Журнал медицинской лабораторной науки . 30 (4): 62–75. дои : 10.5281/zenodo.4399050 . ISSN 1116-1043 . S2CID 244988198 .
- ^ Шэнь, Ханьцзе; Ли, Чжаньцин; Ши, Шимин; Ван, Сяоцзюэ; Лян, Синьмин; Линь, Вэньлан; Алексеев, Ло, Иньлин; Сюй, Чунцзюнь; Дрманак, Снежана; Дай, Сицзе; Хан; Чен, Ао; Му, Фэн; Чжао, Ся, Юань; Дрманак, Радое (23 декабря 2019 г.). Рабочий процесс массово-параллельного секвенирования». bioRxiv 10.1101/2019.12.20.885517 .
- ^ Ляо, Минфэн; Вэнь, Яньлин; Чжао, Цзюаньцзюань; Ван, Синь; Лю, Лэй (12 мая 2020 г.). «Одноклеточный ландшафт бронхиальных иммунных клеток у пациентов с COVID-19» Nature Medicine . 26 (6): 842–844 : 10.1038 s41591-020-0901-9 . ISSN 1546-170X . doi / . . 218593518 .
- ^ Шендюр, Дж.; Джи, Х. (2008). «Секвенирование ДНК нового поколения». Нат. Биотехнология . 26 (10): 1135–1145. дои : 10.1038/nbt1486 . ПМИД 18846087 . S2CID 6384349 .
- ^ Кароу, Джулия (2 марта 2010 г.). «Ion Torrent Systems представляет на выставке AGBT электронный секвенатор стоимостью 50 000 долларов» . ГеномВеб .
- ^ «Ион ПГМ — Ион Торрент» . Архивировано из оригинала 20 сентября 2012 г. Проверено 13 февраля 2013 г.
- ^ «Домой – PacBio – Уверенная последовательность действий» . ПакБио .
- ^ Сунь, Цзинцзин; Ли, Цзигуан, Мо; Ло, Сяоцин; Сяо, Лян; Сун, Цзевэй; 07-03). «Эффективное и стабильное секвенирование метабаркодирования с помощью секвенатора DNBSEQ-G400, проверенное с помощью анализа большого грибкового сообщества » .