✖


Jump to content

Самонаводящаяся эндонуклеаза

(Перенаправлено с эндонуклеаз Хоминга )
Кристаллическая структура I-CreI ДНК связана с последовательностью распознавания . Фермент ; связывается как гомодимер одна субъединица изображена желтым цветом, другая — розовым. Фермент показан на поверхности; Молекула ДНК показана как совокупность сфер, каждая из которых окрашена в соответствии со своим химическим элементом .

Самонаводящиеся эндонуклеазы представляют собой совокупность эндонуклеаз, кодируемых либо как автономные гены внутри интронов , либо как слитые с белками-хозяевами, либо как самосплайсинговые интеины . Они катализируют гидролиз геномной ДНК внутри клеток, которые их синтезируют, но делают это в очень немногих или даже единичных местах. Восстановление гидролизованной ДНК клеткой-хозяином часто приводит к тому, что ген, кодирующий хоминг-эндонуклеазу, копируется в сайт расщепления, отсюда и термин «хоминг» для описания движения этих генов. Таким образом, хоминг-эндонуклеазы могут передавать свои гены горизонтально внутри популяции хозяина, увеличивая частоту своих аллелей со скоростью, превышающей менделевскую скорость.

Происхождение и механизм

[ редактировать ]

Хотя происхождение и функции хоминг-эндонуклеаз все еще исследуются, наиболее устоявшаяся гипотеза рассматривает их как эгоистичные генетические элементы . [ 1 ] похожи на транспозоны , поскольку они способствуют сохранению генетических элементов, которые их кодируют, независимо от предоставления функционального атрибута организму-хозяину.

Последовательности распознавания хоминг-эндонуклеазы достаточно длинные, чтобы происходить случайным образом только с очень низкой вероятностью (примерно один раз каждые 7 × 10 9  б.п. ), [ 2 ] и обычно встречаются в одном или очень небольшом количестве случаев на геном . Обычно из-за механизма самонаведения ген, кодирующий эндонуклеазу (HEG, «ген самонаводящейся эндонуклеазы»), располагается внутри последовательности узнавания, которую разрезает фермент, тем самым прерывая последовательность узнавания самонаводящейся эндонуклеазы и ограничивая разрезание ДНК только теми участками, которые (пока) не несете HEG.

До передачи один аллель несет ген (HEG + ), а другой нет (HEG − ), и поэтому подвержен расщеплению ферментом. Как только фермент синтезируется, он разрывает хромосому в HEG. − аллель, инициирующий ответ системы репарации клеточной ДНК . Повреждение восстанавливается с помощью рекомбинации , принимая образец противоположного, неповрежденного аллеля ДНК, HEG. + , содержащий ген эндонуклеазы. Таким образом, ген копируется в аллель, которая изначально его не имела, и размножается в последующих поколениях. [ 3 ] Этот процесс называется «домой». [ 3 ]

Номенклатура

[ редактировать ]

Хоминг-эндонуклеазы всегда обозначаются префиксом, обозначающим их геномное происхождение, за которым следует дефис: «I-» для хоминг-эндонуклеаз, кодируемых в интроне, «PI-» (для «белковой вставки») для эндонуклеаз, кодируемых в интеине. Некоторые авторы предложили использовать префикс «F-» («автономный») для вирусных ферментов и других природных ферментов, не кодируемых ни интронами, ни интеинами. [ 4 ] и «H-» («гибрид») для ферментов, синтезированных в лаборатории. [ 5 ] Далее, трехбуквенное название получается из биноминального названия организма, включающего одну заглавную букву из названия рода и две строчные буквы из видового названия. (Некоторое смешивание обычно происходит для гибридных ферментов.) Наконец, римская цифра обозначает разные ферменты, обнаруженные в одном и том же организме:

Сравнение с ферментами рестрикции

[ редактировать ]

Хоминг-эндонуклеазы отличаются от ферментов рестрикции типа II в нескольких отношениях: [ 4 ]

  • В то время как ферменты рестрикции типа II связываются с короткими, обычно симметричными последовательностями узнавания длиной от 4 до 8 п.о. , самонаводящиеся эндонуклеазы связывают очень длинные и во многих случаях асимметричные последовательности узнавания, охватывающие от 12 до 40 п.н.
  • Хоминг-эндонуклеазы обычно более толерантны к заменам в последовательности узнавания. Незначительные изменения в последовательности узнавания обычно снижают активность хоминг-эндонуклеаз, но часто не отменяют ее полностью, как это часто происходит с ферментами рестрикции. [ 10 ] [ 11 ]
  • Хоминг-эндонуклеазы имеют общие структурные мотивы , которые позволяют предположить, что существуют четыре семейства, тогда как не удалось определить просто узнаваемые и различимые семейства рестриктаз типа II.
  • Хоминг-эндонуклеазы действуют как мономеры или гомодимеры и часто требуют ассоциированных белков для регулирования своей активности. [ 12 ] или образуют рибонуклеопротеиновые комплексы , где РНК является неотъемлемым компонентом каталитического аппарата. [ 13 ] Ферменты рестрикции типа II также могут функционировать отдельно, в виде мономеров или гомодимеров. [ 14 ] или с дополнительными белковыми субъединицами , [ 15 ] но дополнительные субъединицы отличаются от таковых у хоминговых эндонуклеаз. Таким образом, для их действия могут потребоваться субъединицы ограничения, модификации и специфичности. [ 15 ]
  • Наконец, самонаводящиеся эндонуклеазы имеют более широкое филогенетическое распространение, встречаясь во всех трех биологических доменах — археях , бактериях и эукариях . Ферменты рестрикции II типа встречаются только у архей, бактерий и некоторых вирусов. [ 16 ] [ 17 ] [ 18 ] Хоминг-эндонуклеазы также экспрессируются во всех трех отделах эукариотической клетки: ядрах , митохондриях и хлоропластах . Открытые рамки считывания, кодирующие хоминговые эндонуклеазы, были обнаружены в интронах , интеинах и в отдельной форме между генами, тогда как гены, кодирующие гены рестриктаз типа II, были обнаружены только в отдельной форме, почти всегда в тесной ассоциации с генами, кодирующими родственные ферменты, модифицирующие ДНК. [ 19 ] Таким образом, хотя ферменты рестрикции типа II и хоминг-эндонуклеазы разделяют функцию расщепления двухцепочечной ДНК, они, по-видимому, эволюционировали независимо.

Структурные семьи

[ редактировать ]
А
Б


С
Димер хоминг-эндонуклеазы I-CreI . [ 9 ] Альфа-спирали показаны зеленым, а бета-листы синим. Ответ : Две маленькие розовые сферы в центре структуры представляют собой два катиона металлов, необходимых для катализа. Структура показывает седло, которое создают бета-нити для размещения ДНК. Эти нити содержат мотивы LAGLIDADG, которые взаимодействуют с малой бороздкой ДНК . B и C : атомы ДНК показаны в виде сфер, окрашенных в соответствии с химическим элементом .
Эндонуклеаза LAGLIDADG
Идентификаторы
Символ ЛАГЛИДАДГ_1
Пфам PF00961
Пфам Клан CL0324
ИнтерПро ИПР001982
КАТ 1af5
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ 2 1af5 / SCOPe / СУПФАМ
Доступные белковые структуры:
Pfam  structures / ECOD  
PDBRCSB PDB; PDBe; PDBj
PDBsumstructure summary
См. запись о клане для связанных семей Пфам.
Эндонуклеаза GIY-YIG, каталитическая
Идентификаторы
Символ GIY-YIG
Пфам PF01541
ИнтерПро IPR000305
PROSITE PS50164
КАТ 1мк0
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ 2 1мк0 / СКОПе / СУПФАМ
Доступные белковые структуры:
Pfam  structures / ECOD  
PDBRCSB PDB; PDBe; PDBj
PDBsumstructure summary

В настоящее время известно шесть структурных семейств. Их консервативные структурные мотивы : [ 4 ]

  • ЛАГЛИДАДГ: Каждый полипептид имеет 1 или 2 мотива ЛАГЛИДАДГ. Последовательность LAGLIDADG представляет собой консервативную последовательность аминокислот , где каждая буква представляет собой код, идентифицирующий определенный остаток. Эта последовательность непосредственно участвует в процессе разрезания ДНК. Ферменты, имеющие только один мотив, действуют как гомодимеры, создавая седло, которое взаимодействует с основной бороздкой каждого полуучастка ДНК. Мотивы LAGLIDADG вносят аминокислотные остатки как в белок-белковый интерфейс между белковыми доменами или субъединицами, так и в активные центры фермента. Ферменты, обладающие двумя мотивами в одной белковой цепи, действуют как мономеры, аналогичным образом создавая седло. Первые структуры самонаводящихся эндонуклеаз (PI-SceI и I-CreI, о которых сообщалось в 1997 г.), которые были определены, обе принадлежали к структурному семейству LAGLIDADG. [ 20 ] [ 21 ] В следующем году также было сообщено о первой структуре самонаводящейся эндонуклеазы (I-CreI), связанной с целевым участком ДНК. [ 9 ]
  • GIY-YIG: У них есть только один мотив GIY-YIG в N-концевой области, который взаимодействует с ДНК в сайте разрезания. Прототипическим ферментом этого семейства является I-TevI, который действует как мономер. Сообщалось об отдельных структурных исследованиях ДНК-связывающего и каталитического доменов I-TevI, первый из которых связан с ДНК-мишенью, а второй - в отсутствие ДНК. [ 22 ] [ 23 ]
  • His-Cys-бокс ( Pfam PF05551 ): Эти ферменты обладают областью из 30 аминокислот, которая включает 5 консервативных остатков: два гистидина и три цистеина . Они координируют катионы металлов, необходимые для катализа. I-PpoI является наиболее изученным ферментом этого семейства и действует как гомодимер. О его структуре сообщалось в 1998 году. [ 24 ] Возможно, он связан с семейством HNH, поскольку они имеют общие черты. [ 25 ]
  • HNH: ( Pfam CL0263 ): Они имеют консенсусную последовательность , состоящую примерно из 30 аминокислот. Он включает две пары консервативных гистидинов и один аспарагин , которые создают домен цинковых пальцев . I-HmuI ( P34081 ) является наиболее изученным ферментом этого семейства и действует как мономер. О его структуре сообщалось в 2004 году ( PDB : 1U3E ). [ 26 ]
  • PD-(D/E)xK ( Pfam CL0236 ): Эти ферменты содержат канонический каталитический домен нуклеазы, обычно встречающийся в эндонуклеазах рестрикции типа II. Наиболее изученный фермент этого семейства, I-Ssp6803I ( Q57253 ), действует как тетрамер. Его структура была опубликована в 2007 году ( PDB : 2OST ). [ 27 ] Общая складка консервативна во многих семействах эндонуклеаз, все из которых принадлежат к суперсемейству PD-(D/E)xK. [ 28 ]
  • Vsr-like/EDxHD (DUF559, InterPro : IPR007569 ): эти ферменты были обнаружены в метагеномной базе данных Global Ocean Sampling и впервые описаны в 2009 году. Термин «Vsr-подобный» относится к наличию C-концевого нуклеазного домена, который отображает узнаваемая гомология с бактериальными эндонуклеазами очень короткой патч-репарации (Vsr). [ 29 ] Структура была расшифрована в 2011 году, что подтвердило гомологию Vsr. [ 30 ] Считается частью суперсемейства PD-(D/E)xk. [ 28 ]

Доменная архитектура

[ редактировать ]
Подсказка, связанная с Hom_end
Кристаллическая структура минипрекурсора pi-scei
Идентификаторы
Символ Home_end_hint
Пфам PF05203
Пфам Клан CL0363
ИнтерПро ИПР007868
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ 2 1гпп / СКОПе / СУПФАМ
Доступные белковые структуры:
Pfam  structures / ECOD  
PDBRCSB PDB; PDBe; PDBj
PDBsumstructure summary
Интеиновый мотив более крупного домена LAGLIDADG Hom_end.

Дрожжевая самонаводящаяся эндонуклеаза PI-Sce представляет собой эндонуклеазу типа LAGLIDADG, кодируемую как интеин , который отделяется от другого белка ( P17255 ). Структура с высоким разрешением показывает два домена : эндонуклеолитический центр, напоминающий С-концевой домен белков Hedgehog , и домен Hint сплайсинга белка (Hedgehog/Intein), содержащий активный сайт . [ 31 ]

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Эджелл Д.Р. (февраль 2009 г.). «Эгоистичная ДНК: самонаводящиеся эндонуклеазы находят дом» . Курр Биол . 19 (3): Р115–Р117. дои : 10.1016/j.cub.2008.12.019 . ПМИД   19211047 . S2CID   2380439 .
  2. ^ Джасин М. (июнь 1996 г.). «Генетические манипуляции геномесяцами с помощью редкорежущих эндонуклеаз» . Тенденции Жене . 12 (6): 224–8. дои : 10.1016/0168-9525(96)10019-6 . ПМИД   8928227 .
  3. ^ Jump up to: а б Берт А., Куфопану В. (декабрь 2004 г.). «Гены самонаводящейся эндонуклеазы: взлет, падение и снова подъем эгоистичного элемента». Curr Opin Genet Dev . 14 (6): 609–15. дои : 10.1016/j.где.2004.09.010 . ПМИД   15531154 .
  4. ^ Jump up to: а б с Белфорт М., Робертс Р.Дж. (сентябрь 1995 г.). «Хоминг-эндонуклеазы: наводим порядок в доме» . Нуклеиновые кислоты Рез . 25 (17): 3379–88. дои : 10.1093/нар/25.17.3379 . ПМК   146926 . ПМИД   9254693 .
  5. ^ Jump up to: а б Шевалье Б.С., Кортемме Т., Чедси М.С., Бейкер Д., Моннат Р.Дж., Стоддард Б.Л. (октябрь 2002 г.). «Дизайн, активность и структура высокоспецифичной искусственной эндонуклеазы» . Мол. Клетка . 10 (4): 895–905. дои : 10.1016/S1097-2765(02)00690-1 . ПМИД   12419232 .
  6. ^ Хирата Р., Осумк Ю., Накано А., Кавасаки Х., Сузуки К., Анраку Ю. (апрель 1990 г.). «Молекулярная структура гена VMA1, кодирующего каталитическую субъединицу H (+)-транслоцирующей аденозинтрифосфатазы из вакуолярных мембран Saccharomyces cerevisiae» . J Биол Хим . 265 (12): 6726–33. дои : 10.1016/S0021-9258(19)39210-5 . ПМИД   2139027 .
  7. ^ Кейн П.М., Ямаширо К.Т., Вольчик Д.Ф., Нефф Н., Гебл М., Стивенс Т.Х. (ноябрь 1990 г.). «Сплайсинг белка превращает продукт гена дрожжей TFP1 в субъединицу вакуолярной H (+)-аденозинтрифосфатазы массой 69 кДа». Наука . 250 (4981): 651–7. Бибкод : 1990Sci...250..651K . дои : 10.1126/science.2146742 . ПМИД   2146742 .
  8. ^ Перлер Ф.Б., Комб Д.Г., Джек В.Е., Моран Л.С., Цян Б., Кучера Р.Б., Беннер Дж., Слатко Б.Е., Нванкво Д.О., Хемпстед С.К., Карлоу К.К., Яннаш Х. (июнь 1992 г.). «Промежуточные последовательности в гене ДНК-полимеразы архей» . ПНАС . 89 (12): 5577–81. Бибкод : 1992PNAS...89.5577P . дои : 10.1073/pnas.89.12.5577 . ПМК   49335 . ПМИД   1608969 .
  9. ^ Jump up to: а б с Юрица М.С., Моннат Р.Дж., Стоддард Б.Л. (октябрь 1998 г.). «Распознавание и расщепление ДНК самонаводящейся эндонуклеазой LAGLIDADG I-CreI» (PDF) . Мол. Клетка . 2 (4): 469–76. дои : 10.1016/S1097-2765(00)80146-X . ПМИД   9809068 .
  10. ^ Гимбл Ф.С., Ван Дж (октябрь 1996 г.). «Распознавание субстрата и индуцированное искажение ДНК эндонуклеазой PI-SceI, ферментом, вырабатываемым в результате сплайсинга белков». Дж Мол Биол . 263 (2): 163–80. дои : 10.1006/jmbi.1996.0567 . ПМИД   8913299 .
  11. ^ Аргаст ГМ, Стивенс К.М., Эмонд М.Дж., Моннат Р.Дж. (июль 1998 г.). «Вырождение последовательностей сайтов самонаведения I-PpoI и I-CreI, определяемое случайным мутагенезом и последовательным обогащением in vitro». Дж Мол Биол . 280 (3): 345–53. дои : 10.1006/jmbi.1998.1886 . ПМИД   9665841 .
  12. ^ Сибата Т., Накагава К., Моришима Н. (1995). «Мультисайт-специфические эндонуклеазы и инициирование гомологичной генетической рекомбинации у дрожжей». Адв Биофиз . 31 : 77–91. дои : 10.1016/0065-227X(95)99384-2 . ПМИД   7625280 .
  13. ^ Циммерли С., Го Х., Эскес Р., Ян Дж., Перлман П.С., Ламбовиц А.М. (ноябрь 1995 г.). «Интронная РНК группы II является каталитическим компонентом ДНК-эндонуклеазы, участвующей в подвижности интрона» . Клетка . 83 (4): 529–38. дои : 10.1016/0092-8674(95)90092-6 . ПМИД   7585955 . S2CID   10456475 .
  14. ^ Линн, Стюарт М; Ллойд, Р. Стивен; Робертс, Ричард Дж (декабрь 1993 г.). Нуклеазы . Пресса Колд-Спринг-Харбор . стр. 35–88. ISBN  978-0-87969-426-5 .
  15. ^ Jump up to: а б Линн, Стюарт М; Ллойд, Р. Стивен; Робертс, Ричард Дж (декабрь 1993 г.). Нуклеазы . Пресса Колд-Спринг-Харбор . стр. 89–109. ISBN  978-0-87969-426-5 .
  16. ^ Робертс Р.Дж., Маселис Д. (январь 1997 г.). «REBASE-рестрикционные ферменты и метилазы» . Нуклеиновые кислоты Рез . 25 (1): 248–62. дои : 10.1093/нар/25.1.248 . ПМК   146408 . ПМИД   9016548 .
  17. ^ Ламбовиц А.М., Белфорт М. (1993). «Интроны как мобильные генетические элементы». Анну Рев Биохим . 62 : 587–622. дои : 10.1146/annurev.bi.62.070193.003103 . ПМИД   8352597 .
  18. ^ Линн, Стюарт М; Ллойд, Р. Стивен; Робертс, Ричард Дж. (декабрь 1993 г.). Нуклеазы . Пресса Колд-Спринг-Харбор . стр. 111–143. ISBN  978-0-87969-426-5 .
  19. ^ Уилсон Г.Г. (декабрь 1988 г.). «Клонированные системы ограничения-модификации - обзор». Джин . 74 (1): 281–9. дои : 10.1016/0378-1119(88)90304-6 . ПМИД   3074014 .
  20. ^ Хит, П.; и др. (июнь 1997 г.). «Структура I-Crel, самонаводящейся эндонуклеазы, кодируемой интроном группы I». Структурная биология природы . 4 (6): 468–476. дои : 10.1038/nsb0697-468 . ПМИД   9187655 . S2CID   12261983 .
  21. ^ Дуань, X. (май 1997 г.). «Кристаллическая структура PI-SceI, самонаводящейся эндонуклеазы с активностью сплайсинга белков» . Клетка . 89 (4): 555–564. дои : 10.1016/S0092-8674(00)80237-8 . ПМИД   9160747 . S2CID   14156646 .
  22. ^ Ван Рой, П.; Фокс, КМ; и др. (июль 2001 г.). «Переплетенная структура ДНК-связывающего домена интронной эндонуклеазы I-TevI ​​с его субстратом» . ЭМБО Дж . 20 (14): 3631–3637. дои : 10.1093/emboj/20.14.3631 . ПМК   125541 . ПМИД   11447104 .
  23. ^ Ван Рой, П.; Ковальски, Джозеф К.; и др. (июль 2002 г.). «Каталитическая доменная структура и гипотеза функции интронной эндонуклеазы GIY-YIG I-TevI». Структурная биология природы . 9 (11): 806–811. дои : 10.1038/nsb853 . ПМИД   12379841 . S2CID   24856337 .
  24. ^ Флик, К.; и др. (июль 1998 г.). «Связывание и расщепление ДНК с помощью самонаводящейся эндонуклеазы I-PpoI, кодируемой ядерным интроном». Природа . 394 (6688): 96–101. Бибкод : 1998Natur.394...96F . дои : 10.1038/27952 . ПМИД   9665136 . S2CID   4427957 .
  25. ^ Хафез, М; Хауснер, Г. (август 2012 г.). «Наводящиеся эндонуклеазы: ножницы ДНК на миссии». Геном . 55 (8): 553–69. дои : 10.1139/g2012-049 . ПМИД   22891613 . S2CID   29183470 .
  26. ^ Шен, BW; и др. (сентябрь 2004 г.). «Связывание и расщепление ДНК самонаводящейся эндонуклеазой HNH I-HmuI». Дж. Мол. Биол . 342 (1): 43–56. дои : 10.1016/j.jmb.2004.07.032 . ПМИД   15313606 . S2CID   15990707 .
  27. ^ Чжао, Л.; и др. (май 2007 г.). «Складка рестрикции поворачивается на темную сторону: бактериальная самонаводящаяся эндонуклеаза с мотивом PD-(D/E)-XK» . Журнал ЭМБО . 26 (9): 2432–2442. дои : 10.1038/sj.emboj.7601672 . ПМК   1864971 . ПМИД   17410205 .
  28. ^ Jump up to: а б Стечкевич, К; Мушевская, А; Книжевский, Л; Рыхлевский, Л; Гинальски, К. (август 2012 г.). «Последовательность, структура и функциональное разнообразие суперсемейства фосфодиэстеразы PD-(D/E)XK» . Исследования нуклеиновых кислот . 40 (15): 7016–45. дои : 10.1093/nar/gks382 . ПМЦ   3424549 . ПМИД   22638584 .
  29. ^ Дасса, Б.; и др. (март 2009 г.). «Разрушенные гены: новое геномное устройство, включающее новые расщепленные интеины и новое семейство самонаводящихся эндонуклеаз» . Исследования нуклеиновых кислот . 37 (8): 2560–2573. дои : 10.1093/нар/gkp095 . ПМЦ   2677866 . ПМИД   19264795 .
  30. ^ Тейлор, ГК; Хейтер, Д.Ф.; Петроковский, С; Стоддард, Б.Л. (декабрь 2011 г.). «Активность, специфичность и структура I-Bth0305I: представителя нового семейства самонаводящихся эндонуклеаз» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (22): 9705–19. дои : 10.1093/nar/gkr669 . ПМК   3239194 . ПМИД   21890897 .
  31. ^ Мур СМ, Гимбл Ф.С., Киочо Ф.А. (октябрь 2002 г.). «Кристаллическая структура интеиновой эндонуклеазы PI-SceI, связанной с ее последовательностью распознавания». Нат. Структура. Биол . 9 (10): 764–70. дои : 10.1038/nsb840 . ПМИД   12219083 . S2CID   40192379 .
[ редактировать ]
В эту статью включен текст из общественного достояния Pfam и InterPro : IPR007868.
В эту статью включен текст из общественного достояния Pfam и InterPro : IPR007869.
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Homing_endonuclease&oldid=1202004293"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 7dcb7d8c02604ff5b03cdf550e68d0be__1706810340
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/7d/be/7dcb7d8c02604ff5b03cdf550e68d0be.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Homing endonuclease - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)