Периодическая кислота – окраска Шиффа
Периодическая кислота-Шиффа ( PAS ) — это метод окрашивания, используемый для обнаружения полисахаридов , таких как гликоген , и слизистых веществ, таких как гликопротеины , гликолипиды и муцины, в тканях. Реакция периодной кислоты окисляет вицинальные диолы в этих сахарах , обычно разрывая связь между двумя соседними атомами углерода, не участвующими в гликозидной связи или замыкании кольца в кольце моносахаридных единиц, входящих в состав длинных полисахаридов, и создавая пару альдегидов на двух свободных концах каждого разорванного моносахаридного кольца. Условия окисления должны быть в достаточной степени отрегулированы, чтобы не допустить дальнейшего окисления альдегидов. Эти альдегиды затем реагируют с реагентом Шиффа, давая пурпурно-пурпурный цвет. Подходящее основное пятно часто используется в качестве контрастного пятна .
• Окрашивание PAS-диастазой (PAS-D) – это окрашивание PAS, используемое в сочетании с диастазой , ферментом , расщепляющим гликоген.
• Альциановый синий/периодная кислота – Шифф (AB/PAS или AB-PAS) использует альциановый синий перед этапом PAS.
Использование
[ редактировать ]
Окрашивание PAS в основном используется для окрашивания структур, содержащих высокую долю углеводных макромолекул ( гликоген , гликопротеин , протеогликаны ), обычно встречающихся, например, в соединительных тканях , слизи , гликокаликсе и базальных пластинках .
Окрашивание PAS можно использовать для диагностики нескольких заболеваний:
- Болезнь накопления гликогена (в отличие от других нарушений накопления).
- Аденокарциномы , которые часто секретируют нейтральные муцины.
- Болезнь Педжета молочной железы . [ 1 ]
- Альвеолярная саркома мягких частей . [ 2 ]
- Окрашивание макрофагов при болезни Уиппла . [ 3 ]
- Его можно использовать для диагностики дефицита α1-антитрипсина , если перипортальные гепатоциты печени окрашиваются положительно.
- Агрегаты PAS-положительных лимфоцитов присутствуют в эпидермисе при грибовидном микозе и синдроме Сезари , называемые микроабсцессами Потри.
- Саркома Юинга
- Эритролейкемия , лейкемия незрелых эритроцитов. Эти клетки окрашиваются в яркий цвет фуксии.
- Легочный альвеолярный протеиноз .
- Грибковая инфекция , клеточные стенки грибов окрашиваются в пурпурный цвет; это работает только с живыми грибами. [ нужна ссылка ] Напротив, окрашивание метенамин-серебрением Грокотта (GMS) окрашивает как живые, так и мертвые грибковые организмы.
- Он используется для выявления гликогена в образцах биопсии легких у детей с легочным интерстициальным гликогенозом (СВН).
- Его можно использовать для выделения включений сверхсшитых липидов при цероидном липофусцинозе (НКЛ).
Присутствие гликогена можно подтвердить на срезе ткани, используя диастазу для переваривания гликогена из среза, а затем сравнивая расщепленный диастазой срез PAS с нормальным срезом PAS. На диастазо-отрицательном слайде будет наблюдаться пурпурное окрашивание там, где в срезе ткани присутствует гликоген. На предметном стекле, обработанном диастазой, не будет положительного окрашивания PAS в этих местах.
Окрашивание PAS также используется для окрашивания целлюлозы . Одним из примеров может быть поиск имплантированных медицинских устройств, состоящих из неокисленной целлюлозы.
Если окрашивание PAS будет проводиться на ткани, рекомендуемым фиксатором является 10% формалин с нейтральным буфером или раствор Буэна . Для мазков крови рекомендуемым фиксатором является метанол . Глутаральдегид не рекомендуется использовать, поскольку свободные альдегидные группы могут вступить в реакцию с реагентом Шиффа , что может привести к ложноположительному окрашиванию. [ 4 ]
См. также
[ редактировать ]- Карбоксифлуоресцеин
- DyLight Fluor — линейка флуоресцентных красителей.
- Египетский синий
- Эозин
- Эритрозин
- флуоресцеин
- Флуоресцеин амидит (FAM)
- Гидролиз диацетата флуоресцеина , биохимический лабораторный тест
- Флуоресцеин изотиоцианат (FITC)
- Генцианвиолет
- Он фиолетовый
- Лазерные красители
- Метиловый синий
- Метиловый фиолетовый
- Метиленовый синий
- Новый метиленовый синий
- Феррицианид калия
- Ферроцианид калия
- берлинская лазурь
- Бенгальская роза
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Томас Дж. Лоутон (27 апреля 2009 г.). Грудь . Издательство Кембриджского университета. стр. 55–. ISBN 978-0-521-88159-3 . Проверено 16 ноября 2010 г.
- ^ ( Ладани и др. 2002 г. Архивировано 24 декабря 2003 г. на archive.today.
- ^ К. Хаузер (29 августа 2005 г.). Обзор совета гастроэнтерологии и гепатологии клиники Мэйо . ЦРК Пресс. стр. 108–. ISBN 978-0-203-50274-7 . Проверено 16 ноября 2010 г.
- ^ Карсон, Фрида Л.; Хладик, Криста (2009). Гистотехнология: текст для самообучения (3-е изд.). Гонконг: Издательство Американского общества клинической патологии . стр. 137–139. ISBN 978-0-89189-581-7 .