✖


Jump to content

СмУРФП

    Add links
    Флуоресцентные белки визуализируют развитие клеточного цикла. Флуоресценция IFP2.0-hGem(1/110) показана зеленым цветом и выделяет фазы S/G 2 /M. Флуоресценция smURFP-hCdtI(30/120) показана красным и выделяет фазы G0 / G1 .

    Малый ультракрасный флуоресцентный белок ( smURFP ) представляет собой класс дальнекрасного флуоресцентного белка, развившегося из цианобактерии ( Trichodesmium erythraeum ) фикобилипротеина , α- аллофикоцианина . [1] [2] [3] Нативный α- требует экзогенного белка, известного как лиаза , для прикрепления хромофора фикоцианобилина аллофикоцианин . Фикоцианобилин не присутствует в млекопитающих клетках . smURFP был разработан для ковалентного присоединения фикоцианобилина без лиазы и флуоресценции , ковалентного присоединения биливердина (повсеместно встречающегося в млекопитающих клетках ) и флуоресценции , с синим смещением флуоресценции , соответствующей органическому Cy5 флуорофору , и не ингибирующего рост E. coli . smURFP был обнаружен после 12 раундов случайного мутагенеза и ручного скрининга 10 000 000 бактериальных колоний.

    Характеристики

    [ редактировать ]

    smURFP представляет собой гомодимер с максимумом поглощения и эмиссии 642 нм и 670 нм соответственно. Был создан тандемный димер smURFP (TDsmURFP), который имеет свойства, аналогичные smURFP. smURFP чрезвычайно стабилен: при деградации белка период полураспада составляет 17 часов и 33 часа без хромофора ( биливердина ) и с ним соответственно. Это сопоставимо с , полученного из медуз усиленного зеленого флуоресцентного белка ( eGFP ) белка периодом полураспада , составляющим 24 часа. [4] smURFP чрезвычайно фотостабилен и превосходит mCherry по производительности. [5] и tdTomato [5] в живых клетках. Одномолекулярные smURFP излучают в два раза больше фотонов перед фотообесцвечиванием, чем низкомолекулярные красители AlexaFluor647 и Cyanine5. [6] Коэффициент поглощения (180 000 М −1 см −1 ) smURFP чрезвычайно велик и имеет скромный квантовый выход (0,18), что делает его биофизическую яркость сравнимой с eGFP и примерно в 2 раза ярче, чем большинство красных или дальнекрасных флуоресцентных белков, полученных из кораллов . smURFP имеет самое большое двухфотонное сечение среди флуоресцентных белков . Имеются два пиковых сечения 1060 и 60 GM при 820 и 1196 нм соответственно. [7] Несмотря на то, что они являются гомодимерами, все протестированные N- и C-концевые слияния демонстрируют правильную клеточную локализацию, включая сложное слияние с α-тубулином и ламином B1 ( рисунок ). [1] smURFP назван в честь Смурфиков из-за его светло-голубого цвета в белом свете. [1]

    Таблицу Excel со спектрами поглощения, возбуждения и испускания smURFP можно скачать здесь . Кристаллическая структура smURFP ( PDB: 7UQA ) была определена и использована для понимания направленной эволюции . smURFP также сравнивали с родительским α-аллофикоцианином . [8] Кристаллическая структура мутанта smURFP ( PDB : 6FZN ) была опубликована Fuenzalida-Werner et al . [9] У мутантов наблюдаются значительно большие карманы хромофора и объем белка, что приводит к уменьшению квантового выхода. [10] В обзоре 2020 года обсуждаются недавние применения smURFP в качестве генетически кодируемого или экзогенного зонда для визуализации in vivo , а также обсуждаются проблемы с доступностью биливердина . [11]

    На изображении показаны E. coli , экспрессирующие smURFP, осаждение E. coli , удаление среды, лизис E. coli , связывание smURFP с NiNTA, элюирование smURFP и замена буфера.

    smURFP используется в качестве наночастиц, экзогенных зондов и in vitro . анализов

    [ редактировать ]

    Свободный smURFP имеет диаметр 2-3 нм. smURFP Наночастицы диаметром ~10-14 нм могут быть синтезированы в масляно-водной эмульсии и оставаться флуоресцентными . Эти наночастицы флуоресцентного белка стабильны у живых мышей и полезны для неинвазивной визуализации опухолей флуоресцентной . [12]

    Очищенный smURFP выдерживает ультразвук и фиксацию , что позволяет получить флуоресцентную визуализацию макромолекул доставки с помощью ультразвука в роговицу . [13]

    кодируемый генетически, может быть инкапсулирован в вирусы и использован для неинвазивной флуоресцентной Свободный smURFP, очищенный белок, не визуализации биораспределения у живых мышей. [14] [15] [16]

    smURFP ковалентно присоединяет биливердин , вызывая флуоресценцию , и по своей сути является сенсором биливердина . Исследователи показали, что очищенный smURFP имеет предел обнаружения биливердина в сыворотке 0,4 человека нМ . [17] smURFP позволяет проводить анализы in vitro для выявления активности ферментов . тромбин . Разработан анализ на с диапазоном обнаружения 1,07–0,01 мМ и пределом обнаружения 0,2 мМ [18]

    Тандемный димер smURFP (TDsmURFP) использовался в качестве экзогенного флуоресцентного маркера для мечения семитрансмембранного рецептора Smoothened ( SMO ). TDsmURFP был очищен из E. coli и присоединен к SMO посредством конъюгации, опосредованной сортазой, для сортировки клеток, активируемой флуоресценцией (FACS) . [19] Эта новая экзогенная флуоресцентная маркировка белков позволяет избежать скрининга нескольких мест вставки белка, органических растворителей и химических реакций, которые неправильно сворачивают, инактивируют или разрушают белки.

    smURFP представляет собой самомаркирующийся белок.

    [ редактировать ]
    Маленький ультракрасный флуоресцентный белок (smURFP) представляет собой самомаркирующийся белок. Субстрат флюорогенен, флуоресцирует при прикреплении и гасит флуоресцентный груз. smURFP-тег [20] обладает новыми свойствами для разработки инструментов.

    Маленький ультракрасный флуоресцентный белок (smURFP) представляет собой самомаркирующийся белок, подобный Halo- , SNAP- и CLIP -меткам. smURFP-метка принимает субстрат биливердина , модифицированный карбоксилатом с линкером полиэтиленгликоля (ПЭГ) к карго-молекуле. В отличие от меток Halo-, SNAP- и CLIP, в которых субстрат используется только для ковалентного прикрепления молекулы-груза, биливердин является флюорогенным , и флуоресценция включается при ковалентном присоединении к smURFP-метке, что позволяет отслеживать флуоресценцию в дальнем красном диапазоне. грузовой молекулы в живых клетках. Биливердин также гасит грузы флуоресцеина , что позволяет проводить визуализацию без удаления субстрата. Модификация биливердина по одному карбоксилату создает нейтральную молекулу, которая проходит через внешнюю и ядерную мембрану млекопитающих клеток . [21]

    Доступность хромофора в клетках и мышах

    [ редактировать ]
    smURFP был генетически слит с человеческим ламином B1, чтобы показать флуоресцентную ядерную оболочку. Локализация белка ламина B1 меняется на разных фазах клеточного цикла.

    Несмотря на то, что биофизическая яркость была сравнима с eGFP при очищенного белка нормализации , этого не наблюдалось в живых клетках . было недостаточно хромофора ( биливердина ) Это означало, что внутри клеток . Добавление биливердина увеличивало флуоресценцию , но smURFP с биливердином не сравнимо с eGFP . Биливердин имеет два карбоксилата при нейтральном pH , что ингибирует проникновение в клетку. Диметиловый эфир биливердина является более гидрофобным аналогом и легко проникает через клеточную мембрану . smURFP с диметиловым эфиром биливердина демонстрирует флуоресценцию, сравнимую с eGFP в клетках , и ярче, чем бактериальные фитохромные флуоресцентные белки .

    Свободный хромофор можно отличить от хромофора, прикрепленного к smURFP, с помощью флуоресцентной визуализации времени жизни ( FLIM ) в живых клетках. Свободный диметиловый эфир биливердина (BVMe2) имеет время жизни флуоресценции 0,586 нс, тогда как BVMe2, прикрепленный к smURFP, имеет время жизни флуоресценции 1,27 нс . [22]

    smURFP, экспрессируемый в культуре нейронов, не демонстрирует агрегации в лизосомах, что наблюдалось с флуоресцентным белком mCherry .

    У мышей флуоресценция smURFP видна в HT1080 опухоли ксенотрансплантатах без экзогенного биливердина , но флуоресценция меньше, чем у кораллового красных флуоресцентных белков происхождения , mCherry. [5] и мКардинал. [23] Видимая флуоресценция не всегда полезна флуоресцентные , и белки всегда следует сравнивать с другими полезными, генетически закодированными флуоресцентными белками . Внутривенное введение экзогенного биливердина или диметилового эфира биливердина не увеличивает флуоресценцию smURFP, экспрессируемую в опухолях, через 1–24 часа. Масс-спектрометрия показала, что сложноэфирные группы быстро удаляются из диметилового эфира биливердина . Добавление 25 мкМ или диметилового эфира биливердина резко увеличивает флуоресценцию удаленных биливердина опухолей , а smURFP присутствует без хромофора . Необходимы дальнейшие исследования для оптимизации доступности хромофоров у мышей для получения флуоресценции, сравнимой или большей, чем у кораллового красных флуоресцентных белков происхождения .

    Добавление хромофора в клетки

    [ редактировать ]

    Диметиловый эфир биливердина , биливердин и фикоцианобилин коммерчески доступны от Frontier Scientific . Диметиловый эфир биливердина , биливердин или фикоцианобилин растворяют в ДМСО в концентрации 5 мМ. Раствор очень темный, поэтому энергично пипетируйте его, чтобы убедиться, что все растворилось. Диметиловый эфир биливердина не растворяется в обычных буферах , включая фосфатно-солевой буфер (PBS) или сбалансированный солевой раствор Хэнка (HBSS). Добавьте 1-5 мкм диметилового эфира биливердина в среду или буфер, содержащий 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS). Добавьте 25 мкм биливердина (не в качестве мембранопроницаемого) к клеткам . Биливердин не насыщает сайты smURFP и не достигает максимальной интенсивности флуоресценции. Диметиловый эфир биливердина следует использовать для получения максимальной интенсивности флуоресценции. Инкубируйте smURFP с хромофором как можно дольше, чтобы увеличить накопление белка, вызванное повышенной стабильностью белка с хромофором . Оставьте хромофор минимум на 3 часа, рекомендуется на 24 часа. Удалить хромофор , промойте средой, содержащей 10% FBS , и сделайте изображение в среде без фенолового красного или буфера для визуализации .

    smURFP генетически закодированные биосенсоры

    [ редактировать ]
    FUCCI в дальнем красном и ближнем инфракрасном диапазоне визуализирует рождение многоядерной клетки, что характерно для многих раковых клеток.

    Киназный датчик FRET . smURFP является полезным акцептором для многих красных флуоресцентных белков из-за спектрального перекрытия. Рационально разработанный красный флуоресцентный белок stagRFP позволяет упростить создание датчиков FRET . stagRFP является полезным донором FRET для дальнего красного акцептора smURFP, и ERK киназы был создан репортер FRET со средним ответом ~ 15%. Новый сенсор позволил одновременно визуализировать три киназы, Src , Akt , ERK , в одной клетке . [24]

     

    Флуоресцентная визуализация клеточного цикла . Новаторская работа Ацуши Мияваки и его коллег разработала флуоресцентный индикатор клеточного цикла на основе убиквитинирования ( FUCCI ), который позволяет флуоресцентно отображать клеточный цикл. Первоначально зеленый флуоресцентный белок mAG был слит с hGem (1/110), а оранжевый флуоресцентный белок (mKO 2 ) был слит с hCdt1 (30/120). Обратите внимание, что эти слияния представляют собой фрагменты, которые содержат сигнал ядерной локализации и убиквитинирования сайты для деградации , но не являются функциональными белками. Зеленый флуоресцентный белок образуется во время фазы S, G2 или M и разлагается во время фазы G0 или G1 , тогда как оранжевый флуоресцентный белок образуется во время фазы G0 или G1 и разрушается во время S, G2 . , или М-фаза. [25] FUCCI в дальнем красном и ближнем инфракрасном диапазоне был разработан с использованием цианобактерий полученного из флуоресцентного белка, (smURFP) и бактериофитохрома полученного из флуоресцентного белка, ( фильм можно найти по этой ссылке ). [1]

    smURFP (голубой), экспрессируемый в E. coli .

    Ссылки

    [ редактировать ]
    1. ^ Перейти обратно: а б с д Родригес, Эрик А.; Тран, Джеральдин Н.; Гросс, Ларри А.; Крисп, Джессика Л.; Шу, Сяокунь; Лин, Джон Ю.; Цянь, Роджер Ю. (01 августа 2016 г.). «Дальнекрасный флуоресцентный белок произошел из цианобактериального фикобилипротеина» . Природные методы . 13 (9): 763–9. дои : 10.1038/nmeth.3935 . ISSN   1548-7105 . ПМК   5007177 . ПМИД   27479328 .
    2. ^ Патент США 20180201655A1 , Родригес, Эрик А.; Тран, Джеральдин Н. и Лин, Джон Й. и др., «Развитые мечущие белки альфа-субъединицы аллофикоцианина (smURFP)», выпущено 10 декабря 2019 г.  
    3. ^ Мэттсон, Сара; Тран, Джеральдин Н.; Родригес, Эрик А. (2023), Шарма, Маянк (ред.), «Направленная эволюция флуоресцентных белков в бактериях» , Fluorescent Proteins , vol. 2564, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Springer US, стр. 75–97, doi : 10.1007/978-1-0716-2667-2_4 , ISBN.  978-1-0716-2666-5 , PMID   36107338 , получено 16 сентября 2022 г.
    4. ^ Стек, Дж. Х.; Уитни, М.; Родемс, С.М.; Поллок, Б.А. (1 декабря 2000 г.). «Система маркировки на основе убиквитина для контролируемой модуляции стабильности белка». Природная биотехнология . 18 (12): 1298–1302. дои : 10.1038/82422 . ISSN   1087-0156 . ПМИД   11101811 . S2CID   23741831 .
    5. ^ Перейти обратно: а б с Шанер, Натан С.; Кэмпбелл, Роберт Э.; Штайнбах, Пол А.; Гипманс, Бен Н.Г.; Палмер, Эми Э.; Цянь, Роджер Ю. (1 декабря 2004 г.). «Улучшенные мономерные красные, оранжевые и желтые флуоресцентные белки, полученные из красного флуоресцентного белка Discosoma sp.». Природная биотехнология . 22 (12): 1567–1572. дои : 10.1038/nbt1037 . ISSN   1087-0156 . ПМИД   15558047 . S2CID   205272166 .
    6. ^ Маити, Атану; Буффало, Космо З.; Саурабх, Саумья; Монтесинос-Франхола, Фелипе; Хачи, Джастин С.; Конлон, Уильям Дж.; Тран, Джеральдин Н.; Хасан, Бакар; Уолтерс, Кайли Дж.; Дробижев Михаил; Мёрнер, МЫ; Гош, Парфо; Мацуо, Хироши; Цянь, Роджер Ю.; Лин, Джон Ю. (12 июля 2023 г.). «Структурная и фотофизическая характеристика небольшого ультракрасного флуоресцентного белка» . Природные коммуникации . 14 (1): 4155. doi : 10.1038/s41467-023-39776-9 . ISSN   2041-1723 . ПМЦ   10338489 .
    7. ^ Маити, Атану; Буффало, Космо З.; Саурабх, Саумья; Монтесинос-Франхола, Фелипе; Хачи, Джастин С.; Конлон, Уильям Дж.; Тран, Джеральдин Н.; Хасан, Бакар; Уолтерс, Кайли Дж.; Дробижев Михаил; Мёрнер, МЫ; Гош, Парфо; Мацуо, Хироши; Цянь, Роджер Ю.; Лин, Джон Ю. (12 июля 2023 г.). «Структурная и фотофизическая характеристика небольшого ультракрасного флуоресцентного белка» . Природные коммуникации . 14 (1): 4155. doi : 10.1038/s41467-023-39776-9 . ISSN   2041-1723 . ПМЦ   10338489 .
    8. ^ Маити, Атану; Буффало, Космо З.; Саурабх, Саумья; Монтесинос-Франхола, Фелипе; Хачи, Джастин С.; Конлон, Уильям Дж.; Тран, Джеральдин Н.; Хасан, Бакар; Уолтерс, Кайли Дж.; Дробижев Михаил; Мёрнер, МЫ; Гош, Парфо; Мацуо, Хироши; Цянь, Роджер Ю.; Лин, Джон Ю. (12 июля 2023 г.). «Структурная и фотофизическая характеристика небольшого ультракрасного флуоресцентного белка» . Природные коммуникации . 14 (1): 4155. doi : 10.1038/s41467-023-39776-9 . ISSN   2041-1723 . ПМЦ   10338489 .
    9. ^ Фуэнсалида-Вернер, Япония; Яновский, Р.; Мишра, К; Вайденфельд, Я; Ниссинг, Д.; Нциахристос, В; Стил, AC (декабрь 2018 г.). «Кристаллическая структура фикобилипротеина, связанного с Вериверсдином: взаимозависимость олигомеризации и хромофорилирования». Журнал структурной биологии . 204 (3): 519–522. дои : 10.1016/j.jsb.2018.09.013 . ПМИД   30287387 . S2CID   52919137 .
    10. ^ Маити, Атану; Буффало, Космо З.; Саурабх, Саумья; Монтесинос-Франхола, Фелипе; Хачи, Джастин С.; Конлон, Уильям Дж.; Тран, Джеральдин Н.; Хасан, Бакар; Уолтерс, Кайли Дж.; Дробижев Михаил; Мёрнер, МЫ; Гош, Парфо; Мацуо, Хироши; Цянь, Роджер Ю.; Лин, Джон Ю. (12 июля 2023 г.). «Структурная и фотофизическая характеристика небольшого ультракрасного флуоресцентного белка» . Природные коммуникации . 14 (1): 4155. doi : 10.1038/s41467-023-39776-9 . ISSN   2041-1723 . ПМЦ   10338489 .
    11. ^ Монтесинос-Франхола, Фелипе; Лин, Джон Ю.; Родригес, Эрик А. (16 ноября 2020 г.). «Флуоресцентные белки для визуализации in vivo, где биливердин?» . Труды Биохимического общества . 48 (6): 2657–2667. дои : 10.1042/BST20200444 . ISSN   0300-5127 . ПМИД   33196077 . S2CID   226971864 .
    12. ^ Ан, Фейфей; Чен, Нанди; Конлон, Уильям Дж.; Хачи, Джастин С.; Синь, Цзинци; Арас, Омер; Родригес, Эрик А.; Тинг, Ричард (февраль 2020 г.). «Маленькие ультракрасные наночастицы флуоресцентного белка как экзогенные зонды для неинвазивной визуализации опухолей in vivo» . Международный журнал биологических макромолекул . 153 : 100–106. doi : 10.1016/j.ijbiomac.2020.02.253 . ПМЦ   7493049 . ПМИД   32105698 .
    13. ^ Альмогбил, Ханаа Х.; Монтесинос-Франхола, Фелипе; Дашинский, Камилла; Конлон, Уильям Дж.; Хачи, Джастин С.; Корацца, Джаванна; Родригес, Эрик А.; Здерич, Весна (01 августа 2022 г.). «Терапевтический ультразвук для местной доставки макромолекул в роговицу» . Трансляционное видение, наука и технология . 11 (8): 23. дои : 10.1167/tvst.11.8.23 . ISSN   2164-2591 . ПМЦ   9424970 . ПМИД   35998058 . S2CID   251743679 .
    14. ^ Герберт, Фабиан К.; Бролин, Оливия; Гэлбрейт, Тайлер; Бенджамин, Кэндис; Рейес, Сезар А.; Лузуриага, Майкл А.; Шахриваркевишахи, Арезу; Гассенсмит, Джеремия Дж. (3 апреля 2020 г.). «Супрамолекулярная инкапсуляция небольших ультракрасных флуоресцентных белков в вирусоподобные наночастицы для неинвазивных агентов визуализации in vivo» . дои : 10.26434/chemrxiv.12067851.v1 . S2CID   216595590 . {{cite journal}}: Для цитирования журнала требуется |journal= ( помощь )
    15. ^ Герберт, Фабиан К.; Бролин, Оливия Р.; Гэлбрейт, Тайлер; Бенджамин, Кэндис; Рейес, Сезар А.; Лузуриага, Майкл А.; Шахриваркевишахи, Арезу; Гассенсмит, Джеремия Дж. (07 мая 2020 г.). «Супрамолекулярная инкапсуляция малых ультракрасных флуоресцентных белков в вирусоподобные наночастицы для неинвазивных агентов визуализации in vivo» . Биоконъюгатная химия . 31 (5): 1529–1536. doi : 10.1021/acs.bioconjchem.0c00190 . ISSN   1043-1802 . ПМИД   32343135 .
    16. ^ Траши, Икеда; Дурбач, Матеуш З.; Траши, Орикеда; Виджесундара, Ялини Х.; Эрман, Райан Н.; Чиев, Алисса С.; Дарвин, Кэри Б.; Герберт, Фабиан К.; Гадхви, Джашкаран; Ниско, Николь Дж. Де; Нильсен, Стивен О.; Гассенсмит, Джеремия Дж. (25 апреля 2023 г.). «Самосборка флуоресцентной вирусоподобной частицы для визуализации тканей с высокой автофлуоресценцией» . Журнал химии материалов Б. дои : 10.1039/D3TB00469D . ISSN   2050-7518 .
    17. ^ Ян, Хайтао; Ван, Цзефан (август 2021 г.). Чжу, Сяцин; Цзян , Чжунъи ; Ван , Чимика Акта . 1174 338709. doi : 10.1016 . PMID   34247733 . /   j.aca.2021.338709 :
    18. ^ Чжан, Хуаюе; Ян, Лу; Чжу, Сяцин; Ван, Яньян; Ян, Хайтао; Ван, Цзефан (13 мая 2020 г.). «Быстрый и сверхчувствительный биосенсор тромбина на основе рационально разработанного трифункционального белка». Передовые материалы по здравоохранению . 9 (12): 2000364. doi : 10.1002/adhm.202000364 . ISSN   2192-2640 . ПМИД   32406199 . S2CID   218633091 .
    19. ^ Дешпанде, Ишан; Лян, Цзяхао; Хедин, Даниэль; Робертс, Келси Дж.; Чжан, Юньсяо; Ха, Бетти; Латоррака, Наоми Р.; Фауст, Брайан; Дрор, Рон О.; Бичи, Филип А.; Майерс, Бенджамин Р. (июль 2019 г.). «Сглаженная стимуляция мембранными стеролами стимулирует активность пути Hedgehog» . Природа . 571 (7764): 284–288. дои : 10.1038/s41586-019-1355-4 . ISSN   1476-4687 . ПМК   6709672 . ПМИД   31263273 .
    20. ^ Мачадо, Джон-Хэнсон; Тинг, Ричард; Лин, Джон Ю.; Родригес, Эрик А. (2021). «Самомаркирующийся белок на основе небольшого ультракрасного флуоресцентного белка smURFP» . РНЦ химической биологии . 2 (4): 1221–1226. дои : 10.1039/D1CB00127B . ISSN   2633-0679 . ПМЦ   8341759 . ПМИД   34458834 .
    21. ^ Мачадо, Джон-Хэнсон; Тинг, Ричард; Лин, Джон Ю.; Родригес, Эрик А. (2021). «Самомаркирующийся белок на основе небольшого ультракрасного флуоресцентного белка smURFP» . РНЦ химической биологии . 2 (4): 1221–1226. дои : 10.1039/D1CB00127B . ISSN   2633-0679 . ПМЦ   8341759 . ПМИД   34458834 .
    22. ^ Маити, Атану; Буффало, Космо З.; Саурабх, Саумья; Монтесинос-Франхола, Фелипе; Хачи, Джастин С.; Конлон, Уильям Дж.; Тран, Джеральдин Н.; Хасан, Бакар; Уолтерс, Кайли Дж.; Дробижев Михаил; Мёрнер, МЫ; Гош, Парфо; Мацуо, Хироши; Цянь, Роджер Ю.; Лин, Джон Ю. (12 июля 2023 г.). «Структурная и фотофизическая характеристика небольшого ультракрасного флуоресцентного белка» . Природные коммуникации . 14 (1): 4155. doi : 10.1038/s41467-023-39776-9 . ISSN   2041-1723 . ПМЦ   10338489 .
    23. ^ Чу, Джун; Хейнс, Рассел Д.; Корбель, Стефан Ю; Ли, Пэнпэн; Гонсалес-Гонсалес, Эмилио; Бург, Джон С; Атайе, Нилуфар Дж; Лам, Эми Дж; Крэнфилл, Паула Дж (2014). «Неинвазивная прижизненная визуализация клеточной дифференцировки с помощью ярко-красного возбудимого флуоресцентного белка» . Природные методы . 11 (5): 572–578. дои : 10.1038/nmeth.2888 . ПМК   4008650 . ПМИД   24633408 .
    24. ^ Мо, Гэри Ч.; Познер, Клара; Родригес, Эрик А.; Сунь, Дэнцянь; Чжан, Цзинь (декабрь 2020 г.). «Рационально усиленный красный флуоресцентный белок расширяет возможности биосенсоров FRET» . Природные коммуникации . 11 (1): 1848. Бибкод : 2020NatCo..11.1848M . дои : 10.1038/s41467-020-15687-x . ISSN   2041-1723 . ПМК   7160135 . ПМИД   32296061 .
    25. ^ Сакауэ-Савано, Асако; Моримура, Тошифуми; Хама, Хироши; Кашиваги, Саори; Мията, Такаки (08 февраля 2008 г.) . j.cell.2007.12.033 ISSN / 487–498 132 ): doi : 10.1016 . ( 3   1097-4172 . PMID   18267078. . S2CID   15704902 .
    [ редактировать ]
    Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=SmURFP&oldid=1195479095"
    Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
    Arc.Ask3.Ru
    Номер скриншота №: 7571f6e14a6301d43297ac2e27c5727a__1705182480
    URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/75/7a/7571f6e14a6301d43297ac2e27c5727a.html
    Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
    SmURFP - Wikipedia
    Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)