✖


Jump to content

Органоид

Чтобы узнать об органоидах, появляющихся в аниме-сериалах, см. Зоиды § Органоиды .
Кишечный органоид, выращенный из стволовых клеток Lgr5+

Органоид in — это миниатюрная и упрощенная версия органа, созданная vitro в трех измерениях, которая имитирует ключевую функциональную, структурную и биологическую сложность этого органа. [1] Он происходит из одной или нескольких клеток ткани или , эмбриональных стволовых клеток , индуцированных плюрипотентных стволовых клеток которые могут самоорганизовываться в трехмерной культуре благодаря своим способностям к самообновлению и дифференцировке . Техника выращивания органоидов быстро улучшилась с начала 2010-х годов, и журнал The Scientist назвал ее одним из крупнейших научных достижений 2013 года. [2] Ученые и инженеры используют органоиды для изучения развития и болезней в лаборатории , для открытия и разработки лекарств в промышленности. [3] персонализированная диагностика и медицина, генная и клеточная терапия, тканевая инженерия и регенеративная медицина.

История [ править ]

Попытки создания органов in vitro начались с одного из первых экспериментов по диссоциации-агрегации. [4] где Генри Ван Питерс Уилсон продемонстрировал, что механически диссоциированные клетки губки могут реагрегировать и самоорганизовываться, образуя целый организм. [5] В последующие десятилетия несколько лабораторий смогли создавать различные типы органов. [4] in vitro путем диссоциации и реагрегации тканей органов, полученных от амфибий. [6] и эмбриональные цыплята. [7] Впервые образование тканеподобных колоний in vitro наблюдалось при совместном культивировании кератиноцитов и фибробластов 3Т3. [8] Явления агрегации и реорганизации механически диссоциированных клеток с целью реформирования ткани, из которой они были получены, впоследствии привели к развитию гипотезы дифференциальной адгезии Малкольма Стейнберга . [4] С появлением области биологии стволовых клеток потенциал стволовых клеток формировать органы in vitro был реализован на раннем этапе: когда стволовые клетки образуют тератомы или эмбриоидные тельца , дифференцированные клетки могут организовываться в различные структуры, напоминающие те, что обнаружены в несколько типов тканей . [4] Появление органоидов началось с перехода от культивирования и дифференцировки стволовых клеток в двумерных (2D) средах к трехмерным (3D) средам, что позволило развивать сложные трехмерные структуры органов. [4] Использование методов 3D-среды для структурной организации стало возможным благодаря разработке внеклеточных матриц (ECM). [9] В конце 1980-х годов Бисселл и его коллеги показали, что богатый ламинином гель можно использовать в качестве базальной мембраны для дифференцировки и морфогенеза в клеточных культурах эпителиальных клеток молочной железы. [10] [11] С 1987 года исследователи разработали различные методы 3D-культивирования и смогли использовать разные типы стволовых клеток для создания органоидов, напоминающих множество органов. [4] В 1990-х годах, помимо их роли в физической поддержке, сообщалось о роли компонентов ЕСМ в экспрессии генов посредством их взаимодействия с путями фокальной адгезии на основе интегрина. [12] В 2006 году Яаков Намиас и Дэвид Одде продемонстрировали самосборку сосудистых органоидов печени , поддерживаемую в течение более 50 дней in vitro . [13] В 2008 году Йошики Сасай и его команда из института RIKEN продемонстрировали, что стволовые клетки можно объединить в клубки нервных клеток, которые самоорганизуются в отдельные слои. [14] В 2009 году лаборатория Ганса Клеверса в Институте Хубрехта и Университетском медицинском центре Утрехта , Нидерланды, показала, что отдельные LGR5 -экспрессирующие кишечные стволовые клетки самоорганизуются в структуры крипта-ворсинки in vitro без необходимости создания мезенхимальной ниши, что делает их первыми органоидами. [15] В 2010 году Матье Унбекандт и Джейми А. Дэвис продемонстрировали производство почечных органоидов из реногенных стволовых клеток мышиного плода. [16] В 2014 году Цюнь Ван и его коллеги разработали гели на основе коллагена-I и ламинина и синтетические пенистые биоматериалы для культивирования и доставки кишечных органоидов. [17] и инкапсулировали наночастицы золота, функционализированные ДНК, в кишечные органоиды, чтобы сформировать кишечного троянского коня для доставки лекарств и генной терапии. [18] Последующие отчеты показали значительную физиологическую функцию этих органоидов in vitro. [19] и в естественных условиях . [20] [21]

Другие важные ранние достижения включают в себя создание в 2013 году Мадлен Ланкастер из Института молекулярной биотехнологии Австрийской академии наук протокола, начиная с плюрипотентных стволовых клеток для создания церебральных органоидов , имитирующих развивающуюся клеточную организацию человеческого мозга. [22] Мериткселл Хуч и Крейг Доррелл из Института Хубрехта и Университетского медицинского центра Утрехта продемонстрировали, что отдельные клетки Lgr5+ из поврежденной печени мышей могут клонально размножаться в виде органоидов печени в культуральной среде на основе Rspo1 в течение нескольких месяцев. [23] В 2014 году Артем Шкуматов и др. в Университете Иллинойса в Урбана-Шампейн продемонстрировали, что сердечно-сосудистые органоиды могут образовываться из ES-клеток посредством модуляции жесткости субстрата, к которому они прикрепляются. Физиологическая жесткость способствовала трехмерности ЭТ и кардиомиогенной дифференцировке. [24]

Свойства [ править ]

Ланкастер и Кноблих [4] определяют органоид как совокупность органоспецифичных типов клеток, которые развиваются из стволовых клеток или предшественников органов, самоорганизуются посредством сортировки клеток и пространственно ограниченной детерминации клонов аналогично in vivo и проявляют следующие свойства:

  • он имеет несколько типов клеток, специфичных для органов;
  • он способен повторять некоторые специфические функции органа (например, сокращение , нервную активность, эндокринную секрецию, фильтрацию, выведение );
  • его клетки сгруппированы вместе и пространственно организованы, подобно органу.

Процесс [ править ]

Для формирования органоидов обычно требуется культивирование стволовых клеток или клеток-предшественников в трехмерной среде. [4] Стволовые клетки обладают способностью самообновляться и дифференцироваться в различные подтипы клеток, что позволяет понять процессы развития и прогрессирования заболеваний. [25] Поэтому органоиды, полученные из стволовых клеток, позволяют изучать биологию и физиологию на уровне органов. [26] 3D-среда может быть изготовлена ​​с использованием гидрогеля внеклеточного матрикса , такого как Matrigel или Cultrex BME, который представляет собой богатый ламинином внеклеточный матрикс, секретируемый опухолевой линией Энгельбрета-Холма-Сварма. [27] Затем можно создавать органоидные тела путем внедрения стволовых клеток в трехмерную среду. [4] Когда плюрипотентные для создания органоида используются стволовые клетки, клеткам обычно, но не всегда, позволяют образовывать эмбриоидные тельца . [4] Эти эмбриоидные тельца затем фармакологически обрабатываются факторами формирования паттерна, чтобы стимулировать формирование желаемой идентичности органоида. [4] Органоиды также были созданы с использованием взрослых стволовых клеток, извлеченных из органа-мишени и культивированных в 3D-среде. [28]

Биохимические сигналы были включены в 3D-культуры органоидов, и при воздействии морфогенов, ингибиторов морфогенов или факторов роста можно разработать модели органоидов с использованием эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) или взрослых стволовых клеток (АСК). Методы васкуляризации можно использовать для создания микросреды, физиологически близкой к своим аналогам. Сосудистые системы, которые могут доставлять кислород или питательные вещества во внутреннюю массу органоидов, могут быть созданы с помощью микрофлюидных систем, систем доставки фактора роста эндотелия сосудов и модулей, покрытых эндотелиальными клетками. [9] пациента С индуцированными плюрипотентными стволовыми клетками (ИПСК) [29] и CRISPR/Cas. редактирование генома на основе [30] технологий, геномно-отредактированные или мутированные плюрипотентные стволовые клетки (PSC) с измененными сигнальными сигналами могут быть созданы для контроля внутренних сигналов внутри органоидов.

Типы [ править ]

С помощью органоидов было воссоздано множество структур органов. [4] Целью этого раздела является описание состояния этой области на данный момент путем предоставления сокращенного списка органоидов, которые были успешно созданы, а также краткого описания, основанного на самой последней литературе по каждому органоиду, и примеров того, как он использовался. в исследованиях.

Церебральный органоид [ править ]

Церебральный органоид описывает искусственно выращенные in vitro миниатюрные органы, напоминающие мозг . Церебральные органоиды создаются путем культивирования плюрипотентных стволовых клеток человека в трехмерной структуре с использованием ротационного биореактора и развиваются в течение нескольких месяцев. [22] Процедура имеет потенциальное применение в изучении развития, физиологии и функций мозга. Органоиды головного мозга могут испытывать «простые ощущения» в ответ на внешнюю стимуляцию, и нейробиологи входят в число тех, кто выражает обеспокоенность тем, что такие органы могут развивать чувствительность . Они предполагают, что дальнейшее развитие техники должно подвергаться строгой процедуре надзора. [31] [32] [33] В 2023 году исследователи создали гибридный биокомпьютер, который сочетает в себе выращенные в лаборатории органоиды человеческого мозга с обычными схемами и может выполнять такие задачи, как распознавание голоса. [34] Церебральные органоиды в настоящее время используются для исследования и разработки органоидного интеллекта (ОИ) . технологий [35]

Желудочно-кишечный органоид [ править ]

Желудочно-кишечные органоиды относятся к органоидам, повторяющим структуры желудочно-кишечного тракта . Желудочно-кишечный тракт возникает из энтодермы , которая в процессе развития образует трубку, которую можно разделить на три отдельных отдела, дающих начало, наряду с другими органами, следующим отделам желудочно-кишечного тракта: [4]

  1. Передняя кишка дает начало ротовой полости и желудку.
  2. дает Средняя кишка начало тонкой и восходящей ободочной кишке.
  3. дает Задняя кишка начало прямой кишке и остальной части толстой кишки.

Органоиды созданы для следующих структур желудочно-кишечного тракта:

Кишечный органоид [ править ]

Кишечные органоиды [15] до сих пор были среди органоидов кишечника, полученных непосредственно из тканей кишечника или плюрипотентных стволовых клеток. [4] Одним из способов заставить плюрипотентные стволовые клетки человека формировать кишечные органоиды является сначала применение активина А для придания клеткам мезоэнтодермальной идентичности с последующей фармакологической активацией сигнальных путей Wnt3a и Fgf4 , поскольку было показано, что они способствуют развитию задней части кишечника. судьба. [4] Кишечные органоиды также были созданы из кишечных стволовых клеток, извлеченных из тканей взрослого человека и культивированных в 3D-среде. [28] Эти органоиды, полученные из стволовых клеток взрослых, часто называют энтероидами или колоноидами, в зависимости от сегмента их происхождения, и были выделены как из кишечника человека, так и из кишечника мышей. [15] [36] [37] Органоиды кишечника состоят из одного слоя поляризованных эпителиальных клеток кишечника, окружающих центральный просвет. Таким образом, воссоздайте структуру крипт-ворсинок кишечника, воспроизведя его функции, физиологию и организацию, а также сохранив все типы клеток, обычно присутствующие в структуре, включая стволовые клетки кишечника. [4] Таким образом, кишечные органоиды являются ценной моделью для изучения транспорта питательных веществ в кишечнике. [38] [39] всасывание и доставка лекарств, [40] [41] наноматериалы и наномедицина, [42] [43] секреция гормона инкретина, [44] [45] и инфицирование различными энтеропатогенами. [46] [47] Например, команда Цюнь Вана рационально разработала искусственные вирусные наночастицы в качестве средств пероральной доставки лекарств (ODDV) с моделями слизистой оболочки, полученными из органоидов кишечника. [48] и продемонстрировали новую концепцию использования недавно созданных органоидов толстой кишки в качестве инструментов для высокопроизводительного скрининга лекарств, тестирования токсичности и разработки пероральных лекарств. [49] Кишечные органоиды также воспроизводят структуру крипта-ворсинка с такой высокой степенью точности, что они были успешно трансплантированы в кишечник мышей и, следовательно, высоко ценятся как ценная модель для исследований. [4] Одной из областей исследований, в которых использовались кишечные органоиды, является исследование ниш стволовых клеток. Кишечные органоиды использовались для изучения природы ниши кишечных стволовых клеток , и исследования, проведенные с их использованием, продемонстрировали положительную роль IL-22 в поддержании кишечных стволовых клеток. [50] наряду с демонстрацией роли других типов клеток, таких как нейроны и фибробласты, в поддержании стволовых клеток кишечника. [28] В области биологии инфекций были исследованы различные модельные системы на основе кишечных органоидов. С одной стороны, органоиды можно заразить в больших количествах, просто смешав их с энтеропатогеном . интересующим [51] Однако для моделирования заражения более естественным путем, начиная с просвета кишечника, микроинъекция возбудителя . необходима [52] [53] Кроме того, полярность кишечных органоидов может быть инвертированной. [54] и их даже можно диссоциировать на отдельные клетки и культивировать как 2D-монослои. [55] [56] для того, чтобы сделать апикальную и базолатеральную стороны эпителия более доступными. Кишечные органоиды также продемонстрировали терапевтический потенциал. [57]

Кишечный органоид (Минигут) вырастает за 7 дней. Масштабные линейки составляют 200 мкм.

Для более точного воссоздания кишечника in vivo совместные культуры кишечных органоидов и иммунных клеток . были разработаны [56] Кроме того, модели «орган на чипе» сочетают органоиды кишечника с другими типами клеток, такими как эндотелиальные или иммунные клетки , а также с перистальтическим потоком. [58] [59]

Желудочный органоид [ править ]

Органоиды желудка повторяют, по крайней мере частично, физиологию желудка . Органоиды желудка были получены непосредственно из плюрипотентных стволовых клеток путем временного манипулирования сигнальными путями FGF , WNT , BMP , ретиноевой кислоты и EGF в условиях трехмерного культивирования. [60] Органоиды желудка также были созданы с использованием LGR5, экспрессирующих взрослые стволовые клетки желудка . [61] Органоиды желудка использовались в качестве модели для изучения рака [62] [63] наряду с болезнями человека [60] и развитие. [60] Например, одно исследование [63] пациента исследовали основные генетические изменения, лежащие в основе метастатической популяции опухолей , и установили, что в отличие от первичной опухоли пациента, в метастазах были мутированы оба аллеля гена TGFBR2 . Для дальнейшей оценки роли TGFBR2 в метастазировании исследователи создали органоиды, в которых экспрессия TGFBR2 подавлена, благодаря чему они смогли продемонстрировать, что снижение активности TGFBR2 приводит к инвазии и метастазированию раковых опухолей как in vitro , так и in vivo .

Лингвальный органоид [ править ]

Лингвальные органоиды — это органоиды, которые повторяют, по крайней мере частично, аспекты физиологии языка. Эпителиальные лингвальные органоиды были созданы с использованием эпителиальных стволовых клеток, экспрессирующих BMI1, в условиях трехмерного культивирования путем манипулирования EGF , WNT и TGF-β . [64] Однако в этой органоидной культуре отсутствуют вкусовые рецепторы , поскольку эти клетки не возникают из эпителиальных стволовых клеток, экспрессирующих Bmi1. [64] Однако органоиды язычных вкусовых почек, содержащие вкусовые клетки, были созданы с использованием стволовых/прогениторных клеток LGR5 + или CD44 + ткани циркумваллатного (CV) сосочка. [65] Эти органоиды вкусовых почек были успешно созданы непосредственно из изолированных вкусовых стволовых клеток/клеток-предшественников, экспрессирующих Lgr5 или LGR6 . [66] и косвенно, посредством выделения, расщепления и последующего культивирования ткани CV, содержащей стволовые/прогениторные клетки Lgr5+ или CD44+. [65]

Другое [ править ]

Органоиды тимуса, по крайней мере частично, повторяют архитектуру и ниш стволовых клеток функциональность тимуса . [70] Это лимфоидный орган, в котором созревают Т-клетки. Органоиды тимуса были получены путем посева стромальных клеток тимуса в трехмерную культуру. [70] Органоиды тимуса, по-видимому, успешно повторяют функцию тимуса, поскольку совместное культивирование гемопоэтических стволовых клеток человека или костного мозга с органоидами тимуса мыши приводит к образованию Т-клеток . [70]
  • Органоид яичка [71]
  • Органоид простаты [72]
  • Печеночный органоид. [73] Недавнее исследование показало полезность технологии для поиска новых лекарств для лечения гепатита Е, поскольку она позволяет воспроизвести весь жизненный цикл вируса. [74]
  • Органоид поджелудочной железы [75] [76] [77] [78]
Недавние достижения в области микротитровальных планшетов, отталкивающих клетки, позволили быстро и экономически эффективно проводить скрининг крупных низкомолекулярных лекарств, таких как библиотеки, на 3D-моделях рака поджелудочной железы. Эти модели по фенотипу и профилям экспрессии согласуются с моделями, найденными в лаборатории доктора Дэвида Тувесона .

3D-органоидные модели рака головного мозга, полученные либо из эксплантатов, полученных от пациента (PDX), либо непосредственно из раковой ткани, теперь легко достижимы и обеспечивают высокопроизводительный скрининг этих опухолей по сравнению с существующей панелью одобренных лекарств, формируемых по всему миру.

Самособирающиеся клеточные агрегаты, состоящие из BMEC, астроцитов и перицитов, становятся потенциальной альтернативой трансвелловым и микрофлюидным моделям для определенных приложений. Эти органоиды могут генерировать многие особенности ГЭБ, такие как экспрессия плотных контактов, молекулярных переносчиков и насосов оттока лекарств, и поэтому могут использоваться для моделирования транспорта лекарств через ГЭБ. Кроме того, они могут служить моделью для оценки взаимодействия между ГЭБ и прилегающей тканью головного мозга и предоставить платформу для понимания совокупных способностей нового препарата преодолевать ГЭБ и его влияние на ткань мозга. Кроме того, такие модели легко масштабируются, их проще производить и эксплуатировать, чем микрофлюидные устройства. Однако они имеют ограниченную способность реконструировать морфологию и физиологию ГЭБ и не способны моделировать физиологический поток и напряжение сдвига .

Фундаментальные исследования [ править ]

Органоиды позволяют изучать взаимодействие клеток в органе, их взаимодействие с окружающей средой, влияние на них болезней и действие лекарств. Культура in vitro упрощает манипулирование этой системой и облегчает ее мониторинг. Хотя органы трудно культивировать, поскольку их размер ограничивает проникновение питательных веществ, небольшой размер органоидов ограничивает эту проблему. С другой стороны, они не проявляют всех особенностей органов, и взаимодействия с другими органами не воспроизводятся in vitro . Хотя исследования стволовых клеток и регуляции стволовости были первой областью применения кишечных органоидов, [15] теперь они также используются для изучения, например, поглощения питательных веществ, транспорта лекарств и секреции гормонов инкретинов . [101] Это имеет большое значение в контексте заболеваний мальабсорбции , а также метаболических заболеваний, таких как ожирение , резистентность к инсулину и диабет .

Модели заболевания [ править ]

Органоиды дают возможность создавать клеточные модели заболеваний человека, которые можно изучать в лаборатории, чтобы лучше понять причины заболеваний и определить возможные методы лечения. Возможности органоидов в этом отношении были впервые показаны при генетической форме микроцефалии , когда клетки пациента использовались для создания церебральных органоидов , которые были меньше по размеру и демонстрировали аномалии в раннем образовании нейронов. [22] В другом примере система редактирования генома под названием CRISPR была применена к плюрипотентным стволовым клеткам человека для введения целевых мутаций в генах, связанных с двумя различными заболеваниями почек: поликистозом почек и фокально-сегментарным гломерулосклерозом . [82] Эти CRISPR-модифицированные плюрипотентные стволовые клетки впоследствии были выращены в органоидах почек человека, которые проявляли фенотипы, специфичные для заболевания. Органоиды почек из стволовых клеток с мутациями поликистозной болезни почек сформировали большие полупрозрачные кистозные структуры из почечных канальцев. При культивировании в отсутствие адгезивных сигналов (в суспензии) эти кисты в течение нескольких месяцев достигали размеров 1 см в диаметре. [102] Органоиды почек с мутациями в гене, связанном с фокально-сегментарным гломерулосклерозом, развивают дефекты соединений между подоцитами, фильтрующими клетками, поражаемыми при этом заболевании. [103] Важно отметить, что эти фенотипы заболевания отсутствовали в контрольных органоидах с идентичным генетическим фоном, но без мутаций CRISPR. [82] [102] [103] Сравнение этих органоидных фенотипов с больными тканями мышей и людей выявило сходство с дефектами раннего развития. [102] [103]

Впервые разработанные Такахаси и Яманакой в ​​2007 году, индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ИПСК) также можно перепрограммировать из фибробластов кожи пациента. [104] Эти стволовые клетки несут точный генетический фон пациента, включая любые генетические мутации, которые могут способствовать развитию заболеваний человека. Дифференцировка этих клеток в органоиды почек была проведена у пациентов с синдромом Лоу из-за мутаций ORCL1 . [105] В этом отчете сравнивались органоиды почек, дифференцированные из ИПСК пациента, с несвязанными контрольными ИПСК, и была продемонстрирована неспособность клеток почек пациента мобилизовать транскрипционный фактор SIX2 из комплекса Гольджи . [105] Поскольку SIX2 является хорошо изученным маркером клеток-предшественников нефронов в мезенхиме покрышки , авторы пришли к выводу, что заболевание почек, часто наблюдаемое при синдроме Лоу (глобальная недостаточность реабсорбции в проксимальных канальцах или почечный синдром Фанкони ), может быть связано с изменением структуры нефронов, возникающим из-за нефронов. клетки-предшественники, лишенные экспрессии этого важного гена SIX2 . [105]

В других исследованиях редактирование гена CRISPR использовалось для коррекции мутации пациента в клетках ИПСК пациента для создания изогенного контроля, который можно выполнять одновременно с перепрограммированием ИПСК. [106] [107] [108] Сравнение органоида, полученного из ИПСК пациента, с изогенным контролем является текущим золотым стандартом в этой области, поскольку оно позволяет изолировать интересующую мутацию как единственную переменную в экспериментальной модели. [109] В одном из таких отчетов органоиды почек, полученные из ИПСК пациента с синдромом Майнцера-Салдино из-за сложных гетерозиготных мутаций в IFT140, сравнивались с изогенным контрольным органоидом, в котором вариант IFT140, дающий начало нежизнеспособному транскрипту мРНК, был исправлен с помощью CRISPR. . [107] Органоиды почек пациента продемонстрировали аномальную морфологию ресничек , соответствующую существующим моделям животных, которая была восстановлена ​​до морфологии дикого типа в органоидах с исправленными генами. [107] Сравнительное транскрипционное профилирование эпителиальных клеток, выделенных из органоидов пациента и контроля, выявило пути, участвующие в клеточной полярности , межклеточных соединениях и сборке динеина , некоторые из которых были вовлечены в другие генотипы в фенотипическом семействе почечных цилиопатий. [107] Другой отчет с использованием изогенного контроля продемонстрировал аномальную локализацию нефрина в клубочках органоидов почек, полученных от пациента с врожденным нефротическим синдромом . [108]

Также можно смоделировать такие вещи, как метаболизм эпителия. [110]

Персонализированная медицина [ править ]

Кишечные органоиды, выращенные из ректальной биопсии с использованием протоколов культивирования, разработанных группой Клеверс, использовались для моделирования муковисцидоза . [111] и привело к первому применению органоидов для персонализированного лечения. [112] Муковисцидоз — это наследственное заболевание, вызванное мутациями гена регулятора трансмембранной проводимости муковисцидоза, который кодирует эпителиальный ионный канал, необходимый для здоровой поверхностной жидкости эпителия. Исследования лаборатории Джеффри Бикмана (Детская больница Вильгельмина, Университетский медицинский центр Утрехта, Нидерланды) показали в 2013 году, что стимуляция колоректальных органоидов агонистами, повышающими уровень цАМФ, такими как форсколин или холерный токсин, вызывает быстрое набухание органоидов полностью зависимым от CFTR образом. . [111] В то время как органоиды у субъектов, не страдающих муковисцидозом, набухают в ответ на форсколин вследствие транспорта жидкости в просветы органоидов, это значительно снижается или отсутствует у органоидов, полученных от людей с муковисцидозом. Отек можно восстановить с помощью препаратов, восстанавливающих белок CFTR (модуляторы CFTR), что указывает на то, что индивидуальные ответы на терапию, модулирующую CFTR, можно количественно оценить в доклинических лабораторных условиях. Шванк и др. также продемонстрировали, что органоидный фенотип муковисцидоза кишечника можно исправить с помощью редактирования гена CRISPR-Cas9 в 2013 году. [113]

Последующие исследования Dekkers et al. в 2016 году выявили, что количественные различия в форсколин-индуцированном отеке между кишечными органоидами, полученными от людей с муковисцидозом, связаны с известными диагностическими и прогностическими маркерами, такими как мутации гена CFTR или биомаркеры функции CFTR in vivo. [112] Кроме того, авторы продемонстрировали, что реакции модулятора CFTR в органоидах кишечника со специфическими мутациями CFTR коррелируют с опубликованными данными клинических испытаний этих методов лечения. Это привело к доклиническим исследованиям, в которых было обнаружено, что органоиды пациентов с чрезвычайно редкими мутациями CFTR, для которых не было зарегистрировано лечение, сильно реагируют на клинически доступный модулятор CFTR. Предполагаемая клиническая польза лечения этих субъектов, основанная на доклиническом органоидном тесте, была впоследствии подтверждена после клинического внедрения лечения членами клинического центра МВ под руководством Корса ван дер Энта (отделение детской пульмонологии, Детская больница Вильгельмина, Университетский медицинский центр). Утрехт, Нидерланды). Эти исследования впервые показывают, что органоиды можно использовать для индивидуального подбора терапии или персонализированной медицины .

органоидов Трансплантация ​ ​

Первая успешная трансплантация органоида человеку, больному язвенным колитом , клетки которого были использованы для органоида, была проведена в 2022 году. [114] [115]

модель развития биологии Как

Органоиды предлагают исследователям исключительную модель для изучения биологии развития . [116] С момента идентификации плюрипотентных стволовых клеток были достигнуты большие успехи в управлении судьбой плюрипотентных стволовых клеток in vitro с использованием 2D-культур. [116] Эти достижения в управлении судьбой PSC в сочетании с достижениями в методах 3D-культивирования позволили создать органоиды, повторяющие свойства различных конкретных субрегионов множества органов. [116] Таким образом, использование этих органоидов в значительной степени способствовало расширению нашего понимания процессов органогенеза и области биологии развития. [116] Например, в развитии центральной нервной системы органоиды способствовали нашему пониманию физических сил, лежащих в основе формирования чашечек сетчатки. [116] [117] Более поздние работы значительно продлили периоды роста корковых органоидов, и почти до года в определенных условиях дифференцировки органоиды сохраняются и имеют некоторые особенности стадий развития человеческого плода. [118]

См. также [ править ]

Ссылки [ править ]

  1. ^ Чжао З., Чен Х., Довбай А.М., Слюкич А., Братли К., Лин Л. и др. (2022). «Органоиды» . Обзоры природы. Методы Праймеры . 2 . дои : 10.1038/s43586-022-00174-y . ПМЦ   10270325 . ПМИД   37325195 .
  2. ^ Гренс К. (24 декабря 2013 г.). «Большие достижения науки в 2013 году» . Ученый . Проверено 26 декабря 2013 г.
  3. ^ Маллард А. (март 2023 г.). «Мини-органы привлекают крупную фармацевтику». Обзоры природы. Открытие наркотиков . 22 (3): 175–176. дои : 10.1038/d41573-023-00030-y . ПМИД   36797431 .
  4. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п д Ланкастер М.А., Кноблих Дж.А. (июль 2014 г.). «Органогенез в блюде: моделирование развития и заболеваний с использованием органоидных технологий». Наука . 345 (6194): 1247125. doi : 10.1126/science.1247125 . ПМИД   25035496 . S2CID   16105729 .
  5. ^ Уилсон Х.В. (июнь 1907 г.). «Новый метод искусственного разведения губок» . Наука . 25 (649): 912–915. Бибкод : 1907Sci....25..912W . дои : 10.1126/science.25.649.912 . ПМИД   17842577 .
  6. ^ Хольтфретер Дж (1944). «Экспериментальные исследования развития пронефроса». Преподобный Кан. Биол . 3 : 220–250.
  7. ^ Вайс П., Тейлор AC (сентябрь 1960 г.). «Восстановление полных органов из одноклеточных суспензий куриных эмбрионов на поздних стадиях дифференцировки» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 46 (9): 1177–1185. Бибкод : 1960PNAS...46.1177W . дои : 10.1073/pnas.46.9.1177 . ПМК   223021 . ПМИД   16590731 .
  8. ^ Рейнвальд Дж.Г., Грин Х. (ноябрь 1975 г.). «Формирование ороговевающего эпителия в культуре клонированной клеточной линией, полученной из тератомы». Клетка . 6 (3): 317–330. дои : 10.1016/0092-8674(75)90183-x . ПМИД   1052770 . S2CID   28185779 .
  9. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Йи С.А., Чжан Ю., Ратнам С., Понгкулапа Т., Ли К.Б. (ноябрь 2021 г.). «Биоинженерные подходы к перспективным исследованиям органоидов» . Продвинутые материалы . 33 (45): e2007949. Бибкод : 2021AdM....3307949Y . дои : 10.1002/adma.202007949 . ПМЦ   8682947 . ПМИД   34561899 .
  10. ^ Ли М.Л., Аггелер Дж., Фарсон Д.А., Хатье С., Хасселл Дж., Бисселл М.Дж. (январь 1987 г.). «Влияние восстановленной базальной мембраны и ее компонентов на экспрессию и секрецию гена казеина в эпителиальных клетках молочной железы мышей» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 84 (1): 136–140. Бибкод : 1987PNAS...84..136L . дои : 10.1073/pnas.84.1.136 . ПМК   304157 . ПМИД   3467345 .
  11. ^ Барселлос-Хофф М.Х., Аггелер Дж., Рам Т.Г., Бисселл М.Дж. (февраль 1989 г.). «Функциональная дифференциация и альвеолярный морфогенез первичных культур молочных желез на восстановленной базальной мембране» . Разработка . 105 (2): 223–235. дои : 10.1242/dev.105.2.223 . ПМЦ   2948482 . ПМИД   2806122 .
  12. ^ Штреули Ч., Шмидхаузер С., Бейли Н., Юрченко П., Скубиц А.П., Роскелли С. и др. (май 1995 г.). «Ламинин опосредует тканеспецифическую экспрессию генов в эпителии молочной железы» . Журнал клеточной биологии . 129 (3): 591–603. дои : 10.1083/jcb.129.3.591 . ПМК   2120432 . ПМИД   7730398 .
  13. ^ Намиас Ю., Шварц Р.Э., Ху В.С., Верфайли СМ, ​​Одде DJ (июнь 2006 г.). «Эндотелий-опосредованное рекрутирование гепатоцитов при создании печеночноподобной ткани in vitro». Тканевая инженерия . 12 (6): 1627–1638. дои : 10.1089/ten.2006.12.1627 . ПМИД   16846358 .
  14. ^ Ён Э (28 августа 2013 г.). «Выращенная в лаборатории модель мозга» . Ученый . Проверено 26 декабря 2013 г.
  15. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д и Сато Т., Фрис Р.Г., Снипперт Х.Дж., ван де Ветеринг М., Баркер Н., Штанге Д.Е. и др. (май 2009 г.). «Отдельные стволовые клетки Lgr5 строят структуры крипта-ворсинки in vitro без мезенхимальной ниши». Природа . 459 (7244): 262–265. Бибкод : 2009Natur.459..262S . дои : 10.1038/nature07935 . ПМИД   19329995 . S2CID   4373784 .
  16. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Унбекандт М., Дэвис Дж. А. (март 2010 г.). «Диссоциация эмбриональных почек с последующей реагрегацией позволяет сформировать почечные ткани» . Почки Интернешнл . 77 (5): 407–416. дои : 10.1038/ki.2009.482 . ПМИД   20016472 .
  17. ^ Пэн Х., Пувая Н., Форрестер М., Кокран Э., Ван К. (декабрь 2014 г.). «Культура ex vivo первичных кишечных стволовых клеток в коллагеновых гелях и пенах». ACS Биоматериалы, наука и инженерия . 1 (1): 37–42. дои : 10.1021/ab500041d . ПМИД   33435081 .
  18. ^ Пэн Х, Ван С, Сюй С, Ю С, Ван Ц (январь 2015 г.). «Кишечный троянский конь для доставки генов». Наномасштаб . 7 (10): 4354–4360. дои : 10.1039/c4nr06377e . ПМИД   25619169 .
  19. ^ Лоуренс М.Л., Чанг Ч., Дэвис Дж.А. (март 2015 г.). «Транспорт органических анионов и катионов при развитии эмбриональных почек мышей и в последовательно агрегированных инженерно-инженерных почках» . Научные отчеты . 5 : 9092. Бибкод : 2015NatSR...5E9092L . дои : 10.1038/srep09092 . ПМЦ   4357899 . ПМИД   25766625 .
  20. ^ Ксинарис С., Бенедетти В., Риццо П., Аббате М., Корна Д., Аззоллини Н. и др. (ноябрь 2012 г.). «Созревание in vivo функциональных почечных органоидов, образующихся из суспензий эмбриональных клеток» . Журнал Американского общества нефрологов . 23 (11): 1857–1868. дои : 10.1681/ASN.2012050505 . ПМЦ   3482737 . ПМИД   23085631 .
  21. ^ Юи С., Накамура Т., Сато Т., Немото Ю., Мизутани Т., Чжэн Х. и др. (март 2012 г.). «Функциональное приживление эпителия толстой кишки, размноженного in vitro из одной взрослой стволовой клетки Lgr5⁺». Природная медицина . 18 (4): 618–623. дои : 10.1038/нм.2695 . ПМИД   22406745 .
  22. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Ланкастер М.А., Реннер М., Мартин К.А., Венцель Д., Бикнелл Л.С., Херлз М.Э. и др. (сентябрь 2013 г.). «Церебральные органоиды моделируют развитие мозга человека и микроцефалию» . Природа . 501 (7467): 373–379. Бибкод : 2013Natur.501..373L . дои : 10.1038/nature12517 . ПМЦ   3817409 . ПМИД   23995685 .
  23. ^ Хуч М., Доррелл С., Бой С.Ф., ван Эс Дж.Х., Ли В.С., ван де Ветеринг М. и др. (февраль 2013 г.). «Экспансия in vitro одиночных стволовых клеток печени Lgr5+, индуцированная регенерацией, управляемой Wnt» . Природа . 494 (7436): 247–250. дои : 10.1038/nature11826 . ПМЦ   3634804 . ПМИД   23354049 .
  24. ^ Шкуматов А, Бэк К, Конг Х (2014). «Формирование сердечно-сосудистых органоидов из эмбриоидных тел с модуляцией жесткости матрицы» . ПЛОС ОДИН . 9 (4): e94764. Бибкод : 2014PLoSO...994764S . дои : 10.1371/journal.pone.0094764 . ПМЦ   3986240 . ПМИД   24732893 .
  25. ^ Марри CE, Келлер Дж. (февраль 2008 г.). «Дифференциация эмбриональных стволовых клеток в клинически значимые популяции: уроки эмбрионального развития» . Клетка . 132 (4): 661–680. дои : 10.1016/j.cell.2008.02.008 . ПМИД   18295582 .
  26. ^ Чоудхури Д., Ашок А., Наинг М.В. (март 2020 г.). «Коммерциализация органоидов». Тенденции молекулярной медицины . 26 (3): 245–249. doi : 10.1016/j.molmed.2019.12.002 . ПМИД   31982341 . S2CID   210922708 .
  27. ^ Ли М.Л., Аггелер Дж., Фарсон Д.А., Хатье С., Хасселл Дж., Бисселл М.Дж. (январь 1987 г.). «Влияние восстановленной базальной мембраны и ее компонентов на экспрессию и секрецию гена казеина в эпителиальных клетках молочной железы мышей» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 84 (1): 136–140. Бибкод : 1987PNAS...84..136L . дои : 10.1073/pnas.84.1.136 . ПМК   304157 . ПМИД   3467345 .
  28. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Пастула А., Миддельхофф М., Брандтнер А., Тобиаш М., Хёль Б., Нубер А.Х. и др. (2016). «Трехмерная культура желудочно-кишечных органоидов в сочетании с нервами или фибробластами: метод характеристики ниши желудочно-кишечных стволовых клеток» . Стволовые клетки Интернешнл . 2016 : 3710836. doi : 10.1155/2016/3710836 . ПМЦ   4677245 . ПМИД   26697073 .
  29. ^ Такахаши К., Яманака С. (август 2006 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из культур эмбриональных и взрослых фибробластов мышей с помощью определенных факторов». Клетка . 126 (4): 663–676. дои : 10.1016/j.cell.2006.07.024 . hdl : 2433/159777 . ПМИД   16904174 .
  30. ^ Ран Ф.А., Сюй П.Д., Райт Дж., Агарвала В., Скотт Д.А., Чжан Ф. (ноябрь 2013 г.). «Геномная инженерия с использованием системы CRISPR-Cas9» . Протоколы природы . 8 (11): 2281–2308. дои : 10.1038/nprot.2013.143 . ПМЦ   3969860 . ПМИД   24157548 .
  31. ^ Лавацца А., Массимини М. (сентябрь 2018 г.). «Церебральные органоиды: этические проблемы и оценка сознания» . Журнал медицинской этики . 44 (9): 606–610. doi : 10.1136/medethics-2017-104555 . ПМИД   29491041 .
  32. ^ Скалли Р.П. (6 июля 2019 г.). «Миниатюрный мозг, выращенный в лаборатории, имеет нейронную активность, подобную человеческой» . Новый учёный . № 3237.
  33. ^ Образец I (21 октября 2019 г.). «Ученые, возможно, перешли этическую черту» в выращивании человеческого мозга» . Хранитель . п. 15.
  34. ^ Цай Х., Ао З., Тянь С. и др. (2023). «Вычисления резервуаров органоидов мозга для искусственного интеллекта». Нат Электрон . 6 (12): 1032–1039. дои : 10.1038/s41928-023-01069-w .
  35. ^ Смирнова Л., Каффо Б.С., Грасиас Д.Х., Хуанг К., Моралес Пантоха И.Е., Тан Б. и др. (2023). «Органоидный интеллект (ОИ): новый рубеж в области биокомпьютеров и интеллекта в блюде» . Фронт науки . 1 : 1017235. doi : 10.3389/fsci.2023.1017235 .
  36. ^ Сато Т., Штанге Д.Е., Ферранте М., Фрис Р.Г., Ван Эс Дж.Х., Ван ден Бринк С. и др. (ноябрь 2011 г.). «Долгосрочное распространение эпителиальных органоидов толстой кишки человека, аденомы, аденокарциномы и эпителия Барретта» . Гастроэнтерология . 141 (5): 1762–1772. дои : 10.1053/j.gastro.2011.07.050 . ПМИД   21889923 .
  37. ^ Юнг П., Сато Т., Мерлос-Суарес А., Баррига Ф.М., Иглесиас М., Росселл Д. и др. (сентябрь 2011 г.). «Выделение и размножение in vitro стволовых клеток толстой кишки человека». Природная медицина . 17 (10): 1225–1227. дои : 10.1038/нм.2470 . ПМИД   21892181 . S2CID   205388154 .
  38. ^ Цай Т., Ци Ю, Джергенс А., Ваннемюлер М., Баррет Т.А., Ван К. (2018). «Влияние шести распространенных пищевых питательных веществ на рост органоидов кишечника мышей» . ПЛОС ОДИН . 13 (2): e0191517. дои : 10.1371/journal.pone.0191517 . ПМК   5794098 . ПМИД   29389993 .
  39. ^ Ци Ю, Ломан Дж., Братли К.М., Перутка-Бигус Н., Беллер Б., Ваннемюлер М. и др. (сентябрь 2019 г.). «Витамин C и B 3 как новые биоматериалы для изменения стволовых клеток кишечника» . Журнал исследований биомедицинских материалов. Часть А. 107 (9): 1886–1897. дои : 10.1002/jbm.a.36715 . ПМК   6626554 . ПМИД   31071241 .
  40. ^ Давуди З., Перутка-Бигус Н., Беллэр Б., Ваннемюлер М., Барретт Т.А., Нарасимхан Б. и др. (апрель 2018 г.). «Кишечные органоиды, содержащие наночастицы поли(молочно-когликолевой кислоты) для лечения воспалительных заболеваний кишечника» . Журнал исследований биомедицинских материалов. Часть А. 106 (4): 876–886. дои : 10.1002/jbm.a.36305 . ПМК   5826879 . ПМИД   29226615 .
  41. ^ Давуди З., Перутка-Бигус Н., Беллер Б., Джергенс А., Ваннемюлер М., Ван К. (май 2021 г.). «Кишечный органоид как новая платформа для изучения наночастиц PLGA, опосредованных альгинатом и хитозаном, для доставки лекарств» . Морские наркотики . 19 (5): 282. дои : 10.3390/md19050282 . ПМЦ   8161322 . ПМИД   34065505 .
  42. ^ Ци Ю, Ши Э, Перутка-Бигус Н, Беллер Б, Ваннемюлер М, Джергенс А и др. (май 2018 г.). « ex vivo Исследование теллуридных нанопроволок в миникишечнике». Журнал биомедицинских нанотехнологий . 14 (5): 978–986. дои : 10.1166/jbn.2018.2578 . ПМИД   29883567 .
  43. ^ Рединг Б., Картер П., Ци Ю, Ли З, Ву Ю, Ваннемюлер М и др. (апрель 2021 г.). «Управление кишечными органоидами с помощью нанолистов карбида ниобия» . Журнал исследований биомедицинских материалов. Часть А. 109 (4): 479–487. дои : 10.1002/jbm.a.37032 . ПМИД   32506610 .
  44. ^ Цитек Т., Гисбертц П., Эверс М., Райхарт Ф., Вайнмюллер М., Урбауэр Э. и др. (2020). «Органоиды для изучения кишечного транспорта питательных веществ, усвоения лекарств и метаболизма - обновление модели человека и расширение возможностей применения» . Границы биоинженерии и биотехнологии . 8 : 577656. дои : 10.3389/fbioe.2020.577656 . ПМК   7516017 . ПМИД   33015026 .
  45. ^ Зиетек Т., Рат Э., Халлер Д., Дэниел Х. (ноябрь 2015 г.). «Кишечные органоиды для оценки транспорта питательных веществ, чувствительности и секреции инкретина» . Научные отчеты . 5 (1): 16831. Бибкод : 2015NatSR...516831Z . дои : 10.1038/srep16831 . ПМЦ   4652176 . ПМИД   26582215 .
  46. ^ Рахмани С., Брейнер Н.М., Су Х.М., Верду Э.Ф., Дидар Т.Ф. (февраль 2019 г.). «Кишечные органоиды: новая парадигма инженерии кишечного эпителия in vitro». Биоматериалы . 194 : 195–214. doi : 10.1016/j.bimaterials.2018.12.006 . ПМИД   30612006 . S2CID   58603850 .
  47. ^ Сан Л., Роллинз Д., Ци Ю, Фредерикс Дж., Мэнселл Т.Дж., Джергенс А. и др. (декабрь 2020 г.). «TNFα регулирует органоиды кишечника мышей как с определенной, так и с обычной микробиотой» . Международный журнал биологических макромолекул . 164 : 548–556. doi : 10.1016/j.ijbiomac.2020.07.176 . ПМЦ   7657954 . ПМИД   32693143 .
  48. ^ Тонг Т., Ци Ю, Роллинз Д., Бюссьер Л.Д., Дхар Д., Миллер К.Л. и др. (декабрь 2023 г.). «Рациональный дизайн пероральных препаратов, нацеленных на доставку в слизистую оболочку, с помощью органоидных платформ кишечника» . Биоактивные материалы . 30 : 116–128. doi : 10.1016/j.bioactmat.2023.07.014 . ПМЦ   10406959 . ПМИД   37560199 .
  49. ^ Давуди З., Атерли Т., Борчердинг Д.С., Джергенс А.Е., Ваннемюлер М., Барретт Т.А. и др. (декабрь 2023 г.). «Изучение транспорта лекарств в недавно созданных органоидных системах толстой кишки мышей». Продвинутая биология . 7 (12): e2300103. дои : 10.1002/adbi.202300103 . ПМЦ 10840714. ПМИД   37607116 .
  50. ^ Линдеманс С., Мертельсманн А., Дудаков Дж.А., Веларди Е., Хуа Г., О'Коннор М. и др. (2014). «Введение IL-22 защищает кишечные стволовые клетки от РТГП» . Биология трансплантации крови и костного мозга . 20 (2): С53–С54. дои : 10.1016/j.bbmt.2013.12.056 .
  51. ^ Чжан Ю.Г., Ву С., Ся Ю., Сунь Дж. (сентябрь 2014 г.). «Система культуры органоидов кишечника, инфицированная сальмонеллой, полученная из крипт, для взаимодействия хозяина с бактериями» . Физиологические отчеты . 2 (9): е12147. дои : 10.14814/phy2.12147 . ПМК   4270227 . ПМИД   25214524 .
  52. ^ Гейзер П., Ди Мартино МЛ, Самперио Вентайол П., Эрикссон Дж., Сима Э., Аль-Саффар А.К. и др. (январь 2021 г.). Сперандио V (ред.). «Salmonella enterica Serovar Typhimurium использует циклическое движение через эпителиальные клетки для колонизации энтероидов человека и мышей» . мБио . 12 (1). дои : 10.1128/mBio.02684-20 . ПМЦ   7844539 . PMID   33436434 .
  53. ^ Датта Д., Хо И., О'Коннор Р. (сентябрь 2019 г.). «Изучение инфекции криптоспоридий в трехмерных системах органоидных культур человека, полученных из тканей, путем микроинъекции». Журнал визуализированных экспериментов (151): 59610. doi : 10.3791/59610 . ПМИД   31566619 . S2CID   203377662 .
  54. ^ Ко JY, Маргалеф-Катала М, Ли Х, Мах А.Т., Куо С.Дж., Монак Д.М. и др. (февраль 2019 г.). «Контроль полярности эпителия: человеческая энтероидная модель взаимодействия хозяина и патогена» . Отчеты по ячейкам . 26 (9): 2509–2520.e4. дои : 10.1016/j.celrep.2019.01.108 . ПМК   6391775 . ПМИД   30811997 .
  55. ^ Тонг Т., Ци Ю, Бюссьер Л.Д., Ваннемюлер М., Миллер К.Л., Ван К. и др. (август 2020 г.). «Транспорт искусственных вирусоподобных наноносителей через монослои кишечника через микроскладчатые клетки». Наномасштаб . 12 (30): 16339–16347. дои : 10.1039/d0nr03680c . ПМИД   32725029 .
  56. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Ноэль Г., Баец Н.В., Стааб Дж.Ф., Доновиц М., Ковбаснюк О., Пасетти М.Ф. и др. (март 2017 г.). «Основная модель совместной культуры макрофагов и энтероидов человека для исследования физиологии слизистой оболочки кишечника и взаимодействия хозяина и патогена» . Научные отчеты . 7 (1): 45270. Бибкод : 2017NatSR...745270N . дои : 10.1038/srep45270 . ПМК   5366908 . ПМИД   28345602 .
  57. ^ Боучи Р., Фу К.С., Хуа Х., Цучия К., Омура Й., Сандовал П.Р. и др. (июнь 2014 г.). «Ингибирование FOXO1 дает функциональные клетки, продуцирующие инсулин, в культурах органоидов кишечника человека» . Природные коммуникации . 5 : 4242. Бибкод : 2014NatCo...5.4242B . дои : 10.1038/ncomms5242 . ПМК   4083475 . ПМИД   24979718 .
  58. ^ Сонтхаймер-Фелпс А., Чоу Д.Б., Товальери А., Ферранте Т.К., Дакворт Т., Фадель С. и др. (2020). «Человеческая толстая кишка на чипе обеспечивает непрерывный анализ in vitro накопления и физиологии слоя слизистой толстой кишки» . Клеточная и молекулярная гастроэнтерология и гепатология . 9 (3): 507–526. дои : 10.1016/j.jcmgh.2019.11.008 . ПМК   7036549 . ПМИД   31778828 .
  59. ^ Грассар А., Маларде В., Гобаа С., Сартори-Рупп А., Кернс Дж., Каралис К. и др. (сентябрь 2019 г.). «Биоинженерный человеческий орган на чипе раскрывает кишечную микросреду и механические силы, влияющие на инфекцию шигелл» . Клетка-хозяин и микроб . 26 (3): 435–444.е4. дои : 10.1016/j.chom.2019.08.007 . ПМИД   31492657 . S2CID   201868491 .
  60. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Маккракен К.В., Ката Э.М., Кроуфорд К.М., Синагога К.Л., Шумахер М., Рокич Б.Е. и др. (декабрь 2014 г.). «Моделирование развития человека и заболеваний в плюрипотентных органоидах желудка, полученных из стволовых клеток» . Природа . 516 (7531): 400–404. Бибкод : 2014Natur.516..400M . дои : 10.1038/nature13863 . ПМК   4270898 . ПМИД   25363776 .
  61. ^ Баркер Н., Хуч М., Куджала П., ван де Ветеринг М., Снипперт Х.Дж., ван Эс Дж.Х. и др. (январь 2010 г.). «Стволовые клетки Lgr5(+ve) стимулируют самообновление желудка и создают долгоживущие желудочные единицы in vitro» . Клеточная стволовая клетка . 6 (1): 25–36. дои : 10.1016/j.stem.2009.11.013 . ПМИД   20085740 .
  62. ^ Ли X, Надаулд Л., Отани А., Корни Д.С., Пай Р.К., Геварт О. и др. (июль 2014 г.). «Онкогенная трансформация различных тканей желудочно-кишечного тракта в первичной органоидной культуре» . Природная медицина . 20 (7): 769–777. дои : 10.1038/нм.3585 . ПМК   4087144 . ПМИД   24859528 .
  63. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Надаульд Л.Д., Гарсия С., Нацулис Г., Белл Дж.М., Миотке Л., Хопманс Э.С. и др. (август 2014 г.). «Эволюция метастатической опухоли и моделирование органоидов указывают на то, что TGFBR2 является движущей силой рака при диффузном раке желудка» . Геномная биология . 15 (8): 428. дои : 10.1186/s13059-014-0428-9 . ПМЦ   4145231 . ПМИД   25315765 .
  64. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Хиша Х., Танака Т., Канно С., Токуяма Ю., Комай Ю., Охе С. и др. (ноябрь 2013 г.). «Создание новой системы культуры лингвальных органоидов: создание органоидов, имеющих зрелый ороговевший эпителий, из взрослых эпителиальных стволовых клеток» . Научные отчеты . 3 : 3224. Бибкод : 2013NatSR...3E3224H . дои : 10.1038/srep03224 . ПМЦ   3828633 . ПМИД   24232854 .
  65. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Айхара Э., Маэ М.М., Шумахер М.А., Маттис А.Л., Фенг Р., Рен В. и др. (ноябрь 2015 г.). «Характеристика цикла стволовых клеток/клеток-предшественников с использованием органоида вкусовых почек округлого сосочка мыши» . Научные отчеты . 5 : 17185. Бибкод : 2015NatSR...517185A . дои : 10.1038/srep17185 . ПМЦ   4665766 . ПМИД   26597788 .
  66. ^ Рен В., Левандовски BC, Уотсон Дж., Айхара Э., Ивацуки К., Бахманов А.А. и др. (ноябрь 2014 г.). «Отдельные Lgr5- или Lgr6-экспрессирующие вкусовые стволовые клетки/клетки-предшественники генерируют клетки вкусовых почек ex vivo» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 111 (46): 16401–16406. Бибкод : 2014PNAS..11116401R . дои : 10.1073/pnas.1409064111 . ПМЦ   4246268 . ПМИД   25368147 .
  67. ^ Херманс Ф., Хасевоец С., Ванкелеком Х., Бронкаерс А., Ламбрихтс I (март 2024 г.). «От плюрипотентных стволовых клеток к органоидам и биопечати: последние достижения в моделях зубного эпителия и амелобластов для изучения биологии и регенерации зубов» . Обзоры и отчеты о стволовых клетках . дои : 10.1007/s12015-024-10702-w . ПМИД   38498295 .
  68. ^ Мартин А., Барбезино Г., Дэвис Т.Ф. (1999). «Т-клеточные рецепторы и аутоиммунные заболевания щитовидной железы — признаки заболеваний, вызванных Т-клеточными антигенами». Международные обзоры иммунологии . 18 (1–2): 111–140. дои : 10.3109/08830189909043021 . ПМИД   10614741 .
  69. ^ Бреденкамп Н., Ульянченко С., О'Нил К.Е., Мэнли Н.Р., Вайдья Х.Дж., Блэкберн CC (сентябрь 2014 г.). «Организованный и функциональный тимус, созданный из перепрограммированных FOXN1 фибробластов» . Природная клеточная биология . 16 (9): 902–908. дои : 10.1038/ncb3023 . ПМЦ   4153409 . ПМИД   25150981 .
  70. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Вианелло Ф, Познаньский MC (2007). «Создание тканеинженерного органоида тимуса». Иммунологическая толерантность . Методы молекулярной биологии. Том. 380. стр. 163–70. дои : 10.1007/978-1-59745-395-0_9 . ISBN  978-1-59745-395-0 . ПМИД   17876092 .
  71. ^ Сакиб С., Учида А., Валенсуэла-Леон П., Ю Ю., Валли-Пуласки Х., Орвиг К. и др. (июнь 2019 г.). «Формирование органотипических органоидов яичек в микролуночной культуре †» . Биология размножения . 100 (6): 1648–1660. дои : 10.1093/biolre/ioz053 . ПМК   7302515 . ПМИД   30927418 .
  72. ^ Дрост Дж., Картхаус В.Р., Гао Д., Дрихейс Э., Сойерс К.Л., Чен Ю. и др. (февраль 2016 г.). «Системы органоидных культур эпителия и раковой ткани простаты» . Протоколы природы . 11 (2): 347–358. дои : 10.1038/нпрот.2016.006 . ПМЦ   4793718 . ПМИД   26797458 .
  73. ^ Хуч М., Гехарт Х., ван Бокстель Р., Хамер К., Блокзийл Ф., Верстеген М.М. и др. (январь 2015 г.). «Долговременная культура геномно-стабильных бипотентных стволовых клеток печени взрослого человека» . Клетка . 160 (1–2): 299–312. дои : 10.1016/j.cell.2014.11.050 . ПМЦ   4313365 . ПМИД   25533785 .
  74. ^ Ли П., Ли Ю., Ван Ю., Лю Дж., Лаврийсен М., Ли Ю. и др. (январь 2022 г.). «Подведение итогов взаимодействия вируса гепатита Е с хозяином и содействие открытию противовирусных препаратов в органоидах, полученных из печени человека» . Достижения науки . 8 (3): eabj5908. Бибкод : 2022SciA....8.5908L . дои : 10.1126/sciadv.abj5908 . HDL : 11250/3047921 . ПМЦ   8769558 . ПМИД   35044825 . S2CID   246069868 .
  75. ^ Хуч М., Бонфанти П., Бой С.Ф., Сато Т., Луманс С.Дж., ван де Ветеринг М. и др. (октябрь 2013 г.). «Неограниченное расширение in vitro бипотентных предшественников поджелудочной железы взрослых через ось Lgr5/R-спондин» . Журнал ЭМБО . 32 (20): 2708–2721. дои : 10.1038/emboj.2013.204 . ПМЦ   3801438 . ПМИД   24045232 .
  76. ^ Хоу С., Тириак Х., Шридхаран Б.П., Скампавиа Л., Маду Ф., Селдин Дж. и др. (июль 2018 г.). «Перспективная разработка моделей первичных органоидных опухолей поджелудочной железы для высокопроизводительного фенотипического скрининга лекарств» . СЛАС Дискавери . 23 (6): 574–584. дои : 10.1177/2472555218766842 . ПМК   6013403 . ПМИД   29673279 .
  77. ^ Вольф Р.А., Ван-Гиллам А., Альварес Х., Тириак Х., Энгл Д., Хоу С. и др. (март 2018 г.). «Динамические изменения при лечении рака поджелудочной железы» . Онкотаргет . 9 (19): 14764–14790. дои : 10.18632/oncotarget.24483 . ПМК   5871077 . ПМИД   29599906 .
  78. ^ Ниже CR, Келли Дж., Браун А., Хамфрис Дж.Д., Хаттон С., Сюй Дж. и др. (январь 2022 г.). «Синтетическая трехмерная модель органоидов аденокарциномы протоков поджелудочной железы, основанная на микроокружении» . Природные материалы . 21 (1): 110–119. дои : 10.1038/s41563-021-01085-1 . ПМЦ   7612137 . ПМИД   34518665 .
  79. ^ Баркер Н., ван Эс Дж. Х., Кейперс Дж., Куджала П., ван ден Борн М., Козейнсен М. и др. (октябрь 2007 г.). «Идентификация стволовых клеток в тонкой и толстой кишке по маркерному гену Lgr5». Природа . 449 (7165): 1003–1007. Бибкод : 2007Natur.449.1003B . дои : 10.1038/nature06196 . ПМИД   17934449 . S2CID   4349637 .
  80. ^ Ли Дж.Х., Бханг Д.Х., Биде А., Хуанг Т.Л., Стрип Б.Р., Блох К.Д. и др. (январь 2014 г.). «Дифференцировка стволовых клеток легких у мышей, направляемая эндотелиальными клетками через ось BMP4-NFATc1-тромбоспондин-1» . Клетка . 156 (3): 440–455. дои : 10.1016/j.cell.2013.12.039 . ПМЦ   3951122 . ПМИД   24485453 .
  81. ^ Такасато М., Эр ПХ, Чиу Х.С., Майер Б., Бэйли Г.Дж., Фергюсон С. и др. (октябрь 2015 г.). «Органоиды почек из iPS-клеток человека содержат несколько линий и моделируют нефрогенез человека». Природа . 526 (7574): 564–568. Бибкод : 2015Natur.526..564T . дои : 10.1038/nature15695 . ПМИД   26444236 . S2CID   4443766 .
  82. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Фридман Б.С., Брукс С.Р., Лам А.К., Фу Х., Моризан Р., Агравал В. и др. (октябрь 2015 г.). «Моделирование заболевания почек с помощью CRISPR-мутантных почечных органоидов, полученных из сфероидов плюрипотентных эпибластов человека» . Природные коммуникации . 6 : 8715. Бибкод : 2015NatCo...6.8715F . дои : 10.1038/ncomms9715 . ПМЦ   4620584 . ПМИД   26493500 .
  83. ^ Моризан Р., Лам А.К., Фридман Б.С., Киши С., Валериус М.Т., Бонвентр СП (ноябрь 2015 г.). «Органоиды нефрона, полученные из плюрипотентных стволовых клеток человека, моделируют развитие и повреждение почек» . Природная биотехнология . 33 (11): 1193–1200. дои : 10.1038/nbt.3392 . ПМЦ   4747858 . ПМИД   26458176 .
  84. ^ ван ден Бринк С.К., Бэйли-Джонсон П., Балайо Т., Хаджантонакис А.К., Новочин С., Тернер Д.А. и др. (ноябрь 2014 г.). «Нарушение симметрии, спецификация зародышевого листка и аксиальная организация в агрегатах эмбриональных стволовых клеток мыши» . Разработка . 141 (22): 4231–4242. дои : 10.1242/dev.113001 . ПМК   4302915 . ПМИД   25371360 .
  85. ^ Тернер Д.А., Бэйли-Джонсон П., Мартинес Ариас А. (февраль 2016 г.). «Органоиды и генетически закодированная самосборка эмбриональных стволовых клеток» . Биоэссе . 38 (2): 181–191. doi : 10.1002/bies.201500111 . ПМЦ   4737349 . ПМИД   26666846 .
  86. ^ Тернер Д.А., Гиргин М., Алонсо-Кризостомо Л., Триведи В., Бэйли-Джонсон П., Глодовски С.Р. и др. (ноябрь 2017 г.). «Переднезадняя полярность и удлинение при отсутствии внеэмбриональных тканей и пространственно локализованной передачи сигналов в гаструлоидах: эмбриональные органоиды млекопитающих» . Разработка . 144 (21): 3894–3906. дои : 10.1242/dev.150391 . ПМК   5702072 . ПМИД   28951435 .
  87. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Беккари Л., Морис Н., Гиргин М., Тернер Д.А., Бэйли-Джонсон П., Косси А.С. и др. (октябрь 2018 г.). «Свойства многоосной самоорганизации эмбриональных стволовых клеток мыши в гаструлоиды». Природа . 562 (7726): 272–276. Бибкод : 2018Natur.562..272B . дои : 10.1038/s41586-018-0578-0 . ПМИД   30283134 . S2CID   52915553 .
  88. ^ Риврон Н. (27 июня 2018 г.). «Бластоид: предыстория формирования бластоцистоподобной структуры исключительно из стволовых клеток» . Узел . ООО Компания Биологов.
  89. ^ «Бластоид» . Лаборатория Николаса Риврона . Нидерланды.
  90. ^ Риврон Н.К., Фриас-Альдегер Дж., Врий Э.Дж., Буассе Дж.К., Корвинг Дж., Вивье Дж. и др. (май 2018 г.). «Бластоцистоподобные структуры, возникающие исключительно из стволовых клеток». Природа . 557 (7703): 106–111. Бибкод : 2018Natur.557..106R . дои : 10.1038/s41586-018-0051-0 . ПМИД   29720634 . S2CID   13749109 .
  91. ^ Роулингс Т.М., Маквана К., Трифонос М., Лукас Э.С. (июль 2021 г.). «Органоиды для моделирования эндометрия: имплантация и не только» . Репродукция и фертильность . 2 (3): Р85–Р101. дои : 10.1530/RAF-21-0023 . ПМК   8801025 . ПМИД   35118399 .
  92. ^ Ли Э.Дж., Ким Д.Э., Азелоглу ЕС, Коста К.Д. (февраль 2008 г.). «Спроектированные камеры сердечных органоидов: на пути к функциональной биологической модели желудочка». Тканевая инженерия. Часть А. 14 (2): 215–225. дои : 10.1089/tea.2007.0351 . ПМИД   18333774 .
  93. ^ Молтени М (27 июня 2018 г.). «Эти бьющиеся мини-сердечки могут спасти большие деньги, а возможно, и жизни» . ПРОВОДНОЙ . Проверено 30 июня 2018 г.
  94. ^ Уайли Л.А., Бернайт Э.Р., ДеЛука А.П., Анфинсон К.Р., Крэнстон К.М., Каалберг Э.Э. и др. (июль 2016 г.). «Производство цГМФ индивидуальных ИПСК и клеток-предшественников фоторецепторов для лечения дегенеративной слепоты сетчатки» . Научные отчеты . 6 : 30742. Бибкод : 2016NatSR...630742W . дои : 10.1038/srep30742 . ПМЦ   4965859 . ПМИД   27471043 .
  95. ^ Зилова Л., Вайнхардт В., Тавхелидзе Т., Шлагек С., Тамбергер Т., Виттбродт Дж. (июль 2021 г.). Ариас А.М., Стейнир Д.Ю. (ред.). «Первичные эмбриональные плюрипотентные клетки рыб собираются в ткань сетчатки, отражая раннее развитие глаз in vivo» . электронная жизнь . 10 : е66998. doi : 10.7554/eLife.66998 . ПМЦ   8275126 . ПМИД   34252023 .
  96. ^ Сакс Н., де Лигт Дж., Коппер О., Гогола Е., Бунова Г., Вибер Ф. и др. (январь 2018 г.). «Живой биобанк органоидов рака молочной железы отражает гетерогенность заболевания» . Клетка . 172 (1–2): 373–386.e10. дои : 10.1016/j.cell.2017.11.010 . ПМИД   29224780 .
  97. ^ ван де Ветеринг М., Фрэнсис Х.Э., Фрэнсис Дж.М., Бунова Г., Иорио Ф., Пронк А. и др. (май 2015 г.). «Перспективное создание живого органоидного биобанка больных колоректальным раком» . Клетка . 161 (4): 933–945. дои : 10.1016/j.cell.2015.03.053 . ПМК   6428276 . ПМИД   25957691 .
  98. ^ Кереда В., Хоу С., Маду Ф., Скампавия Л., Спайсер Т.П., Дакетт Д. (сентябрь 2018 г.). «Высокопроизводительный цитотоксический трехмерный сфероидный анализ с использованием стволовых клеток глиомы, полученных от пациента» . СЛАС Дискавери . 23 (8): 842–849. дои : 10.1177/2472555218775055 . ПМК   6102052 . ПМИД   29750582 .
  99. ^ Дейтон Т.Л., Алкала Н., Мунен Л., ден Хартиг Л., Гертс В., Манджианте Л. и др. (декабрь 2023 г.). «Лекарственные зависимости роста и анализ эволюции опухолей в органоидах нейроэндокринных новообразований, полученных от пациентов из разных участков тела» . Раковая клетка . 41 (12): 2083–2099.e9. дои : 10.1016/j.ccell.2023.11.007 . ПМИД   38086335 .
  100. ^ Зидарич Т., Градишник Л., Велнар Т. (сентябрь 2022 г.). «Астроциты и модели искусственного гематоэнцефалического барьера человека» . Боснийский журнал фундаментальных медицинских наук . 22 (5): 651–672. дои : 10.17305/bjbms.2021.6943 . ПМЦ   9519155 . ПМИД   35366791 .
  101. ^ Зиетек Т., Рат Э., Халлер Д., Дэниел Х. (ноябрь 2015 г.). «Кишечные органоиды для оценки транспорта питательных веществ, чувствительности и секреции инкретина» . Научные отчеты . 5 : 16831. Бибкод : 2015NatSR...516831Z . дои : 10.1038/srep16831 . ПМЦ   4652176 . ПМИД   26582215 .
  102. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Круз Н.М., Сонг Х, Чернецкий С.М., Гулиева Р.Е., Черчилль А.Дж., Ким Ю.К. и др. (ноябрь 2017 г.). «Органоидный цистогенез раскрывает критическую роль микроокружения при поликистозе почек у человека» . Природные материалы . 16 (11): 1112–1119. Бибкод : 2017NatMa..16.1112C . дои : 10.1038/nmat4994 . ПМК   5936694 . ПМИД   28967916 .
  103. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Ким Ю.К., Рафаэли И., Брукс Ч.Р., Цзин П., Гулиева Р.Э., Хьюз М.Р. и др. (декабрь 2017 г.). «Генно-отредактированные органоиды почек человека выявляют механизмы заболевания в развитии подоцитов» . Стволовые клетки . 35 (12): 2366–2378. дои : 10.1002/stem.2707 . ПМЦ   5742857 . ПМИД   28905451 .
  104. ^ Такахаши К., Танабе К., Онуки М., Нарита М., Ичисака Т., Томода К. и др. (ноябрь 2007 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из фибробластов взрослого человека определенными факторами». Клетка . 131 (5): 861–872. дои : 10.1016/j.cell.2007.11.019 . hdl : 2433/49782 . ПМИД   18035408 . S2CID   8531539 .
  105. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Се В.К., Рамадезикан С., Фекете Д., Агилар Р.К. (14 февраля 2018 г.). «Дифференцированные в почках клетки, полученные из ИПСК пациентов с синдромом Лоу, обнаруживают дефекты цилиогенеза и сохранение Six2 в комплексе Гольджи» . ПЛОС ОДИН . 13 (2): e0192635. Бибкод : 2018PLoSO..1392635H . дои : 10.1371/journal.pone.0192635 . ПМК   5812626 . ПМИД   29444177 .
  106. ^ Хауден С.Е., Томсон Дж.А., Литтл М.Х. (май 2018 г.). «Одновременное перепрограммирование и редактирование генов фибробластов человека» . Протоколы природы . 13 (5): 875–898. дои : 10.1038/nprot.2018.007 . ПМЦ   5997775 . ПМИД   29622803 .
  107. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д Форбс Т.А., Хауден С.Е., Лоулор К., Фипсон Б., Максимович Дж., Хейл Л. и др. (май 2018 г.). «Органоиды почек, полученные от пациента из ИПСК, демонстрируют функциональное подтверждение цилиопатического почечного фенотипа и раскрывают основные патогенетические механизмы» . Американский журнал генетики человека . 102 (5): 816–831. дои : 10.1016/j.ajhg.2018.03.014 . ПМЦ   5986969 . ПМИД   29706353 .
  108. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Танигава С., Ислам М., Шармин С., Наганума Х., Ёсимура Ю., Хак Ф. и др. (сентябрь 2018 г.). «Органоиды из ИПСК, полученных из нефротических заболеваний, идентифицируют нарушение локализации НЕФРИНА и формирование щелевой диафрагмы в подоцитах почек» . Отчеты о стволовых клетках . 11 (3): 727–740. дои : 10.1016/j.stemcr.2018.08.003 . ПМК   6135868 . ПМИД   30174315 .
  109. ^ Энгл С.Дж., Блаха Л., Клейман Р.Дж. (ноябрь 2018 г.). «Передовые методы моделирования трансляционных заболеваний с использованием нейронов, полученных из ИПСК человека» . Нейрон . 100 (4): 783–797. дои : 10.1016/j.neuron.2018.10.033 . PMID   30465765 .
  110. ^ Рат Э., Шамайяр М. (ред.). «Метаболиты» . Специальный выпуск журнала «Метаболиты» . Проверено 16 октября 2022 г.
  111. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Деккерс Дж. Ф., Вигеринк К. Л., де Йонге Х. Р., Бронсвельд И., Янссенс Х. М., де Винтер-де Гроот К. М. и др. (июль 2013 г.). «Функциональный анализ CFTR с использованием кишечных органоидов первичного муковисцидоза». Природная медицина . 19 (7): 939–945. дои : 10.1038/нм.3201 . ПМИД   23727931 . S2CID   5369669 .
  112. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Деккерс Дж. Ф., Беркерс Г., Круссельбринк Э., Вонк А., де Йонге Х. Р., Янссенс Х. М. и др. (июнь 2016 г.). «Характеристика реакции на препараты, модулирующие CFTR, с использованием ректальных органоидов, полученных от пациентов с муковисцидозом». Наука трансляционной медицины . 8 (344): 344ра84. doi : 10.1126/scitranslmed.aad8278 . ПМИД   27334259 . S2CID   19462535 .
  113. ^ Шванк Г., Ку Б.К., Сасселли В., Деккерс Дж.Ф., Хео И., Демиркан Т. и др. (декабрь 2013 г.). «Функциональное восстановление CFTR с помощью CRISPR/Cas9 в органоидах кишечных стволовых клеток пациентов с муковисцидозом» . Клеточная стволовая клетка . 13 (6): 653–658. дои : 10.1016/j.stem.2013.11.002 . ПМИД   24315439 .
  114. ^ «Первая в мире транспортировка мини-органов пациенту с язвенным колитом» . Токийский медицинский и стоматологический университет (medicalxpress.com) . Проверено 18 сентября 2022 г.
  115. ^ Ватанабэ С., Кобаяши С., Огасавара Н., Окамото Р., Накамура Т., Ватанабэ М. и др. (март 2022 г.). «Трансплантация кишечных органоидов мышиной модели колита». Протоколы природы . 17 (3): 649–671. дои : 10.1038/s41596-021-00658-3 . ПМИД   35110738 . S2CID   246488596 .
  116. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д и Адер М., Танака Э.М. (декабрь 2014 г.). «Моделирование человеческого развития в 3D-культуре». Современное мнение в области клеточной биологии . 31 : 23–28. дои : 10.1016/j.ceb.2014.06.013 . ПМИД   25033469 .
  117. ^ Мартинес-Моралес-младший, Каводасси Ф, Боволента П (2017). «Координированные морфогенетические механизмы формируют глаз позвоночных» . Границы в неврологии . 11 : 721. дои : 10.3389/fnins.2017.00721 . ПМЦ   5742352 . ПМИД   29326547 .
  118. ^ Гордон А., Юн С.Дж., Тран С.С., Макинсон К.Д., Пак Дж.Я., Андерсен Дж. и др. (март 2021 г.). «Долгосрочное созревание корковых органоидов человека соответствует ключевым ранним постнатальным переходам» . Природная неврология . 24 (3): 331–342. дои : 10.1038/s41593-021-00802-y . ПМК   8109149 . ПМИД   33619405 .

Дальнейшее чтение [ править ]

Внешние ссылки [ править ]

Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Organoid&oldid=1230101095"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 2c866c6fabe20a55f40dc0769f89c199__1718892480
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/2c/99/2c866c6fabe20a55f40dc0769f89c199.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Organoid - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)