Гистопатология

Гистопатология (соединение из трех греческих слов: ἱστός Histos 'ткани', πάθος pathos 'страдания' и -λογία -logia ') -это микроскопическое исследование ткани для изучения проявлений заболевания . В частности, в клинической медицине гистопатология относится к изучению биопсии или хирургического , после образца патологом того, как образец обрабатывался и гистологические срезы были помещены на стеклянные слайды. Напротив, цитопатология исследует свободные клетки или микрофрагменты тканей (как «клеточные блоки ").

Сбор тканей

Гистопатологическое исследование тканей начинается с хирургии , биопсии или вскрытия . Ткань удаляется из организма или растения , а затем, часто после экспертного рассечения в свежем состоянии, помещается в фиксатор , который стабилизирует ткани для предотвращения распада . Наиболее распространенным фиксатором является 10% нейтральный буферный формалин (соответствует 3,7% мас / Об . .

Подготовка к гистологии

Затем ткань готовится для просмотра под микроскопом, используя либо химическую фиксацию, либо замороженную часть.

Если большой образец предоставляется, например, из хирургической процедуры, то патолог смотрит на образец ткани и выбирает часть, наиболее вероятно, дает полезную и точную диагностику - эта часть удаляется для изучения в процессе, обычно известном как кассовый или разрезанный. Большие образцы вырезаются, чтобы правильно расположить их анатомические структуры в кассете. Некоторые образцы (особенно биопсии) могут подвергаться предварительному введению агара , чтобы обеспечить правильную ориентацию ткани в кассете, а затем в блоке, а затем на слайде диагностической микроскопии. Затем это помещается в пластиковую кассету для большей части остальной части процесса. ^{[ Цитация необходима ]}

Химическая фиксация

В дополнение к формалину использовались другие химические фиксаторы. Но с появлением иммуногистохимии (IHC) окрашивания и диагностического молекулярного патологического тестирования на этих образцах образцов формалин стал стандартным химическим фиксатором в диагностической гистопатологии человека. Время фиксации для очень маленьких образцов короче, а в гистопатологии человека существуют стандарты.

Обработка

Вода удаляется из образца на последовательных этапах с использованием увеличения концентрации спирта . ^{[ 1 ]} Ксилол используется в последней фазе обезвоживания вместо спирта - это потому, что воск, используемый на следующей стадии, растворим в ксилоле , где он не находится в спирте, позволяя воску проникать (инфильтрат) образец. ^{[ 1 ]} Этот процесс обычно автоматизирован и выполняется в течение ночи. Восковой инфильтрированный образец затем переносятся в отдельный встроенный (обычно металлический) контейнер (обычно металл). Наконец, расплавленный воск вводится вокруг образца в контейнере и охлаждается до затвердевания, чтобы встраивать его в восковой блок. ^{[ 1 ]} Этот процесс необходим для обеспечения правильно ориентированного образца, достаточно прочного для получения тонкого сечения (ы) микротома для слайда.

После того, как встроенный восковой блок будет закончен, срезы будут вырезаны из него и обычно размещены для плавания на поверхности водяной ванны, которая распределяет участок. Обычно это делается вручную и является квалифицированной работой (гистотехнологом), когда лабораторный персонал делает выбор того, какие части образцов микротома -восковой ленты размещают на слайдах. Ряд слайдов обычно готовятся с разных уровней по всему блоку. После этого тонкий срез, установленный на слайд, окрашивается, и на нем установлено защитное покрытие. Для общих пятен обычно используется автоматический процесс; Но редко используемые пятна часто делаются вручную. ^{[ 1 ]}

Замороженная секция обработка

Первоначальная оценка подозреваемой лимфомы состоит в том, чтобы сделать «сенсорный подготовку», в котором стеклянный слайд слегка прижат к удаленной лимфоидной ткани и впоследствии окрашивается (обычно окрашивание H & E ) для оценки при световой микроскопии . Второй метод обработки гистологии называется обработкой замороженной секции . Это очень технический научный метод, выполняемый обученным гистокционистом. В этом методе ткань заморожены и тонко нарезают с использованием микротома, установленного в охлаждении ниже замерзания, называемого Cryostat . Тонкие замороженные срезы монтируются на стеклянном горке, непосредственно фиксируются в жидком фиксаторе и окрашиваются с использованием аналогичных методов окрашивания, как традиционные восковые встроенные секции. Преимущества этого метода - быстрое время обработки, меньше требований к оборудованию и меньшая потребность в вентиляции в лаборатории. Недостатком является низкое качество финального слайда. Он используется в внутриоперационной патологии для определений, которые могут помочь в выборе следующего шага в хирургии во время этого хирургического сеанса (например, для предварительного определения ясности Маржа резекции опухоли во время операции).

Окрашивание обработанных гистологических слайдов

Это можно сделать для того, чтобы скользить, обрабатываемые химической фиксацией или слайдами замороженных срезов. Чтобы увидеть ткань под микроскопом, срезы окрашиваются одним или несколькими пигментами . Целью окрашивания является выявление клеточных компонентов; Контракты используются для обеспечения контраста.

Наиболее часто используемым пятном в гистологии является сочетание гематоксилина и эозина (часто сокращенного H & E). Гематоксилин используется для окрашивания ядра синего , в то время как эозин окрашивает цитоплазму и внеклеточную соединительную ткани матрицы большинства клеток розового . Существуют сотни различных методов, которые использовались для избирательного окрашивания ячеек. Другие соединения, используемые для окрашивания срезов ткани, включают сафранин , масляное красное O , Congo Red , серебряные соли и искусственные красители. Гистохимия относится к науке об использовании химических реакций между лабораторными химическими веществами и компонентами в тканях. Обычно выполненная гистохимическая техника - это прусская синяя реакция Perls, используемая для демонстрации отложений железа при таких заболеваниях, как гемохроматоз . ^{[ 2 ]}

Недавно антитела использовались для окрашивания определенных белков , липидов и углеводов . Этот метод, называемый иммуногистохимией , значительно увеличил способность специфически идентифицировать категории клеток под микроскопом. Другие передовые методы включают гибридизацию in situ для идентификации специфических молекул ДНК или РНК . Эти методы окрашивания антителами часто требуют использования гистологии замороженного сечения. Эти процедуры, приведенные выше, также выполняются в лаборатории под пристальным вниманием и точностью обученного специализированного медицинского лабораториста (гистокомента). Цифровые камеры все чаще используются для захвата гистопатологических изображений.

Интерпретация

Гистологические слайды изучаются под микроскопом патологом , специалистом по с медицинской точки зрения, который завершил признанную программу обучения. Этот медицинский диагноз сформулирован как отчет о патологии, описывающий гистологические результаты и мнение патолога. В случае рака это представляет собой диагноз ткани , необходимый для большинства протоколов лечения. При удалении рака патолог укажет, очищается ли хирургический край или задействован (оставшийся остаток рак). Это делается с использованием хлеба или CCPDMA метода обработки . Микроскопические визуальные артефакты могут потенциально вызвать ошибочную диагноз образцов.

Ниже приведены примеры общих особенностей подозрительных результатов, которые можно оценить от низкого до высокого увеличения на гистопатологии:

Ориентация (наименьшее увеличение): в этом случае ориентировано на поверхность кожи (зеленый). Повреждение наблюдается (красный), и его разграничение можно различить (диффузно в этом случае)
Архитектурный паттерн любых подозрительных клеток, в данном случае гнезд клеток, а также компоненты промежуточной стромы.
Клеточное расположение , включая толпу и полярность клеток (общие тенденции между клетками на границе, такие как удлинение или « палисадирование » в этом случае). Количество митозов также может быть оценено на этом уровне.
Субклеточные особенности (может потребоваться наибольшее увеличение)

Архитектурные закономерности

Основные гистопатологические архитектурные паттерны включают в себя:

Гнезда : острова клеток аналогичного типа.
Ацинар или трубчатый : каждый ацинус состоит из клеток, которые окружают просвет.
Трабекулярные , удлиненные (стержневые) группы клеток.
Папиллярный : выпуклости эпителиоидных клеток вокруг фиброваскулярных ядер.
Микропапиллярные : папиллярные пучки без фиброваскулярных ядер
Фассекуляр : обычно один и тот же тип ячейки повсюду, но некоторые образуют полосоподобные группы, которые выровнены в одном и том же направлении.
Плетеное или сторообразные : удлиненные клетки или ядра, в которых мелкие пучки выровнены в схеме, в остальном.
Сплошное : более или менее одинаковый тип ячейки во всем, без пробелов между и никакой другой конкретной картины.
Крибриформ : твердый с несколькими прозрачными пространствами.
Whorled : несколько концентрических объектов или спиральная форма
Паттерн колеса : центральные точки, которые излучают клетки или соединительную ткань наружу

Ядерные паттерны

Основные ядерные паттерны включают:

Мономорфный при относительно похожих размерах и формах.
Плеоморфный при наличии разных размеров и форм. Это часто коррелирует с повышенным ядром к соотношению цитоплазмы . Эти особенности обычно указывают на злокачественные новообразования .
Тонкий хроматин , когда он незаметный (по существу, только ядра, наблюдаемый в ядрах), по сравнению с грубым хроматином.
Иногда « гетерохроматические » и « эухроматические » ядра используются для визуального внешнего вида, но это строго относится к молекулярной структуре ДНК.
Гранулированный "соленый и пеппер" хроматин .

В инфаркте миокарда

После инфаркта миокарда (сердечный приступ) гистопатология не видно в первые ~ 30 минут. Единственный возможный знак в первые 4 часа - это волнистость волокон на границе. Позже, однако, некроз коагуляции инициируется , с отеком и кровоизлиянием. Через 12 часов можно увидеть кариопиноз и гиперреозинофилию миоцитов с некрозом полосы сокращения в краях, а также начала инфильтрации нейтрофилов. Через 1 - 3 дня продолжается некроз коагуляции с потерей ядер и полос и повышенной инфильтрации нейтрофилов в интерстиции. До конца первой недели после инфаркта начинается распад мертвых мышечных волокон, некроза нейтрофилов и начала удаления мертвых клеток макрофагов на границе, что увеличивает последующие дни. Через неделю также начинается образование грануляционной ткани на полях, которое созревает в течение следующего месяца, и получает увеличение осаждения коллагена и снижение клеточности до тех пор, пока Обучение миокарда полностью созревает примерно через 2 месяца после инфаркта. ^{[ 3 ]}

Смотрите также

Ссылки

^ Jump up to: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} «Основное руководство по гистологическому окрашиванию и приготовлению ткани» . Архивировано с оригинала 6 июля 2016 года.
^ «Перл - эритроциты - окрашивание» . Спирбд .
^ Глава 11 в: Митчелл, Ричард Шеппард; Кумар, Виной; Аббас, Абул К.; Фаусто, Нельсон (2007). Роббинс Базовая патология . Филадельфия: Сондерс. ISBN 978-1-4160-2973-1 Полем 8 -е издание.

Внешние ссылки

Курс виртуальной гистологии - Университет Цюриха (немецкая, английская версия в подготовке)
Гистопатология шейки матки - цифровой атлас (группа скрининга IARC)
Гистопатологическая виртуальная слайдбокс - Университет Айовы

[mwap-1] Jump up to: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} «Основное руководство по гистологическому окрашиванию и приготовлению ткани» . Архивировано с оригинала 6 июля 2016 года.

[2] «Перл - эритроциты - окрашивание» . Спирбд .

[Kumar11-3] Глава 11 в: Митчелл, Ричард Шеппард; Кумар, Виной; Аббас, Абул К.; Фаусто, Нельсон (2007). Роббинс Базовая патология . Филадельфия: Сондерс. ISBN 978-1-4160-2973-1 Полем 8 -е издание.

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

v Т и Патология
Принципы патологии	Болезнь Инфекция Неоплазия Причина Патогенез Гемодинамика Ишемия Воспаление Повреждение ячейки Заживление раны Клеточная адаптация Атрофия Гипертрофия Гиперплазия Дисплазия Метаплазия Плоскоклеточный Желез Гибель клеток Некроз Коагулятивный некроз Разжиженный некроз Гангренозный некроз Кассозный некроз Жирный некроз Фибриноидный некроз Миоцитолиз Запрограммированная гибель клеток Апоптоз Пинкноз Кариоррексис Кариолиз Скопления пигмент Гемосидеррин Липохром / липофусцин Меланин Стеатоз
Анатомическая патология	Хирургическая патология Цитопатология Вскрытие Молекулярная патология Судебно -медицинская патология Пероральная и челюстная патология Валовая обработка Гистопатология Иммуногистохимия Электронная микроскопия Иммунофлуоресценция Гибридизация флуоресценции in situ
Клиническая патология	Клиническая химия Гематопатология Трансфузионная медицина Медицинская микробиология Диагностическая иммунология Иммунопатология Анализ ферментов Масс -спектрометрия Хроматография Проточная цитометрия Банк крови Микробиологическая культура Серология