U937 (сотовая линия)

Клетки U-937 представляют собой промоноцитарную модельную клеточную линию, используемую в биомедицинских исследованиях . ^{[ 1 ]} Они были выделены из гистиоцитарной лимфомы 37-летнего пациента мужского пола в 1974 году. ^{[ 2 ]} Из-за относительной однородности размноженных культур и меньших требований к содержанию эти клетки с тех пор используются в качестве важного инструмента для изучения фагоцитов дифференцировки и различных видов межклеточных взаимодействий. Клетки U-937 созревают и дифференцируются в ответ на ряд растворимых стимулов, приобретая морфологию и характеристики моноцитов , макрофагов или дендритных клеток . ^{[ 3 ]}

Клетки U-937 имеют миелоидную линию и, таким образом, секретируют большое количество цитокинов и хемокинов либо конститутивно (например, IL-1 и GM-CSF ), либо в ответ на растворимые стимулы. TNFα и рекомбинантный GM-CSF Например, независимо способствуют выработке IL-10 в клетках U937. ^{[ 4 ]} Поэтому эта клеточная линия широко используется для определения уровня цитокинов в результате воздействия различных химических соединений. продукцию IL-1β , IL-6 , IL-8 , IL-10 , TNF-α , iNOS , COX-2 и NF-κB . А именно, обычно измеряют ^{[ 3 ]}

t(10;11)(p13;q14), Клетки U-937 несут транслокацию вызывающую слияние MLLT10 и Ар-3-подобного клатрина белка сборки PICALM . ^{[ 3 ]} Аллели HLA , присутствующие в клетках U-937, представляют собой HLA-A*03:01, A*31:01, B*18:01, B*51:01, Cw*01:02 и Cw*07:02. ^{[ 5 ]}

Обслуживание и дифференциация

Линию U-937 можно культивировать in vitro до 3 месяцев или хранить замороженной при температуре -80 °C в течение нескольких лет в соответствии с соответствующим протоколом. Можно использовать среду RPMI 1640 или, альтернативно, среду DMEM , дополненную 10% FBS и антибиотиками (обычно пенициллином или стрептомицином ). В некоторых случаях можно использовать еще одну добавку — цвиттер-ионный буфер — HEPES . ^{[ 3 ]}

Индукция дифференциации

Индукция дифференцировки U-937 в моноциты или макрофаги может быть достигнута различными агентами, такими как PMA (форбол 12-миристат-13-ацетат), ретиноевые кислоты , витамин D3 (1,25-дигидроксивитамин D3) или TPA (12-O- тетрадеканоилфорбол-13-ацетат). Дальнейшую дифференцировку в дендритные клетки можно вызвать, подвергая их воздействию собственного пептида аполипопротеина Е (Ep1.B). Такая обработка приводит к изменениям в экспрессии поверхностных маркеров и, таким образом, индуцирует приобретение DC-подобной морфологии. ^{[ 3 ]}

Помимо упомянутых выше типов клеток, клетки U-937 могут дифференцироваться в остеокласты – подтип клеток, имеющий решающее значение для резорбции и ремоделирования кости. Этот фенотип может быть достигнут путем сочетания стимуляции PMA и витамином D3 с добавлением магния , что может еще больше увековечить процесс дифференцировки. ^{[ 6 ]}

Особенности и использование в исследованиях

Из-за ограниченных возможностей получения первичных макрофагов клеточная линия U-937, наряду с клетками THP-1 , является важным инструментом для изучения этих фагоцитов in vitro . Однако следует принять во внимание, что обе указанные клеточные линии дают разные результаты после культивирования. Макрофаги, производные U-937, преимущественно реагируют на стимулы, индуцирующие М2, что впоследствии приводит к тому, что они приобретают фенотип альтернативно активированных макрофагов . Тогда как в случае клеток THP-1 поляризация меняется в пользу классических макрофагов М1 . Однако обе клеточные линии можно искусственно поляризовать в любом направлении. Единственная разница состоит в том, что установление фенотипа M1 в макрофагах, происходящих из U-937, не будет таким сильным, как в THP-1, и наоборот. ^{[ 7 ]}

Лейкемия

По данным Си и др. (2022), клеточная линия U-937 может быть многообещающей моделью острого миелолейкоза , поскольку было показано, что она активно экспрессирует JAK3. ^М511И активированная мутация наблюдается примерно у 10% пациентов с ОМЛ. В этом исследовании они также подтверждают, что клетки U-937 действительно реагируют на модельный ингибитор JAK3, и, таким образом, он нарушает их пролиферацию. ^{[ 8 ]}

Фагоцитоз

Как говорилось ранее, U-937 является ценным инструментом для расширения знаний о фагоцитах . Одной из особенностей, которые особенно стоит изучить, является их способность генерировать АФК (активные формы кислорода) как часть неспецифического иммунного ответа . Прасад и др. (2020) представляют текущие возможности визуализации АФК в этих клетках с помощью электронного парамагнитного резонанса спектроскопии и конфокальной лазерной сканирующей микроскопии . ^{[ 9 ]}

Апоптоз

U-937V представляет собой вариант клеточной линии, полученной из исходных клеток U-937, отличием которых является их повышенная чувствительность к воздействию TNFα. Уникальной особенностью этих клеток является отсутствие клеточного распада как сопутствующего явления апоптоза . Было документально подтверждено, что основные молекулярные процессы (деградация ДНК , ФС экстернализация , активность каспаз или высвобождение CytC ) после индукции апоптоза в этих клетках радикально не изменяются. Таким образом, этот подтип может служить хорошей моделью для регуляции образования апоптотических телец или пузырей . ^{[ 10 ]}

Ссылки

^ ATCC U-937 CRL-1593.2™ https://www.atcc.org/products/crl-1593.2
^ Сундстрем С., Нильссон К. (май 1976 г.). «Создание и характеристика клеточной линии гистиоцитарной лимфомы человека (U-937)». Международный журнал рака . 17 (5): 565–577. дои : 10.1002/ijc.2910170504 . ПМИД 178611 . S2CID 19334036 .
^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и Чанпут В., Петерс В., Вичерс Х. (2015). «Клетки THP-1 и U937» . В Верхёкс К., Коттер П., Лопес-Экспозито I, Клейвеланд С., Леа Т., Маки А., Рекена Т., Святецка Д., Вичерс Х. (ред.). Влияние пищевых биоактивных веществ на здоровье: модели in vitro и ex vivo . Чам (Швейцария): Спрингер. стр. 147–159. дои : 10.1007/978-3-319-16104-4_14 . ISBN 978-3-319-15791-7 . ПМИД 29787063 . Проверено 7 января 2023 г.
^ Леманн М.Х. (июнь 1998 г.). «Рекомбинантный человеческий гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор запускает экспрессию интерлейкина-10 в моноцитарной клеточной линии U937». Молекулярная иммунология . 35 (8): 479–485. дои : 10.1016/S0161-5890(98)00043-1 . ПМИД 9798652 .
^ Гебреселасси Д., Шпигель Х., Вукманович С. (ноябрь 2006 г.). «Отбор проб пептидома, связанного с главным комплексом гистосовместимости класса I, предполагает относительно более слабую глобальную связь HLA-B * 5101 с пептидами» . Иммунология человека . 67 (11): 894–906. дои : 10.1016/j.humimm.2006.08.294 . ПМК 2269730 . ПМИД 17145369 .
^ Паренти С., Сандони Л., Монтанари М., Занокко-Марани Т., Анеси А., Иотти С. и др. (август 2021 г.). «Магний способствует способности витамина D3 индуцировать дифференцировку моноцитов клеток U937». Исследования магния . 34 (3): 114–129. doi : 10.1684/mrh.2021.0490 (неактивен 13 сентября 2024 г.). ПМИД 34859787 . {{cite journal}}: CS1 maint: DOI неактивен по состоянию на сентябрь 2024 г. ( ссылка )
^ Насименто ЧР, Родригес Фернандес Н.А., Гонсалес Мальдонадо Л.А., Росса Хуниор С (декабрь 2022 г.). «Сравнение моноцитарных клеточных линий U937 и THP-1 как моделей макрофагов для исследований in vitro» . Отчеты по биохимии и биофизике . 32 : 101383. дои : 10.1016/j.bbrep.2022.101383 . ПМЦ 9677084 . ПМИД 36420419 .
^ Си Х, Ван Дж, Хэ Р, Юй Х, Ли С, Хуан Дж и др. (2021). «Идентификация U937 ^{ЯК3-М511И} Клетки острого миелоидного лейкоза как чувствительная модель к ингибитору JAK3» . Frontiers in Oncology . 11 : 807200. doi : 10.3389/ . PMC 8802890. . PMID 35111683 fonc.2021.807200
^ Прасад А., Седларжова М., Балукова А., Овсий А., Рац М., Кржупка М. и др. (2020). «Визуализация активных форм кислорода в клетках U937» . Границы в физиологии . 11 : 552569. doi : 10.3389/fphys.2020.552569 . ПМЦ 7593787 . ПМИД 33178031 .
^ Стасилойч Г., Пинто С., Вышковска Р., Вейда М., Сломиньска Э.М., Филипска М. и др. (июнь 2013 г.). «Вариант клеток U937 как модель апоптоза без распада клеток» . Письма по клеточной и молекулярной биологии . 18 (2): 249–262. дои : 10.2478/s11658-013-0087-y . ПМК 6275624 . ПМИД 23605997 .

Внешние ссылки

Запись о целлозавре для U937

[1] ATCC U-937 CRL-1593.2™ https://www.atcc.org/products/crl-1593.2

[Sundstrom-2] Сундстрем С., Нильссон К. (май 1976 г.). «Создание и характеристика клеточной линии гистиоцитарной лимфомы человека (U-937)». Международный журнал рака . 17 (5): 565–577. дои : 10.1002/ijc.2910170504 . ПМИД 178611 . S2CID 19334036 .

[:0-3] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и Чанпут В., Петерс В., Вичерс Х. (2015). «Клетки THP-1 и U937» . В Верхёкс К., Коттер П., Лопес-Экспозито I, Клейвеланд С., Леа Т., Маки А., Рекена Т., Святецка Д., Вичерс Х. (ред.). Влияние пищевых биоактивных веществ на здоровье: модели in vitro и ex vivo . Чам (Швейцария): Спрингер. стр. 147–159. дои : 10.1007/978-3-319-16104-4_14 . ISBN 978-3-319-15791-7 . ПМИД 29787063 . Проверено 7 января 2023 г.

[Lehmann_1998-4] Леманн М.Х. (июнь 1998 г.). «Рекомбинантный человеческий гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор запускает экспрессию интерлейкина-10 в моноцитарной клеточной линии U937». Молекулярная иммунология . 35 (8): 479–485. дои : 10.1016/S0161-5890(98)00043-1 . ПМИД 9798652 .

[Gebreselassie_2006-5] Гебреселасси Д., Шпигель Х., Вукманович С. (ноябрь 2006 г.). «Отбор проб пептидома, связанного с главным комплексом гистосовместимости класса I, предполагает относительно более слабую глобальную связь HLA-B * 5101 с пептидами» . Иммунология человека . 67 (11): 894–906. дои : 10.1016/j.humimm.2006.08.294 . ПМК 2269730 . ПМИД 17145369 .

[6] Паренти С., Сандони Л., Монтанари М., Занокко-Марани Т., Анеси А., Иотти С. и др. (август 2021 г.). «Магний способствует способности витамина D3 индуцировать дифференцировку моноцитов клеток U937». Исследования магния . 34 (3): 114–129. doi : 10.1684/mrh.2021.0490 (неактивен 13 сентября 2024 г.). ПМИД 34859787 . {{cite journal}}: CS1 maint: DOI неактивен по состоянию на сентябрь 2024 г. ( ссылка )

[7] Насименто ЧР, Родригес Фернандес Н.А., Гонсалес Мальдонадо Л.А., Росса Хуниор С (декабрь 2022 г.). «Сравнение моноцитарных клеточных линий U937 и THP-1 как моделей макрофагов для исследований in vitro» . Отчеты по биохимии и биофизике . 32 : 101383. дои : 10.1016/j.bbrep.2022.101383 . ПМЦ 9677084 . ПМИД 36420419 .

[8] Си Х, Ван Дж, Хэ Р, Юй Х, Ли С, Хуан Дж и др. (2021). «Идентификация U937 ^{ЯК3-М511И} Клетки острого миелоидного лейкоза как чувствительная модель к ингибитору JAK3» . Frontiers in Oncology . 11 : 807200. doi : 10.3389/ . PMC 8802890. . PMID 35111683 fonc.2021.807200

[9] Прасад А., Седларжова М., Балукова А., Овсий А., Рац М., Кржупка М. и др. (2020). «Визуализация активных форм кислорода в клетках U937» . Границы в физиологии . 11 : 552569. doi : 10.3389/fphys.2020.552569 . ПМЦ 7593787 . ПМИД 33178031 .

[10] Стасилойч Г., Пинто С., Вышковска Р., Вейда М., Сломиньска Э.М., Филипска М. и др. (июнь 2013 г.). «Вариант клеток U937 как модель апоптоза без распада клеток» . Письма по клеточной и молекулярной биологии . 18 (2): 249–262. дои : 10.2478/s11658-013-0087-y . ПМК 6275624 . ПМИД 23605997 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]

[ 7 ]

[ 8 ]

[ 9 ]

[ 10 ]