✖


Jump to content

Изопептидная связь

(Перенаправлено с Изопептида )
Изопептидная связь между лизином и аспартатом/аспарагином

Изопептидная связь — это тип амидной связи, образующейся между карбоксильной группой одной аминокислоты и аминогруппой другой. Изопептидная связь — это связь между амино- или карбоксильной группой боковой цепи одной аминокислоты с α-карбоксильной, α-аминогруппой или боковой цепью другой аминокислоты. В типичной пептидной связи , также известной как эупептидная связь, амидная связь всегда образуется между α-карбоксильной группой одной аминокислоты и α-аминогруппой второй аминокислоты. Изопептидные связи встречаются реже, чем обычные пептидные связи. [ 1 ] Изопептидные связи приводят к разветвлению первичной последовательности белка. Белки, образованные из нормальных пептидных связей, обычно имеют линейную первичную последовательность .

Амидные связи и, следовательно, изопептидные связи стабилизируются за счет резонанса ( делокализации электрона ) между карбонильным кислородом , карбонильным углеродом и атомом азота . Прочность изопептидной связи аналогична силе связи пептида из-за аналогичного типа связи. Прочность . пептидной связи составляет 2,3-3,6 ккал/моль [ 2 ]

Аминокислоты, такие как лизин , глутаминовая кислота , глутамин , аспарагиновая кислота и аспарагин , могут образовывать изопептидные связи, поскольку все они содержат амино- или карбоксильную группу в своей боковой цепи. Например, образование изопептидной связи между боковыми цепями лизина и глутамина происходит следующим образом:

  • Gln-(C=O)NH 2 + Lys-NH 3 + → Gln-(C=O)NH-Lys + NH 4 +

ε-аминогруппа лизина также может реагировать с α-карбоксильной группой любой другой аминокислоты, как в следующей реакции:

  • Иле-(C=O)O - + Лиз-NH 3 + → Ile-(C=O)NH-Lys + H 2 O

Образование изопептидной связи обычно катализируется ферментами . [ 3 ] Реакция между лизином и глютамином, как показано выше, катализируется трансглутаминазой . Другим примером катализируемого ферментами образования изопептидной связи является образование молекулы глутатиона . Глутатион, трипептид , содержит нормальную пептидную связь (между цистеином и глицином ) и изопептидную связь (между глутаматом и цистеином). Образование изопептидной связи между γ-карбоксильной группой глутамата и α-аминогруппой цистеина катализируется ферментом γ- глутамилцистеинсинтетазой . [ 3 ] Изопептидная связь образуется вместо эупептидной связи, поскольку внутриклеточные пептидазы [ 3 ] неспособны распознать эту связь и, следовательно, не гидролизуют связь. Изопептидная связь может образовываться спонтанно, что наблюдается при созревании бактериофага HK97 капсида . [ 4 ] В этом случае ε-аминогруппа лизина автокаталитически боковой цепи реагирует с карбоксамидной группой аспарагина . [ 4 ] Спонтанное образование изопептидной связи между лизином и аспарагином также происходит в грамположительных бактерий пилях . [ 5 ]

Функция

[ редактировать ]

Генерируемые ферментами изопептидные связи имеют две основные биологические цели: передачу сигналов и структуру .

Биосигнализация влияет на функцию белка, [ 6 ] конденсация хроматина, [ 7 ] и период полураспада белка. [ 8 ] Биоструктурная роль изопептидных связей включает свертывание крови . [ 9 ] (для заживления ран), внеклеточного матрикса , поддержания [ 10 ] путь апоптоза , [ 10 ] модификация микротрубочек , [ 11 ] и формирования патогенных пилей [ 12 ] у бактерий. Изопептидные связи способствуют патогенности холерного , вибриона поскольку домен поперечной сшивки актина (ACD) образует межмолекулярную связь между γ-карбоксильной группой глутамата и ε-аминогруппой лизина в актине . [ 13 ] Этот процесс останавливает полимеризацию актина в клетке-хозяине . [ 13 ]

Биосигнализация

[ редактировать ]

Что касается изопептидных связей, связывающих один белок с другим с целью передачи сигнала, в литературе преобладают убиквитин и другие подобные белки. Убиквитин и родственные ему белки ( SUMO , Atg8 , Atg12 и т. д.) имеют тенденцию следовать относительно одному и тому же пути лигирования белков. [ 6 ]

Процесс лигирования белков убиквитином и убиквитиноподобными белками состоит из трех основных стадий. [ 6 ] На начальном этапе специфический активирующий белок (Е1 или Е1-подобный белок) активирует убиквитин путем аденилирования его с помощью АТФ . [ 6 ] Затем аденилированный убиквитин можно перенести на консервативный цистеин с помощью тиоэфирной связи, которая находится между карбоксильной группой C-концевого глицина убиквитина и серой цистеина E1. [ 6 ] [ 14 ] [ 15 ] Затем активирующий фермент E1 связывается с убиквитином и переносит его на следующий уровень, фермент E2, который принимает белок и снова образует тиоэфир с консервативной связью. E2 действует в определенной степени как посредник, который затем связывается с ферментной лигазой E3 на последнем уровне, что приводит к конечному переносу убиквитина или родственного убиквитину белка к лизиновому участку на целевом белке или, чаще, к убиквитину, на сам убиквитин образует цепи указанного белка. [ 14 ]

Однако на последнем уровне также существует расхождение: в зависимости от типа лигазы E3 она может на самом деле не вызывать конъюгацию. Так же существуют лигазы E3, содержащие домены HECT, в которых они продолжают эту «цепочку переноса», снова принимая убиквитин через другой консервативный цистеин, а затем нацеливая его и перенося к желаемой мишени. Тем не менее, в случае домена RING-пальца, который использует координационные связи с ионами цинка для стабилизации своих структур, они действуют больше, направляя реакцию. Под этим подразумевается, что как только лигаза Е3 из RING-пальца связывается с Е2, содержащим убиквитин, она просто действует как нацеливающее устройство, которое направляет Е2 на прямое лигирование целевого белка в лизиновом сайте. [ 14 ] [ 16 ]

Хотя в этом случае убиквитин действительно хорошо представляет другие родственные ему белки, каждый белок, очевидно, будет иметь свои собственные недостатки, такие как SUMO, который, как правило, представляет собой лигазу домена RING-пальца, где E3 просто действует как нацеливающее устройство, направляя лигирование с помощью E2, и фактически не выполняет саму реакцию, например, лигазы убиквитин E3-HECT. [ 15 ] Таким образом, хотя внутренние механизмы различаются, например, участие белков в цепи переноса, общие химические аспекты, такие как использование тиоэфиров и специфических лигаз для нацеливания, остаются прежними.

Биоструктурный

[ редактировать ]

Ферментативная химия, участвующая в образовании изопептидов структурного назначения, отличается от случая убиквитина и родственных убиквитину белков. При этом вместо последовательных шагов, включающих несколько ферментов для активации, конъюгации и нацеливания на субстрат. [ 17 ] Катализ осуществляется одним ферментом, и единственной стадией предшественника, если она есть, обычно является расщепление с целью активации его из зимогена. Однако единообразие, существующее в случае убиквитина, здесь не так, поскольку существует множество различных ферментов, каждый из которых выполняет реакцию образования изопептидной связи.

Первый случай — это сортазы, семейство ферментов, которое распространено среди многочисленных грамположительных бактерий. Было показано, что он является важным фактором патогенности и вирулентности. Общая реакция, выполняемая сортазами, включает использование собственной разновидности «каталитической триады», то есть использование гистидина, аргинина и цистеина для реактивного механизма. Его и Arg помогают создать реактивную среду, а Cys снова действует как реакционный центр, используя тиоэфир, помогая удерживать карбоксильную группу до тех пор, пока амин лизина не сможет совершить нуклеофильную атаку для переноса белка и образования изопептидной связи. Ионом, который иногда может играть важную, хотя и косвенную роль в ферментативной реакции, является кальций, который связывается сортазой. Он играет важную роль в поддержании структуры фермента в оптимальной для катализа конформации. Однако есть случаи, когда было показано, что кальций не является необходимым для осуществления катализа. [ 18 ]

Другой аспект, который отличает сортазы в целом, заключается в том, что они имеют очень специфическое нацеливание на свой субстрат, поскольку сортазы обычно выполняют две функции: первая - это слияние белков с клеточной стенкой бактерий, а вторая - полимеризация пилина. Для процесса локализации белков на клеточной стенке существует тройное требование: белок должен содержать гидрофобный домен, положительно заряженную хвостовую область и конечную специфическую последовательность, используемую для распознавания. [ 19 ] Наиболее изученным из этих сигналов является LPXTG, который действует как точка расщепления, где сортаза атакует пространство между Thr и Gly, конъюгируя с карбоксильной группой Thr. [ 18 ] Затем тиоэфир разделяется путем переноса пептида на первичный амин, и это обычно имеет очень высокую специфичность, что видно на примере B. cereus, где фермент сортаза D помогает полимеризовать белок BcpA посредством двух сигналов распознавания. LPXTG как точка расщепления и образования тиоэфира, а также сайт YPKN, который действует как сигнал узнавания и определяет, где будет образовываться изопептид. [ 20 ] Хотя детали могут различаться у разных бактерий, основы ферментативной химии сортазы остаются неизменными.

Следующий случай — это трансглутаминазы (ТГазы), которые действуют в основном внутри эукариот, соединяя различные белки по разным причинам, например, для заживления ран или прикрепления белков к липидным мембранам. [ 21 ] [ 22 ] Сами ТГазы также содержат свою собственную «каталитическую триаду» с гистидином, аспартатом и цистеином. Роль этих остатков аналогична или такая же, как у ранее описанных сортаз, в том смысле, что His и Asp играют вспомогательную роль во взаимодействии с целевым остатком, тогда как Cys образует тиоэфир с карбоксильной группой для последующей нуклеофильной атаки первичным остатком. амин, в данном случае из-за интереса лизина. Хотя на этом сходство с сортазой в каталитическом отношении заканчивается, поскольку фермент и его семейство зависят от кальция, который играет решающую структурную роль в поддержании плотной конформации фермента. TGases также обладают совершенно разной субстратной специфичностью, поскольку они нацелены конкретно на средний Gln в последовательности «Gln-Gln-Val». Общая субстратная специфичность, т.е. специфический белок, обусловлена ​​общей структурой различных ТГаз, которая нацеливает их на субстрат. [ 23 ]

У ТГаз была отмечена специфичность, заключающаяся в том, что разные ТГазы будут реагировать с разными Gln на одном и том же белке, что означает, что ферменты имеют очень специфическое первоначальное нацеливание. [ 24 ] Также было показано, что он обладает некоторой специфичностью в отношении того, к какой мишени лизина он переносит белок, как в случае с фактором XIII, где остаток, соседний с Lys, решает, произойдет ли реакция. [ 22 ] Таким образом, хотя на первый взгляд ТГазы могут показаться эукариотической сортазой, на самом деле они представляют собой отдельный набор ферментов.

Другим примером изопептид-связывающего фермента для структурных целей является актиновый домен поперечной сшивки (ACD) токсинного белка MARTX, вырабатываемого V. cholerae. Хотя было показано, что ACD при осуществлении катализа использует магний и АТФ для образования поперечных связей, особенности механизма неясны. Хотя интересный аспект поперечной связи, образующейся в этом случае, заключается в том, что она использует неконцевой Glu для лигирования с неконцевым Lys, что, по-видимому, редко встречается в процессе образования изопептидной связи. [ 25 ] Хотя химия ACD еще не выяснена, она показывает, что образование изопептидных связей не зависит просто от Asp/Asn для неконцевых изопептидных связей между белками.

Последний случай, который следует рассмотреть, — это любопытный случай посттрансляционных модификаций микротубилина (МТ). MT содержит широкий спектр посттрансляционных модификаций; однако наиболее интересными являются полиглутамилирование и полиглицилирование. Обе модификации схожи в том смысле, что они представляют собой повторяющиеся участки одной и той же аминокислоты, слитые с карбоксильной группой боковой цепи глутамата в С-концевой области МТ. Ферментативные механизмы не полностью выяснены, поскольку о полигликирующем ферменте известно немного. В случае полиглутамилирования точный механизм также неизвестен, но, по-видимому, он зависит от АТФ. [ 26 ] Хотя снова отсутствует ясность в отношении ферментативной химии, все еще существует ценная информация об образовании изопептидных связей с использованием карбоксила R-группы Glu в сочетании с N-концевой аминомодифицирующими пептидами.

Приложения

[ редактировать ]

Спонтанное образование изопептидных связей было использовано при разработке пептидной метки под названием SpyTag . SpyTag может спонтанно и необратимо реагировать со своим партнером по связыванию (белком SpyCatcher) через ковалентную изопептидную связь. [ 27 ] Этот молекулярный инструмент может найти применение для нацеливания на белки in vivo , флуоресцентной микроскопии и необратимого прикрепления белковых микрочипов . После этого были разработаны другие системы Tag/Catcher, такие как SnoopTag/SnoopCatcher. [ 28 ] и SdyTag/SdyCatcher [ 29 ] которые дополняют SpyTag/SpyCatcher.

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ «Изопептидная связь – Определение и примеры» . Биологический онлайн-словарь . 07.10.2019 . Проверено 17 апреля 2023 г.
  2. ^ Мартин Р.Б. (декабрь 1998 г.). «Свободные энергии и равновесия гидролиза и образования пептидных связей». Биополимеры . 45 (5): 351–353. doi : 10.1002/(SICI)1097-0282(19980415)45:5<351::AID-BIP3>3.0.CO;2-K .
  3. ^ Jump up to: а б с Ву Дж., Фанг Ю.З., Ян С., Луптон-младший, Тернер Н.Д. (март 2004 г.). «Метаболизм глутатиона и его значение для здоровья» . Журнал питания . 134 (3): 489–492. дои : 10.1093/jn/134.3.489 . ПМИД   14988435 .
  4. ^ Jump up to: а б Викофф В.Р., Лильяс Л., Дуда Р.Л., Цурута Х., Хендрикс Р.В., Джонсон Дж.Е. (сентябрь 2000 г.). «Топологически связанные белковые кольца в капсиде бактериофага HK97». Наука . 289 (5487): 2129–2133. Бибкод : 2000Sci...289.2129W . дои : 10.1126/science.289.5487.2129 . ПМИД   11000116 .
  5. ^ Канг Х.Дж., Кулибали Ф., Клоу Ф., Профт Т., Бейкер Э.Н. (декабрь 2007 г.). «Стабилизация изопептидных связей, выявленных в структуре пилуса грамположительных бактерий». Наука . 318 (5856): 1625–1628. Бибкод : 2007Sci...318.1625K . дои : 10.1126/science.1145806 . ПМИД   18063798 . S2CID   5627277 .
  6. ^ Jump up to: а б с д и Кершер О., Фельбербаум Р., Хохштрассер М. (01.11.2006). «Модификация белков убиквитином и убиквитиноподобными белками». Ежегодный обзор клеточной биологии и биологии развития . 22 (1): 159–180. doi : 10.1146/annurev.cellbio.22.010605.093503 . ПМИД   16753028 .
  7. ^ Тернер Б.М. (ноябрь 2002 г.). «Клеточная память и код гистонов» . Клетка . 111 (3): 285–291. дои : 10.1016/S0092-8674(02)01080-2 . ПМИД   12419240 . S2CID   11787517 .
  8. ^ Гилл Дж. (сентябрь 2004 г.). «СУМО и убиквитин в ядре: разные функции, схожие механизмы?» . Гены и развитие . 18 (17): 2046–2059. дои : 10.1101/gad.1214604 . ПМИД   15342487 .
  9. ^ Ариенс Р.А., Лай Т.С., Вайзель Дж.В., Гринберг К.С., Грант П.Дж. (август 2002 г.). «Роль фактора XIII в образовании сгустков фибрина и эффекты генетического полиморфизма» . Кровь . 100 (3): 743–54. дои : 10.1182/blood.v100.3.743 . ПМИД   12130481 .
  10. ^ Jump up to: а б Гриффин М., Касадио Р., Бергамини С.М. (декабрь 2002 г.). «Трансглутаминазы: природные биологические клеи» . Биохимический журнал . 368 (Часть 2): 377–396. дои : 10.1042/bj20021234 . ПМК   1223021 . ПМИД   12366374 .
  11. ^ Вестерманн С., Вебер К. (декабрь 2003 г.). «Посттрансляционные модификации регулируют функцию микротрубочек». Обзоры природы. Молекулярно-клеточная биология . 4 (12): 938–947. дои : 10.1038/nrm1260 . hdl : 11858/00-001M-0000-0012-EF93-5 . ПМИД   14685172 . S2CID   6933970 .
  12. ^ Марраффини Л.А., Дедент А.С., Шнеевинд О. (март 2006 г.). «Сортазы и искусство закрепления белков на оболочках грамположительных бактерий» . Обзоры микробиологии и молекулярной биологии . 70 (1): 192–221. дои : 10.1128/MMBR.70.1.192-221.2006 . ПМЦ   1393253 . ПМИД   16524923 .
  13. ^ Jump up to: а б Кудряшов Д.С., Дюрер З.А., Иттерберг А.Ю., Савая М.Р., Пашков И., Прохазкова К. и др. (ноябрь 2008 г.). «Соединение мономеров актина изопептидной связью является механизмом токсичности токсина MARTX холерного вибриона» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 105 (47): 18537–18542. Бибкод : 2008PNAS..10518537K . дои : 10.1073/pnas.0808082105 . ПМЦ   2587553 . ПМИД   19015515 .
  14. ^ Jump up to: а б с Кершер О., Фельбербаум Р., Хохштрассер М. (2006). «Модификация белков убиквитином и убиквитиноподобными белками». Ежегодный обзор клеточной биологии и биологии развития . 22 : 159–180. doi : 10.1146/annurev.cellbio.22.010605.093503 . ПМИД   16753028 .
  15. ^ Jump up to: а б Гилл Дж. (сентябрь 2004 г.). «СУМО и убиквитин в ядре: разные функции, схожие механизмы?» . Гены и развитие . 18 (17): 2046–2059. дои : 10.1101/gad.1214604 . ПМИД   15342487 .
  16. ^ Джексон П.К., Элдридж А.Г., Фрид Э., Фюрстенталь Л., Сюй Ю.И., Кайзер Б.К., Рейманн Дж.Д. (октябрь 2000 г.). «Знания о RING: распознавание субстратов и катализ убиквитинлигазами». Тенденции в клеточной биологии . 10 (10): 429–439. дои : 10.1016/S0962-8924(00)01834-1 . ПМИД   10998601 .
  17. ^ Граббе С., Дикич I (апрель 2009 г.). «Функциональные роли белков, содержащих убиквитин-подобный домен (ULD) и убиквитин-связывающий домен (UBD). Химические обзоры . 109 (4): 1481–1494. дои : 10.1021/cr800413p . ПМИД   19253967 .
  18. ^ Jump up to: а б Клэнси К.В., Мелвин Дж.А., Маккафферти Д.Г. (30 июня 2010 г.). «Сортаза-транспептидазы: понимание механизма, субстратной специфичности и ингибирования» . Биополимеры . 94 (4): 385–396. дои : 10.1002/bip.21472 . ПМЦ   4648256 . ПМИД   20593474 .
  19. ^ Марраффини Л.А., Дедент А.С., Шнеевинд О. (март 2006 г.). «Сортазы и искусство закрепления белков на оболочках грамположительных бактерий» . Обзоры микробиологии и молекулярной биологии . 70 (1): 192–221. дои : 10.1128/MMBR.70.1.192-221.2006 . ПМЦ   1393253 . ПМИД   16524923 .
  20. ^ Будзик Дж.М., Марраффини Л.А., Суда П., Уайтлегге Дж.П., Фаулл К.Ф., Шнеевинд О. (июль 2008 г.). «Амидные связи соединяют пили на поверхности бацилл» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 105 (29): 10215–10220. Бибкод : 2008PNAS..10510215B . дои : 10.1073/pnas.0803565105 . ПМЦ   2481347 . ПМИД   18621716 .
  21. ^ Ахвази Б., Штайнерт П.М. (август 2003 г.). «Модель механизма реакции фермента трансглутаминазы 3» . Экспериментальная и молекулярная медицина . 35 (4): 228–242. дои : 10.1038/emm.2003.31 . ПМИД   14508061 .
  22. ^ Jump up to: а б Ариенс Р.А., Лай Т.С., Вайзель Дж.В., Гринберг К.С., Грант П.Дж. (август 2002 г.). «Роль фактора XIII в образовании сгустков фибрина и эффекты генетического полиморфизма» . Кровь . 100 (3): 743–754. дои : 10.1182/blood.v100.3.743 . ПМИД   12130481 .
  23. ^ Ахвази Б., Штайнерт П.М. (август 2003 г.). «Модель механизма реакции фермента трансглутаминазы 3» . Экспериментальная и молекулярная медицина . 35 (4): 228–242. дои : 10.1038/emm.2003.31 . ПМИД   14508061 .
  24. ^ Гриффин М., Касадио Р., Бергамини С.М. (декабрь 2002 г.). «Трансглутаминазы: природные биологические клеи» . Биохимический журнал . 368 (Часть 2): 377–396. дои : 10.1042/BJ20021234 . ПМК   1223021 . ПМИД   12366374 .
  25. ^ Кудряшов Д.С., Дюрер З.А., Иттерберг А.Ю., Савая М.Р., Пашков И., Прохазкова К. и др. (ноябрь 2008 г.). «Соединение мономеров актина изопептидной связью является механизмом токсичности токсина MARTX холерного вибриона» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 105 (47): 18537–18542. Бибкод : 2008PNAS..10518537K . дои : 10.1073/pnas.0808082105 . ПМЦ   2587553 . ПМИД   19015515 .
  26. ^ Вестерманн С., Вебер К. (декабрь 2003 г.). «Посттрансляционные модификации регулируют функцию микротрубочек». Обзоры природы. Молекулярно-клеточная биология . 4 (12): 938–947. дои : 10.1038/nrm1260 . hdl : 11858/00-001M-0000-0012-EF93-5 . ПМИД   14685172 . S2CID   6933970 .
  27. ^ Закери Б., Фирер Дж.О., Челик Э., Читток Э.К., Шварц-Линек У., Мой В.Т., Ховарт М. (март 2012 г.). «Пептидная метка, образующая быструю ковалентную связь с белком посредством создания бактериального адгезина» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 109 (12): E690–E697. Бибкод : 2012PNAS..109E.690Z . дои : 10.1073/pnas.1115485109 . ПМК   3311370 . ПМИД   22366317 .
  28. ^ Веджиани Дж., Накамура Т., Бреннер М.Д., Гайет Р.В., Ян Дж., Робинсон К.В., Ховарт М. (февраль 2016 г.). «Программируемые полипротеамы, построенные с использованием двойных пептидных суперклеев» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 113 (5): 1202–1207. Бибкод : 2016ПНАС..113.1202В . дои : 10.1073/pnas.1519214113 . ПМЦ   4747704 . ПМИД   26787909 .
  29. ^ Тан Л.Л., Хун СС, Вонг Ф.Т. (26 октября 2016 г.). «Кинетические контролируемые взаимодействия меток-ловушек для направленной сборки ковалентного белка» . ПЛОС ОДИН . 11 (10): e0165074. Бибкод : 2016PLoSO..1165074T . дои : 10.1371/journal.pone.0165074 . ПМК   5082641 . ПМИД   27783674 .
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Isopeptide_bond&oldid=1233375643"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: ece58785b7cc1b3731cf031b2f5ebe82__1720455480
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/ec/82/ece58785b7cc1b3731cf031b2f5ebe82.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Isopeptide bond - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)