Корреляционная светоэлектронная микроскопия

Корреляционная светоэлектронная микроскопия ( CLEM ) представляет собой комбинацию оптического микроскопа (обычно флуоресцентного микроскопа ) с электронным микроскопом . В интегрированной системе CLEM изображение образца одновременно создается с помощью электронного луча и оптического светового пути. Традиционно образцы визуализируются с использованием двух отдельных методов микроскопии, возможно, на разных объектах и с использованием разных методов подготовки проб. Таким образом, интегрированный CLEM считается полезным, поскольку эта методология быстрее и проще, а также снижает вероятность изменений в выборке в процессе сбора данных. Таким образом, наложение двух изображений выполняется автоматически в результате интеграции двух микроскопов. ^[1]

Этот метод используется для получения информации в различных масштабах: электронный микроскоп предоставляет информацию с высоким разрешением вплоть до наномасштаба, а флуоресцентный микроскоп выделяет интересующие области. CLEM используется в различных дисциплинах наук о жизни , включая нейробиологию , исследования тканей и белков исследования .

Флуоресцентный микроскоп [ править ]

При подготовке к визуализации с помощью флуоресцентного микроскопа можно использовать различные методы, такие как флуорофоры или красители, иммуномечение и генетически кодируемые флуоресцентные белки. Для выделения нескольких интересующих областей в образце можно использовать различные флуоресцентные метки. ^[2] Недавно Кумар и др. ^[3] комбинированные измерения молекулярного напряжения на основе FRET ^[4] с помощью криоэлектронной микроскопии, чтобы изучить, как сила, воздействующая на талин (белок фокальной адгезии, который напрямую связывает интегрины с актином), связана с организацией актина. Области с высоким натяжением талина имеют сильно выровненную и линейную нитевидную структуру актина, тогда как области с низким натяжением имеют менее выровненную структуру актина. ^[3]

Электронный микроскоп [ править ]

Электронный микроскоп используется для получения структурной информации на наноуровне. В отличие от оптического микроскопа, электронный микроскоп способен превзойти дифракционный предел света. Это связано с тем, что длина волны ускоренных электронов намного короче длины волны видимого света. ^[5]

Ссылки [ править ]

^ БВ, ДЕЛЬМИК. «Автоматическое наложение — Техническое примечание | DELMIC» . request.delmic.com . Проверено 8 февраля 2017 г.
^ «Что такое корреляционная световая и электронная микроскопия?» . 25 апреля 2018 г.
↑ Перейти обратно: Перейти обратно: ^а ^б Кумар, Абхишек; Андерсон, Карен Л.; Свифт, Марк Ф.; Ханейн, Дорит; Фолькманн, Нильс; Шварц, Мартин А. (сентябрь 2018 г.). «Локальное напряжение талина в фокальных спайках коррелирует с выравниванием F-актина в нанометровом масштабе» . Биофизический журнал . 115 (8): 1569–1579. Бибкод : 2018BpJ...115.1569K . дои : 10.1016/j.bpj.2018.08.045 . ISSN 0006-3495 . ПМК 6372196 . ПМИД 30274833 .
^ Кумар, Абхишек; Оуян, Минсин; Дрис, Коэн Ван ден; МакГи, Юэн Джеймс; Танака, Кейитиро; Андерсон, Мари Д.; Гройсман, Александр; Гулт, Бенджамин Т.; Андерсон, Курт И. (9 мая 2016 г.). «Датчик натяжения Talin раскрывает новые особенности передачи силы фокального сцепления и механочувствительности» . J Клеточная Биол . 213 (3): 371–383. дои : 10.1083/jcb.201510012 . ISSN 0021-9525 . ПМЦ 4862330 . ПМИД 27161398 .
^ Воортман, Ленард (2014). «Интеграция без компромиссов». Микроскопия сегодня . 22 (6): 30–35. дои : 10.1017/S1551929514001199 . S2CID 138111672 .

Дальнейшее чтение [ править ]

Сутерс - Ди Мео, Джози; Лив, Налан; Хугенбум, Джейкоб П. (2016). «Использование усовершенствованной корреляционной микроскопии для изучения сложных биологических образцов». Энциклопедия аналитической химии . стр. 1–31. дои : 10.1002/9780470027318.a9473 . ISBN 9780470027318 .
Зонневилл, AC; Ван Тол, RFC; Лив, Н.; Нарваес, AC; Эффтинг, APJ; Круит, П.; Хугенбум, JP (2013). «Интеграция светового микроскопа с высокой числовой апертурой в сканирующий электронный микроскоп» . Журнал микроскопии . 252 (1): 58–70. дои : 10.1111/jmi.12071 . ISSN 0022-2720 . ПМИД 23889193 .

[1] БВ, ДЕЛЬМИК. «Автоматическое наложение — Техническое примечание | DELMIC» . request.delmic.com . Проверено 8 февраля 2017 г.

[2] «Что такое корреляционная световая и электронная микроскопия?» . 25 апреля 2018 г.

[:0-3] Перейти обратно: Перейти обратно: ^а ^б Кумар, Абхишек; Андерсон, Карен Л.; Свифт, Марк Ф.; Ханейн, Дорит; Фолькманн, Нильс; Шварц, Мартин А. (сентябрь 2018 г.). «Локальное напряжение талина в фокальных спайках коррелирует с выравниванием F-актина в нанометровом масштабе» . Биофизический журнал . 115 (8): 1569–1579. Бибкод : 2018BpJ...115.1569K . дои : 10.1016/j.bpj.2018.08.045 . ISSN 0006-3495 . ПМК 6372196 . ПМИД 30274833 .

[4] Кумар, Абхишек; Оуян, Минсин; Дрис, Коэн Ван ден; МакГи, Юэн Джеймс; Танака, Кейитиро; Андерсон, Мари Д.; Гройсман, Александр; Гулт, Бенджамин Т.; Андерсон, Курт И. (9 мая 2016 г.). «Датчик натяжения Talin раскрывает новые особенности передачи силы фокального сцепления и механочувствительности» . J Клеточная Биол . 213 (3): 371–383. дои : 10.1083/jcb.201510012 . ISSN 0021-9525 . ПМЦ 4862330 . ПМИД 27161398 .

[5] Воортман, Ленард (2014). «Интеграция без компромиссов». Микроскопия сегодня . 22 (6): 30–35. дои : 10.1017/S1551929514001199 . S2CID 138111672 .

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]