Шоколадный агар


Неселективная среда с шоколадным агаром слева, известная как чрезмерный рост, благодаря своему составу позволяла расти колониям организмов, отличных от N. gonorrhoeae , тогда как селективная среда Тейера-Мартина справа содержала противомикробные препараты, ингибирующие рост. микроорганизмов, отличных от N. gonorrhoeae , не показывает чрезмерного роста, но положителен на N. gonorrhoeae бактерии . (Увеличьте изображение, чтобы увидеть колонии N. gonorrhoeae )
Шоколадный агар ( CHOC ) или шоколадный кровяной агар ( CBA ) представляет собой неселективную обогащенную питательную среду , используемую для изоляции патогенных бактерий. [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ] Это вариант пластинки с кровяным агаром , содержащей эритроциты путем , лизированные медленного нагревания до 80°C. Шоколадный агар используется для выращивания требовательных респираторных бактерий, таких как Haemophilus influenzae и Neisseria meningitidis . [ 4 ] Кроме того, некоторые из этих бактерий, особенно H. influenzae , нуждаются в факторах роста, таких как никотинамидадениндинуклеотид (фактор V или НАД) и гемин (фактор X), которые находятся внутри эритроцитов; таким образом, предпосылкой роста этих бактерий является наличие лизатов эритроцитов. Тепло также инактивирует ферменты, которые в противном случае могли бы разрушить НАД. Агар назван в честь своего цвета и не содержит шоколадных продуктов.
Варианты
[ редактировать ]Шоколадный агар с добавлением бацитрацина становится селективным в отношении рода Haemophilus . Другой вариант шоколадного агара, называемый агаром Тайера-Мартина, содержит набор антибиотиков, подходящих для видов Neisseria .
В состав шоколадного агара входят следующие компоненты:
Ингредиент | Количество (граммы на литр) | Цель |
---|---|---|
Перевар казеина/животных тканей | 15,0 грамм | Источник аминокислот и пептидов для роста бактерий. |
Кукурузный крахмал | 1,0 грамм | Обеспечивает углеводы в качестве источника энергии для бактерий. |
Хлорид натрия | 5,0 грамм | Поддерживает осмотический баланс в среде. |
Дикалийфосфат | 4,0 грамма | Действует как буфер pH для поддержания желаемого уровня pH для роста бактерий. |
Монокалийфосфат | 1,0 грамм | Действует как буфер pH для поддержания желаемого уровня pH для роста бактерий. |
Раствор гемоглобина 2% | 500 мл | Обеспечивает железо и другие питательные вещества, необходимые для роста бактерий. |
Обогащение коферментов | 10 мл | Содержит коферменты, необходимые для определенных метаболических путей бактерий. |
Так что | 10 грамм | Затвердевающий агент, позволяющий среде образовывать твердую поверхность для роста бактерий. |
Точные концентрации этих ингредиентов могут незначительно отличаться в зависимости от конкретной рецептуры, используемой в разных лабораториях или разными производителями.
История
[ редактировать ]Добавление нагретой крови в среду было впервые зарегистрировано для использования Коэном и Фицджеральдом в 1910 году, а затем доктором Ольгой Повицки из Департамента здравоохранения Нью-Йорка . Бюро лабораторий [ 5 ] [ 6 ] Термин «шоколадный агар» происходит от коричневого цвета, возникающего из-за более высокой концентрации нагретой крови в смеси, и впервые получил отличительное описание Уоррена Кроу в 1915 году. [ 7 ]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Сеген. «Шоколадный агар: определение» . Бесплатный словарь . Проверено 28 сентября 2012 г.
- ^ «Шоколадный агар (ШОК)» . Системы без анаэробов . Проверено 28 сентября 2012 г.
- ^ Андерсон, Синди (2013). Большие приключения в лаборатории микробиологии (7-е изд.). Пирсон. п. 175. ИСБН 978-1-269-39068-2 .
- ^ Ганн, бакалавр (1984). «Шоколадный агар: дифференциальная среда для грамположительных кокков» . Журнал клинической микробиологии . 20 (4): 822–823. doi : 10.1128/jcm.20.4.822-823.1984 . ПМК 271442 . ПМИД 6490866 .
- ^ Кока, Артур Ф.; Келли, Маргарет Ф. (1 января 1921 г.). «VI. Серологическое исследование бациллы Пфайфера» . Журнал иммунологии . 6 (1): 87–101. doi : 10.4049/jimmunol.6.1.87 . ISSN 0022-1767 .
- ^ Маклеод, JW; Уитли, Б; Фелон, HV (февраль 1927 г.). «О некоторых необъяснимых трудностях, возникших при культивировании гонококка: роль аминокислот» . Британский журнал экспериментальной патологии . 8 (1): 25–37. ПМК 2047973 .
- ^ КРОУ, УОРРЕН (1915). «Некоторые аспекты проблемы цереброспинальной лихорадки. С примечанием о методе выделения стрептококков из ран и т. д.» . Ланцет . 186 (4812): 1127–1132. дои : 10.1016/s0140-6736(01)56054-7 . ISSN 0140-6736 .