Jump to content

Бактерии-помощники микоризы

Общая связь и эффекты МГБ с микоризными грибами .

Бактерии-помощники микоризы ( MHB ) представляют собой группу организмов, которые образуют симбиотические ассоциации как с эктомикоризой, так и с арбускулярной микоризой . [ 1 ] MHB разнообразны и принадлежат к широкому спектру типов бактерий, включая как грамотрицательные, так и грамположительные бактерии . [ 1 ] Некоторые из наиболее распространенных MHB, наблюдаемых в исследованиях, принадлежат к типам Pseudomonas и Streptomyces . [ 1 ] Было замечено, что MHB иногда имеют чрезвычайно специфические взаимодействия со своими грибными хозяевами, но эта специфичность теряется у растений. [ 2 ] MHB улучшают функцию микоризы, рост, поглощение питательных веществ грибами и растениями , улучшают проводимость почвы , помогают против определенных патогенов и способствуют укреплению защитных механизмов . [ 1 ] Эти бактерии естественным образом присутствуют в почве и образуют сложные взаимодействия с грибами , когда развитие корней растений начинает обретать форму. [ 2 ] Механизмы, посредством которых формируются эти взаимодействия, недостаточно изучены и требуют дальнейшего изучения. [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ]

Таксономия

[ редактировать ]

MHB состоят из разнообразной группы бактерий , часто грамотрицательных и грамположительных бактерий . Большинство бактерий связаны как с эктомикоризой, так и с арбускулярной микоризой , но некоторые проявляют специфичность к определенному типу грибов. [ 1 ] будут рассмотрены в следующих разделах Общие типы, к которым принадлежат MHB, а также общие роды .

Псевдомонадота

[ редактировать ]

Pseudomonadota (ранее Proteobacteria) — это большая и разнообразная группа грамотрицательных бактерий, состоящая из пяти классов . Pseudomonas относится к классу гаммапротеобактерий . Специфические бактерии этого рода тесно связаны как MHB в ризосфере как эктомикоризы, так и арбускулярной микоризы. [ 1 ] Pseudomonas fluorescens изучалась в нескольких исследованиях, чтобы понять, как они приносят пользу микоризе и растению. [ 1 ] В одном исследовании они обнаружили, что бактерии помогают эктомикоризным грибам способствовать симбиозу с растением, исследуя увеличение образования микоризы при Pseudomonas fluorescens . внесении в почву [ 4 ] Некоторые бактерии улучшают колонизацию корней и рост растений, когда связаны с арбускулярной микоризой. [ 5 ] Была выдвинута гипотеза, что MHB помогают растению в защите от патогенов, улучшая поглощение питательных веществ из почвы, позволяя растениям выделять больше ресурсов на широкие защитные механизмы. [ 6 ] Однако механизм, который эти виды используют для оказания помощи обоим грибам, до сих пор неизвестен и требует дальнейшего изучения. [ 5 ]

Актиномицетота

[ редактировать ]
Ветвящаяся форма Streptomyces , очень распространенной почвенной бактерии, часто способствует установлению взаимоотношений растения и микоризы.

Actinomycetota являются грамположительными бактериями и естественным образом встречаются в почве. В этом типе Streptomyces являются крупнейшим родом бактерий и часто связаны с MHB. [ 1 ] Streptomyces были модельным организмом в биологических исследованиях MHB. В одном исследовании сообщалось, что Streptomyces ответственны за усиление колонизации корней, рост биомассы растений, микоризную колонизацию и рост грибков. [ 7 ] [ 8 ] Однако не существует единого механизма, в котором участвуют MHB. [ 1 ] [ 7 ] [ 8 ] Также было обнаружено, что Streptomyces взаимодействуют с эктомикоризой и арбускулярной микоризой. [ 1 ] Хотя эти взаимодействия требуют дальнейшего понимания, они, по-видимому, чрезвычайно распространены в естественной почве. [ 8 ]

Бациллота

[ редактировать ]

Bacillota — грамположительные бактерии, многие из которых имеют низкое содержание GC в ДНК . Есть несколько родов, которые действуют как MHB, но одним из наиболее распространенных является Bacillius . [ 1 ] Bacillius относятся к классу Bacilli и представляют собой палочковидные организмы, которые могут быть свободноживущими или патогенными. Однако при наличии микоризы некоторые виды могут быть полезными и считаются MHB. [ 1 ] Поскольку они распространены, они могут образовывать родство с эктомикоризой и арбускулярной микоризой, аналогично предыдущим родам. [ 1 ] Bacillius способствует зарождению и росту микоризы, а также фиксации азота в ризосфере. [ 9 ] [ 10 ] [ 11 ]

Известно, что МГБ выполняют несколько функций при взаимодействии с корнями растений и росте грибов. В нескольких исследованиях сообщалось, что MHB могут помочь грибам, увеличивая рост мицелия и помогая потреблять питательные вещества. [ 3 ] Увеличение мицелия позволяет грибам поглощать больше питательных веществ, увеличивая площадь его поверхности. [ 9 ]

Росту способствуют питательные вещества

[ редактировать ]

Известно, что некоторые MHB помогают расщеплять молекулы до более пригодной для использования формы. [ 1 ] MHB могут получать как неорганические , так и органические питательные вещества из почвы посредством прямого процесса, известного как выветривание минералов , который способствует рециркуляции питательных веществ в окружающей среде. [ 12 ] В процессе выветривания минералов высвобождаются протоны и железо . в почву [ 12 ] Это приводит к снижению pH . [ 12 ] В процессе выветривания минералов могут участвовать разнообразные группы бактерий, такие как Pseudomonas , Burkholderia и Collimonas . [ 12 ] Предполагается, что подкисление почвы МГБ связано с их метаболизмом глюкозы . [ 12 ]

МХБ также помогают собирать недоступный фосфор из окружающей почвы. [ 13 ] , солюбилизирующие фосфат, Ризобактерии являются наиболее распространенными MHB, которые способствуют поглощению фосфора. [ 13 ] Бактерии участвуют в этом процессе, выделяя в почву соединения, разлагающие фосфаты, которые расщепляют органические и неорганические фосфаты. [ 14 ] В результате MHB создает пул фосфатов, который затем использует микориза. [ 14 ] [ 15 ] Бактерии работают в условиях ограниченного фосфора, помогая микоризе прижиться и расти. [ 13 ] Streptomyces могут способствовать арбускулярной микоризе в условиях ограниченного фосфора посредством аналогичного процесса. [ 8 ] [ 13 ]

МГБ в ризосфере часто обладают способностью усваивать азот , который может использовать растение. МГБ способны фиксировать азот в почве и создавать пулы доступного азота. [ 16 ] Однако MHB не вызывают модификаций растений, как это делают бобовые , способствуя фиксации азота . [ 16 ] Азотфиксация осуществляется только в окружающей микоризе почве. [ 16 ] В одном исследовании исследователи сообщили, что Bacillius MHB способствует фиксации азота и, среди других факторов, помогает растению расти при инокуляции грибком. [ 11 ]

Гормоны роста растений

[ редактировать ]

Было высказано предположение (Kaska et al., 1994), что MHB индуцируют гормоны роста в растении , что помогает микоризе взаимодействовать с боковыми корнями в почве. [ 17 ] Увеличение корнеобразования наблюдалось также при , когда Pseudomonas putida продуцировала гормоны роста. инокуляции арбускулярной микоризы Gigaspora rosea на огурца растении [ 18 ] Инокуляция как MHB, так и гриба позволила увеличить удлинение корней и их рост в почве, как и в предыдущем исследовании. [ 18 ] В другом исследовании было обнаружено, что MHB может выделять газообразные соединения , привлекая и способствуя росту грибов. [ 19 ] Введение гормонов роста и газообразных соединений, продуцируемых МГБ, было обнаружено только недавно и требует дальнейшего изучения того, как МГБ влияют на симбиотические отношения микоризы и рост корней.

Изменение грибных генов, способствующее росту

[ редактировать ]
Пример передачи сигналов клетками, предлагаемый метод связи между MHB и их грибковыми хозяевами, позволяющий распознавать и совместную колонизацию растений.

Исследователи сообщили, что грибковые гены могут быть изменены в присутствии MHB. [ 20 ] В одном исследовании была выдвинута гипотеза, что в присутствии грибка MHB будет способствовать увеличению экспрессии гена , который способствует росту гриба. [ 20 ] Гриб меняет экспрессию своих генов после того, как MHB способствует росту гриба, поэтому изменение гена является косвенным эффектом. [ 20 ] Вероятно, это является причиной определенных соединений или сигналов, выделяемых MHB, и необходим дальнейший анализ, чтобы лучше понять эту связь. [ 20 ]

Взаимодействие с конкретными грибами

[ редактировать ]

Лишь некоторые бактерии специфичны для групп микоризных грибов. [ 15 ] Результаты показали, что местные арбускулярные микоризные грибы клевера могли расти только в присутствии Pseudomonas putida , но на самом деле растение могло расти и в присутствии множества бактерий. [ 15 ] Была выдвинута гипотеза, что бактерии-помощники ризосферы в почве развили черты, помогающие им конкурировать за прививку грибов в окружающей среде. [ 8 ] Таким образом, вполне вероятно, что MHB выбирают определенные грибы и развивают некоторую специфичность в отношении гриба, который благоприятствует бактериям. [ 8 ] [ 1 ]

Детоксикация почвы

[ редактировать ]

MHB помогают микоризе устанавливать симбиотические ассоциации в стрессовых средах, например, с высоким содержанием токсичных металлов . [ 21 ] В суровых условиях бактерии помогают усваивать больше питательных веществ, таких как азот и фосфор . [ 22 ] [ 23 ] MHB помогают предотвратить поглощение токсичных металлов, включая свинец , цинк и кадмий . [ 22 ] [ 23 ] Бактерии уменьшают количество металлов, поглощаемых растением, посредством механизмов блокады. [ 22 ] [ 23 ] Блокада токсичных металлов бактериями позволяет грибу сформировать более прочную симбиотическую связь с растением и способствует росту обоих. [ 22 ] [ 23 ] Другой предполагаемый механизм действия MHB в токсичной среде заключается в том, что бактерии помогают микоризе, компенсируя негативные эффекты, вызванные токсичным металлом. [ 24 ] MHB помогают, увеличивая усвоение питательных веществ растениями и создавая баланс между макро- и микроэлементами . [ 23 ] [ 24 ] Таким образом, у MHB есть механизмы, помогающие растению переносить суровые и в других отношениях неподходящие условия. Эта связь делает их отличными кандидатами на биоремедиацию .

С патогенными грибами

[ редактировать ]
Патогенные грибы, способные нанести вред другим грибам или растениям.

Большинство исследований показывают, что при наличии патогенного грибка MHB помогают бороться с патогенами. [ 2 ] Однако было несколько случаев, когда MHB способствовали патогенному воздействию грибка. [ 2 ]

Помощь патогенным грибам

[ редактировать ]

Было проведено несколько исследований, которые показали, что MHB помогают патогенным грибам. Одно исследование показало, что MHB способствовали колонизации грибкового патогена, поскольку окружающая среда была неподходящей для симбиотической микоризы. [ 25 ] Таким образом, MHB стал более вредным при определенных условиях для повышения собственной физической подготовки. [ 25 ] [ 2 ] Исследователи также обнаружили, что MHB помогают патогенному грибу колонизироваться на поверхности растения. [ 25 ] Это оказывает негативное влияние на растение, усиливая губительное воздействие гриба. Другой предполагаемый механизм заключается в том, что MHB изменяют защитный механизм растения, отключая разрушающие ферменты пероксидазы и позволяя патогенному грибу заразить растение. [ 26 ]

Защита от болезнетворных грибков

[ редактировать ]

В нескольких исследованиях ученые предложили множество способов защиты MHB от патогенов. В одном эксперименте исследователи заметили, что MHB производят кислоту в окружающей среде, которая помогает бороться с различными патогенами. [ 27 ] Также была выдвинута гипотеза, что защитный механизм против патогенов обусловлен сочетанием грибов и растений. [ 27 ] Другое исследование показало, что MHB выделяют в почву противогрибковые метаболиты. [ 28 ] Противогрибковые метаболиты оказывают антагонистическое действие на патогенные грибы. [ 28 ] Однако MHB могут помочь защитить патоген в зависимости от наличия питательных веществ и пространства в ризосфере. [ 1 ] [ 27 ] Дальнейшие исследования все еще необходимы, чтобы понять механизм того, как MHB помогают микоризе победить патогены, и является ли эта роль симбиотической или более мутуалистической по своей природе.

  1. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п д Фрей-Клетт, П.; Гарбай, Дж.; Таркка, М. (1 октября 2007 г.). «Возврат к бактериям-помощникам микоризы» . Новый фитолог . 176 (1): 22–36. дои : 10.1111/j.1469-8137.2007.02191.x . ISSN   1469-8137 . ПМИД   17803639 .
  2. ^ Jump up to: а б с д и ж Ригамонте, Т; Пилро, В. (2010). «Роль бактерий-помощников микоризации в формировании и действии ассоциаций эктомикоризы» . Бразильский журнал микробиологии . 41 (4): 832–840. дои : 10.1590/S1517-83822010000400002 . ПМЦ   3769757 . ПМИД   24031563 .
  3. ^ Jump up to: а б Пивато, Барбара; Оффре, Пьер; Марчелли, Сара; Барбональя, Бруно; Мугель, Кристоф; Лемансо, Филипп; Берта, Грациелла (1 февраля 2009 г.). «Бактериальное воздействие на арбускулярные микоризные грибы и развитие микоризы под влиянием бактерий, грибов и растения-хозяина». Микориза . 19 (2): 81–90. дои : 10.1007/s00572-008-0205-2 . ISSN   0940-6360 . ПМИД   18941805 .
  4. ^ Фунун, Хассна; Дюпоннуа, Робин; Мейер, Жан Мари; Тиулуза, Жан; Массе, Доминик; Шотт, Жан Люк; Нейра, Марк (1 июля 2002 г.). «Взаимодействие между эктомикоризным симбиозом и флуоресцентными псевдомонадами на Acacia holosericea: выделение бактерий-помощников микоризы (MHB) из судано-сахелианской почвы» . ФЭМС Микробиология Экология . 41 (1): 37–46. дои : 10.1111/j.1574-6941.2002.tb00964.x . ПМИД   19709237 .
  5. ^ Jump up to: а б Гамалеро, Элиза; Тротта, Антонио; Масса, Надя; Копетта, Андреа; Мартинотти, Мария Джованна; Берта, Грациелла (1 июня 2004 г.). «Влияние двух флуоресцентных псевдомонад и арбускулярного микоризного гриба на рост растений томата, архитектуру корней и приобретение фосфора». Микориза . 14 (3): 185–192. дои : 10.1007/s00572-003-0256-3 . ПМИД   15197635 .
  6. ^ Басу, Мутурамалингам; Сантагуру, Каруппаньяниар (1 июня 2009 г.). «Влияние Glomus Fasciculatum и флуоресцентной Pseudomonas на рост Vigna Radiata (L.) Wilczek, подвергшегося воздействию фитопатогенов» . Журнал исследований в области защиты растений . 49 (2): 190–194. CiteSeerX   10.1.1.599.7665 . дои : 10.2478/v10045-009-0028-y .
  7. ^ Jump up to: а б Абдель-Фаттах, генеральный менеджер; Мохамедин, АХ (1 декабря 2000 г.). «Взаимодействие между везикулярно-арбускулярным микоризным грибом (Glomus interradices) и Streptomyces coelicolor и их влияние на растения сорго, выращенные в почве с добавлением хитина мускульных чешуек». Биология и плодородие почв . 32 (5): 401–409. дои : 10.1007/s003740000269 .
  8. ^ Jump up to: а б с д и ж Франко-Корреа, Марсела; Кинтана, Анжелика; Дуке, Кристиан; Суарес, Кристиан; Родригес, Мария X.; Бареа, Хосе-Мигель (2010). «Оценка штаммов актиномицетов на предмет ключевых признаков, связанных со стимулированием роста растений и деятельностью по борьбе с микоризой». Прикладная экология почв . 45 (3): 209–217. дои : 10.1016/j.apsoil.2010.04.007 .
  9. ^ Jump up to: а б Торо, М.; Азкон, Р.; Бареа, Дж. (1 ноября 1997 г.). «Улучшение развития арбускулярной микоризы путем инокуляции почвы ризобактериями, солюбилизирующими фосфат, для улучшения биодоступности каменного фосфата ((sup32)P) и круговорота питательных веществ» . Прикладная и экологическая микробиология . 63 (11): 4408–4412. дои : 10.1128/АЕМ.63.11.4408-4412.1997 . ПМЦ   1389286 . ПМИД   16535730 .
  10. ^ Мамата, Г.; Багьярай, Д.; Джаганатх, С. (1 декабря 2002 г.). «Инокуляция выращенных в полевых условиях шелковицы и папайи арбускулярными микоризными грибами и бактерией-помощником микоризы». Микориза . 12 (6): 313–316. дои : 10.1007/s00572-002-0200-y . ПМИД   12466919 .
  11. ^ Jump up to: а б Чанвей, CP; Холл, ФБ (1 марта 1991 г.). «Увеличение биомассы и ассоциативная азотфиксация микоризных сеянцев Pinus contorta, инокулированных штаммом Bacillus, способствующим росту растений». Канадский журнал ботаники . 69 (3): 507–511. дои : 10.1139/b91-069 .
  12. ^ Jump up to: а б с д и Уроз, С.; Кальварузо, К.; Тюрпо, член парламента; Пьерра, JC; Мустин, К.; Фрей-Клетт, П. (1 мая 2007 г.). «Влияние микорризосферы на генотипическое и метаболическое разнообразие бактериальных сообществ, участвующих в выветривании минералов в лесной почве» . Прикладная и экологическая микробиология . 73 (9): 3019–3027. дои : 10.1128/aem.00121-07 . ISSN   0099-2240 . ПМК   1892860 . ПМИД   17351101 .
  13. ^ Jump up to: а б с д Бареа, Дж. М.; Азкон, Р; Азкон-Агилар, C (август 2002 г.). «Взаимодействие микорризосферы для улучшения приспособленности растений и качества почвы». Антони ван Левенгук . 81 (1–4): 343–51. дои : 10.1023/А:1020588701325 . ПМИД   12448732 .
  14. ^ Jump up to: а б Кьюси, РМН; Янзен, Х.Х.; Леггетт, Мэн (1989). «Микробно-опосредованное увеличение доступного для растений фосфора». Достижения в агрономии Том 42 . Достижения в агрономии. Том. 42. стр. 199–228. дои : 10.1016/s0065-2113(08)60525-8 . ISBN  9780120007424 .
  15. ^ Jump up to: а б с Артурссон, Вероника; Финли, Роджер Д.; Янссон, Джанет К. (1 января 2006 г.). «Взаимодействие между арбускулярными микоризными грибами и бактериями и их потенциал стимулирования роста растений» . Экологическая микробиология . 8 (1): 1–10. дои : 10.1111/j.1462-2920.2005.00942.x . ПМИД   16343316 .
  16. ^ Jump up to: а б с Антун, Хани; Прево, Даниэль (2005). PGPR: Биоконтроль и биооплодотворение . Спрингер, Дордрехт. стр. 1–38. дои : 10.1007/1-4020-4152-7_1 . ISBN  9781402040023 .
  17. ^ Каска, Д.Д.; Мюллюля, Р.; Купер, Дж. Б. (1 апреля 1999 г.). «Ингибиторы транспорта ауксина действуют через этилен, регулируя дихотомическое ветвление меристем боковых корней сосны» . Новый фитолог . 142 (1): 49–57. дои : 10.1046/j.1469-8137.1999.00379.x . ISSN   1469-8137 .
  18. ^ Jump up to: а б Гамалеро, Элиза; Берта, Грациелла; Масса, Надя; Глик, Бернард Р.; Лингва, Гвидо (01 июня 2008 г.). «Синергетическое взаимодействие между бактерией Pseudomonas putida UW4, продуцирующей деаминазу ACC, и AM-грибом Gigaspora rosea положительно влияет на рост растений огурца» . ФЭМС Микробиология Экология . 64 (3): 459–467. дои : 10.1111/j.1574-6941.2008.00485.x . ISSN   0168-6496 . ПМИД   18400004 .
  19. ^ Дюпоннуа, Робин; Киса, Мария (1 июня 2006 г.). «Возможная роль трегалозы в эффекте бактерий-помощников микоризы». Канадский журнал ботаники . 84 (6): 1005–1008. дои : 10.1139/b06-053 . ISSN   0008-4026 .
  20. ^ Jump up to: а б с д Шрей, Сильвия Д.; Шеллхаммер, Майкл; Экке, Маргрет; Хапп, Рюдигер; Таркка, Мика Т. (01 октября 2005 г.). «Бактерия-помощник микоризы Streptomyces AcH 505 индуцирует дифференциальную экспрессию генов у эктомикоризного гриба Amanita muscaria» . Новый фитолог . 168 (1): 205–216. дои : 10.1111/j.1469-8137.2005.01518.x . ISSN   1469-8137 . ПМИД   16159334 .
  21. ^ Бонфанте, Паола; Анка, Юлия-Андра (8 сентября 2009 г.). «Растения, микоризные грибы и бактерии: сеть взаимодействий». Ежегодный обзор микробиологии . 63 (1): 363–383. дои : 10.1146/annurev.micro.091208.073504 . hdl : 2318/99264 . ПМИД   19514845 .
  22. ^ Jump up to: а б с д Вивас, А; Азкон, Р; Биро, Б; Бареа, Дж. М.; Руис-Лозано, ЖМ (01 октября 2003 г.). «Влияние бактериальных штаммов, выделенных из загрязненной свинцом почвы, и их взаимодействие с арбускулярными микоризами на рост Trifolium pratense L. при токсичности свинца». Канадский журнал микробиологии . 49 (10): 577–588. дои : 10.1139/w03-073 . ПМИД   14663492 .
  23. ^ Jump up to: а б с д и Вивас, А.; Бареа, Дж. М.; Биро, Б.; Азкон, Р. (1 марта 2006 г.). «Эффективность автохтонных бактерий и микоризных грибов на рост Trifolium, симбиотическое развитие и ферментативную активность почвы в загрязненной цинком почве». Журнал прикладной микробиологии . 100 (3): 587–598. дои : 10.1111/j.1365-2672.2005.02804.x . ПМИД   16478498 .
  24. ^ Jump up to: а б Вивас, А.; Бареа, Дж. М.; Азкон, Р. (2005). «Интерактивное влияние Brevibacillus brevis и Glomus mosseae, выделенных из почвы, загрязненной кадмием, на рост растений, физиологические характеристики микоризных грибов и ферментативную активность почвы в почве, загрязненной кадмием». Загрязнение окружающей среды . 134 (2): 257–266. дои : 10.1016/j.envpol.2004.07.029 . ПМИД   15589653 .
  25. ^ Jump up to: а б с Дьюи, FM; Вонг, Ю.Л.; Сири, Р.; Холлинз, ТВ; Гурр, SJ (27 августа 1999 г.). «Бактерии, ассоциированные с Stagonospora (Septoria) nodorum, повышают патогенность гриба» . Новый Фитол . 144 (3): 489–497. дои : 10.1046/j.1469-8137.1999.00542.x .
  26. ^ Лер, Нина А.; Шрей, Сильвия Д.; Бауэр, Роберт; Хапп, Рюдигер; Таркка, Мика Т. (1 июня 2007 г.). «Подавление защитной реакции растений бактерией-помощником микоризы» . Новый фитолог . 174 (4): 892–903. дои : 10.1111/j.1469-8137.2007.02021.x . ISSN   1469-8137 . ПМИД   17504470 .
  27. ^ Jump up to: а б с Шелкле, М.; Петерсон, Р.Л. (1 февраля 1997 г.). «Подавление распространенных корневых патогенов бактериями-помощниками и эктомикоризными грибами in vitro». Микориза . 6 (6): 481–485. дои : 10.1007/s005720050151 . ISSN   0940-6360 .
  28. ^ Jump up to: а б Двиведи, Дипти; Джохри, Б.Н. (2003). «Противогрибковые средства из флуоресцентных псевдомонад: биосинтез и регуляция». Современная наука . 85 (12): 1693–1703. JSTOR   24109974 .
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 54815b5397c768d0da35541c49bd2ec2__1691872560
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/54/c2/54815b5397c768d0da35541c49bd2ec2.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Mycorrhiza helper bacteria - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)