Агар для подсчета чашек

Агар для подсчета чашек ( PCA ), также называемый агаром стандартных методов ( SMA ), представляет собой микробиологическую питательную среду , обычно используемую для оценки или мониторинга «общего» или жизнеспособного роста бактерий в образце. PCA не является селективным средством.

Общее количество живых аэробных бактерий можно определить с помощью агара для подсчета чашек, который является субстратом для роста бактерий. Среда содержит казеин , который обеспечивает азот , углерод , аминокислоты , витамины и минералы, способствующие росту организма. Дрожжевой экстракт является источником витаминов, особенно группы B. Глюкоза является ферментируемым углеводом, а агар – затвердевающим агентом. Это неселективная среда, и количество бактерий подсчитывается в колониеобразующих единицах на грамм (КОЕ/г) в твердых образцах и (КОЕ/мл) в жидких образцах.

Для технической платформы

Техника заливки чашек является типичной методикой, используемой для приготовления агаров для подсчета чашек. Здесь инокулят добавляют в расплавленный агар перед заливкой чашки. Расплавленный агар охлаждают примерно до 45 градусов Цельсия и стерильным методом выливают в чашку Петри, содержащую определенный разведенный образец. Отсюда планшеты вращаются, чтобы обеспечить равномерное смешивание образцов с агаром. Инкубация чашек является следующим этапом и проводится в течение примерно 3 дней при температуре от 20 до 30 градусов Цельсия.

Состав

Ингредиенты

ферментативный перевар казеина/триптона	5,0 г/л
дрожжевой экстракт	2,5 г/л
глюкоза	1,0 г/л
так что	15,0 г/л

Преимущества

• легко выполнить
• больший объем пробы, чем метод поверхностного распределения, что позволяет обнаруживать более низкие микробиологические концентрации
• поверхность агара не требует предварительной сушки
• можно определить количество микробов/мл в образце
• заранее подготовленные пластины не нужны
• возможность определения бактериальной обсемененности пищевых продуктов

Получение изолированных колоний из агаров для подсчета чашек.

После успешной подготовки чашки клетки агара для подсчета на чашке вырастут в колонии, которые можно будет достаточно изолировать для определения исходного типа клеток. Колониеобразующая единица (КОЕ) является подходящим описанием происхождения колонии. При подсчете на чашках подсчитывают колонии, но количество обычно записывают в КОЕ. В связи с тем, что колонии, растущие на чашках, могут начинаться как с одной клетки, так и с группы клеток, КОЕ позволяет правильно описать плотность клеток. Метод полосовой пластины помогает идентифицировать неизвестный микроб, образуя отдельные колонии на чашке с агаром, что позволяет использовать метод КОЕ:

1. Начало полосатого узора. Пометьте основание тарелки. Затем визуализируйте тарелку в четырех секторах:
   • вверху слева (I),
   • вверху справа (II),
   • внизу справа (III),
   • внизу слева (IV).

Нанесите штрихами смешанную культуру взад и вперед в первом квадранте (вверху слева) чашки с агаром. Не разрезайте агар, просто соскоблите верхушку. Подожгите петлю, чтобы избавиться от остатков культуры. Подождите, пока он остынет для следующего квадранта.

1. Опять полоса. Перейдите ко второму квадранту с полосками. Полосы на носителе будут перекрываться. Подожгите петлю, чтобы избавиться от остатков культуры. Подождите, пока он остынет для следующего квадранта.
2. Опять полоса. Поверните пластину на 180 градусов, чтобы получить правильный угол штриховки в третьем квадранте. Обязательно охладите петли перед тем, как прокладывать их в четвертом квадранте.
3. Полоса в центре. Проведите полосу в последний раз, начиная с четвертого квадранта и до центра тарелки. Подожгите петли. Инкубируйте планшет в течение назначенного времени и соответствующей температуры.

Ссылки

1. «Агар для подсчета пластин (PCA) - питательные среды». Микробные заметки . 13 мая 2019 г. Проверено 6 декабря 2021 г.

2. Арьял, Сагар (08 июля 2021 г.). «Метод полосовой пластины - принцип, методы, значение, ограничения». Микробные заметки . Проверено 7 декабря 2021 г.