✖


Jump to content

Пятно по Граму

(Перенаправлено из окрашивания по Граму )
Микрофотография грамположительного кокка и грамотрицательной палочки.
Окраска по Граму смешанных золотистых стафилококков ( S. aureus ATCC 25923, грамположительные кокки, фиолетового цвета) и Escherichia coli ( E. coli ATCC 11775, грамотрицательных бацилл, красного цвета), наиболее распространенных эталонных бактерий, окрашиваемых по Граму.

Окрашивание по Граму ( окрашивание по Граму или метод Грама ) — это метод окрашивания, используемый для разделения видов бактерий на две большие группы: грамположительные бактерии и грамотрицательные бактерии . Его также можно использовать для диагностики грибковой инфекции . [1] Название происходит от датского бактериолога Ганса Кристиана Грама , который разработал метод в 1884 году. [2]

Окрашивание по Граму позволяет дифференцировать бактерии по химическим и физическим свойствам их клеточных стенок . Грамположительные клетки имеют толстый слой пептидогликана в клеточной стенке, который сохраняет первичное окрашивание – кристаллический фиолетовый . Грамотрицательные клетки имеют более тонкий слой пептидогликана, который позволяет кристаллическому фиолетовому вымываться при добавлении этанола . окрашивает их в розовый или красный цвет Контракраска , [3] обычно сафранин или фуксин . Раствор Люголя всегда добавляют после добавления кристаллического фиолетового для усиления связи пятна с клеточной мембраной .

Окрашивание по Граму почти всегда является первым шагом в идентификации группы бактерий. Хотя окрашивание по Граму является ценным диагностическим инструментом как в клинических, так и в исследовательских целях, не все бактерии можно однозначно классифицировать с помощью этого метода. Это приводит к образованию грамм-переменных и грамм-неопределенных групп.

История

[ редактировать ]

Метод назван в честь своего изобретателя, датского ученого Ганса Христиана Грама (1853–1938), который разработал методику во время работы с Карлом Фридлендером в морге городской больницы Берлина в 1884 году. Грам разработал свою методику не с целью не только отличать один тип бактерий от другого, но и делать бактерии более заметными на окрашенных участках легочной ткани. [4] Грам заметил, что некоторые бактериальные клетки обладают заметной устойчивостью к обесцвечиванию. Основываясь на этих наблюдениях, Грам разработал первоначальную процедуру окрашивания по Граму, первоначально используя анилин-генцианвиолет Эрлиха, йод Люголя, абсолютный спирт для обесцвечивания и коричневый Бисмарк для контрастного окрашивания. [5] Он опубликовал свой метод в 1884 году и включил в свой краткий отчет наблюдение, что тифозная палочка не сохраняет пятно. [6] Первоначально Грам не проводил различия между грамотрицательными и грамположительными бактериями, используя свою процедуру. [5]

Использование

[ редактировать ]
Окраска по Граму Candida albicans из влагалищного мазка. Мелкие овальные хламидоспоры 2–4 мкм . диаметром

Окраска по Граму – бактериологический лабораторный метод. [7] используется для дифференциации видов бактерий на две большие группы ( грамположительные и грамотрицательные ) на основе физических свойств их клеточных стенок . [8] [ нужна страница ] Окрашивание по Граму также можно использовать для диагностики грибковой инфекции . [1] Окрашивание по Граму не используется для классификации архей , поскольку эти микроорганизмы дают весьма разнообразные реакции, не соответствующие их филогенетическим группам . [9]

Некоторые организмы являются грамизменчивыми (это означает, что они могут окрашиваться как отрицательно, так и положительно); некоторые не окрашены красителями, используемыми в технике Грамма, и не видны. [ нужна ссылка ]

Медицинский

[ редактировать ]
См. Также: Патогенные бактерии.

проводят окраску по Граму биологической жидкости или биопсию При инфекцию подозрении на . Окрашивание по Граму дает результаты гораздо быстрее, чем культивирование , и особенно важно, когда инфекция может иметь важное значение в лечении и прогнозе пациента; примерами являются спинномозговая жидкость при менингите и синовиальная жидкость при септическом артрите . [10] [11]

Механизм окрашивания

[ редактировать ]
Грамположительные, окрашенные в фиолетовый цвет (слева) и грамотрицательные, окрашенные в розовый цвет (справа).

Грамположительные бактерии имеют толстую сетчатую клеточную стенку, состоящую из пептидогликана (50–90% клеточной оболочки), и в результате окрашиваются в фиолетовый цвет кристаллическим фиолетовым, тогда как грамотрицательные бактерии имеют более тонкий слой (10% клеточной оболочки). конверт), поэтому не сохраняют пурпурное пятно и окрашиваются сафранином в розовый цвет. Окраска по Граму состоит из четырех основных этапов:

  1. Нанесение первичного красителя ( кристалвиолета ) на термофиксированный мазок бактериальной культуры. Тепловая фиксация убивает некоторые бактерии, но в основном используется для прикрепления бактерий к предметному стеклу, чтобы они не смывались во время процедуры окрашивания.
  2. Добавление йода , который связывается с кристаллическим фиолетовым и удерживает его в клетке.
  3. Быстрое обесцвечивание этанолом или ацетоном
  4. Докраска сафранином ​ . [12] Карболфуксин иногда заменяют сафранином, поскольку он более интенсивно окрашивает анаэробные бактерии, но реже используется в качестве контрастного красителя. [13]
Краткое описание окраски по Граму
Применение Реагент Цвет ячейки
Грамположительный Грамотрицательный
Первичный краситель кристально-фиолетовый фиолетовый фиолетовый
Траппер йод фиолетовый фиолетовый
Обесцвечиватель спирт / ацетон фиолетовый бесцветный
Противопятно сафранин / карболфуксин фиолетовый розовый или красный

Кристаллический фиолетовый (CV) диссоциирует в водных растворах на CV. +
и хлорид ( Cl −
) ионы. Эти ионы проникают через клеточную стенку как грамположительных, так и грамотрицательных клеток. Резюме ​ +
ион взаимодействует с отрицательно заряженными компонентами бактериальных клеток и окрашивает клетки в фиолетовый цвет. [14]

Йодид ( я −
или я −
3 ) взаимодействует с резюме +
и образует большие комплексы кристаллического фиолетового и йода (CV – I) во внутренних и внешних слоях клетки. Йод часто называют протравой , но он является улавливающим агентом, который предотвращает удаление комплекса CV-I и, следовательно, окрашивает клетку. [15]

Когда добавляется обесцвечиватель, такой как спирт или ацетон, он взаимодействует с липидами клеточной мембраны. [16] Грамотрицательная клетка теряет внешнюю липополисахаридную мембрану, а внутренний слой пептидогликана остается открытым. Комплексы CV–I вымываются из грамотрицательной клетки вместе с внешней мембраной. [17] Напротив, грамположительные клетки обезвоживаются в результате обработки этанолом. Большие комплексы CV-I задерживаются внутри грамположительной клетки из-за многослойной природы ее пептидогликана. [17] Этап обесцвечивания имеет решающее значение и должен быть правильно рассчитан по времени; Окраска кристаллическим фиолетовым удаляется как с грамположительных, так и с отрицательных клеток, если обесцвечивающее средство остается на слишком долгое время (в течение нескольких секунд). [18]

После обесцвечивания грамположительная клетка остается фиолетовой, а грамотрицательная клетка теряет фиолетовый цвет. [18] Контркраситель, который обычно представляет собой положительно заряженный сафранин или основной фуксин, применяется последним, чтобы придать обесцвеченным грамотрицательным бактериям розовый или красный цвет. [3] [19] Как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии улавливают контрастное окрашивание. Однако контрастное окрашивание незаметно для грамположительных бактерий из-за более темного пятна кристаллического фиолетового. [ нужна ссылка ]

Примеры

[ редактировать ]

Грамположительные бактерии

[ редактировать ]
Окраска по Граму грамположительных стрептококков , окруженных гнойными клетками
Основная статья: Грамположительные бактерии

Грамположительные бактерии обычно имеют одну мембрану ( монодерма ), окруженную толстым пептидогликаном.Этому правилу следуют два типа: Bacillota (за исключением классов Mollicutes и Negativicutes ) и Actinomycetota . [8] [20] Напротив, представители Chloroflexota (зеленые несерные бактерии) являются монодермами, но имеют тонкий или отсутствующий (класс Dehalococcoidetes ) пептидогликан и могут окрашиваться отрицательно, положительно или неопределенно; представители Deinococta окрашиваются положительно, но представляют собой дидермы с толстым слоем пептидогликана. [8] [ нужна страница ] [20]

Прочность клеточной стенки повышается за счет тейхоевых кислот, гликополимерных веществ, встроенных в пептидогликан. Тейхоевые кислоты играют множество ролей, например, генерируют чистый отрицательный заряд клетки, способствуют жесткости клеточной стенки и поддержанию формы, а также способствуют делению клеток и устойчивости к различным стрессорам, включая тепло и соль. Несмотря на плотность слоя пептидогликана, он остается относительно пористым, позволяя проникать большинству веществ. Для получения более крупных питательных веществ грамположительные бактерии используют экзоферменты, секретируемые внеклеточно для расщепления макромолекул вне клетки. [21]

Исторически грамположительные формы составляли тип Firmicutes , название, которое сейчас используется для самой большой группы. Он включает в себя множество известных родов, таких как Lactobacillus, Bacillus , Listeria , Staphylococcus , Streptococcus , Enterococcus и Clostridium . [22] Он также был расширен за счет включения Mollicutes, бактерий, таких как Mycoplasma и Thermoplasma, у которых нет клеточных стенок и поэтому их нельзя окрашивать по Граму, но они происходят от таких форм. [23]

У некоторых бактерий клеточные стенки особенно хорошо удерживают пятна. При окраске по Граму они будут казаться положительными, даже если они не являются тесно связанными с другими грамположительными бактериями. Их называют кислотоустойчивыми бактериями , и отличить их от других грамположительных бактерий можно только с помощью специальных процедур окрашивания . [24]

Грамотрицательные бактерии

[ редактировать ]
Основная статья: Грамотрицательные бактерии
Грамотрицательные Neisseria gonorrhoeae и гнойные клетки

Грамотрицательные бактерии обычно имеют тонкий слой пептидогликана между двумя мембранами ( дидермой ). [25] Липополисахарид (ЛПС) является наиболее распространенным антигеном на поверхности клеток большинства грамотрицательных бактерий, составляя до 80% внешней мембраны E. coli и сальмонелл . [26] Эти молекулы ЛПС, состоящие из О-антигена или О-полисахарида, сердцевинного полисахарида и липида А, выполняют множество функций, включая вклад в создание отрицательного заряда клетки и защиту от определенных химических веществ. Роль ЛПС имеет решающее значение во взаимодействии хозяин-патоген: О-антиген вызывает иммунный ответ, а липид А действует как эндотоксин. [21]

Кроме того, внешняя мембрана действует как селективный барьер, регулируемый поринами, трансмембранными белками, образующими поры, которые пропускают определенные молекулы. Пространство между клеточной мембраной и внешней мембраной, известное как периплазма, содержит периплазматические ферменты для переработки питательных веществ. Важным структурным компонентом, связывающим слой пептидогликана и внешнюю мембрану, является липопротеин Брауна, который обеспечивает дополнительную стабильность и прочность бактериальной клеточной стенки. [21]

Большинство типов бактерий являются грамотрицательными, включая цианобактерии , зеленые серобактерии и большинство Pseudomonadota (исключением являются некоторые представители Rickettsiales и насекомые-эндосимбионты Enterobacteriales ) . [8] [ нужна страница ] [20]

Грамотвариабельные и грамотрицательные бактерии.

[ редактировать ]

Некоторые бактерии после окраски красителем по Граму дают грамвариабельную картину: видна смесь розовых и пурпурных клеток. [17] [27] В культурах Bacillus, Butyrivibrio и Clostridium уменьшение толщины пептидогликана в процессе роста совпадает с увеличением числа клеток, окрашивающихся грамотрицательно. [27] Кроме того, у всех бактерий, окрашенных красителем по Граму, возраст культуры может влиять на результаты окрашивания. [27]

Грамнеопределенные бактерии не реагируют предсказуемо на окрашивание по Граму и, следовательно, не могут быть определены как грамположительные или грамотрицательные. Примеры включают многие виды Mycobacterium , в том числе Mycobacterium bovis , Mycobacterium leprae и Mycobacterium Tuberculosis , две последние из которых являются возбудителями проказы и туберкулеза соответственно. [28] [29] У бактерий рода Mycoplasma отсутствует клеточная стенка вокруг клеточных мембран . [10] это означает, что они не окрашиваются по методу Грама и устойчивы к антибиотикам, воздействующим на синтез клеточной стенки. [30] [31]

Орфографическое примечание

[ редактировать ]

Термин «окрашивание по Граму» происходит от фамилии Ганса Христиана Грама ; Поэтому эпоним . (Грам) пишется с заглавной буквы, а не нарицательное существительное (пятно), как обычно для научных терминов [32] Начальные буквы грамположительных и грамотрицательных , которые являются одноименными прилагательными , могут быть как заглавными G , так и строчными g , в зависимости от того, какое руководство по стилю (если таковое имеется) регулирует написанный документ. Стиль строчных букв используется Центрами США по контролю и профилактике заболеваний , а также другими режимами стиля, такими как стиль AMA . [33] Словари могут использовать строчные буквы, [34] [35] верхний регистр, [36] [37] [38] [39] или оба. [40] [41] Использование заглавных букв грамположительных или грамотрицательных букв также распространено во многих статьях и публикациях научных журналов . [41] [42] [43] Когда статьи отправляются в журналы, каждый журнал может применять или не применять собственный стиль к постпринтной версии. Препринтные версии содержат тот стиль, который использовал автор. Даже в схемах оформления, в которых прилагательные «грамположительный» и «грамотрицательный» обычно используется заглавная буква используются строчными буквами, для обозначения окраски по Граму . [ нужна ссылка ]

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Перейти обратно: а б «Окраска по Граму: медицинский тест MedlinePlus» . medlineplus.gov .
  2. ^ Колко, Р. (2005). «Окраска по Граму». Современные протоколы в микробиологии . Приложение 3 (1): Приложение 3C. дои : 10.1002/9780471729259.mca03cs00 . ISBN  978-0471729259 . ПМИД   18770544 . S2CID   32452815 .
  3. ^ Перейти обратно: а б Беверидж, Ти Джей; Дэвис, Дж. А. (ноябрь 1983 г.). «Клеточные реакции Bacillus subtilis и Escherichia coli на окраску по Граму» . Журнал бактериологии . 156 (2): 846–58. дои : 10.1128/JB.156.2.846-858.1983 . ПМК   217903 . ПМИД   6195148 .
  4. ^ Австриец, Р. (1960). «Окраска по Граму и этиология крупозной пневмонии, историческая справка» . Бактериологические обзоры . 24 (3): 261–265. дои : 10.1128/MMBR.24.3.261-265.1960 . ПМК   441053 . ПМИД   13685217 .
  5. ^ Перейти обратно: а б Варфоломей, Джеймс В.; Миттвер, Тод (март 1952 г.). «ПЯТНО ГРАММА» . Бактериологические обзоры . 16 (1): 1–29. дои : 10.1128/бр.16.1.1-29.1952 . ISSN   0005-3678 . ПМК   180726 . ПМИД   14925025 .
  6. ^ Грам, Ганс Христиан (1884). «Об изолированном окрашивании шизомицетов в срезанных и сухих препаратах». Достижения медицины (на немецком языке). 2 : 185-189. .
    Английский перевод на: Брок, Т.Д. (1999). Вехи микробиологии 1546–1940 (2-е изд.). АСМ Пресс. стр. 215–218. ISBN  978-1-55581-142-6 .
    Перевод также есть по адресу: Брок, Т.Д. «Пионеры медицинской лабораторной науки: Кристиан Грам, 1884 г.» . HOSLink.com . Проверено 27 июля 2010 г.
  7. ^ Райан, Кей Джей; Рэй, CG, ред. (2004). Медицинская микробиология Шерриса (4-е изд.). МакГроу Хилл. стр. 232ф. ISBN  978-0838585290 .
  8. ^ Перейти обратно: а б с д Мэдиган, Монтана; Мартинко, Дж.; Паркер, Дж. (2004). Брок Биология микроорганизмов (10-е изд.). Липпинкотт Уильямс и Уилкинс. ISBN  978-0-13-066271-2 .
  9. ^ Беверидж, Ти Джей (2001). «Использование окраски по Граму в микробиологии». Биотехника и гистохимия . 76 (3): 111–118. дои : 10.1080/714028139 . ПМИД   11475313 .
  10. ^ Перейти обратно: а б Райан К.Дж., Рэй К.Г. (редакторы) (2004). Медицинская микробиология Шерриса (4-е изд.). МакГроу Хилл. стр. 409–12. ISBN  978-0-8385-8529-0 . {{cite book}}: |author= имеет общее имя ( справка )
  11. ^ Согаард, М.; Норгаард, М.; Шёнхейдер, Х. (2007). «Первое уведомление о положительных посевах крови: высокая точность отчета об окраске по Граму» . Журнал клинической микробиологии . 45 (4): 1113–1117. дои : 10.1128/JCM.02523-06 . ПМК   1865800 . ПМИД   17301283 .
  12. ^ Блэк, Жаклин Г. (1993). Микробиология: принципы и исследования . Прентис Холл. п. 65.
  13. ^ «Медико-химическая корпорация» . Med-Chem.com . Проверено 9 марта 2016 г.
  14. ^ Лебофф, Майкл (2014). Теория и применение микробиологической лаборатории (3-е изд.). Энглвуд, Колорадо: Издательская компания Мортона. п. 105. ИСБН  978-1617312809 .
  15. ^ «Теория пятен – чем не является протрава» . StainsFile.info . Архивировано из оригинала 9 марта 2016 года . Проверено 9 марта 2016 г.
  16. ^ «Пятно по Граму» . Микробагз . Общественный колледж Остина. Архивировано из оригинала 26 мая 2017 г. Проверено 26 мая 2017 г.
  17. ^ Перейти обратно: а б с Тим, Сэндл (21 октября 2015 г.). Фармацевтическая микробиология: основы обеспечения и контроля качества . Эльзевир Наука. ISBN  9780081000229 . OCLC   923807961 .
  18. ^ Перейти обратно: а б Харди, Джей; Мария, Санта. «Случайное пятно бабушки» (PDF) . Диагностика Харди . Архивировано (PDF) из оригинала 24 марта 2017 г.
  19. ^ Дэвис, Дж.А.; Андерсон, ГК; Беверидж, Ти Джей; Кларк, ХК (ноябрь 1983 г.). «Химический механизм окраски по Граму и синтез нового электронно-непрозрачного маркера для электронной микроскопии, заменяющего йодную протраву окраски» . Журнал бактериологии . 156 (2): 837–845. дои : 10.1128/JB.156.2.837-845.1983 . ПМК   217902 . ПМИД   6195147 .
  20. ^ Перейти обратно: а б с Бреннер, Дон Дж.; Криг, Ноэль Р.; Стейли, Джеймс Т. (26 июля 2005 г.) [1984]. Гаррити, Джордж М. (ред.). Вводные эссе . Руководство Берджи по систематической бактериологии. Том. 2А (2-е изд.). Нью-Йорк: Спрингер. п. 304. ИСБН  978-0-387-24143-2 . Британская библиотека №. GBA561951.
  21. ^ Перейти обратно: а б с Бруслинд, Линда (01 августа 2019 г.). Общая микробиология . Государственный университет Орегона.
  22. ^ Гальперин, Михаил Ю. (27 декабря 2013 г.). «Геномное разнообразие спорообразующих фирмикутов» . Микробиологический спектр . 1 (2): TBS-0015-2012-. doi : 10.1128/microbiolspectrum.tbs-0015-2012 . ISSN   2165-0497 . ПМК   4306282 . ПМИД   26184964 .
  23. ^ Хашем, Хамс Х. «Практическая медицинская микробиология» . Университет Аль-Кадисия . [ постоянная мертвая ссылка ]
  24. ^ «Кислотностойкое пятно» . www2.Highlands.edu . Колледж Джорджии Хайлендс. Архивировано из оригинала 10 июня 2017 года . Проверено 10 июня 2017 г.
  25. ^ Мегриан Д., Тайб Н., Витвиновски Дж., Грибальдо С. (2020). «Одна или две мембраны? Diderm Firmicutes бросает вызов разделению на грамположительные и грамотрицательные» . Молекулярная микробиология . 113 (3): 659–671. дои : 10.1111/mmi.14469 . ПМИД   31975449 . S2CID   210882600 .
  26. ^ Авила-Кальдерон ЭД, Руис-Пальма МД, Контрерас-Родригес А (2021 г.). «Везикулы наружной мембраны грамотрицательных бактерий: взгляд на биогенез» . Границы микробиологии . 12 : 557902. дои : 10.3389/fmicb.2021.557902 . ПМЦ   7969528 . ПМИД   33746909 .
  27. ^ Перейти обратно: а б с Беверидж, Терри Дж. (март 1990 г.). «Механизм граммовой изменчивости некоторых бактерий» . Журнал бактериологии . 172 (3): 1609–1620. дои : 10.1128/jb.172.3.1609-1620.1990 . ПМК   208639 . ПМИД   1689718 .
  28. ^ Блэк, Жаклин (2012). Микробиология: принципы и исследования (8-е изд.). Джон Уайли и сыновья. п. 68. ИСБН  978-0-470-54109-8 .
  29. ^ Рейнольдс, Дж.; Мойес, РБ; Брейквелл, ДП (2009). «Приложение 3». Дифференциальное окрашивание бактерий: кислотоустойчивое окрашивание . Том. Приложение 3. стр. H. doi : 10.1002/9780471729259.mca03hs15 . ISBN  978-0471729259 . ПМИД   19885935 . S2CID   45685776 . {{cite book}}: |journal= игнорируется ( помогите )
  30. ^ Ли Э.Х., Уинтер Х.Л., ван Дийл Дж.М., Метцемакерс Дж.Д., Арендс Дж.П. (декабрь 2012 г.). «Диагностика и противомикробная терапия микоплазменного менингита у взрослых». Международный журнал медицинской микробиологии . 302 (7–8): 289–92. дои : 10.1016/j.ijmm.2012.09.003 . ПМИД   23085510 .
  31. ^ Готье-Бушардон А.В. (июль 2018 г.). «Устойчивость к противомикробным препаратам у Mycoplasma spp». Микробиологический спектр . 6 (4): 425–446. doi : 10.1128/microbiolspec.ARBA-0030-2018 . ISBN  9781555819798 . ПМИД   30003864 . S2CID   51616821 .
  32. ^ Уоддингем, Энн (28 августа 2014 г.). Правила Нью-Харта: Оксфордское руководство по стилю . Издательство Оксфордского университета. п. 105. ИСБН  978-0199570027 .
  33. ^ «Предпочтительное использование» . Руководство по стилю в отношении новых инфекционных заболеваний . Центры по контролю и профилактике заболеваний .
  34. ^ «Иллюстрированный медицинский словарь Дорланда» (32-е изд.). Эльзевир . Проверено 5 июня 2020 г. Используйте такие поисковые запросы, как gram-negative.
  35. ^ «грамположительный» , Merriam-Webster , Британская энциклопедия, Inc.
  36. ^ «Грамположительный» . CollinsDictionary.com . ХарперКоллинз.
  37. ^ «Окраска по Граму» . Лексико.com . Издательство Оксфордского университета. Архивировано из оригинала 5 июня 2020 года.
  38. ^ «Грамположительный» . МедицинаНет .
  39. ^ «Грамотрицательный/положительный» . BusinessDictionary.com . Архивировано из оригинала 20 октября 2016 г. Проверено 20 октября 2016 г.
  40. ^ «грамположительный» или «грамположительный» . Словарь американского наследия . Хоутон Миффлин.
  41. ^ Перейти обратно: а б «Грамположительный» . Словарь.com .
  42. ^ Браун, Лиза; Вольф, Джули М.; Прадос-Росалес, Рафаэль; Касадевалл, Артуро (2015). «Сквозь стену: Внеклеточные везикулы у грамположительных бактерий, микобактерий и грибов» . Обзоры природы Микробиология . 13 (10): 620–630. дои : 10.1038/nrmicro3480 . ПМЦ   4860279 . ПМИД   26324094 .
  43. ^ Мюллер, Кристен Л. (12 июня 2015 г.). «Обнаружение грамотрицательных бактерий». Наука . 348 (6240): 1218. doi : 10.1126/science.348.6240.1218-o .
[ редактировать ]
Викискладе есть медиафайлы по теме пятен по Граму .
В Wikibook School Science есть страница на тему: Окрашивание по Граму.
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Gram_stain&oldid=1231890095"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 133f1e3fccc0ecde5dfe326b7f4d8edb__1719769620
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/13/db/133f1e3fccc0ecde5dfe326b7f4d8edb.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Gram stain - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)