Американский убийца

Американский убийца
Научная классификация
Домен:	Эукариоты
Королевство:	животное
Тип:	Нематоды
Сорт:	Хромадория
Заказ:	Рабдитида
Семья:	Анкилостоматиды
Род:	Убийца
Разновидность:	Н. американский
Биномиальное имя
	Американский убийца ; ( Стайлз , 1902)
Синонимы
	Uncinaria americanus Стайлз, 1902 г.

Necator americanus — это вид анкилостомы (разновидность гельминта ), широко известный как анкилостома Нового Света. Как и другие нематоды, он принадлежит к типу нематод . Это облигатная паразитическая нематода , обитающая в тонком кишечнике человека-хозяина. ^[1] Некатороз — тип гельминтоза — это термин, обозначающий состояние, при котором происходит заражение одним из видов Necator . Поскольку N. americanus и Ancylostoma duodenale (также известные как нематоды Старого Света) представляют собой два вида нематод, которые чаще всего поражают людей, их обычно рассматривают под общим заголовком « инфекция нематод ». Наиболее заметно они различаются по географическому распространению, строению ротового аппарата и относительным размерам. ^[2]

Necator americanus был предложен в качестве альтернативы Trichuris suis при лечении гельминтов . ^[3]

Морфология

Этот паразит имеет две дорсальные и две вентральные режущие пластинки вокруг переднего края буккальной капсулы. Он также имеет пару субдорсальных и пару субвентральных зубов, расположенных близко к задней части. Самцы обычно имеют длину 7–9 мм, а самки - около 9–11 мм. Типичная продолжительность жизни этих паразитов составляет 3–5 лет. Они могут производить от 5000 до 10 000 яиц в день. ^[4]

среда обитания

N. americanus в основном встречается в тропических и умеренных регионах. Этот паразит процветает в более теплом климате, поскольку для вылупления яйцам требуется влажная, теплая и затененная среда. Тонкая и гладкая скорлупа этого вида приводит к гибели яиц и молоди при отрицательных температурах или при высыхании почвы. Поэтому тип почвы, в которой обитает паразит, также очень важен для идеальных условий его существования. Идеальные почвенные условия, как правило, возникают в районах, где вода может стекать со стандартной скоростью, а размер частиц почвы не слишком велик и не слишком мал. Таким образом, степень влажности, а также отверстия в почве позволяют паразитам зарываться на поверхность и прикрепляться к коже следующего хозяина. Высокие темпы передачи, по-видимому, соответствуют проливным дождям и теплым температурам, характерным для тропического климата. Одной из аномалий этого вида является то, что он, по-видимому, предпочитает хозяев-мужчин женщинам-хозяевам, вероятно, из-за разделения труда в регионах его распространенности. ^[5]

Жизненный цикл

Этот червь зарождается как неоплодотворенное в почве яйцо. Через 24–48 часов при благоприятных условиях яйца развиваются и вылупляются. Эта первая ювенильная стадия 1 известна как «рабдитоформная». Рабдитиформные личинки растут и линяют в почве, превращаясь в ювенильную стадию 2. Молодь 2-й стадии линяет еще раз, пока не достигнет ювенильной 3-й стадии, которую также называют «филяриформной»; это также инфекционная форма. Превращение рабдитовидной формы в нитевидную обычно занимает 5–10 дней. ^[6] Эта личиночная форма способна проникать через кожу человека, проходить через кровеносные сосуды и сердце и достигать легких. Оказавшись там, он проникает через легочные альвеолы и поднимается по трахее , где заглатывается и попадает в тонкую кишку. Там он прикрепляется к стенке кишечника, превращается во взрослую особь и начинает размножаться. Взрослые особи обитают в просвете кишечной стенки, где вызывают кровопотерю хозяина. Яйца, вырабатываемые взрослыми особями, попадают в почву после выхода из организма через фекалии; самки нематод производят до 30 000 яиц в день. ^[7]^[8] В среднем большинство взрослых червей уничтожаются за 1–2 года. Жизненный цикл N. americanus лишь незначительно отличается от жизненного цикла A. duodenale . У N. americanus нет остановки развития у иммунных хозяев, и он должен мигрировать через легкие.

Патогенез и симптомы

Патология N. americanus делится на две стадии – личиночную и имаго. Личинки проникают через неинфицированную кожу и перемещаются через различные органы, включая дыхательные пути и лимфатические узлы . Попав в лимфатические узлы, личинки начинают проникать в кровь, легкие и кишечник . Некоторые личинки не могут легко проникнуть в дерму и остаются в коже, вызывая раздражение кожи и миграцию кожных личинок. Другие симптомы включают сильный кашель и одышку (одышку) во время миграции личинок. Прикрепившись к стенке кишечника, N. americanus остается и превращается во взрослых особей, проникает в кровеносные сосуды и сосет кровь. Инкубационный процесс личинок начинается после попадания в тонкий кишечник; поэтому симптомы могут не возникать до 40 дней, но это зависит от человека. ^[9] Потеря крови из мест прикрепления к кишечнику может вызвать железодефицитную анемию и потерю белка. ^[8] Одна особь N. americanus может вызвать 30 мкл кровопотери в день. ^[10] Железодефицитная анемия может вызвать умственную отсталость и задержку роста у детей. Кроме того, инфицированные пациенты испытывают боли в животе (усугубляемые во время еды) с диареей, вздутием живота и тошнотой. ^[11]

Эпидемиология

В Соединенных Штатах 95% случаев анкилостомоза у людей вызваны N. americanus , преимущественно у школьников младшего школьного возраста в экономически неблагополучных сельских районах. Исторически сложилось так, что на юге Америки наблюдался высокий уровень инфицирования среди детей. ^[12] Молодые особи не могут пережить отрицательные температуры, поэтому наибольшая распространенность наблюдается в районах с более высокими температурами и большим количеством осадков. Наибольшая заболеваемость инфекциями наблюдается в Азии и странах Африки к югу от Сахары, особенно в бедных районах с плохими санитарными условиями. ^[8] Инфекции, вызванные A. duodenale, встречаются реже и наблюдаются преимущественно в Европе и Средиземноморье. ^[13]

Геном

Черновой вариант генома Necator americanus был секвенирован и проанализирован. ^[14] Он содержит 244 Мбит с 19 151 предсказанным геном, кодирующим белок; к ним относятся гены, продукты которых опосредуют инвазию нематод в человека-хозяина, гены, участвующие в кровоснабжении и развитии, гены, кодирующие белки, которые представляют собой новые потенциальные мишени для лекарств против нематод, а также расширенные семейства генов, кодирующие вероятные белки -иммуномодуляторы , продукты которых могут быть полезны при лечении воспалительные заболевания и астма . ^[15]

Диагностика

Наиболее распространенным методом диагностики N. americanus является идентификация яиц в образце фекалий с помощью микроскопа . Яйца N. americanus имеют тонкую скорлупу и овальную форму размером примерно 56–74 на 36–40 мкм. ^[16]

Лечение

Наиболее распространенным лечением инфекции N. americanus являются бензимидазолы, в частности альбендазол и мебендазол . Бензимидазолы убивают взрослых червей, связываясь с β-тубулином нематоды и впоследствии ингибируя полимеризацию микротрубочек внутри паразита. ^[17] Эффективность лечения однократной дозой анкилостомоза составила: 72% для альбендазола, 15% для мебендазола и 31% для пирантела памоата. ^[18] В настоящее время проблемой, связанной с этим паразитом, является рост устойчивости к лекарствам, таким как бензимидазолы и мебендазолы. ^[19]

Беременным женщинам не следует проводить лечение в течение первого триместра. ^[9]

В 1940-х годах методом выбора был тетрахлорэтилен . ^[20] назначают по 3–4 см3 натощак, затем 30–45 г сульфата натрия . Сообщалось, что тетрахлорэтилен обеспечивает 80 процентов излечения при инфекциях Necator и 25 процентов при инфекциях Ancylostoma, и часто вызывает у пациента легкую интоксикацию.

Профилактика и контроль

Заражение и передачу инфекции другим людям можно предотвратить, если не испражняться на открытом воздухе или использовать человеческие фекалии в качестве удобрения. ^[21] Этот паразит не передается напрямую от человека к человеку. ^[9] Свиньи могут быть промежуточным хозяином N. americanus. ^[1]

Экономическое бремя

N. americanus вызывает заболевания анкилостомы, которые связаны с кровопотерей и анемией. Пациенты, зараженные от 25 до 100 червями, испытывают такие симптомы, как усталость, потеря веса и легкие головные боли. Когда число заражений достигает 100–500 червей, пациент испытывает сильную усталость , дефицит железа и боли в животе . Симптомы ухудшаются и приводят к возможной смерти, когда заражение достигает более 500 нематод. Дети и беременные женщины, пораженные N. americanus, подвергаются большему риску из-за анемии и большей потребности в пищевом железе и белке. Существует высокая потребность в улучшении санитарных условий для снижения фекального загрязнения в регионах с высокой распространенностью инфекций, вызванных N. americanus . Текущие стратегии борьбы включают сочетание массового введения лекарств детям в возрасте 4–6 лет для предотвращения или ликвидации инфекций, вызванных N. americanus . ^[22]

Ссылки

^ Перейти обратно: ^а ^б «Некатор американский» . Сеть разнообразия животных . Архивировано из оригинала 18 апреля 2018 г. Проверено 21 апреля 2018 г.
^ Георгиев В.С. (май 2000 г.). «Некаториоз: лечение и развивающая терапия» . Экспертное заключение об исследуемых препаратах . 9 (5): 1065–78. дои : 10.1517/13543784.9.5.1065 . ПМИД 11060728 . S2CID 8040066 . Архивировано из оригинала 20 августа 2018 г. Проверено 20 августа 2018 г.
^ Крез Дж., О'Нил Дж., Массон Дж. и др. (январь 2006 г.). «Подтверждение концептуального исследования, устанавливающего Necator americanus у пациентов с болезнью Крона и доноров-резервуаров» . Гут . 55 (1): 136–7. дои : 10.1136/gut.2005.079129 . ПМЦ 1856386 . ПМИД 16344586 .
^ Робертс, Янови и Шмидт, 2010 г.
^ «Некатор американский» . Сеть разнообразия животных . Архивировано из оригинала 18 апреля 2018 г. Проверено 21 апреля 2018 г.
^ «Анкилостомы (кишечные) | CDC-DPDx» . 17 сентября 2019 г. Архивировано из оригинала 15 декабря 2009 г. Проверено 11 ноября 2021 г. .
^ «Анкилостоматозная болезнь» . Британская энциклопедия. 2009. Архивировано из оригинала 11 ноября 2021 г. Проверено 11 ноября 2021 г.
^ Перейти обратно: ^а ^б ^с Хотез, Питер Дж; Бетони, Джефф; Боттацци, Мария Елена; Брукер, Саймон; Бусс, Пауло (2005). «Анкилостом: «Великая зараза человечества» » . ПЛОС Медицина . 2 (3): е67. doi : 10.1371/journal.pmed.0020067 . ISSN 1549-1676 . ПМЦ 1069663 . ПМИД 15783256 .
^ Перейти обратно: ^а ^б ^с «Некатор американский» . Архивировано из оригинала 19 апреля 2018 г. Проверено 21 апреля 2018 г.
^ Святой Георгиев, Василий (1999). «Паразитарные инфекции. Лечение и развивающая терапия. 1. Некатороз» . Текущий фармацевтический дизайн . Том. 7. Бентамовская наука. стр. 545–54. ISSN 1381-6128 .
^ Пхосук И, Интапан П.М., Танчомнанг Т., Санпул О., Джанван П., Лауммаунвай П., Амнарт В., Моракоте Н., Маливонг В. (2013). «Молекулярное обнаружение Ancylostoma duodenale , Ancylostoma ceylanicum и Necator americanus у людей на северо-востоке и юге Таиланда» . Корейский журнал паразитологии . 51 (6): 747–49. дои : 10.3347/kjp.2013.51.6.747 . ПМЦ 3916468 . ПМИД 24516284 .
^ Бликли, Хойт (2007). «Болезнь и развитие: данные об искоренении нематод на юге Америки» . Ежеквартальный экономический журнал . 122 (1): 73–117. дои : 10.1162/qjec.121.1.73 . ISSN 0033-5533 . ПМК 3800113 . ПМИД 24146438 .
^ Джон, DT; Петри, Вашингтон (2013). «8 Кишечные нематоды: Necator americanus » . Медицинская паразитология Маркелла и Фоге (9-е изд.). Elsevier Науки о здоровье. стр. 251–52. ISBN 978-0-323-27764-8 . ( N. americanus ) — местный анкилостом, обитающий в Африке к югу от Сахары и единственный, встречающийся в некоторых частях Индии. Ancylostoma и Necator встречаются вместе в других местах Индии, на большей части территории Китая, в Юго-Восточной Азии, на островах южной и юго-западной части Тихого океана, а также в некоторых частях Австралии. ..., вполне вероятно, что географические границы между двумя родами анкилостомы человека исчезнут.
^ Тан Ю.Т., Гао X, Роза Б.А., Абубакер С., Холлсуорт-Пепин К., Мартин Дж., Тьяги Р., Хейзер Э., Чжан Х., Бхонагири-Палсикар В., Минкс П., Уоррен В.К., Ван К., Жан Б., Хотез П.Дж., Штернберг П.В., Дугалл А., Гейз С.Т., Малвенна Дж., Сотилло Дж., Ранганатан С., Рабело Э.М., Уилсон Р.К., Фелгнер П.Л., Бетони Дж., Хоудон Дж.М., Гассер Р.Б., Лукас А., Митрева М. (март 2014 г.). «Геном анкилостомы человека Necator americanus » . Природная генетика . 46 (3): 261–69. дои : 10.1038/ng.2875 . ПМЦ 3978129 . ПМИД 24441737 .
^ Фири, младший; Венн, Эй Джей; Мортимер, К; Браун, AP; Хои, Д; Фальконе, Ф. Х.; Причард, Д.И.; Бриттон, младший (2010). «Экспериментальная инфекция анкилостомоза: рандомизированное плацебо-контролируемое исследование астмы» . Клиническая и экспериментальная аллергия . 40 (2): 299–306. дои : 10.1111/j.1365-2222.2009.03433.x . ПМК 2814083 . ПМИД 20030661 .
^ Шири, Х.; Биггс, бакалавр; Трейнор, П. (2007). «Нематоды». В Мюррее, PR; Барон, Э.Дж.; Йоргенсен, Дж. Х.; Лэндри, ML; Пфаллер, Массачусетс (ред.). Руководство по клинической микробиологии (9-е изд.). АСМ Пресс. стр. 2144–55. ISBN 978-1555813710 .
^ Бетони Дж., Брукер С., Альбонико М., Гейгер С.М., Лукас А., Димерт Д., Хотез П.Дж. (май 2006 г.). «Почвенные гельминтозы: аскаридоз, трихуриоз и анкилостомоз». Ланцет . 367 (9521): 1521–32. дои : 10.1016/S0140-6736(06)68653-4 . ПМИД 16679166 . S2CID 8425278 .
^ Кейзер Дж., Утцингер Дж. (апрель 2008 г.). «Эффективность современных препаратов против гельминтных инфекций, передающихся через почву: систематический обзор и метаанализ». ДЖАМА . 299 (16): 1937–48. дои : 10.1001/jama.299.16.1937 . ПМИД 18430913 .
^ «Лекарственная устойчивость нематод» . Архивировано из оригинала 21 апреля 2018 г. Проверено 21 апреля 2018 г.
^ «Клинические аспекты и лечение наиболее распространенных кишечных паразитов человека (ТБ-33)» . Технический бюллетень Управления по делам ветеранов за 1946 и 1947 годы . 10 : 1–14. 1948. Архивировано из оригинала 25 февраля 2022 г. Проверено 14 июля 2021 г.
^ «Профилактика и контроль» . Паразиты: Анкилостомы . Центры по контролю и профилактике заболеваний Министерства здравоохранения и социальных служб США. 2013. Архивировано из оригинала 24 мая 2017 г. Проверено 30 апреля 2017 г.
^ Бенке Дж.М., Де Клерк Д., Сако М., Гилберт Ф.С., Уаттара Д.Б., Веркруисс Дж. (2000). «Эпидемиология инфекций анкилостомоза человека в южном регионе Мали». Тропическая медицина и международное здравоохранение . 5 (5): 343–54. CiteSeerX 10.1.1.589.8549 . дои : 10.1046/j.1365-3156.2000.00553.x . ПМИД 10886798 . S2CID 4945916 .

Дальнейшее чтение

Хотез, П.Дж.; Причард, Д.И. (июнь 1995 г.). «Анкилостоматозная инфекция». Научный американец . 272 (6): 68–74. Бибкод : 1995SciAm.272f..68H . doi : 10.1038/scientificamerican0695-68 . ПМИД 7761817 .
Мюррей, PR; Розенталь, Канзас; Пфаллер, Массачусетс (2015). «§ 7 Паразитология. 74 Нематоды» . Медицинская микробиология (8-е изд.). Elsevier Науки о здоровье. стр. 748–65. ISBN 978-0-323-35952-8 .
Робертс, Л.С.; Янови, Дж.; Шмидт, Г.Д. (2010). Основы паразитологии (8-е изд.). МакГроу-Хилл. стр. 472–73. ISBN 978-0071311038 .

[animaldiversity.org-1] Перейти обратно: ^а ^б «Некатор американский» . Сеть разнообразия животных . Архивировано из оригинала 18 апреля 2018 г. Проверено 21 апреля 2018 г.

[2] Георгиев В.С. (май 2000 г.). «Некаториоз: лечение и развивающая терапия» . Экспертное заключение об исследуемых препаратах . 9 (5): 1065–78. дои : 10.1517/13543784.9.5.1065 . ПМИД 11060728 . S2CID 8040066 . Архивировано из оригинала 20 августа 2018 г. Проверено 20 августа 2018 г.

[3] Крез Дж., О'Нил Дж., Массон Дж. и др. (январь 2006 г.). «Подтверждение концептуального исследования, устанавливающего Necator americanus у пациентов с болезнью Крона и доноров-резервуаров» . Гут . 55 (1): 136–7. дои : 10.1136/gut.2005.079129 . ПМЦ 1856386 . ПМИД 16344586 .

[4] Робертс, Янови и Шмидт, 2010 г.

[5] «Некатор американский» . Сеть разнообразия животных . Архивировано из оригинала 18 апреля 2018 г. Проверено 21 апреля 2018 г.

[6] «Анкилостомы (кишечные) | CDC-DPDx» . 17 сентября 2019 г. Архивировано из оригинала 15 декабря 2009 г. Проверено 11 ноября 2021 г. .

[7] «Анкилостоматозная болезнь» . Британская энциклопедия. 2009. Архивировано из оригинала 11 ноября 2021 г. Проверено 11 ноября 2021 г.

[HotezBethony2005-8] Перейти обратно: ^а ^б ^с Хотез, Питер Дж; Бетони, Джефф; Боттацци, Мария Елена; Брукер, Саймон; Бусс, Пауло (2005). «Анкилостом: «Великая зараза человечества» » . ПЛОС Медицина . 2 (3): е67. doi : 10.1371/journal.pmed.0020067 . ISSN 1549-1676 . ПМЦ 1069663 . ПМИД 15783256 .

[msdsonline.com-9] Перейти обратно: ^а ^б ^с «Некатор американский» . Архивировано из оригинала 19 апреля 2018 г. Проверено 21 апреля 2018 г.

[10] Святой Георгиев, Василий (1999). «Паразитарные инфекции. Лечение и развивающая терапия. 1. Некатороз» . Текущий фармацевтический дизайн . Том. 7. Бентамовская наука. стр. 545–54. ISSN 1381-6128 .

[11] Пхосук И, Интапан П.М., Танчомнанг Т., Санпул О., Джанван П., Лауммаунвай П., Амнарт В., Моракоте Н., Маливонг В. (2013). «Молекулярное обнаружение Ancylostoma duodenale , Ancylostoma ceylanicum и Necator americanus у людей на северо-востоке и юге Таиланда» . Корейский журнал паразитологии . 51 (6): 747–49. дои : 10.3347/kjp.2013.51.6.747 . ПМЦ 3916468 . ПМИД 24516284 .

[:0-12] Бликли, Хойт (2007). «Болезнь и развитие: данные об искоренении нематод на юге Америки» . Ежеквартальный экономический журнал . 122 (1): 73–117. дои : 10.1162/qjec.121.1.73 . ISSN 0033-5533 . ПМК 3800113 . ПМИД 24146438 .

[13] Джон, DT; Петри, Вашингтон (2013). «8 Кишечные нематоды: Necator americanus » . Медицинская паразитология Маркелла и Фоге (9-е изд.). Elsevier Науки о здоровье. стр. 251–52. ISBN 978-0-323-27764-8 . ( N. americanus ) — местный анкилостом, обитающий в Африке к югу от Сахары и единственный, встречающийся в некоторых частях Индии. Ancylostoma и Necator встречаются вместе в других местах Индии, на большей части территории Китая, в Юго-Восточной Азии, на островах южной и юго-западной части Тихого океана, а также в некоторых частях Австралии. ..., вполне вероятно, что географические границы между двумя родами анкилостомы человека исчезнут.

[pmid24441737-14] Тан Ю.Т., Гао X, Роза Б.А., Абубакер С., Холлсуорт-Пепин К., Мартин Дж., Тьяги Р., Хейзер Э., Чжан Х., Бхонагири-Палсикар В., Минкс П., Уоррен В.К., Ван К., Жан Б., Хотез П.Дж., Штернберг П.В., Дугалл А., Гейз С.Т., Малвенна Дж., Сотилло Дж., Ранганатан С., Рабело Э.М., Уилсон Р.К., Фелгнер П.Л., Бетони Дж., Хоудон Дж.М., Гассер Р.Б., Лукас А., Митрева М. (март 2014 г.). «Геном анкилостомы человека Necator americanus » . Природная генетика . 46 (3): 261–69. дои : 10.1038/ng.2875 . ПМЦ 3978129 . ПМИД 24441737 .

[15] Фири, младший; Венн, Эй Джей; Мортимер, К; Браун, AP; Хои, Д; Фальконе, Ф. Х.; Причард, Д.И.; Бриттон, младший (2010). «Экспериментальная инфекция анкилостомоза: рандомизированное плацебо-контролируемое исследование астмы» . Клиническая и экспериментальная аллергия . 40 (2): 299–306. дои : 10.1111/j.1365-2222.2009.03433.x . ПМК 2814083 . ПМИД 20030661 .

[16] Шири, Х.; Биггс, бакалавр; Трейнор, П. (2007). «Нематоды». В Мюррее, PR; Барон, Э.Дж.; Йоргенсен, Дж. Х.; Лэндри, ML; Пфаллер, Массачусетс (ред.). Руководство по клинической микробиологии (9-е изд.). АСМ Пресс. стр. 2144–55. ISBN 978-1555813710 .

[17] Бетони Дж., Брукер С., Альбонико М., Гейгер С.М., Лукас А., Димерт Д., Хотез П.Дж. (май 2006 г.). «Почвенные гельминтозы: аскаридоз, трихуриоз и анкилостомоз». Ланцет . 367 (9521): 1521–32. дои : 10.1016/S0140-6736(06)68653-4 . ПМИД 16679166 . S2CID 8425278 .

[18] Кейзер Дж., Утцингер Дж. (апрель 2008 г.). «Эффективность современных препаратов против гельминтных инфекций, передающихся через почву: систематический обзор и метаанализ». ДЖАМА . 299 (16): 1937–48. дои : 10.1001/jama.299.16.1937 . ПМИД 18430913 .

[19] «Лекарственная устойчивость нематод» . Архивировано из оригинала 21 апреля 2018 г. Проверено 21 апреля 2018 г.

[20] «Клинические аспекты и лечение наиболее распространенных кишечных паразитов человека (ТБ-33)» . Технический бюллетень Управления по делам ветеранов за 1946 и 1947 годы . 10 : 1–14. 1948. Архивировано из оригинала 25 февраля 2022 г. Проверено 14 июля 2021 г.

[21] «Профилактика и контроль» . Паразиты: Анкилостомы . Центры по контролю и профилактике заболеваний Министерства здравоохранения и социальных служб США. 2013. Архивировано из оригинала 24 мая 2017 г. Проверено 30 апреля 2017 г.

[22] Бенке Дж.М., Де Клерк Д., Сако М., Гилберт Ф.С., Уаттара Д.Б., Веркруисс Дж. (2000). «Эпидемиология инфекций анкилостомоза человека в южном регионе Мали». Тропическая медицина и международное здравоохранение . 5 (5): 343–54. CiteSeerX 10.1.1.589.8549 . дои : 10.1046/j.1365-3156.2000.00553.x . ПМИД 10886798 . S2CID 4945916 .

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]

[7]

[8]

[9]

[10]

[11]

[12]

[13]

[14]

[15]

[16]

[17]

[18]

[19]

[20]

[21]

[22]