Анализ секреции

Анализ секреции — это процесс, используемый в клеточной биологии для идентификации клеток, секретирующих определенный белок (обычно цитокин ). Впервые он был разработан Манцем и др. в 1995 году.

Обычно клетку, секретирующую интересующий белок, изолируют с помощью комплекса антитело-антитело, который покрывает клетку и способен «улавливать» секретируемые молекулы. Затем клетка обнаруживается другим флуорохромом меченным антителом, , и впоследствии извлекается с помощью процесса, называемого сортировкой клеток, активируемых флуоресценцией (FACS). Метод FACS во многом аналогичен формату антител иммуноферментного анализа ( ELISA ), за исключением того, что инкапсулированные клетки остаются интактными. Это выгодно, поскольку клетки все еще живы после экстракции.

Дальнейшие достижения теперь означают, что можно извлекать секретирующие клетки с помощью магнитной системы разделения или проточного цитометра .

Существует ряд коммерческих применений для анализа секреции. Одним из таких примеров является технология Gel Microdrop (GMD), разработанная компанией One Cell Systems . One Cell утверждает, что GMD обычно восстанавливает большее количество жизнеспособных секретирующих клеток, чем другие методы, игнорируя при этом любые клетки, которые не секретируют желаемый белок.

Ссылки

• Манц, Рудольф; и др. (март 1995 г.). «Анализ и сортировка живых клеток по секретируемым молекулам, перемещенным в матрицу сродства клеточной поверхности» . Труды Национальной академии наук . 92 (6): 1921–1925. Бибкод : 1995ПНАС...92.1921М . дои : 10.1073/пнас.92.6.1921 . ПМК   42394 . ПМИД   7892200 .

Дальнейшее чтение

• Цуркану, Виктор; Уильямс, Нил А. (2001). «Идентификация и изоляция клеток на основе секреции цитокинов: новый инструмент для исследования иммунных ответов». Природная медицина . 7 (3): 373–376. дои : 10.1038/85533 . ПМИД   11231640 . S2CID   837840 .

Внешние ссылки

• Одноклеточные системы – технология анализа секреции гелевых микрокапель (GMD).