Коагулаза
Коагулаза — это белковый фермент, вырабатываемый несколькими микроорганизмами , который обеспечивает преобразование фибриногена в фибрин . В лаборатории его используют для различения различных типов изолятов стафилококка . Важно отметить, что S. aureus обычно является коагулазо-положительным, а это означает, что положительный тест на коагулазу будет указывать на присутствие S. aureus или любого из других 11 коагулазо-положительных стафилококков . [ 1 ] Вместо этого отрицательный тест на коагулазу покажет наличие коагулазонегативных организмов, таких как S. epidermidis или S. saprophyticus . Однако теперь известно, что не все S. aureus являются коагулазоположительными. [ 2 ] [ 3 ] В то время как коагулазоположительные стафилококки обычно являются патогенными , коагулазонегативные стафилококки чаще связаны с оппортунистической инфекцией . [ 4 ]
Его также производит Yersinia pestis . [ 5 ]
Коагулаза реагирует с протромбином в крови. Образующийся комплекс называется стафилотромбином , который позволяет ферменту действовать как протеаза , превращая фибриноген, белок плазмы, вырабатываемый печенью, в фибрин. Это приводит к свертыванию крови. Коагулаза прочно связана с поверхностью бактерии S. aureus и при контакте с кровью может покрывать ее поверхность фибрином. Сгусток фибрина может защитить бактерию от фагоцитоза и изолировать ее от других защитных сил хозяина. [ 6 ] Таким образом, фибриновая оболочка может сделать бактерии более вирулентными. Связанная коагулаза является частью более крупного семейства белков-адгезинов MSCRAMM .
Коагулазный тест
[ редактировать ]Коагулазный тест традиционно используется для дифференциации золотистого стафилококка от коагулазонегативного стафилококка . S.aureus производит две формы коагулазы (т.е. связанную коагулазу и свободную коагулазу). Связанная коагулаза, иначе известная как «фактор слипания» , может быть обнаружена путем проведения слайд-коагулазного теста, а свободная коагулаза может быть обнаружена с помощью пробирочного теста на коагулазу.
Слайд-тест
[ редактировать ]Слайд-тест на коагулазу проводят с отрицательным контролем, чтобы исключить аутоагглютинацию. Две капли физиологического раствора наносятся на предметное стекло, помеченное номером образца: Тест (Т) и Контроль (С). Две капли физиологического раствора эмульгируются с тестируемым организмом с помощью проволочной петли, прямой проволоки или деревянной палочки. Капля плазмы ( плазма кролика, антикоагулированная ЭДТА ) рекомендуется [ 7 ] помещают на каплю инокулированного физиологического раствора, соответствующую тесту, и хорошо перемешивают, затем предметное стекло осторожно покачивают в течение примерно 10 секунд.
- В случае положительного результата в течение 10 секунд в плазме будет наблюдаться макроскопическое слипание без слипания в капле физиологического раствора.
- Если «отрицательный», слипания наблюдаться не будет.
Если тест на коагулазу на предметном стекле отрицательный, в качестве подтверждения следует провести пробирочный тест. Слипание обеих капель является признаком аутоагглютинации, поэтому следует провести пробирочный тест. Пробирочный тест не проводится в каждом учреждении, но большая часть результата зависит от лабораторных культур крови.
Пробирочный тест
[ редактировать ]
В пробирочном тесте используется кроличья плазма , заражённая колонией стафилококка (т.е. грамположительными кокками, которые являются каталазоположительными ). Затем пробирку инкубируют при 37°С в течение 1,5 часов. Если результат отрицательный, то инкубацию продолжают до 18 часов.
- Если «положительный результат» (например, подозрительная колония — S. aureus ), плазма будет коагулировать, [ 8 ] в результате чего образуется тромб (иногда тромб настолько выражен, что жидкость полностью застывает).
- Если «отрицательно», плазма остается жидкостью. Отрицательный результат может быть S. epidermidis , но подтвердить это может только более детальный идентификационный тест с использованием биохимических тестов, таких как методы определения индекса аналитического профиля . Ложноотрицательный результат может быть воспринят, если не дать образцу остыть в течение примерно 30 минут при комнатной температуре или 10 минут в морозильной камере, поскольку сыворотка может расплавиться. Если результат действительно отрицательный, сыворотка останется жидкой после охлаждения.
- Список коагулазоположительных стафилококков: Staphylococcus aureus subsp. anaerobius , S. aureus subsp. aureus , S. delphini , S. hyicus , S. intermedius , S. lutrae и Staphylococcus schleiferi subsp. коагуляция
- Список коагулазонегативных стафилококков, имеющих клиническое значение: S. saprophyticus , S. cohnii subsp. cohnii , S. cohnii subsp. urealyticum , S. captitus subsp. captitus , S.warneri , S.hominis , S.epidermidis , S.caprae и S.lugdunensis .
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Беккер и др., 2014. PMID 25278577.
- ^ Райан К.Дж., Рэй К.Г. (редакторы) (2004). Медицинская микробиология Шерриса (4-е изд.). МакГроу Хилл. ISBN 0-8385-8529-9 .
- ^ PreTest, Хирургия, 12-е изд., стр.88
- ^ Гонсалес-Мартин М., Суарес-Бонне А., Техедор-Хунко М.Т. (2020). «Факторы вирулентности коагулазо-положительных стафилококков, представляющих ветеринарный интерес, кроме Staphylococcus aureus» . Ветеринарный ежеквартальный журнал . 40 (1): 118–131. дои : 10.1080/01652176.2020.1748253 . ПМК 7178840 . ПМИД 32223696 .
- ^ «коагулаза» в Медицинском словаре Дорланда.
- ^ Тортора, Джерард Дж.; Функе, Берделл Р.; Кейс, Кристин Л. (2013). Микробиология: Введение (11-е изд.). Гленвью, Иллинойс: Pearson Education Inc., с. 434. ИСБН 978-0-321-73360-3 .
- ^ А.Форбс, Бетти; Дэниел Ф.Сам; Элис С.Вайсфельд (1998). Диагностическая микробиология BAILEY & SCOTT (Десятое изд.). Дон Ладиг. стр. 430–431 . ISBN 0-8151-2535-6 .
- ^ «Тест на коагулазу» в Медицинском словаре Дорланда.
Внешние ссылки
[ редактировать ]- Тест на коагулазу в пробирке - видео с плазмой кролика. Архивировано 24 ноября 2012 г. на Wayback Machine.
- Коагулаза Национальной медицинской библиотеки США по медицинским предметным рубрикам (MeSH)
- Процедура теста на коагулазу
