Нью-Йоркский агар

NYC ( Нью-Йорк ) или среду GC ( Neisseria gonorrhoeae ) используют среду Для выделения гонококков . ^{[ 1 ]}

Состав

Агаровая основа состоит из: ^{[ 1 ]}

Ингредиенты	Грамм на литр
Протеозный пептон	15
Кукурузный крахмал	1
Глюкоза	5
Хлорид натрия	5
Дикалий гидрофосфат	4
Калия дигидрофосфат	1
Так что	20

Конечный pH (при 25°C) 7,4±0,2.

Предыстория и принципы

NYC Agar Base изначально была разработана Фауэром, Вейсбурдом и Уилсоном. ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]}^{[ 3 ]} в Департаменте здравоохранения Нью-Йорка для селективной изоляции патогенных видов Neisseria из клинических образцов. Он состоит в основном из пептонно-кукурузно-крахмального агара, забуференного фосфатами и дополненного лошадиной плазмой , лошадиным гемоглобином , декстрозой , автолизатом дрожжей и антибиотиками . ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]} Эта среда превосходит другие среды, обычно используемые для выделения видов Neisseria . ^{[ 1 ]}^{[ 4 ]}^{[ 5 ]} Прозрачность среды помогает в изучении колониальных типов. ^{[ 6 ]}

Протеозопептон, лошадиная плазма, гемоглобин обеспечивают питательные вещества для роста N. gonorrhoeae и N. meningitidis . Фосфатный буфер обеспечивает среду. Добавленная селективная добавка содержит антибиотики ванкомицин , колистин , нистатин и триметоприм для подавления сопутствующей флоры. Ванкомицин подавляет рост грамположительных бактерий. Колистин ингибирует грамотрицательные бактерии, включая виды Pseudomonas , а протей ингибируется триметопримом . ^{[ 7 ]} Комбинация триметоприма и колистина действует синергически против грамотрицательных бактерий . ^{[ 8 ]} Крахмал нейтрализует токсичные метаболиты, вырабатываемые нейссерией . Добавка из дрожжевого автолизата удовлетворяет требованиям по CO _{2 ,} необходимым для ускорения роста Neisseria . Дрожжи содержат щавелевоуксусную кислоту , которая метаболизируется гонококками с образованием достаточного количества CO ₂ для роста капнофильных гонококков. ^{[ 9 ]} Кроме того, присутствие автолизата дрожжей уменьшает лаг-фазу роста Neisseria , тем самым увеличивая размер и количество колоний. Образец можно нанести штрихами непосредственно на среду для достижения максимальной изоляции.

Процедура

Сделайте штриховые штрихи на как образце можно скорее после его поступления в лабораторию . Если материал культивируется непосредственно из тампона , действуйте следующим образом: ^{[ 10 ]}

Прокатите тампон непосредственно по среде в форме большой буквы «Z», чтобы обеспечить достаточный контакт тампона со средой для переноса микроорганизмов .
Перекрестите узор «Z» стерильной проволочной петлей , желательно в клинике . Если это не было сделано ранее, перекрестное стрикирование следует провести в лаборатории.
Как можно скорее поместите культуру в аэробную среду, обогащенную углекислым газом .
Инкубируйте при 35 ± 2 °C и исследуйте после инкубации в течение ночи и снова примерно через 48 часов.
Субкультуру для выявления N. gonorrhoeae следует производить в течение 18–24 часов. При отправке после инкубации колонии следует пересеять перед проведением биохимических идентификационных тестов, чтобы гарантировать достижение адекватной жизнеспособности.

Ожидаемые результаты

Типичная колониальная морфология выглядит следующим образом: ^{[ 7 ]}

N. gonorrhoeae может выглядеть как небольшие (0,5–1,0 мм) слизистые колонии от серовато-белого до бесцветного цвета. N. meningitidis выглядит как большие слизистые колонии от бесцветного до голубовато-серого цвета.

Колонии могут быть отобраны для окрашивания по Граму , субкультивирования или других диагностических процедур.

Ссылки

^ Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и Фауэр, Вейсбурд, Уилсон и Мэй, 1973 г., Лаборатория здоровья. наук, 10: 44.
^ Jump up to: ^а ^б Фауэр, Вейсбурд и Уилсон, 1973, Лаборатория здоровья. наук, 10: 55.
^ Фауэр Ю.К., Вейсбурд М.Х. и Уилсон М.Е., 1973, Health Lab Sci., 10 (2) 61.
^ Гранато, Шнайбл-Смит и Вайнер, 1981, Дж. Клин. Микробиол.13:963.
^ Гриффин П.Дж. и Рейдер С.В., 1957, J. Biol. Мед., 29, 613
^ Макфаддин Дж. Ф., 1985, Среды для изоляции, культивирования, идентификации и поддержания медицинских бактерий, Vol. 1, Уильямс и Уилкинс, Балтимор
^ Jump up to: ^а ^б Кнапп и Куманс. 1999. В Мюррей, Барон, Пфаллер, Теновер и Йолкен (ред.), Руководство по клинической микробиологии, 7-е изд. Американское общество микробиологии, Вашингтон, округ Колумбия
^ . Симмонс Н.А., 1970, Дж. Клин. Патол., 23, 757.
^ Лоутон и Кох, 1982, Дж. Клин. Микробиол., 20: 905.
^ Центр по контролю заболеваний. 1975. Критерии и методы диагностики гонореи, USPHS, Атланта, Джорджия.

[First-1] Jump up to: ^а ^б ^с ^д ^и Фауэр, Вейсбурд, Уилсон и Мэй, 1973 г., Лаборатория здоровья. наук, 10: 44.

[Second-2] Jump up to: ^а ^б Фауэр, Вейсбурд и Уилсон, 1973, Лаборатория здоровья. наук, 10: 55.

[3] Фауэр Ю.К., Вейсбурд М.Х. и Уилсон М.Е., 1973, Health Lab Sci., 10 (2) 61.

[4] Гранато, Шнайбл-Смит и Вайнер, 1981, Дж. Клин. Микробиол.13:963.

[5] Гриффин П.Дж. и Рейдер С.В., 1957, J. Biol. Мед., 29, 613

[6] Макфаддин Дж. Ф., 1985, Среды для изоляции, культивирования, идентификации и поддержания медицинских бактерий, Vol. 1, Уильямс и Уилкинс, Балтимор

[Third-7] Jump up to: ^а ^б Кнапп и Куманс. 1999. В Мюррей, Барон, Пфаллер, Теновер и Йолкен (ред.), Руководство по клинической микробиологии, 7-е изд. Американское общество микробиологии, Вашингтон, округ Колумбия

[8] . Симмонс Н.А., 1970, Дж. Клин. Патол., 23, 757.

[9] Лоутон и Кох, 1982, Дж. Клин. Микробиол., 20: 905.

[10] Центр по контролю заболеваний. 1975. Критерии и методы диагностики гонореи, USPHS, Атланта, Джорджия.

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]

[ 7 ]

[ 8 ]

[ 9 ]

[ 10 ]