Пятно Киньюна
Метод Киньюна или окрашивание Киньюна (холодный метод), разработанный Джозефом Дж. Киньюном , представляет собой процедуру, используемую для окрашивания кислотоустойчивых видов бактерий рода Mycobacterium . [1] Это разновидность метода, разработанного Робертом Кохом в 1882 году. Некоторые виды бактерий содержат в клеточных стенках восковой липид, называемый миколевой кислотой, который позволяет им окрашиваться кислотостойкими красителями лучше, чем красителями по Граму. Уникальная способность микобактерий противостоять обесцвечиванию под действием кислотно-спиртовой кислоты является причиной того, что их называют кислотоустойчивыми. [2] Он предполагает нанесение основного красителя ( основного фуксина ), обесцвечивателя (кислотно-спиртового) и контрастного красителя ( метиленового синего ). [3] В отличие от окраски Циля-Нильсена (окраска ZN), метод окрашивания Киньюна не требует нагревания. [4] [5] При окрашивании по Цилю-Нильсену тепло действует как физическая протрава а фенол ( карбол карболфуксина , ) действует как химическая протрава. Поскольку окрашивание Киньюна представляет собой холодный метод (без применения тепла), концентрация используемого карболфушина увеличивается. [6]
| Применение | Реагент | Цвет ячейки | |
|---|---|---|---|
| кислотоустойчивый | Некислотный быстрый | ||
| Первичный краситель | Карбол фуксин | Красный | Красный |
| Обесцвечиватель | Кислый спирт | Красный | Бесцветный |
| Противопятно | Метиленовый синий | Красный | Синий |
Процедура окрашивания
[ редактировать ]
Сделайте кислотостойкое пятно [7]
[ редактировать ]Материалы
[ редактировать ]- Слайд с мазком организма
- Карбол Фуксин
- Кислота-Спирт
- Метиленовый синий
- книжная бумага
- Микроскоп
Инструкции
[ редактировать ]- Сделать мазок на предметном стекле с микроорганизмами
- Очистите предметное стекло, нанесите восковую этикетку, распределите организм, высушите на воздухе в течение 10 минут, зафиксируйте нагреванием.
- Опустите предметное стекло в Карбол Фуксин на 20 минут.
- Промыть слайд
- Опустите предметное стекло в кислотно-спиртовой раствор на 3–5 секунд.
- Промыть слайд
- Окуните предметное стекло в метиленовый синий на 30 секунд.
- Промыть слайд
- Промокните предметное стекло насухо бибулизированной бумагой.
- Наблюдайте под микроскопом.
Модификация
[ редактировать ]Метод Киньюна можно модифицировать как слабокислотное окрашивание, при котором используется 0,5–1,0% серная кислота вместо соляной кислоты . Слабокислотное окрашивание, помимо окрашивания микобактерий , также окрашивает организмы, которые не способны сохранять карболфуксин после обесцвечивания HCl, такие как виды Nocardia и Cryptosporidium .
См. также
[ редактировать ]Ссылки
[ редактировать ]- ^ Гео Ф. Б. и др., Медицинская микробиология Джавеца, Мельника и Адельберга, 25-е издание, Lange Medical, 2004, стр. 182
- ^ .dalynn (октябрь 2014 г.). «КИНЬЮН КАРБОЛ ФУЧСИН ПЯТНО» (PDF) . Архивировано (PDF) из оригинала 14 января 2022 г. Проверено 22 мая 2019 г.
- ^ Хасси, А.М., Заяиц, А., «Протоколы кислотоустойчивого окрашивания». Архивировано 1 октября 2011 г. в Wayback Machine , Американское общество микробиологии , 8 сентября 2008 г. Проверено 1 ноября 2014 г.
- ^ Мюррей П.Р., Барон Э., Пфаллер М., Теновер Ф., Йолкен, ред. Руководство по клинической микробиологии. 7-е изд. Вашингтон, округ Колумбия: ASM, 1999.
- ^ Барон Э.Дж., Finegold SM. Диагностическая микробиология Бейли и Скотта. 8-е изд. Сент-Луис: Мосби, 1990.
- ^ Учебник по микробиологии Анантанараяна и Паникера, 9-е издание, Universities Press (Индия), 2013, стр. 353
- ^ Бриггс, Крис (июль 2018 г.). «Часть 3: Дифференциальное и структурное окрашивание». Руководство по микробиологической лаборатории: обнаружение ваших крошечных соседей (PDF) (лабораторное руководство). п. 58. Архивировано из оригинала (PDF) 14 января 2022 г.
{{cite book}}:|work=игнорируется ( помогите )
 | Эта микробиологии, статья, посвященная незавершена . Вы можете помочь Википедии, расширив ее . |