KHYG-1
KHYG-1 представляет собой иммортализованную клеточную линию , имеющую характеристики NK-клеток . NK-клетки — это тип иммунных клеток , обнаруженных в крови, чья врожденная функция заключается в уничтожении инфицированных вирусом клеток, клеток, находящихся в состоянии стресса, и раковых клеток . Линия клеток KHYG-1 была создана в 1997 году в лаборатории М. Ягиты в отделении клинической иммунологии и гематологии Медицинского научно-исследовательского института Тазуке-Кофукай больницы Китано , Осака , Япония . [ 1 ] Эти клетки были получены из крови 45-летней женщины, страдающей агрессивным лимфобластным лейкозом/лимфомой естественных киллеров . Эта линия клеток непрерывно растет в присутствии IL-2 в течение 18 месяцев после выделения, а время ее удвоения составляет около 24-48 часов. [ 1 ] Способность к размножению сохранялась даже после криоконсервации в жидком азоте . [ 1 ]
Фенотип и функция
[ редактировать ]Клетки KHYG-1 имеют морфологию, аналогичную лейкемическим клеткам , с большим ядром , грубым хроматином , заметными ядрышками и обильной цитоплазмой с большим количеством гранул . Они также имеют иммунофенотип , аналогичный клеткам первичного лейкоза ( CD2 + , sCD3 - , CD7 + , CD8 + , CD56 + и HLA-DR + ) и они несут одну и ту же точечную мутацию в экзоне 7 гена TP53 (p53) с той разницей, что у них отсутствуют CD57 и CD1 , но экспрессируются CD33 . В том же случае, что и линия клеток NK-92, эти клетки не экспрессируют CD16 и, следовательно, не способны осуществлять антителозависимую клеточную цитотоксичность (ADCC) и поэтому убивают свои мишени в основном за счет секреции литических гранул , которые содержат порообразующий белок перфорин и апоптоз. индуцируя белки гранулизин и гранзим . Клетки KHYG-1 проявляют превосходную цитотоксическую активность против клеток K562 , которые представляют собой иммортализованную клеточную линию миелогенного лейкоза , обычно используемую в качестве мишени для NK-клеток . [ 1 ] Клетки KHYG-1 экспрессируют активирующие рецепторы NKp44 и NKG2D . Экспрессия этих рецепторов вместе с конститутивно высоким уровнем экспрессии гранзима М , экспрессия которого ограничена в первичных NK-клетках , и полностью процессированным расщепленным перфорином в их гранулах считается причиной повышенной цитотоксичности клеточной линии KHYG-1. [ 2 ] Они также способны секретировать цитокины, такие как IFNγ и TNFα , которые впоследствии могут стимулировать другие иммунные клетки и вызывать иммунную реакцию . [ 1 ] Эти свойства клеток KHYG-1 вместе с их способностью сохранять свои функции после облучения делают их интересной клеточной линией в качестве модели для изучения механизма NK-клеток лейкемогенеза и в качестве потенциальной эффекторной клетки в NK-клетками опосредованной иммунотерапии рака, . [ 3 ]
Клиническая значимость
[ редактировать ]В последние годы проводились исследования, пытающиеся использовать клетки KHYG-1 в качестве потенциальной «готовой» терапии , в основном с целью их генетической инженерии для распознавания и уничтожения конкретных видов рака человека путем экспрессии химерных антигенных рецепторов (CAR) . CAR-T-клетки были признаны многообещающим агентом в лечении иммуноонкологических заболеваний, поскольку было показано, что инфузия этих клеток вызывает ремиссии у некоторых пациентов с острыми и хроническими лейкозами и лимфомами . Однако терапия CAR-T-клетками сопряжена с опасностью возникновения синдрома высвобождения цитокинов , а их производство дорогое и должно быть персонализировано для каждого пациента. [ 4 ] Итак, несколько исследовательских групп исследовали возможность использования клеток CAR-NK , которые могли бы преодолеть некоторые трудности, связанные с клетками CAR-T . Арвен Стиквоот исследовала возможность использования линии клеток KHYG-1 и создания CAR CD38 в клетках KHYG-1 в качестве варианта терапии для лечения множественной миеломы . [ 5 ] Цутому Наказава создал клетки KHYG-1 со специфичным для EGFRvIII CAR, который ингибировал рост клеток глиобластомы in vitro посредством апоптоза . [ 6 ] Роос Винкен и Ана Руис-Саенс создали протокол для создания клеточной линии KHYG-1, стабильно экспрессирующей FCγRIIIa (CD16) и, таким образом, способной к антителозависимой клеточной цитотоксичности . [ 7 ] По состоянию на январь 2024 г. [update]Клетки KHYG-1 еще не использовались ни в одном клиническом исследовании, в отличие от клеток NK-92.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Jump up to: а б с д и Ягита, М.; Хуанг, CL; Умехара, Х.; Мацуо, Ю.; Табата, Р.; Мияке, М.; Конака, Ю.; Такацуки, К. (май 2000 г.). «Новая линия естественных клеток-киллеров (KHYG-1) от пациента с агрессивным лейкозом естественных киллеров, несущего точечную мутацию р53» . Лейкемия . 14 (5): 922–930. дои : 10.1038/sj.leu.2401769 . ISSN 1476-5551 . ПМИД 10803526 . S2CID 22938275 .
- ^ Соси, Гранат; Бранч, Дональд Р.; Смит, Марк Дж.; Миллер, Ричард Г.; Вергидис, Джоанна; Фахим, Соад; Китинг, Арманд (октябрь 2005 г.). «KHYG-1, модель для изучения повышенной цитотоксичности естественных киллеров» . Экспериментальная гематология . 33 (10): 1160–1171. дои : 10.1016/j.exphem.2005.06.024 . ISSN 0301-472X . ПМИД 16219538 .
- ^ Сосать, Г.; Филиал, ДР; Китинг, А. (январь 2006 г.). «Облученный KHYG-1 сохраняет цитотоксичность: потенциал для адоптивной иммунотерапии с использованием линии естественных клеток-киллеров» . Международный журнал радиационной биологии . 82 (5): 355–361. дои : 10.1080/09553000600649653 . ISSN 0955-3002 . ПМИД 16782653 . S2CID 30502987 .
- ^ Циммер, Жак; Юришич, Владимир (январь 2023 г.). «Специальный выпуск «Новые разработки в области естественных клеток-киллеров для иммунотерапии» » . Клетки . 12 (11): 1496. doi : 10.3390/cells12111496 . ISSN 2073-4409 . ПМЦ 10252853 . ПМИД 37296617 .
- ^ Стикворт, Арвен; ван дер Шанс, Йорт; Саркар, Субхашис; Поулс, Рене; Райдер, Рууд; Наик, Джиоти; Юань, Хуэйпин; де Брёйн, Йост Д.; ван де Донк, Нильс WCJ; Цвегман, Соня; Темели, Мария; Грин, Ричард; О'Дуайер, Майкл; Мутис, Тунец (июль 2021 г.). «CD38-специфичный химерный антигенный рецептор, экспрессирующий естественные клетки-киллеры KHYG-1: подтверждение концепции готовой к использованию терапии множественной миеломы» . Гемасфера . 5 (7): е596. дои : 10.1097/HS9.0000000000000596 . ISSN 2572-9241 . ПМЦ 8196092 . ПМИД 34131635 .
- ^ Накадзава, Цутому; Нацуме, Нисимура, Моримото, Рёсуке; Ямада, Накагава, Ичиро; Вакабаяси, Тошихико, Накасе, Хироюки; (01.06.2020). для EGFRvIII CAR вызывают признаки псевдопрогрессии в подкожных опухолях, происходящих из глиобластомоподобных клеток» 40 « . ( 6): 3231–3237 Клетки KHYG-1 со специфичным . /anticanres.14304 . ISSN 0250-7005 . ПМИД 32487617 .
- ^ Винкен, Роос; Руис-Саенс, Ана (16 июня 2023 г.). «Модельная система совместной культуры для количественной оценки антителозависимой клеточной цитотоксичности в клетках рака молочной железы человека с использованием сконструированной линии естественных клеток-киллеров» . STAR-протоколы . 4 (2): 102224. doi : 10.1016/j.xpro.2023.102224 . ISSN 2666-1667 . ПМЦ 10323021 . ПМИД 37071532 .