✖


Jump to content

Синтез пептидов

Соединение двух аминокислот в растворе. Незащищенный амин одного реагирует с незащищенной группой карбоновой кислоты другого с образованием пептидной связи . В этом примере вторая реакционноспособная группа (амин/кислота) в каждом из исходных материалов несет защитную группу .

В органической химии пептидный синтез — это производство пептидов , соединений, в которых несколько аминокислот связаны амидными связями, также известными как пептидные связи . Пептиды химически синтезируются путем реакции конденсации карбоксильной группы одной аминокислоты в аминогруппу другой. Стратегии защиты групп обычно необходимы для предотвращения нежелательных побочных реакций с различными боковыми цепями аминокислот. [1] Химический синтез пептидов чаще всего начинается с карбоксильного конца пептида (С-конец) и продолжается к аминоконцу ( N-конец ). [2] Биосинтез белков (длинных пептидов) в живых организмах происходит в обратном направлении.

Химический синтез пептидов может осуществляться с использованием классических методов растворенной фазы, хотя в большинстве исследовательских и опытно-конструкторских работ они были заменены твердофазными методами (см. Ниже). [3] Более того, синтез в растворной фазе сохраняет свою полезность при крупномасштабном производстве пептидов для промышленных целей.

Химический синтез облегчает производство пептидов, которые трудно экспрессировать в бактериях, включение неприродных аминокислот, модификацию основной цепи пептида/белка и синтез D-белков, которые состоят из D-аминокислот .

Твердофазный синтез [ править ]

Схема твердофазного синтеза пептидов (ТФС).
Схема твердофазного синтеза пептидов (ТФС) на смоле в качестве твердого носителя с защищенными аминокислотами . обычно Снятие защиты осуществляется с использованием такого основания , как пиперидин . За этим следует этап связывания (добавление защищенной аминокислоты) с растущей пептидной цепью. Связывающие реагенты (например, HBTU , HATU или DIC ) используются для формирования пептидной связи . За окончательным снятием защиты следует расщепление .

Установленный метод производства синтетических пептидов в лаборатории известен как твердофазный пептидный синтез (SPPS). [2] Пионер Роберт Брюс Меррифилд . [4] [5] SPPS обеспечивает быструю сборку пептидной цепи посредством последовательных реакций производных аминокислот на макроскопически нерастворимой, набухшей в растворителе, основе из гранулированной смолы. [ нужна ссылка ]

Твердый носитель состоит из небольших шариков полимерной смолы, функционализированных реакционноспособными группами (такими как амино- или гидроксильные группы), которые связываются с образующейся пептидной цепью. [2] Поскольку пептид остается ковалентно связанным с носителем на протяжении всего синтеза, излишки реагентов и побочные продукты можно удалить промыванием и фильтрацией. Этот подход позволяет избежать сравнительно трудоемкого выделения пептидного продукта из раствора после каждой стадии реакции, что потребовалось бы при использовании обычного синтеза в растворе. [ нужна ссылка ]

Каждая аминокислота, подлежащая соединению с N-концом пептидной цепи, должна быть защищена на ее N-конце и боковой цепи с использованием соответствующих защитных групп, таких как Boc (лабильная в кислоте) или Fmoc (лабильная в отношении оснований), в зависимости от боковой цепи и используемая стратегия защиты (см. ниже). [1]

Общая процедура SPPS представляет собой один из повторяющихся циклов поочередного снятия защиты с N-конца и реакций связывания. Смолу можно промывать между каждым этапом. [2] Сначала со смолой связывают аминокислоту. Впоследствии с амина снимают защиту, а затем он соединяется с активированной карбоксильной группой следующей добавляемой аминокислоты. Этот цикл повторяется до тех пор, пока желаемая последовательность не будет синтезирована. Циклы SPPS могут также включать этапы кэпирования, которые блокируют реакцию концов непрореагировавших аминокислот. В конце синтеза неочищенный пептид отщепляется от твердого носителя при одновременном удалении всех защитных групп с использованием такого реагента, как трифторуксусная кислота. [2] Неочищенный пептид можно осаждать из неполярного растворителя, такого как диэтиловый эфир, для удаления органических растворимых побочных продуктов. Неочищенный пептид можно очистить с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ . [6] [7] Процесс очистки, особенно более длинных пептидов, может быть сложным, поскольку необходимо удалить совокупные количества многочисленных второстепенных побочных продуктов, которые имеют свойства, аналогичные желаемому пептидному продукту. По этой причине так называемые процессы непрерывной хроматографии, такие как MCSGP, все чаще используются в коммерческих целях для максимизации выхода без ущерба для чистоты. [8]

SPPS ограничен выходами реакций из-за экспоненциального накопления побочных продуктов, и обычно пептиды и белки в диапазоне 70 аминокислот раздвигают границы синтетической доступности. [2] Синтетическая сложность также зависит от последовательности; обычно склонные к агрегации последовательности, такие как амилоиды [9] сложно сделать. Доступ к более длинным длинам можно получить, используя подходы лигирования, такие как нативное химическое лигирование , при котором два более коротких синтетических пептида с полностью снятой защитой можно соединить в растворе.

пептидов связывания для Реагенты

Важной особенностью, которая позволила широко применять SPPS, является получение чрезвычайно высоких выходов на этапе соединения. [2] высокоэффективные условия образования амидной Требуются связи. Чтобы проиллюстрировать влияние неоптимальных выходов сочетания для данного синтеза, рассмотрим случай, когда каждая стадия связывания должна была иметь выход не менее 99%: это привело бы к общему выходу сырого продукта 77% для пептида из 26 аминокислот (при условии, что 100% выход при каждом снятии защиты); если бы эффективность каждой муфты составляла 95 %, общий выход составил бы 25 %. [10] [11] и добавление избытка каждой аминокислоты (от 2 до 10 раз). Минимизация рацемизации аминокислот во время связывания также имеет жизненно важное значение, чтобы избежать эпимеризации в конечном пептидном продукте. [ нужна ссылка ]

Образование амидной связи между амином и карбоновой кислотой происходит медленно и поэтому обычно требует «связывающих реагентов» или «активаторов». Существует широкий спектр реагентов сочетания, отчасти из-за их различной эффективности для конкретных соединений. [12] [13] многие из этих реагентов коммерчески доступны.

Карбодиимиды [ править ]

Образование амидной связи с использованием DIC/HOBt. [11]

Карбодиимиды, такие как дициклогексилкарбодиимид (DCC) и диизопропилкарбодиимид (DIC), часто используются для образования амидной связи. [11] Реакция протекает через образование высокореакционной О - ацилизомочевины . Этот реакционноспособный промежуточный продукт подвергается атаке N-концевого амина пептида, образуя пептидную связь. Образование O -ацилизомочевины быстрее всего происходит в неполярных растворителях, таких как дихлорметан. [14]

DIC особенно полезен для SPPS, поскольку в жидком виде он легко дозируется, а побочный продукт мочевины легко смывается. И наоборот, родственный карбодиимид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (EDC) часто используется для связывания пептидов в растворенной фазе, поскольку его побочный продукт мочевина может быть удален промывкой во время водной обработки . [11]

ХОБт
НОАт
Эффект соседней группы HOAt

Активация карбодиимида открывает возможность рацемизации активированной аминокислоты. [11] Рацемизацию можно обойти с помощью добавок, «подавляющих рацемизацию», таких как триазолы 1-гидроксибензотриазол (HOBt) и 1-гидрокси-7-азабензотриазол (HOAt). Эти реагенты атакуют промежуточное соединение O -ацилизомочевины с образованием активного сложного эфира , который впоследствии реагирует с пептидом с образованием желаемой пептидной связи. [15] этилцианогидроксииминоацетат (Оксима), добавка для карбодиимидного связывания. Альтернативой НОАт является [16]

Соли аминия/урония и фосфония [ править ]

Реагенты для связывания пептидов на основе урония

связующие реагенты полностью исключают карбодиимид и включают фрагмент HOAt/HOBt в виде аминий/урониевой или фосфониевой соли ненуклеофильного Некоторые аниона ( тетрафторбората или гексафторфосфата ). [10] Примеры реагентов аминия/урония включают HATU (HOAt), HBTU / TBTU (HOBt) и HCTU (6-ClHOBt). HBTU и TBTU различаются только выбором аниона. Реагенты фосфония включают PyBOP (HOBt) и PyAOP (HOAt). [ нужна ссылка ]

Эти реагенты образуют те же активные эфирные формы, что и условия активации карбодиимида, но различаются скоростью начальной стадии активации, которая определяется природой углеродного скелета связывающего реагента. [17] Кроме того, аминиевые/урониевые реагенты способны вступать в реакцию с N-концом пептида с образованием неактивного гуанидинового побочного продукта, тогда как фосфониевые реагенты этого не делают.

Ангидрид пропанфосфоновой кислоты [ править ]

С конца 2000-х годов ангидрид пропанфосфоновой кислоты , продаваемый под разными названиями, например, «T3P», стал полезным реагентом для образования амидных связей в коммерческих целях. Он превращает кислород карбоновой кислоты в уходящую группу, побочные продукты пептидного связывания которой растворимы в воде и легко смываются. При сравнении характеристик ангидрида пропанфосфоновой кислоты и других реагентов для связывания пептидов для получения нонапептидного лекарственного средства было обнаружено, что этот реагент превосходит другие реагенты с точки зрения выхода и низкой эпимеризации. [18]

Твердые опоры [ править ]

Сшитый полистирол является наиболее распространенной твердой основой, используемой в SPPS.

Твердые подложки для синтеза пептидов выбираются с учетом их физической стабильности и обеспечения быстрой фильтрации жидкостей. Подходящие носители инертны к реагентам и растворителям, используемым во время SPPS, и позволяют присоединить первую аминокислоту. [19] Набухание имеет большое значение, поскольку синтез пептидов происходит внутри набухших пор твердой подложки. [20]

Тремя основными типами твердых опор являются: гелевые опоры, опоры поверхностного типа и композиты. [19] Усовершенствования твердых носителей, используемых для синтеза пептидов, повышают их способность противостоять многократному использованию TFA на этапе снятия защиты с SPPS. [21] Используются две первичные смолы в зависимости от того, требуется ли С-концевая карбоновая кислота или амид. Смола Ванга по состоянию на 1996 г. , наиболее часто используемая смола для пептидов с С-концевыми карбоновыми кислотами. [22] [ нужно обновить ]

Схемы защиты групп [ править ]

Как описано выше, использование защитных групп N-конца и боковой цепи необходимо во время синтеза пептидов, чтобы избежать нежелательных побочных реакций, таких как самосочетание активированной аминокислоты, приводящее к ( полимеризации ). [1] Это будет конкурировать с предполагаемой реакцией связывания пептидов, что приведет к низкому выходу или даже полной невозможности синтеза желаемого пептида. [ нужна ссылка ]

В твердофазном синтезе пептидов обычно используются две принципиальные схемы защитных групп: так называемые подходы Boc/бензил и Fmoc/ трет- бутил. [2] Стратегия Boc/Bzl использует TFA -лабильную N-концевую Boc- защиту наряду с защитой боковой цепи, которая удаляется с помощью безводного фторида водорода во время конечной стадии расщепления (с одновременным отщеплением пептида от твердой подложки). Fmoc/tBu SPPS использует лабильную к основаниям защиту N-конца Fmoc с защитой боковой цепи и смоляной связью, которая является лабильной в кислоте (окончательное кислотное расщепление осуществляется посредством обработки TFA).

Оба подхода, включая преимущества и недостатки каждого, более подробно описаны ниже.

Бок/Бзл СППС [ править ]

Основная статья: Трет-бутилоксикарбонильная защитная группа
Расщепление группы Boc

До появления SPPS методы химического синтеза пептидов в растворе основывались на трет -бутилоксикарбониле (сокращенно «Boc») в качестве временной N-концевой α-аминозащитной группы. Вос-группу удаляют кислотой, такой как трифторуксусная кислота (ТФУ). В присутствии избытка TFA образуется положительно заряженная аминогруппа (обратите внимание, что на изображении справа аминогруппа не протонирована), которая нейтрализуется и соединяется с поступающей активированной аминокислотой. [23] Нейтрализация может происходить либо до реакции сочетания, либо in situ во время основной реакции сочетания.

Подход Boc/Bzl сохраняет свою полезность в снижении агрегации пептидов во время синтеза. [24] Кроме того, Boc/бензил-SPPS может быть предпочтительнее подхода Fmoc/ трет- бутил при синтезе пептидов, содержащих чувствительные к основаниям фрагменты (такие как депсипептиды или тиоэфирные фрагменты), поскольку обработка основанием требуется на этапе снятия защиты с Fmoc (см. ниже). .

Постоянные защитные группы боковой цепи, используемые во время Boc/бензил-SPPS, обычно представляют собой бензильные группы или группы на основе бензила. [1] Окончательное удаление пептида с твердого носителя происходит одновременно со снятием защиты боковой цепи с использованием безводного фторида водорода посредством гидролитического расщепления. Конечный продукт представляет собой фторидную соль, которую относительно легко растворить. К HF необходимо добавлять поглотители, такие как крезол , чтобы предотвратить образование нежелательных побочных продуктов реактивными катионами.

Fmoc/ t Бу СППС [ править ]

Смотрите также: Флуоренилметилоксикарбонильная защитная группа
Расщепление группы Fmoc. Обработка Fmoc-защищенного амина пиперидином приводит к отрыву протона от группы флуоренильной метиновой кольцевой системы. Это приводит к высвобождению карбамата , который разлагается на углекислый газ ( CO 2 ) и свободный амин. дибензофульвен Также образуется . Эта реакция способна протекать за счет кислотности флуоренильного протона, возникающей в результате стабилизации образующегося ароматического аниона. нуклеофилами такими Побочный продукт дибензофульвен может реагировать с , как пиперидин (который находится в большом избытке) или, возможно, с высвободившимся амином. [25]

Использование N-концевой защиты Fmoc позволяет использовать более мягкую схему снятия защиты, чем используемая для Boc/Bzl SPPS, и эта схема защиты действительно ортогональна в условиях SPPS. [26] Для снятия защиты Fmoc используется основание, обычно 20–50% пиперидина в ДМФ . [19] Таким образом, экспонированный амин является нейтральным, и, следовательно, нейтрализация пептид-смолы не требуется, как в случае подхода Boc/Bzl. Однако отсутствие электростатического отталкивания между пептидными цепями может привести к повышенному риску агрегации с Fmoc/ t Bu SPPS. Поскольку высвобожденная флуоренильная группа представляет собой хромофор, снятие защиты с Fmoc можно контролировать по УФ-поглощению реакционной смеси - стратегия, которая используется в автоматических синтезаторах пептидов.

Способность группы Fmoc расщепляться в относительно мягких основных условиях, сохраняя при этом устойчивость к кислоте, позволяет использовать защитные группы боковой цепи, такие как Boc и t Bu, которые можно удалить в более мягких кислых условиях окончательного расщепления (TFA), чем те, которые используются для окончательное расщепление в Boc/Bzl SPPS (HF). Поглотители, такие как вода и триизопропилсилан (TIPS), чаще всего добавляются во время окончательного расщепления, чтобы предотвратить побочные реакции с активными катионными частицами, высвобождаемыми в результате снятия защиты с боковой цепи. Тем не менее, можно также использовать многие другие соединения-поглотители. [27] [28] [29] Полученный сырой пептид получают в виде соли TFA, которую потенциально труднее растворить, чем фторидные соли, образующиеся в Boc SPPS.

Fmoc/ t Bu SPPS менее экономичен по атомам , поскольку флуоренильная группа намного больше, чем Boc-группа. Соответственно, цены на Fmoc-аминокислоты были высокими до тех пор, пока в 1990-х годах не началось крупномасштабное пилотное испытание одного из первых синтезированных пептидных препаратов, энфувиртида , когда рыночный спрос скорректировал относительные цены на Fmoc-аминокислоты и Boc-аминокислоты.

группы защиты Другие ​

Бензилокси-карбонил [ править ]
Смотрите также: Карбоксибензил

Группа (Z) представляет собой еще одну защитную группу амина карбаматного типа, открытую Леонидасом Зервасом в начале 1930-х годов и обычно добавляемую в результате реакции с бензилхлорформиатом . [30]

Введение Z-защитной группы в результате реакции с бензилхлорформиатом (Z-хлоридом)

Его удаляют в жестких условиях с помощью HBr в уксусной кислоте или в более мягких условиях каталитического гидрирования .

Эта методология была впервые использована при синтезе олигопептидов Зервасом и Максом Бергманном в 1932 году. [31] Таким образом, это стало известно как синтез Бергмана-Зерваса, который был охарактеризован как «эпохальный» и помог выделить химию синтетических пептидов в отдельную область. [30] Это первый полезный лабораторный метод контролируемого синтеза пептидов, позволяющий синтезировать ранее недостижимые пептиды с реакционноспособными боковыми цепями, в то время как Z-защищенные аминокислоты также предотвращают рацемизацию . [30] [31]

Использование метода Бергмана-Зерваса оставалось стандартной практикой в ​​​​химии пептидов в течение двух полных десятилетий после его публикации, а в начале 1950-х годов его заменили более новые методы (такие как Boc-защитная группа). [30] В настоящее время, хотя его периодически используют для защиты α-аминов, гораздо чаще его используют для защиты боковой цепи.

Выделенные и разные группы [ править ]

Защитная группа аллилоксикарбонила (аллока) иногда используется для защиты аминогруппы (или карбоновой кислоты, или спиртовой группы), когда ортогональная схема снятия защиты требуется . Его также иногда используют при проведении образования циклического пептида на смоле, где пептид связан со смолой функциональной группой боковой цепи. Группу Alloc можно удалить с помощью тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) . [32]

Для особых применений, таких как этапы синтеза, включающие белковые микроматрицы , используются защитные группы, иногда называемые «литографическими», которые поддаются фотохимии при определенной длине волны света и поэтому могут быть удалены во время литографических операций. [33] [34] [35] [36]

связи Региоселективное образование дисульфидной

Образование множества природных дисульфидов остается проблемой синтеза нативных пептидов твердофазными методами. Случайное сочетание цепей обычно приводит к образованию нескольких продуктов с ненативными дисульфидными связями. [37] Поэтапное образование дисульфидных связей обычно является предпочтительным методом и осуществляется с использованием тиоловых защитных групп. [38] Различные тиоловые защитные группы обеспечивают различные аспекты ортогональной защиты. Эти ортогонально защищенные цистеины включаются во время твердофазного синтеза пептида. Последовательное удаление этих групп, позволяющее избирательно высвободить тиоловые группы, приводит к ступенчатому образованию дисульфида. Необходимо учитывать порядок удаления групп, чтобы одновременно удалялась только одна группа.

Тиолзащитные группы, используемые в синтезе пептидов, требующих последующего образования региоселективной дисульфидной связи, должны обладать множеством характеристик. [39] [40] Во-первых, они должны быть обратимыми в условиях, не затрагивающих незащищенные боковые цепи. Во-вторых, защитная группа должна быть способна выдерживать условия твердофазного синтеза. В-третьих, если желательна ортогональная защита, удаление тиолзащитной группы должно быть таким, чтобы другие тиолзащитные группы оставались нетронутыми. То есть удаление PG A не должно влиять на PG B. Некоторые из обычно используемых тиолзащитных групп включают ацетамидометил (Acm), трет- бутил (But), 3-нитро-2-пиридинсульфенил (NPYS), 2- пиридинсульфенильная (Pyr) и тритильная (Trt) группы. [39] Важно отметить, что группа NPYS может заменить Acm PG с образованием активированного тиола. [41]

Используя этот метод, Кисо и его коллеги сообщили о первом полном синтезе инсулина в 1993 году. [42] В этой работе А-цепь инсулина была получена со следующими защитными группами на ее цистеинах: CysA6(But), CysA7(Acm) и CysA11(But), оставляя CysA20 незащищенным. [42]

помощью микроволновой пептидов с печи Синтез

См. Также: микроволновая химия

Синтез пептидов с помощью микроволнового излучения использовался для завершения длинных пептидных последовательностей с высокой степенью выхода и низкой степенью рацемизации. [43] [44]

Твердофазный пептидный синтез потоком с непрерывным

Первая статья, посвященная синтезу пептидов в непрерывном потоке, была опубликована в 1986 году. [45] но из-за технических ограничений только в начале 2010-х годов все больше академических групп начали использовать непрерывный поток для быстрого синтеза пептидов. [46] [47] Преимуществом непрерывного потока по сравнению с традиционными периодическими методами является возможность нагревать реагенты с хорошим контролем температуры, что обеспечивает скорость кинетики реакции и минимизирует побочные реакции. [48] Время циклов варьируется от 30 секунд до 6 минут, в зависимости от условий реакции и избытка реагента.

Благодаря встроенной аналитике, такой как УФ/Вид-спектроскопия, и использованию реактора с переменным потоком слоя (VBFR), который контролирует объем смолы, можно выявить агрегацию на смоле и оценить эффективность связывания. [49]

Синтез длинных пептидов [ править ]

Пошаговая элонгация, при которой аминокислоты соединяются последовательно, идеально подходит для небольших пептидов, содержащих от 2 до 100 аминокислотных остатков. Другой метод — конденсация фрагментов , при которой соединяются пептидные фрагменты. [50] [51] [52] Хотя первый может удлинять пептидную цепь без рацемизации , выход падает, если его использовать только для создания длинных или высокополярных пептидов. Конденсация фрагментов лучше, чем ступенчатая элонгация, для синтеза сложных длинных пептидов, но ее использование должно быть ограничено, чтобы защитить от рацемизации. Конденсация фрагментов также нежелательна, поскольку сцепленный фрагмент должен находиться в значительном избытке, что может быть ограничением в зависимости от длины фрагмента. [53]

Новой разработкой для получения более длинных пептидных цепей является химическое лигирование : незащищенные пептидные цепи хемоселективно реагируют в водном растворе. Первый кинетически контролируемый продукт перегруппировывается с образованием амидной связи. В наиболее распространенной форме нативного химического лигирования используется пептидный тиоэфир, который реагирует с концевым остатком цистеина. [54]

Другие методы, применимые для ковалентного связывания полипептидов в водном растворе, включают использование расщепленных интеинов , [55] спонтанное образование изопептидной связи [56] и сортазное лигирование. [57]

С целью оптимизации синтеза длинных пептидов был разработан метод в Medicon Valley преобразования пептидных последовательностей . [ нужна ссылка ] Простая пред-последовательность (например, лизин (Lysn); глутаминовая кислота (Glun); (LysGlu)n), которая включается на С-конец пептида для индукции структуры, подобной альфа-спирали . Это потенциально может увеличить период биологического полураспада , улучшить стабильность пептидов и ингибировать ферментативную деградацию без изменения фармакологической активности или профиля действия. [58] [59]

Циклические пептиды [ править ]

О циклизации смолы [ править ]

Пептиды могут циклизоваться на твердой подложке. Можно использовать различные реагенты циклизации, такие как HBTU/HOBt/DIEA, PyBop/DIEA, PyClock/DIEA. [60] Пептиды типа «голова-хвост» могут быть получены на твердой подложке. Снятие защиты с С-конца в каком-либо подходящем месте делает возможной циклизацию на смоле путем образования амидной связи со снятой защитой N-конца. После завершения циклизации пептид отщепляется от смолы путем ацидолиза и очищается. [61] [62]

Стратегия твердофазного синтеза циклических пептидов не ограничивается присоединением через боковые цепи Asp, Glu или Lys. Цистеин имеет очень реакционноспособную сульфгидрильную группу на боковой цепи. Дисульфидный мостик создается, когда атом серы одного цистеина образует одинарную ковалентную связь с другим атомом серы второго цистеина в другой части белка. Эти мостики помогают стабилизировать белки, особенно те, которые секретируются клетками. Некоторые исследователи используют модифицированные цистеины с использованием S-ацетомидометила (Acm), чтобы блокировать образование дисульфидной связи, но сохранить цистеин и исходную первичную структуру белка. [63]

Циклизация вне смолы [ править ]

Циклизация вне смолы представляет собой твердофазный синтез ключевых промежуточных продуктов, за которым следует ключевая циклизация в фазе раствора, окончательное снятие защиты с любых замаскированных боковых цепей также осуществляется в фазе раствора. Это имеет те недостатки, что эффективность твердофазного синтеза теряется на стадиях растворенной фазы, требуется очистка от побочных продуктов, реагентов и непрореагировавшего материала и что нежелательные олигомеры могут образовываться макроцикла . , если задействовано образование [64]

Использование пентафторфениловых эфиров (FDPP, [65] ПФПОХ [66] ) и BOP-Cl [67] полезны для циклизации пептидов.

История [ править ]

Первый защищенный пептид был синтезирован Теодором Куртиусом в 1882 году, а первый свободный пептид был синтезирован Эмилем Фишером в 1901 году. [3]

См. также [ править ]

Ссылки [ править ]

  1. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д Исидро-Льобет А, Альварес М, Альберисио Ф (июнь 2009 г.). «Защитные группы аминокислот». Химические обзоры . 109 (6): 2455–2504. дои : 10.1021/cr800323s . hdl : 2445/69570 . ПМИД   19364121 . S2CID   90409290 .
  2. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д и ж г час Чан У.К., Уайт ПД (2000). Твердофазный синтез пептидов Fmoc: практический подход . Оксфорд, Великобритания: ОУП. ISBN  978-0-19-963724-9 .
  3. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Джарадат Д.М. (январь 2018 г.). «Тринадцать десятилетий синтеза пептидов: ключевые достижения в области твердофазного синтеза пептидов и образования амидных связей, используемых при лигировании пептидов». Аминокислоты . 50 (1): 39–68. дои : 10.1007/s00726-017-2516-0 . ПМИД   29185032 . S2CID   3680612 .
  4. ^ Меррифилд РБ (1963). «Твердофазный синтез пептидов. I. Синтез тетрапептида». Дж. Ам. хим. Соц. 85 (14): 2149–2154. дои : 10.1021/ja00897a025 .
  5. ^ Митчелл А.Р. (2008). «Брюс Меррифилд и твердофазный синтез пептидов: историческая оценка». Биополимеры . 90 (3): 175–184. дои : 10.1002/bip.20925 . ПМИД   18213693 . S2CID   30382016 .
  6. ^ Мант К.Т., Чен Ю., Ян З., Попа Т.В., Ковач Дж.М., Миллс Дж.Б. и др. (2007). «ВЭЖХ-анализ и очистка пептидов». Характеристика пептидов и протоколы применения . Методы молекулярной биологии. Том. 386. Хумана Пресс. стр. 3–55. дои : 10.1007/978-1-59745-430-8_1 . ISBN  978-1-59745-430-8 . ПМК   7119934 . ПМИД   18604941 .
  7. ^ «Услуга индивидуального синтеза пептидов. ВЭЖХ означает высокоэффективную жидкостную хроматографию» . Реметайд Биотех . ноябрь 2021 г.
  8. ^ Лундеманн-Хомбургер О (май 2013 г.). «Идеальное пептидное растение» (PDF) . Журнал «Специальная химия» : 30–33.
  9. ^ Тиклер А.К., Клиппингдейл А.Б., Уэйд Дж.Д. (август 2004 г.). «Бета-амилоид как «сложная последовательность» в твердофазном синтезе пептидов». Буквы о белках и пептидах . 11 (4): 377–384. дои : 10.2174/0929866043406986 . ПМИД   15327371 .
  10. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Эль-Фахам А., Альберисио Ф (ноябрь 2011 г.). «Реагенты для связывания пептидов - больше, чем буквенный суп». Химические обзоры . 111 (11): 6557–6602. дои : 10.1021/cr100048w . ПМИД   21866984 .
  11. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д и Монтальбетти, Калифорния, Фальк V (2005). «Образование амидной связи и связывание пептидов». Тетраэдр . 61 (46): 10827–10852. дои : 10.1016/j.tet.2005.08.031 .
  12. ^ Валер Э., Брэдли М. (февраль 2009 г.). «Образование амидной связи: за пределами мифа о связующих реагентах». Обзоры химического общества . 38 (2): 606–631. дои : 10.1039/B701677H . ПМИД   19169468 .
  13. ^ Эль-Фахам А., Альберисио Ф (ноябрь 2011 г.). «Реагенты для связывания пептидов - больше, чем буквенный суп». Химические обзоры . 111 (11): 6557–6602. дои : 10.1021/cr100048w . ПМИД   21866984 .
  14. ^ Сингх С. (январь 2018 г.). «CarboMAX - усиленное связывание пептидов при повышенных температурах» (PDF) . Примечание АП . 0124 : 1–5.
  15. ^ Жулье М.М., Лассен К.М. (2010). «Эволюция образования амидной связи» . Аркивок . VIII (8): 189–250. дои : 10.3998/ark.5550190.0011.816 . hdl : 2027/spo.5550190.0011.816 .
  16. ^ Субирос-Фуносас Р., Проэнс Р., Барбас Р., Эль-Фахам А., Альберисио Ф. (сентябрь 2009 г.). «Оксима: эффективная добавка для синтеза пептидов для замены HOBt и HOAt на основе бензотриазола с меньшим риском взрыва». Химия: Европейский журнал . 15 (37): 9394–9403. дои : 10.1002/chem.200900614 . ПМИД   19575348 .
  17. ^ Альберисио Ф., Бофилл Дж.М., Эль-Фахам А., Кейтс С.А. (1998). «Использование связывающих реагентов на основе ониевой соли в синтезе пептидов». Дж. Орг. Хим . 63 (26): 9678–9683. дои : 10.1021/jo980807y .
  18. ^ Дж. Хибл и др., Дж. Пепт. ничего (1999), 54, 54
  19. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с Альберисио Ф (2000). Твердофазный синтез: Практическое руководство (1-е изд.). Бока-Ратон: CRC Press. п. 848. ИСБН  978-0-8247-0359-2 .
  20. ^ Кент С.Б. (1988). «Химический синтез пептидов и белков». Ежегодный обзор биохимии . 57 (1): 957–989. дои : 10.1146/annurev.bi.57.070188.004521 . ПМИД   3052294 .
  21. ^ Фейнберг Р.С., Меррифилд Р.Б. (1974). «Хлорметилирование смол, катализируемое хлоридом цинка, для твердофазного синтеза пептидов». Тетраэдр . 30 (17): 3209–3212. дои : 10.1016/S0040-4020(01)97575-1 .
  22. ^ Хермкенс П.Х., Оттенхейм Х.К., Рис, округ Колумбия (1997). «Твердофазные органические реакции II: обзор литературы, 95 ноября – 96 ноября». Тетраэдр . 53 (16): 5643–5678. дои : 10.1016/S0040-4020(97)00279-2 .
  23. ^ Шнольцер М.А., Джонс А., Алвуд Д., Кент С.Б. (2007). «Нейтрализация in situ в Boc-химическом твердофазном синтезе пептидов». Межд. J. Пептид Рез. Терапия . 13 (1–2): 31–44. дои : 10.1007/s10989-006-9059-7 . S2CID   28922643 .
  24. ^ Бейерманн М., Бьнерт М. (1992). «Синтез сложных пептидных последовательностей: сравнение Fmoc- и BOC-методов». Буквы тетраэдра . 33 (26): 3745–3748. дои : 10.1016/0040-4039(92)80014-Б .
  25. ^ Джонс Дж (1992). Синтез аминокислот и пептидов . Оксфорд, Великобритания: Издательство Оксфордского университета.
  26. ^ Луна О.Ф., Гомес Х., Карденас К., Альберисио Ф., Маршалл Ш., Гусман Ф. (ноябрь 2016 г.). «Реагенты для снятия защиты в твердофазном пептидном синтезе Fmoc: отказ от пиперидина?» . Молекулы . 21 (11): 1542. doi : 10,3390/molecules21111542 . ПМК   6274427 . ПМИД   27854291 .
  27. ^ Хуан Х., Рабенштейн Д.Л. (май 1999 г.). «Коктейль для расщепления метионинсодержащих пептидов». Журнал исследований пептидов . 53 (5): 548–553. дои : 10.1034/j.1399-3011.1999.00059.x . ПМИД   10424350 .
  28. ^ «Коктейли расщепления; Реагент B; Реагент H; Реагент K; Реагент L; Реагент R» . ААППТЕК . Проверено 13 ноября 2022 г.
  29. ^ Дик Ф (1995). «Кислотное расщепление/снятие защиты при твердофазном пептидном синтезе Fmoc/tBiu». В Пеннингтоне М.В., Данн Б.М. (ред.). Протоколы синтеза пептидов . Методы молекулярной биологии. Том. 35. Тотова, Нью-Джерси: Humana Press. стр. 63–72. дои : 10.1385/0-89603-273-6:63 . ISBN  978-1-59259-522-8 . ПМИД   7894609 .
  30. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д Кацояннис П.Г., изд. (1973). Химия полипептидов . Нью-Йорк: Пленум Пресс. дои : 10.1007/978-1-4613-4571-8 . ISBN  978-1-4613-4571-8 . S2CID   35144893 .
  31. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Бергманн М , Зервас Л (1932). «Об общем методе синтеза пептидов». Отчеты Немецкого химического общества . 65 (7): 1192–1201. дои : 10.1002/cber.19320650722 .
  32. ^ Тьери Н, Альсина Дж, Жиральт Э, Гибе Ф, Альберисио Ф (1997). «Использование аллок-аминокислот в твердофазном синтезе пептидов. Тандемные реакции снятия защиты и сочетания с использованием нейтральных условий». Буквы тетраэдра . 38 (41): 7275–7278. дои : 10.1016/S0040-4039(97)01690-0 .
  33. ^ Шин Д.С., Ким Д.Х., Чунг В.Дж., Ли Ю.С. (сентябрь 2005 г.). «Комбинаторный твердофазный синтез пептидов и биоанализы» . Журнал биохимии и молекулярной биологии . 38 (5): 517–525. дои : 10.5483/BMBRep.2005.38.5.517 . ПМИД   16202229 .
  34. ^ Прайс СП, Тангсомбатвизит С., Сюй Г, Ю Дж., Леви Д., Бэхлер Э.К. и др. (сентябрь 2012 г.). «Силиконовые пептидные микрочипы для картирования эпитопов антител и разнообразных белок-белковых взаимодействий с высоким разрешением» . Природная медицина . 18 (9): 1434–1440. дои : 10.1038/нм.2913 . ПМЦ   3491111 . ПМИД   22902875 .
  35. ^ Хедберг-Дирк Э.Л., Мартинес У.А. (8 августа 2010 г.). «Крупномасштабные белковые массивы, созданные с помощью интерферометрической литографии для пространственного контроля взаимодействий клетки и материала» . Журнал наноматериалов . 2010 : e176750. дои : 10.1155/2010/176750 . ISSN   1687-4110 .
  36. ^ Фодор С.П., Рид Дж.Л., Пиррунг М.К., Страйер Л., Лу А.Т., Солас Д. (февраль 1991 г.). «Светонаправленный, пространственно адресуемый параллельный химический синтез». Наука . 251 (4995): 767–773. Бибкод : 1991Sci...251..767F . дои : 10.1126/science.1990438 . ПМИД   1990438 .
  37. ^ Там Дж.П., Ву Ч.Р., Лю В., Чжан Дж.В. (1991). «Образование дисульфидной связи в пептидах диметилсульфоксидом. Область применения и применение». Дж. Ам. хим. Соц . 113 (17): 6657–6662. дои : 10.1021/ja00017a044 .
  38. ^ Зибер П., Камбер Б., Хартманн А., Йоль А., Риникер Б., Риттель В. (январь 1977 г.). «[Тотальный синтез человеческого инсулина. IV. Описание заключительных стадий (авторский перевод)]». Helvetica Chimica Acta . 60 (1): 27–37. дои : 10.1002/hlca.19770600105 . ПМИД   838597 .
  39. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Спирс Р.Дж., МакМахон С., Чудасама В. (октябрь 2021 г.). «Цистеинзащитные группы: применение в науке о пептидах и белках» . Обзоры химического общества . 50 (19): 11098–11155. дои : 10.1039/D1CS00271F . ПМИД   34605832 . S2CID   238258277 .
  40. ^ Лапс С., Атамле Ф., Камнески Г., Сан Х., Брик А. (февраль 2021 г.). «Общая синтетическая стратегия региоселективного сверхбыстрого образования дисульфидных связей в пептидах и белках» . Природные коммуникации . 12 (1): 870. Бибкод : 2021NatCo..12..870L . дои : 10.1038/s41467-021-21209-0 . ПМЦ   7870662 . ПМИД   33558523 .
  41. ^ Оттл Дж., Баттистута Р., Пипер М., Чеше Х., Боде В., Кюн К., Мородер Л. (ноябрь 1996 г.). «Дизайн и синтез гетеротримерных коллагеновых пептидов со встроенным цистиновым узлом. Модели катаболизма коллагена матриксными металлопротеазами» . Письма ФЭБС . 398 (1): 31–36. дои : 10.1016/S0014-5793(96)01212-4 . ПМИД   8946948 . S2CID   24688988 .
  42. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Акадзи К., Фуджино К., Тацуми Т., Кисо Ю. (1993). «Тотальный синтез человеческого инсулина путем региоселективного образования дисульфида силилхлорид-сульфоксидным методом». Журнал Американского химического общества . 115 (24): 11384–11392. дои : 10.1021/ja00077a043 .
  43. ^ Педерсен С.Л., Тофтенг А.П., Малик Л., Дженсен К.Дж. (март 2012 г.). «Микроволновое нагревание при твердофазном синтезе пептидов». Обзоры химического общества . 41 (5): 1826–1844. дои : 10.1039/C1CS15214A . ПМИД   22012213 .
  44. ^ Каппе К.О., Стадлер А., Даллинджер Д. (2012). Микроволны в органической и медицинской химии . Методы и принципы медицинской химии. Том. 52 (Второе изд.). Уайли. ISBN  9783527331857 .
  45. ^ Драйленд А, Шеппард Р.С. (1986). «Синтез пептидов. Часть 8. Система для твердофазного синтеза в условиях непрерывного потока низкого давления» . Журнал Химического общества, Perkin Transactions 1 : 125–137. дои : 10.1039/p19860000125 . ISSN   0300-922X .
  46. ^ Саймон М.Д., Хайдер П.Л., Адамо А., Виноградов А.А., Монг С.К., Ли Х и др. (март 2014 г.). «Быстрый проточный синтез пептидов» . ХимБиоХим . 15 (5): 713–720. дои : 10.1002/cbic.201300796 . ПМК   4045704 . ПМИД   24616230 .
  47. ^ Спейр Л.К., Лауд В., Харман Д.Г., Олдрич-Райт-младший, Гордон С.П. (2018). «Оптимизированный подход к твердофазному синтезу пептидов в непрерывном потоке с использованием элементарного проточного реактора» . Реакционная химия и инженерия . 3 (6): 875–882. дои : 10.1039/C8RE00190A . ISSN   2058-9883 .
  48. ^ Гордон КП (январь 2018 г.). «Возрождение синтеза пептидов в непрерывном потоке - сокращенный отчет о подходах на основе твердых веществ и растворов». Органическая и биомолекулярная химия . 16 (2): 180–196. дои : 10.1039/C7OB02759A . ПМИД   29255827 .
  49. ^ Слеттен Э.Т., Нуньо М., Гатри Д., Сибергер П.Х. (декабрь 2019 г.). «Мониторинг твердофазного синтеза пептидов в режиме реального времени с использованием реактора с переменным потоком слоя». Химические коммуникации . 55 (97): 14598–14601. дои : 10.1039/C9CC08421E . hdl : 21.11116/0000-0005-3E5F-D . ПМИД   31742308 .
  50. ^ Мьюир Т.В., Сонди Д., Коул П.А. (июнь 1998 г.). «Экспрессированное лигирование белков: общий метод белковой инженерии» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 95 (12): 6705–6710. Бибкод : 1998PNAS...95.6705M . дои : 10.1073/pnas.95.12.6705 . ПМК   22605 . ПМИД   9618476 .
  51. ^ Нильссон Б.Л., Зёлльнер М.Б., Рейнс Р.Т. (2005). «Химический синтез белков» . Ежегодный обзор биофизики и биомолекулярной структуры . 34 : 91–118. doi : 10.1146/annurev.biophys.34.040204.144700 . ПМЦ   2845543 . ПМИД   15869385 .
  52. ^ Кент С.Б. (февраль 2009 г.). «Тотальный химический синтез белков». Обзоры химического общества . 38 (2): 338–351. дои : 10.1039/B700141J . ПМИД   19169452 . S2CID   5432012 .
  53. ^ Найфелер Р. (7 ноября 1994 г.). Синтез пептидов методом конденсации фрагментов . Методы молекулярной биологии. Том. 35. Нью-Джерси: Humana Press. стр. 303–316. дои : 10.1385/0-89603-273-6:303 . ISBN  978-0-89603-273-6 . ПМИД   7894607 .
  54. ^ Флуд Д.Т., Хинтцен Дж.К., Бёрд М.Дж., Цистрон П.А., Чен Дж.С., Доусон П.Е. (сентябрь 2018 г.). «Использование синтеза пиразола Кнорра для легкого создания суррогатов тиоэфиров для использования в нативном химическом лигировании» . Angewandte Chemie International Edition на английском языке . 57 (36): 11634–11639. дои : 10.1002/anie.201805191 . ПМК   6126375 . ПМИД   29908104 .
  55. ^ Аранко А.С., Влодавер А., Иваи Х (август 2014 г.). «Природный рецепт расщепления белков» . Белковая инженерия, проектирование и отбор . 27 (8): 263–271. дои : 10.1093/протеин/gzu028 . ПМЦ   4133565 . ПМИД   25096198 .
  56. ^ Реддингтон СК, Ховарт М. (декабрь 2015 г.). «Секреты ковалентного взаимодействия биоматериалов и биотехнологий: SpyTag и SpyCatcher» . Современное мнение в области химической биологии . 29 : 94–99. дои : 10.1016/j.cbpa.2015.10.002 . ПМИД   26517567 .
  57. ^ Харидас В., Саданандан С., Дипти Н.У. (сентябрь 2014 г.). «Биоорганические стратегии макромолекулярного синтеза на основе сортазы». ХимБиоХим . 15 (13): 1857–1867. дои : 10.1002/cbic.201402013 . ПМИД   25111709 . S2CID   28999405 .
  58. ^ Капуста Д.Р., Торкильдсен С., Кенигс В.А., Мейер Э., Винге М.М., Квист С., Петерсен Дж.С. (август 2005 г.). «Фармакодинамическая характеристика ZP120 (Ac-RYYRWKKKKKKK-NH2), нового функционально селективного частичного агониста пептидного рецептора ноцицептина / орфанина FQ с натрий-калийсберегающей акваретической активностью». Журнал фармакологии и экспериментальной терапии . 314 (2): 652–660. дои : 10.1124/jpet.105.083436 . ПМИД   15855355 . S2CID   27318583 .
  59. ^ Рицци А., Рицци Д., Марзола Дж., Реголи Д., Ларсен Б.Д., Петерсен Дж.С., Кало Дж. (октябрь 2002 г.). «Фармакологическая характеристика нового лиганда рецептора ноцицептина/орфанина FQ, ZP120: исследования in vitro и in vivo на мышах» . Британский журнал фармакологии . 137 (3): 369–374. дои : 10.1038/sj.bjp.0704894 . ПМЦ   1573505 . ПМИД   12237257 .
  60. ^ Дэвис Дж.С. (август 2003 г.). «Циклизация пептидов и депсипептидов» . Журнал пептидной науки . 9 (8): 471–501. дои : 10.1002/psc.491 . ПМИД   12952390 .
  61. ^ Ламберт Дж. Н., Митчелл Дж. П., Робертс К. Д. (1 января 2001 г.). «Синтез циклических пептидов» . Журнал Химического общества, Perkin Transactions 1 (5): 471–484. дои : 10.1039/B001942I . ISSN   1364-5463 .
  62. ^ Чоу ХИ, Чжан Ю, Мэтисон Э, Ли Х (сентябрь 2019 г.). «Технологии лигирования синтеза циклических пептидов». Химические обзоры . 119 (17): 9971–10001. doi : 10.1021/acs.chemrev.8b00657 . ПМИД   31318534 . S2CID   197666575 .
  63. ^ Зибер П., Камбер Б., Риникер Б., Риттель В. (10 декабря 1980 г.). «Окисление йода S-тритил- и S-ацетамидометилцистеин-пептидов, содержащих триптофан: условия, приводящие к образованию триптофан-2-тиоэфиров». Helvetica Chimica Acta . 63 (8): 2358–2363. дои : 10.1002/hlca.19800630826 .
  64. ^ Скотт П. (13 октября 2009 г.). Стратегии линкера в твердофазном органическом синтезе . Джон Уайли и сыновья. стр. 135–137. ISBN  978-0-470-74905-0 .
  65. ^ Николау К.С., Натараджан С., Ли Х., Джайн Н.Ф., Хьюз Р., Соломон М.Е. и др. (октябрь 1998 г.). «Полный синтез агликона ванкомицина. Часть 1: синтез аминокислот 4–7 и построение кольцевого скелета AB-COD». Ангеванде Хеми . 37 (19): 2708–2714. doi : 10.1002/(SICI)1521-3773(19981016)37:19<2708::AID-ANIE2708>3.0.CO;2-E . ПМИД   29711605 .
  66. ^ Восток СП, Жулье ММ (1998). «Синтетические исследования 14-членных циклопептидных алкалоидов» . Тетраэдр Летт. 39 (40): 7211–7214. дои : 10.1016/S0040-4039(98)01589-5 .
  67. ^ Бейкер Р., Кастро Дж.Л. (1989). «Полный синтез (+)-макбецина I». хим. Коммун. (6): 378–381. дои : 10.1039/C39890000378 .

Дальнейшее чтение [ править ]

Внешние ссылки [ править ]

Викискладе есть медиафайлы, связанные с синтезом пептидов .
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Peptide_synthesis&oldid=1227736574#Solid-phase_synthesis"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 56bff36391370892d3bd672748a755da__1717760040
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/56/da/56bff36391370892d3bd672748a755da.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Peptide synthesis - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)