Jump to content

Пятно Романовского

(Перенаправлено из Пятен Романовского )
Мазок крови с пятном по Гимзе . Моноциты окружены эритроцитами .

Окрашивание по Романовскому — это прототип метода окрашивания , который был предшественником нескольких различных, но похожих окрасок, широко используемых в гематологии (изучение крови) и цитопатологии (изучение больных клеток). Окраска типа Романовского используется для дифференциации клеток при микроскопическом исследовании в патологических образцах, особенно в пленках крови и костного мозга . [ 1 ] и для обнаружения паразитов, таких как малярия, в крови. [ 2 ] [ 3 ] [ 4 ] [ 5 ]

Техника окрашивания названа в честь русского врача Дмитрия Леонидовича Романовского (1861–1921), который одним из первых осознал ее потенциал для использования в качестве пятна крови. [ 6 ]

Пятна, родственные или производные от пятен типа Романовского, включают пятна Гимзы , Дженнера , Райта , Филда , Мэй-Грюнвальда , Паппенгейма и Лейшмана . Они различаются протоколами и добавками, и на практике их названия часто путают друг с другом.

Механизм

[ редактировать ]

Ценность окрашивания по Романовскому заключается в его способности создавать широкий спектр оттенков, что позволяет легко дифференцировать клеточные компоненты. Это явление называется эффектом Романовского или, в более общем смысле, метахромазией . [ 7 ]

Эозиновая часть окраски отвечает за розово-оранжевый оттенок эритроцитов и гранул внутри цитоплазмы эозинофильных лейкоцитов .

Эффект Романовского

[ редактировать ]
На пленке крови , окрашенной препаратом Гимза, виден плазмодий (в центре изображения), паразит, вызывающий малярийные инфекции.

В 1891 году Романовский [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ] разработал краситель, используя смесь эозина (обычно эозина Y ) и выдержанных растворов метиленового синего , который образовывал оттенки, не связанные только с компонентами окрашивания: характерные оттенки фиолетового цвета в хроматине клеточного ядра и внутри гранул в цитоплазме некоторых лейкоцитов . Это стало известно как эффект Романовского. [ 11 ] [ 12 ] [ 6 ] [ 13 ] [ 4 ] Эозин и чистый метиленовый синий по отдельности (или в комбинации) не вызывают эффекта Романовского. [ 13 ] [ 4 ] а активными красителями, вызывающими такой эффект, теперь считаются азура Б и эозин. [ 14 ] [ 3 ] [ 13 ]

Полихромный метиленовый синий

[ редактировать ]

Пятна типа Романовского могут быть изготовлены либо из комбинации чистых красителей, либо из метиленового синего, подвергшегося окислительному деметилированию , что приводит к расщеплению метиленового синего на множество других пятен, некоторые из которых необходимы для создания эффекта Романовского. . [ 15 ] [ 4 ] Метиленовый синий, подвергшийся этому окислительному процессу, известен как «полихромированный метиленовый синий». [ 15 ] [ 4 ] Полихромированный метиленовый синий может содержать до 11 красителей, включая метиленовый синий , лазурь А , лазурь Б, лазурь С, тионин , метиленвиолет Бернтезена, метилтионолин и тионолин. [ 4 ] Точный состав полихромного метиленового синего зависит от используемого метода, и даже партии красителя одного и того же производителя могут различаться по составу. [ 15 ]

Распространенный метод быстрого окисления предполагает повышение pH раствора с помощью карбоната калия воздуха и его кипячение, при котором вводится кислород . [ 16 ] Использовались и другие методы, такие как окисление в кислой среде дихромат-анионом .

Хотя было показано, что азур B и эозин являются необходимыми компонентами для создания эффекта Романовского, [ 14 ] [ 3 ] [ 13 ] эти красители в чистом виде не всегда использовались при составлении красящих растворов. [ 4 ] Первоначальными источниками азуры Б (одного из продуктов окисления метиленового синего) были растворы полихромного метиленового синего, которые обрабатывались окислителями или подвергались естественному старению, как в случае Романовского. [ 3 ] [ 13 ] Эрнст Малаховский в 1891 году был первым, кто намеренно использовал полихромный метиленовый синий для окрашивания по типу Романовского. [ 15 ] [ 17 ]

Пятно Райта

[ редактировать ]

Краситель Райта можно использовать отдельно или в сочетании с красителем Гимзы, известным как пятно Райта-Гимзы. [ 1 ] Пятно Райта названо в честь Джеймса Гомера Райта, который в 1902 г. [ 18 ] опубликовали метод получения полихромного метиленового синего с использованием тепла, который сочетается с эозином Y. [ 19 ] [ 20 ] [ 21 ] [ 1 ] Полихромированный метиленовый синий смешивают с эозином и дают ему выпасть в осадок, образуя эозинат, который повторно растворяют в метаноле . [ 4 ] Добавление Гимзы к краске Райта увеличивает яркость «красновато-фиолетовой» окраски цитоплазматических гранул. [ 1 ] [ 21 ] Красители Райта и Райта-Гимзы — это два красителя типа Романовского, широко используемые в Соединенных Штатах и ​​в основном используемые для окрашивания пленок крови и костного мозга. [ 21 ] [ 1 ]

пятно Дженнера

[ редактировать ]

Краситель Дженнера используется в микроскопии для окраски мазков крови . Окраска темно-синего цвета, в результате чего образуется хорошо заметное четко окрашенное ядро.

Пятно по Гимзе

[ редактировать ]

Краситель Гимзы состоит из «Azure II» и эозина Y с метанолом и глицерином в качестве растворителя. [ 15 ] Считается, что «Лазурь II» представляет собой смесь лазури B (которую Гимза назвал «лазурью I») и метиленового синего, хотя точный состав «лазури I» считается коммерческой тайной. [ 4 ] [ 15 ] Сопоставимые составы с использованием известных красителей опубликованы и коммерчески доступны. Окраска по Гимзе считается стандартной краской для обнаружения и идентификации малярийного паразита. [ 5 ]

Майское пятно Грюнвальда

[ редактировать ]

Аппарат Май-Грюнвальда-Гимзы используется для окрашивания предметных стекол, полученных тонкоигольной аспирацией в гистопатологической лаборатории, для диагностики опухолевых клеток.

Пятно по Паппенгейму

[ редактировать ]

Этот метод представляет собой комбинацию окраски по Май-Грюнвальду и Гимзе.

Пятно Лейшмана

[ редактировать ]

В 1901 году Уильям Лейшман [ 22 ] разработал пятно, похожее на пятно Луи Дженнера, но с заменой чистого метиленового синего полихромным метиленовым синим. [ 19 ] [ 15 ] [ 4 ] Краситель Лейшмана готовят из эозината полихромного метиленового синего и эозина Y с использованием метанола в качестве растворителя. [ 4 ]

Пятно Филда

[ редактировать ]

Полевая окраска используется для окрашивания толстых мазков крови с целью обнаружения малярийных паразитов.

Клиническое значение

[ редактировать ]

Патологии крови и костного мозга

[ редактировать ]
Образец бронхоальвеолярного лаважа , окрашенный Diff-Quik , коммерческим вариантом окраски Романовского, широко используемым в цитопатологии.

Окраски типа Романовского широко применяются при исследовании крови, в виде мазков крови , при микроскопическом костного мозга исследовании биоптатов и мазков-аспиратов. [ 1 ] [ 23 ] Исследование крови и костного мозга может иметь значение в диагностике различных заболеваний крови. [ 1 ] [ 23 ] В США широко используются варианты окраски типа Романовского по Райту и Райту-Гимзе. [ 1 ] в то время как в Европе обычно используется окраска по Гимзе. [ 1 ]

Обнаружение малярии и других паразитов

[ редактировать ]

Из окрасок типа Романовского окраска Гимзы особенно важна для обнаружения и идентификации малярийных паразитов в образцах крови . [ 5 ] [ 15 ] Тесты на выявление малярийного антигена являются альтернативой окрашиванию и микроскопическому исследованию мазков крови для выявления малярии. [ 5 ]

Использование в цитопатологии

[ редактировать ]

Окраски типа Романовского также используются для окрашивания цитопатологических образцов, например, полученных из тонкоигольных аспиратов и спинномозговой жидкости из люмбальных пункций . [ 24 ]

Dmitri Leonidovich Romanowsky (1861-1921)

Хотя существуют споры о том, кто заслуживает похвалы за этот общий метод окрашивания, популярное мнение приписывает его Дмитрию Леонидовичу Романовскому . [ 14 ] [ 17 ] [ 19 ]

В 1870-х годах Пауль Эрлих использовал смесь кислотных и основных красителей, включая кислый фуксин (кислотный краситель) и метиленовый синий (основной краситель), для исследования мазков крови. [ 25 ] [ 26 ] [ 27 ] [ 28 ] [ 17 ] В 1888 году Чеслав Иванович Чензинский использовал метиленовый синий, но заменил кислый фуксин, использованный Эрлихом, на эозин. [ 14 ] [ 27 ] [ 28 ] Комбинация красителей Чензинского смогла окрасить малярийного паразита (представителя рода Plasmodium ). [ 28 ] [ 19 ] Ни окраска Эрлиха, ни Хензинского не давала эффекта Романовского, поскольку используемый ими метиленовый синий не был полихромным. [ 17 ]

Дмитрий Романовский в 1890 году опубликовал предварительные результаты своего пятна крови (комбинации выдержанного метиленового синего и эозина), включая результаты при нанесении на кровь, зараженную малярией. [ 6 ] Такое использование полихромного метиленового синего отличало окраску Романовского (и последующие составы) от окраски Эрлиха и Хензинского, в которой отсутствовал фиолетовый оттенок, связанный с эффектом Романовского. [ 17 ] Публикация Романовского 1890 года не включала описания того, как он модифицировал раствор метиленового синего. [ 6 ] [ 17 ] но в своей докторской диссертации 1891 года он лучше всего описал метиленовый синий, используемый после того, как на поверхности начала образовываться плесень. [ 6 ] [ 17 ] За исключением использования выдержанного раствора метиленового синего, окраска Романовского была основана на технике окрашивания Чензинского. [ 17 ] Использование Романовским своего метода для изучения малярийных паразитов объясняется постоянным интересом к его методу окрашивания. [ 26 ]

Эрнст Малаховский

Эрнсту Малаховскому приписывают независимое наблюдение той же комбинации пятен, что и Дмитрию Романовскому, в 1891 году. [ 6 ] [ 13 ] хотя ему также приписывают то, что он был первым, кто сделал это. [ 17 ] [ 19 ] Малаховский был первым, кто использовал сознательно полихромированный раствор метиленового синего. [ 15 ] чего Малаховский достиг, добавив буру . в красящую смесь [ 17 ] Сообщается, что Малаховский продемонстрировал пятно 15 июня 1890 года и в том же году опубликовал статью, «описывающую его публичную демонстрацию». [ 19 ] и Малаховского смогли окрасить ядро ​​и цитоплазму малярийного паразита И методы Романовского , , тогда как до этого момента используемые красители окрашивали только цитоплазму. [ 19 ]

Густав Гимза

В 1899 году Луи Леопольд Дженнер разработал более стабильную версию окраски метиленовым синим и эозином, собирая осадок , образующийся в смесях на водной основе, и повторно растворяя его в метаноле . [ 28 ] [ 15 ] [ 4 ] Красители типа Романовского, приготовленные из собранных осадков, иногда называют эозинатами . [ 4 ] Помимо увеличения стабильности окраски, использование метанола при Дженнера фиксировало окраске образцы крови. [ 4 ] хотя версия пятна Дженнер не дает эффекта Романовского. [ 28 ] [ 19 ] [ 15 ]

Ричард Мэй и Людвиг Грюнвальд в 1892 году опубликовали версию пятна (теперь известную как пятно Мэя-Грюнвальда ), которая аналогична версии, предложенной Дженнером в 1899 году, и также не вызывает эффекта Романовского. [ 28 ] [ 19 ] [ 15 ]

В 1901 году Карл Рейтер и Уильям Лейшман [ 22 ] разработали пятна, в которых сочеталось использование спирта Луи Дженнером в качестве растворителя и использование Малаховским полихромного метиленового синего. [ 19 ] [ 15 ] [ 4 ] Окраска Рейтера отличалась от окраски Дженнера использованием этилового спирта вместо метанола, а окраска Лейшмана отличалась от окраски Дженнера использованием эозина B вместо эозина Y. [ 19 ] [ 4 ]

Джеймс Гомер Райт в 1902 году опубликовал [ 18 ] метод с использованием тепла для полихромирования метиленового синего, который он объединил с эозином Y. Этот метод известен как пятно Райта . [ 19 ] [ 20 ]

Имя Густава Гимзы также стало ассоциироваться с пятном, поскольку ему приписывают публикацию полезной формулировки и протокола в 1902 году. [ 13 ] [ 6 ] [ 26 ] Гимза попытался использовать комбинации чистых красителей, а не растворы полихромного метиленового синего, состав которых сильно варьируется. [ 20 ] [ 19 ] [ 15 ] Гимза продал права на производство своего пятна, но так и не опубликовал подробностей о том, как он его произвел. [ 19 ] хотя считается, что он использовал комбинацию азура Б и метиленового синего. [ 15 ] Гимза опубликовал ряд модификаций своих пятен между 1902 и 1934 годами. В 1904 году [ 29 ] он предложил добавить в пятно глицерин вместе с метанолом, чтобы повысить его стабильность. [ 23 ] [ 19 ]

Порошки-красители Гимзы, производимые в Германии, широко использовались в Соединенных Штатах до прекращения поставок во время Первой мировой войны , что привело к более широкому использованию метода Джеймса Гомера Райта для полихромирования метиленового синего. [ 19 ] [ 1 ]

См. также

[ редактировать ]
  1. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж Тейл, Карл С. (2012). «Обработка костного мозга и нормальная морфология». Лабораторная гематологическая практика . стр. 279–299. дои : 10.1002/9781444398595.ch22 . ISBN  9781444398595 .
  2. ^ Бейн, Барбара Дж.; Бейтс, Имельда; Лаффан, Майк А. (11 августа 2016 г.). «Глава 4: Методы приготовления и окрашивания пленок крови и костного мозга». Практическая гематология Дэйси и Льюиса (12-е изд.). Elsevier Науки о здоровье. ISBN  978-0-7020-6925-3 .
  3. ^ Jump up to: а б с д Хоробин, Р.В. (2011). «Как работают пятна Романовского и почему они остаются ценными, включая предлагаемый универсальный механизм окрашивания Романовского и рациональную схему устранения неполадок». Биотехника и гистохимия . 86 (1): 36–51. дои : 10.3109/10520295.2010.515491 . ISSN   1052-0295 . ПМИД   21235292 . S2CID   207513741 .
  4. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п Маршалл, ПН (1978). «Окраски типа Романовского в гематологии». Гистохимический журнал . 10 (1): 1–29. дои : 10.1007/BF01003411 . ПМИД   74370 . S2CID   37939306 .
  5. ^ Jump up to: а б с д Ли, Цигуй; Вейна, Питер Дж.; Миллер, Р. Скотт (2012). «Анализ малярии». Лабораторная гематологическая практика . стр. 626–637. дои : 10.1002/9781444398595.ch48 . ISBN  9781444398595 .
  6. ^ Jump up to: а б с д и ж г Безруков, А.В. (2017). «Окрашивание Романовского, эффект Романовского и мысли по вопросу о научном приоритете». Биотехника и гистохимия . 92 (1): 29–35. дои : 10.1080/10520295.2016.1250285 . ISSN   1052-0295 . ПМИД   28098484 . S2CID   37401579 .
  7. ^ Рибатти, Доменико (2018). «Окрашивание тучных клеток: исторический обзор» . Международный архив аллергии и иммунологии . 176 (1): 55–60. дои : 10.1159/000487538 . hdl : 11586/227987 . ISSN   1018-2438 . ПМИД   29597213 .
  8. ^ Романовскiй Д.Л. (1890). "Къ вопросу о строенiи чужеядныхъ малярiи". Врачъ . 52 : 1171–1173.
  9. ^ Романовскiй Д.Л. Къ вопросу о паразитологіи и терапiи болотной лихорадки. Диссертацiя на степень доктора медицины. Спб. 1891 г., 118 с.
  10. ^ Романовский Д (1891). «К вопросу паразитологии и терапии малярии». Санкт-Петербургский медицинский еженедельник . 16 : 297–302, 307–315.
  11. ^ Хоробин Р.В., Уолтер К.Дж. (1987). «Понимание окрашивания Романовского. I: Эффект Романовского-Гимзы в мазках крови» . Гистохимия . 86 (3): 331–336. дои : 10.1007/bf00490267 . ПМИД   2437082 . S2CID   25723230 .
  12. ^ Воронцов-Дашков К.К. (2002). «Пятно Райта-Гимзы. Тайны раскрыты» . Клин Лаб Мед . 22 (1): 15–23. дои : 10.1016/S0272-2712(03)00065-9 . ПМИД   11933573 .
  13. ^ Jump up to: а б с д и ж г Виттекинд, Д.Х. (1983). «О природе окрашивания Романовского-Гимаза и его значении для цитохимии и гистохимии: общий взгляд». Гистохимический журнал . 15 (10): 1029–1047. дои : 10.1007/BF01002498 . ISSN   0018-2214 . ПМИД   6196323 . S2CID   23896062 .
  14. ^ Jump up to: а б с д Кукси, CJ (2017). «Особенности номенклатуры красителей. 8. Метиленовый синий, лазурный и фиолетовый». Биотехника и гистохимия . 92 (5): 347–356. дои : 10.1080/10520295.2017.1315775 . ISSN   1052-0295 . ПМИД   28598697 . S2CID   46746062 .
  15. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к л м н тот Лилли, Ральф Дугалл (1977). Биологические пятна HJ Conn (9-е изд.). Балтимор: Уильямс и Уилкинс. стр. 692с.
  16. ^ Гудпасчер, EW (1917). «Кислый раствор полихрома-метиленового синего для обычного и специального окрашивания» . Журнал Американской медицинской ассоциации . LXIX (12): 998. doi : 10.1001/jama.1917.25910390002016c . Проверено 16 января 2024 г.
  17. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж Лилли, РД (1978). «Романовский-Малаховский окрашивает так называемое пятно Романовского: использование Малаховским в 1891 году щелочного полихромного метиленового синего для лечения малярийных плазмодий». Технология окраски . 53 (1): 23–28. дои : 10.3109/10520297809111439 . ПМИД   78544 .
  18. ^ Jump up to: а б Райт Дж. Х. (1902). «Быстрый метод дифференциального окрашивания пленок крови и малярийных паразитов» . J Med Res . 7 (1): 138–144. ПМК   2105822 . ПМИД   19971449 .
  19. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п Крафтс, КП; Хемпельманн, Э; Олексин, Б.Я. (2011). «Пурпурный цвет: от королевской власти к лаборатории, с извинениями перед Малаховским». Биотехника и гистохимия . 86 (1): 7–35. дои : 10.3109/10520295.2010.515490 . ISSN   1052-0295 . ПМИД   21235291 . S2CID   19829220 .
  20. ^ Jump up to: а б с Гейтенби, Дж.Б.; Балки, HW (1950). Vade-Mecum микротомиста (11-е изд.). Филадельфия: Компания Blackstone.
  21. ^ Jump up to: а б с Воронцов-Дашкофф К.К. (2002). «Пятно Райта-Гимзы. Тайны раскрыты» . Клин Лаб Мед . 22 (1): 15–23. дои : 10.1016/S0272-2712(03)00065-9 . ПМИД   11933573 .
  22. ^ Jump up to: а б Лейшман В. (1901). «Заметка о простом и быстром методе окрашивания по Романовскому малярийных и других мазков крови» . Бр Мед Дж . 2 (2125): 757–758. дои : 10.1136/bmj.2.2125.757 . ПМК   2507168 . ПМИД   20759810 .
  23. ^ Jump up to: а б с Петерсон, Пауэрс; Макнил, Шейла; Гулати, Джин (2012). «Клеточный морфологический анализ периферической крови». Лабораторная гематологическая практика . стр. 10–25. дои : 10.1002/9781444398595.ch2 . ISBN  9781444398595 .
  24. ^ Крафтс, КП; Памбучиан, ЮВ (2011). «Окрашивание Романовского в цитопатологии: история, преимущества и ограничения». Биотехника и гистохимия . 86 (2): 82–93. дои : 10.3109/10520295.2010.515492 . ISSN   1052-0295 . ПМИД   21395493 . S2CID   5168332 .
  25. ^ Эрлих П. (1880). «Методологический вклад в физиологию и патологию различных форм лейкоцитов» (PDF) . З Клин Мед . 1 :553-560. Архивировано из оригинала (PDF) 19 июля 2011 г.
  26. ^ Jump up to: а б с Брейсгедл, Брайан (1986). История микротехники: эволюция микротома и развитие подготовки тканей (2-е изд.). Science Heritage Ltd. Линкольнвуд, Иллинойс: ISBN  978-0940095007 .
  27. ^ Jump up to: а б Крафтс, Кристина; Хемпельманн, Эрнст; Олексин, Барбара Дж. (2011). «В поисках малярийного паразита». Паразитологические исследования . 109 (3): 521–529. дои : 10.1007/s00436-011-2475-4 . ISSN   0932-0113 . ПМИД   21660627 . S2CID   1823696 .
  28. ^ Jump up to: а б с д и ж Воронцов-Дашкофф, Кристина Полин Крафтс (1993). «Пятно Эрлиха-Хензинского-Плена-Малаховского-Романовского-Нохта-Дженнера-Мэй-Грюнвальда-Лейшмана-Рейтера-Райта-Гимзы-Лилли-Роу-Уилкокса: тайна разворачивается». Клиники лабораторной медицины . 13 (4): 759–771. дои : 10.1016/S0272-2712(18)30406-2 . ISSN   0272-2712 . ПМИД   7508837 .
  29. ^ Гимза Г (1904). «Упрощение и совершенствование моего метода окрашивания метилен азуром, метиленовым синим и эозином для окрашивания хроматина по Романовскому-Ноху». Centralbl F Bakt и т . д . 37 :308-311.
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 7123963a97bc0ae5d9b1c2f6fbecddbd__1716167400
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/71/bd/7123963a97bc0ae5d9b1c2f6fbecddbd.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Romanowsky stain - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)