Диагностика малярии
Основой диагностики малярии является микроскопическое исследование крови с использованием мазков крови . [ 1 ] Хотя кровь является наиболее часто используемым для постановки диагноза образцом, слюна и моча исследуются как альтернативные, менее инвазивные образцы. [ 2 ] Совсем недавно современные методы, использующие тесты на антигены или полимеразную цепную реакцию , хотя они не получили широкого распространения в эндемичных по малярии регионах. были открыты [ 3 ] [ 4 ] Районы, которые не могут позволить себе лабораторные диагностические тесты, часто используют только субъективную лихорадку в анамнезе в качестве показания к лечению малярии.
Фильмы о крови
[ редактировать ]| Разновидность | Появление | Периодичность | Персистирующая печень |
|---|---|---|---|
| Плазмодий вивакс |  |
третичный | да |
| Плазмодий овальный |  |
третичный | нет |
| Плазмодий фальципарум |  |
третичный | нет |
| Плазмодий малярийный |  |
квартан | нет |
Наиболее экономичным, предпочтительным и надежным методом диагностики малярии является микроскопическое исследование мазков крови , поскольку каждый из четырех основных видов паразитов имеет отличительные характеристики. Традиционно используются два вида мазков крови. Тонкие пленки аналогичны обычным мазкам крови и позволяют идентифицировать вид, поскольку в этом препарате лучше всего сохраняется внешний вид паразита. Толстые пленки позволяют микроскописту проверять больший объем крови и примерно в одиннадцать раз более чувствительны, чем тонкие пленки, поэтому на толстой пленке легче выявить низкий уровень инфекции, но внешний вид паразита искажается гораздо сильнее и, следовательно, различать разные виды может быть гораздо сложнее. Принимая во внимание плюсы и минусы как толстых, так и тонких мазков, при попытке поставить окончательный диагноз необходимо использовать оба мазка. [ 5 ]
По толстой пленке опытный микроскопист может обнаружить уровень паразитов (или паразитемию ) всего лишь 5 паразитов/ мкл крови. [ 6 ] Диагностика видов может быть затруднена, поскольку ранние трофозоиты («кольцевая форма») всех четырех видов выглядят одинаково, и никогда невозможно диагностировать виды на основе одной кольцевой формы; Видовая идентификация всегда осуществляется по нескольким трофозоитам. [ нужна ссылка ]
Поскольку малярия становится менее распространенной благодаря таким мерам, как использование надкроватных сеток, важность точной диагностики возрастает. Это связано с тем, что предположение о том, что любой пациент с лихорадкой болен малярией, становится менее точным. Таким образом, проводятся значительные исследования по разработке недорогих решений для микроскопии для стран Глобального Юга . [ 7 ]
Plasmodiummalariae и P.knowlesi (который является наиболее распространенной причиной малярии в Юго-Восточной Азии ) под микроскопом выглядят очень похожими. Однако паразитемия P.knowlesi очень быстро разрастается и вызывает более тяжелое заболевание, чем P.malariae , поэтому важно быстро выявлять и лечить инфекции. современные методы, такие как ПЦР (см. «Молекулярные методы» ниже) или панели моноклональных антител , которые могут различать эти два понятия. Поэтому в этой части мира следует использовать [ 8 ]
Антигенные тесты
[ редактировать ]Для районов, где микроскопия недоступна или где сотрудники лаборатории не имеют опыта диагностики малярии, существуют коммерческие тесты на выявление антигенов, для которых требуется всего лишь капля крови. [ 9 ] Иммунохроматографические тесты (также называемые: тесты быстрой диагностики малярии , анализ захвата антигена или « щупы ») были разработаны, распространены и протестированы на местах. В этих тестах используется кровь из пальца или венозная кровь, завершенный тест занимает в общей сложности 15–20 минут, а результаты считываются визуально по наличию или отсутствию цветных полосок на щупе, поэтому они подходят для использования в полевых условиях. Порог обнаружения этими экспресс-тестами находится в диапазоне 100 паразитов/мкл крови (коммерческие наборы могут варьироваться от примерно 0,002% до 0,1% паразитемии) по сравнению с 5 при толстопленочной микроскопии. Одним из недостатков является то, что тесты с полосками являются качественными, а не количественными : они могут определить, присутствуют ли паразиты в крови, но не определяют их количество. [ нужна ссылка ]
Первые экспресс-диагностические тесты использовали Plasmodium в качестве антигена глутаматдегидрогеназу . [ 3 ] Вскоре PGluDH была заменена плазмодия лактатдегидрогеназой (pLDH). В зависимости от того, какие моноклональные антитела используются, этот тип анализа позволяет различать различные виды малярийных паразитов человека из-за антигенных различий между их изоферментами pLDH. Тесты на антитела также могут быть направлены против других малярийных антигенов, таких как HPR2, специфичный для P. falciparum . [ нужна ссылка ]
Современные экспресс-диагностические тесты на малярию часто включают комбинацию двух антигенов, таких как P. falciparum . специфический антиген, например, богатый гистидином белок II (HRP II), и либо P. vivax специфический антиген , например, LDH P. vivax , либо антиген, чувствительный ко всем видам плазмодий , которые влияют на человека, например, pLDH. Такие тесты не обладают 100%-ной чувствительностью , и там, где это возможно, следует также проводить микроскопическое исследование мазков крови. [ нужна ссылка ]
Молекулярные методы
[ редактировать ]В некоторых клинических лабораториях доступны молекулярные методы и быстрые анализы в реальном времени (например, QT-NASBA на основе полимеразной цепной реакции ). [ 4 ] разрабатываются с надеждой на возможность их применения в эндемичных районах. [ нужна ссылка ]
ПЦР (и другие молекулярные методы) более точны, чем микроскопия. Однако это дорого и требует специализированной лаборатории. Более того, уровни паразитемии не обязательно коррелируют с прогрессированием заболевания, особенно когда паразит способен прикрепляться к стенкам кровеносных сосудов. Поэтому необходимо разработать более чувствительные и низкотехнологичные диагностические инструменты для выявления низких уровней паразитемии в полевых условиях. [ 10 ]
Другой подход заключается в обнаружении побочного продукта кристаллов железа гемоглобина , который обнаружен у малярийных паразитов, питающихся эритроцитами, но не обнаружен в нормальных клетках крови. Это может быть быстрее, проще и точнее, чем любой другой метод. Исследователи из Университета Райса опубликовали доклиническое исследование своей новой технологии, которая может обнаружить даже одну зараженную малярией клетку среди миллиона нормальных клеток. [ 11 ] [ 12 ] Они утверждают, что им может управлять немедицинский персонал, он не дает ложноположительных показаний и не требует использования иглы или каких-либо повреждений.
Гипер- и ошибочный диагноз
[ редактировать ]Многочисленные недавние исследования документально подтвердили, что гипердиагностика малярии является постоянной проблемой во всем мире, но особенно в африканских странах. [ 13 ] [ 14 ] Гипердиагностика приводит к завышению фактических показателей заболеваемости малярией, зарегистрированных на местном и национальном уровнях. [ 15 ] Медицинские учреждения, как правило, чрезмерно диагностируют малярию у пациентов с такими симптомами, как лихорадка, из-за традиционных представлений, таких как «любая лихорадка эквивалентна малярии». [ 15 ] и проблемы, связанные с лабораторными исследованиями (например, высокий уровень ложноположительных диагнозов, поставленных неквалифицированным персоналом). [ 16 ] ). Гипердиагностика малярии приводит к недостаточному лечению других состояний, вызывающих лихорадку, и чрезмерному назначению противомалярийных препаратов. [ 17 ] [ 15 ] и преувеличенное восприятие высокой эндемичности малярии в регионах, которые больше не являются эндемичными по этой инфекции. [ 15 ]
Субъективный диагноз
[ редактировать ]Районы, которые не могут позволить себе лабораторные диагностические тесты, часто используют только субъективную лихорадку в анамнезе в качестве показания к лечению малярии. Одно исследование с использованием мазков крови детей в Малави, окрашенных по Гимзе, показало, что, когда в качестве показаний к лечению использовались клинические предикторы (ректальная температура, бледность ногтевого ложа и спленомегалия), а не только история субъективных лихорадок, правильный диагноз увеличивался с 2 % до 41% случаев, а ненужное лечение малярии значительно сократилось. [ 10 ]
Дифференциал
[ редактировать ]лихорадку и септический шок обычно ошибочно принимают за тяжелую малярию В Африке , что приводит к невозможности лечения других опасных для жизни заболеваний. В эндемичных по малярии районах паразитемия не гарантирует диагноз тяжелой малярии, поскольку паразитемия может быть случайной при других сопутствующих заболеваниях. Недавние исследования показывают, что малярийная ретинопатия от немалярийной лучше (коллективная чувствительность 95% и специфичность 90%), чем любой другой клинический или лабораторный признак, позволяет отличить малярийную кому . [ 18 ]
Количественная желтая окраска
[ редактировать ]Количественный лейкоцит (QBC) — это лабораторный тест для выявления заражения малярией или другими паразитами крови. Кровь берут в капиллярную трубку QBC, покрытую акридиновым оранжевым (флуоресцентным красителем), и центрифугируют; затем флуоресцирующие паразиты можно наблюдать в ультрафиолетовом свете на границе между эритроцитами и лейкоцитной пленкой. Этот тест более чувствителен, чем обычный толстый мазок, однако он ненадежен для дифференциальной диагностики видов паразитов. [ 19 ]
В случаях чрезвычайно низкого количества лейкоцитов может быть сложно вручную провести дифференциальный анализ различных типов лейкоцитов, а автоматический дифференциальный анализ может оказаться практически невозможным. В таких случаях медицинский технолог может получить лейкоцитную пленку, из которой делают мазок крови. Этот мазок содержит гораздо большее количество лейкоцитов, чем цельная кровь. [ нужна ссылка ]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Крафтс К., Хемпельманн Э., Олексин Б. (2011). «Пурпурный цвет: от королевской власти к лаборатории, с извинениями перед Малаховским». Биотех Гистохим . 86 (1): 7–35. дои : 10.3109/10520295.2010.515490 . ПМИД 21235291 . S2CID 19829220 .
- ^ Сазерленд CJ, Халлетт Р. (2009). «Обнаружение малярийных паразитов вне крови» . J Заразить Дис . 199 (11): 1561–3. дои : 10.1086/598857 . ПМИД 19432543 .
- ^ Перейти обратно: а б Линг ИТ; Куксли С.; Бейтс, Пенсильвания; Хемпельманн Э.; Уилсон РДЖМ (1986). «Антитела к глутаматдегидрогеназе Plasmodium falciparum » (PDF) . Паразитология . 92 (2): 313–24. дои : 10.1017/S0031182000064088 . ПМИД 3086819 . S2CID 16953840 .
- ^ Перейти обратно: а б Мужской ПФ; Шуне Дж.Дж.; Кагер П.А.; Шаллиг HDFH (2006). «Обнаружение и идентификация видов человеческого плазмодия с помощью количественной амплификации на основе последовательностей нуклеиновых кислот в реальном времени» . Журнал малярии . 5 (80): 80. дои : 10.1186/1475-2875-5-80 . ПМК 1592503 . ПМИД 17018138 .
- ^ Уорхерст, округ Колумбия, Уильямс Дж. Э. (1996). «Лабораторная диагностика малярии» . Дж. Клин Патол . 49 (7): 533–8. дои : 10.1136/jcp.49.7.533 . ПМК 500564 . ПМИД 8813948 .
- ^ Ричард Л. Геррант; Дэвид Х. Уокер; Питер Ф. Веллер (2006). Тропические инфекционные болезни: принципы, возбудители и практика . Эльзевир Черчилль Ливингстон. ISBN 978-0-443-06668-9 . Проверено 22 июня 2011 г.
- ^ Боуден А.К., Дурр Нью-Джерси, Эриксон Д., Озджан А., Рамануджам Н., Жак П.В. (2020). «Оптические технологии для улучшения здравоохранения в условиях ограниченности ресурсов: введение в проблему функций» . Биомедицинская оптика Экспресс . 11 (6): 3091–3094. дои : 10.1364/BOE.397698 . ПМК 7316015 . ПМИД 32637243 .
- ^ Маккатчан, Томас Ф.; Пайпер, Роберт С.; Маклер, Майкл Т. (ноябрь 2008 г.). «Использование экспресс-теста для диагностики малярии для выявления Plasmodium Knowlesi инфекции » . Новые инфекционные заболевания . 14 (11): 1750–2. дои : 10.3201/eid1411.080840 . ПМЦ 2630758 . ПМИД 18976561 .
- ^ Паттанасин С., Пру С., Чомпасук Д., Лувирадай К., Жакье П., Луарисуван С., Ностен Ф. (2003). «Оценка нового анализа лактатдегидрогеназы Plasmodium (OptiMAL-IT) для выявления малярии». Transact Royal Soc Trop Med . 97 (6): 672–4. дои : 10.1016/S0035-9203(03)80100-1 . ПМИД 16117960 .
- ^ Перейти обратно: а б Редд С., Казембе П., Луби С., Нваньянву О., Хайтауэр А., Зиба С., Вирима Дж., Чицуло Л., Франко С., Оливар М. (2006). «Клинический алгоритм лечения малярии Plasmodium falciparum у детей» . Ланцет . 347 (8996): 223–7. дои : 10.1016/S0140-6736(96)90404-3 . ПМИД 8551881 . S2CID 10931276 .
- ^ « Нанопузырьки пара быстро обнаруживают малярию через кожу. Архивировано 8 января 2014 г. в Wayback Machine », news.rice.edu.
- ^ «Нанопузырьки пара, генерируемые гемозоином, для чрескожного и безыгольного обнаружения малярии с реагентами», Екатерина Ю.Л. и др . DOI: 10.1073/pnas.1316253111
- ^ Гай, Риа Р.; Тербер, Мэри И.; Эль-Бакри, Азза; Чепмен, Колин А.; Голдберг, Тони Л. (07 сентября 2016 г.). «Многометодная оценка пациентов с лихорадочными заболеваниями выявила чрезмерную диагностику малярии в сельской местности Уганды» . Журнал малярии . 15 (1): 460. doi : 10.1186/s12936-016-1502-4 . ISSN 1475-2875 . ПМК 5015337 . ПМИД 27604542 .
- ^ Рейберн, Хью; Мбатия, Редемпта; Дрейкли, Крис; Карнейро, Илона; Мвакасунгула, Эммануэль; Мверинде, Омбени; Саганда, Капалала; Шао, Джон; Китуа, Эндрю (20 ноября 2004 г.). «Гипердиагностика малярии у пациентов с тяжелой лихорадкой в Танзании: проспективное исследование» . BMJ (Клинические исследования под ред.) . 329 (7476): 1212. doi : 10.1136/bmj.38251.658229.55 . ISSN 1756-1833 . ПМК 529364 . ПМИД 15542534 .
- ^ Перейти обратно: а б с д Мванзива, Чарльз; Шекалаге, Сейф; Ндаро, Арнольд; Менгеринк, Бьянка; Мегиру, Саймон; Моша, Фрэнк; Зауэрвейн, Роберт; Дрейкли, Крис; Гослинг, Роли (5 ноября 2008 г.). «Чрезмерное использование комбинированной терапии артемизинином в Мто ва Мбу (река комаров), районе, ошибочно интерпретируемом как высокоэндемичный по малярии» . Журнал малярии . 7 : 232. дои : 10.1186/1475-2875-7-232 . ISSN 1475-2875 . ПМК 2588630 . ПМИД 18986520 .
- ^ Егоров, Сергей; Галиванго, Рональд М.; Брат Алоизиус; Муванга, Моисей; Направь себя, Ирэн; Зеркало, Джордж; Драджоле, Дэвид А.; Каин, Кевин С.; Киванука, Ной (14 ноября 2016 г.). «Низкая распространенность лабораторно подтвержденной малярии среди клинически диагностированных взрослых женщин из района Вакисо в Уганде» . Журнал малярии . 15 (1): 555. doi : 10.1186/s12936-016-1604-z . ISSN 1475-2875 . ПМК 5109652 . ПМИД 27842555 .
- ^ Соломон, Кристофер А.; Сакарлал, Джахит; Чилундо, Бальтазар; Гудо, Эдвард Само (01 декабря 2015 г.). «Практика назначения лекарств от малярии в Мозамбике: плохое соблюдение национальных протоколов лечения малярии в 22 государственных медицинских учреждениях» . Журнал малярии . 14 : 483. дои : 10.1186/s12936-015-0996-5 . ISSN 1475-2875 . ПМК 4667420 . ПМИД 26628068 .
- ^ Беар Н.А., Тейлор Т.Е., Хардинг С.П., Леваллен С., Молинье М.Э. (ноябрь 2006 г.). «Малярийная ретинопатия: недавно установленный диагностический признак тяжелой малярии» . Являюсь. Ж. Троп. Мед. Хиг . 75 (5): 790–7. дои : 10.4269/ajtmh.2006.75.790 . ПМК 2367432 . ПМИД 17123967 .
- ^ Adeoye GO, Nga IC (декабрь 2007 г.). «Сравнение метода количественной лейкоцитной пленки (QBC) с толстой пленкой, окрашенной по Гимзе (GTF), для диагностики малярии». Паразитол. Межд . 56 (4): 308–12. дои : 10.1016/j.parint.2007.06.007 . ПМИД 17683979 .
