✖


Jump to content

Корецептор

(Перенаправлено с Корецепторов )

Корецептор рецептор представляет собой клеточной поверхности , который связывает сигнальную молекулу в дополнение к первичному рецептору, чтобы облегчить распознавание лиганда и инициировать биологические процессы, такие как проникновение патогена в клетку-хозяина.

Характеристики

[ редактировать ]

Термин «корецептор» широко используется в литературе, посвященной передаче сигнала — процессу, посредством которого внешние раздражители регулируют внутреннее функционирование клеток. [1] Ключом к оптимальному функционированию клеток является наличие специального механизма, который может выполнять задачи эффективно и действенно. В частности, процесс, посредством которого межмолекулярные реакции передают и усиливают внеклеточные сигналы через поверхность клетки, происходит по двум механизмам. Во-первых, рецепторы клеточной поверхности могут напрямую передавать сигналы, обладая серином и треонином или просто серином в цитоплазматическом домене. Они также могут передавать сигналы через адаптерные молекулы через свой цитоплазматический домен, которые связываются с сигнальными мотивами. Во-вторых, некоторые поверхностные рецепторы, лишенные цитоплазматического домена, могут передавать сигналы посредством связывания лиганда. Как только поверхностный рецептор связывает лиганд, он образует комплекс с соответствующим поверхностным рецептором для регулирования передачи сигналов. [2] Эти категории рецепторов клеточной поверхности обычно называют корецепторами. Корецепторы также называют дополнительными рецепторами, особенно в области биомедицинских исследований и иммунологии. [1]

Корецепторы — это белки, которые поддерживают трехмерную структуру. Большие внеклеточные домены составляют примерно 76–100% рецептора. [2] Мотивы, составляющие крупные внеклеточные домены, участвуют в связывании лигандов и образовании комплексов. [3] Мотивы могут включать гликозаминогликаны , повторы EGF, остатки цистеина или домены ZP-1. [2] Разнообразие мотивов приводит к тому, что корецепторы могут взаимодействовать с двумя-девятью различными лигандами, которые сами также могут взаимодействовать с рядом различных корецепторов. [2] У большинства корецепторов отсутствует цитоплазматический домен, и они, как правило, заякорены с GPI, хотя было идентифицировано несколько рецепторов, которые содержат короткие цитоплазматические домены, лишенные внутренней киназной активности. [2]

Локализация и функции

[ редактировать ]

В зависимости от типа лиганда, с которым связывается корецептор, его расположение и функция могут различаться. Различные лиганды включают интерлейкины , нейротрофические факторы , факторы роста фибробластов , трансформирующие факторы роста , факторы роста эндотелия сосудов и факторы роста эпидермиса . [3] Корецепторы, присутствующие в эмбриональной ткани, играют важную роль в формировании градиента морфогена или дифференцировке тканей. [2] Корецепторы, локализованные в эндотелиальных клетках, усиливают пролиферацию и миграцию клеток . [3] При таком разнообразии местоположения корецепторы могут участвовать во многих различных клеточных действиях. Корецепторы были идентифицированы как участники клеточных сигнальных каскадов, эмбрионального развития, регуляции клеточной адгезии, формирования градиента, пролиферации и миграции тканей. [2]

Некоторые классические примеры

[ редактировать ]

семейство компакт-дисков

[ редактировать ]

Семейство корецепторов CD представляет собой хорошо изученную группу внеклеточных рецепторов, обнаруженных в иммунологических клетках. [4] Семейство рецепторов CD обычно действует как корецепторы, что иллюстрируется классическим примером того, как CD4 действует как корецептор по отношению к рецептору Т-клеток (TCR) для связывания главного комплекса гистосовместимости II (MHC-II). [5] Это связывание особенно хорошо изучено на Т-клетках, где оно служит для активации Т-клеток, находящихся в фазе покоя (или покоя), и заставляет активные циклические Т-клетки подвергаться запрограммированной гибели клеток . Беме и др. продемонстрировали этот интересный двойной результат, блокируя связывание CD4 с MHC-II, что предотвращало реакцию запрограммированной гибели клеток, которую обычно проявляют активные Т-клетки. [6] Рецептор CD4 состоит из четырех конкатамеризованных Ig-подобных доменов и прикреплен к клеточной мембране с помощью одного трансмембранного домена . Рецепторы семейства CD обычно представляют собой мономеры или димеры , хотя все они в основном представляют собой внеклеточные белки. Рецептор CD4, в частности, взаимодействует с мышиным MHC-II по модели «шарик на палочке», где шарик Phe-43 вписывается в консервативные гидрофобные остатки доменов α2 и β2. [5] При связывании с MHC-II CD4 сохраняет независимую структуру и не образует никаких связей с рецептором TCR.

Члены семейства корецепторов CD обладают широким спектром функций. Рецептор CD4 не только участвует в формировании комплекса MHC-II с TCR для контроля судьбы Т-клеток, но и является печально известным первичным рецептором, гликопротеин оболочки GP120 ВИЧ. с которым связывается [6] Для сравнения, CD28 действует как «кокорецептор» (костимулирующий рецептор) для связывания MHC-II с TCR и CD4. CD28 увеличивает секрецию IL-2 Т-клетками, если он участвует в начальной активации; однако блокировка CD28 не влияет на запрограммированную гибель клеток после активации Т-клеток. [6]

Семейство рецепторов CCR

[ редактировать ]

Семейство рецепторов CCR представляет собой группу рецепторов, связанных с g-белком (GPCR), которые обычно действуют как хемокиновые рецепторы . В первую очередь они обнаруживаются на иммунологических клетках, особенно Т-клетках . [7] Рецепторы CCR также экспрессируются на нейрональных клетках, таких как дендриты и микроглия. [7] Возможно, самым известным и хорошо изученным представителем семейства CCR является CCR5 (и его близкий гомолог CXCR4 ), который действует как первичный корецептор ВИЧ-вирусной инфекции. [7] [8] Гликопротеин оболочки ВИЧ GP120 связывается с CD4 в качестве первичного рецептора, затем CCR5 образует комплекс с CD4 и ВИЧ, позволяя вирусу проникнуть в клетку. CCR5 — не единственный член семейства CCR, который позволяет заразиться ВИЧ. Из-за общности структур, обнаруженных во всем семействе, CCR2b , CCR3 и CCR8 могут использоваться некоторыми штаммами ВИЧ в качестве корецепторов для облегчения инфекции. CXCR4 по структуре очень похож на CCR5. Хотя только некоторые штаммы ВИЧ могут использовать CCR2b, CCR3 и CCR8, все штаммы ВИЧ могут заражать посредством CCR5 и CXCR4. [7]

Известно, что CCR5 имеет сродство к воспалительному белку макрофагов (MIP) и, как полагают, играет роль в воспалительных иммунологических реакциях. Основная роль этого рецептора менее понятна, чем его роль при ВИЧ-инфекции, поскольку воспалительные реакции остаются плохо изученным аспектом иммунной системы. [7] [8] Сродство CCR5 к MIP делает его большим интересом для практических применений, таких как тканевая инженерия , где предпринимаются попытки контролировать воспалительные и иммунологические реакции хозяина на уровне клеточной передачи сигналов. Сродство к MIP использовалось in vitro для предотвращения заражения ВИЧ посредством конкуренции лигандов; однако эти ингибиторы проникновения оказались неэффективными in vivo из-за высокой адаптивной природы ВИЧ и проблем токсичности. [7]

Клиническое значение

[ редактировать ]

Из-за своей важности в передаче сигналов и регуляции клеток корецепторы вовлечены в ряд заболеваний и расстройств. корецептора Мыши с нокаутом часто неспособны развиваться, и такие нокауты обычно приводят к эмбриональной или перинатальной летальности. [2] В частности, в иммунологии термин «корецептор» часто описывает вторичный рецептор, используемый патогеном для получения доступа к клетке, или рецептор, который работает вместе с рецепторами Т-клеток, такими как CD4, CD8 или CD28, для связывания антигенов или регуляции. Т-клеточная активность в некотором роде. [2]

Наследственные аутосомные нарушения корецепторов

[ редактировать ]

Многие расстройства, связанные с корецепторами, возникают из-за мутаций в гене, кодирующем рецептор. LRP5 (белок 5, родственный рецептору липопротеинов низкой плотности) действует как корецептор для гликопротеинов семейства Wnt, которые регулируют костную массу. Нарушения работы этого корецептора приводят к снижению плотности и прочности костей, что способствует развитию остеопороза . [9]

Мутации потери функции в LRP5 связаны с синдромом остеопороза-псевдоглиомы, семейной экссудативной витреоретинопатией, а специфическая миссенс-мутация в первой области β-пропеллера LRP5 может привести к аномально высокой плотности кости или остеопетрозу . [2] Мутации в LRP1 также были обнаружены в случаях семейной болезни Альцгеймера. [2]

Мутации потери функции в Cryptic-корецепторе могут привести к случайному расположению органов из-за дефектов ориентации слева направо в процессе развития. [2]

Считается, что в некоторых случаях гигантизм вызван потерей функции корецептора 3 . глипикана [2]

Рак

[ редактировать ]

Молекула клеточной адгезии-1 карциноэмбрионального антигена (Caecam1) представляет собой иммуноглобулинподобный корецептор, который способствует клеточной адгезии в эпителиальных, эндотелиальных и гемопоэтических клетках и играет жизненно важную роль во время васкуляризации и ангиогенеза путем связывания фактора роста эндотелия сосудов (VEGF). [10]

Ангиогенез важен для эмбрионального развития, но также является фундаментальным процессом роста опухоли. Удаление гена у мышей Caecam1-/- приводит к уменьшению аномальной васкуляризации, наблюдаемой при раке, и снижению выработки оксида азота, что указывает на возможность лечения путем нацеливания на этот ген. [10] Семейство нейропилина корецепторов опосредует связывание VEGF совместно с сигнальными рецепторами VEGFR1 / VEGFR2 и плексина и, следовательно, также играет роль в развитии сосудов опухоли. [2]

CD109 действует как негативный регулятор рецептора фактора роста опухоли β ( TGF-β ). При связывании TGF-β рецептор интернализуется посредством эндоцитоза под действием CD109, что снижает передачу сигнала в клетку. [11] В этом случае корецептор функционирует критическим регуляторным образом, уменьшая сигналы, которые приказывают клетке расти и мигрировать – признаки рака. [11] Семейство корецепторов LRP также опосредует связывание TGF-β с различными мембранными рецепторами. [2]

Интерлейкины 1, 2 и 5 связываются с первичными рецепторами интерлейкина с помощью корецепторов интерлейкина. [2]

Синдеканы 1 и 4 участвуют в различных типах рака, включая рак шейки матки, молочной железы, легких и толстой кишки, а аномальные уровни экспрессии связаны с худшим прогнозом. [2]

ВИЧ

[ редактировать ]

Чтобы заразить клетку, гликопротеин оболочки GP120 вируса ВИЧ взаимодействует с CD4 (действующим как первичный рецептор) и корецептором: либо CCR5 , либо CXCR4 . Это связывание приводит к слиянию мембран и последующей внутриклеточной передаче сигналов, которая облегчает вирусную инвазию. [12] Примерно в половине всех случаев ВИЧ вирусы, использующие корецептор CCR5, по-видимому, благоприятствуют немедленному заражению и передаче, тогда как вирусы, использующие рецептор CXCR4, не проявляются до более поздней стадии иммунологически подавленной стадии заболевания. [12] В ходе инфекции вирус часто переключается с использования CCR5 на CXCR4, что служит индикатором прогрессирования заболевания. [13] Недавние данные свидетельствуют о том, что некоторые формы ВИЧ также используют большой рецептор интегрина a4b7 для повышения эффективности связывания в тканях слизистой оболочки. [13]

Гепатит С

[ редактировать ]

Вирус гепатита С для заражения требует CD81 корецептора . Исследования показывают, что белок плотных соединений Клаудин-1 (CLDN1) также может играть роль в проникновении ВГС. [14] Аномалии семейства Клаудинов также часто встречаются при гепатоцеллюлярной карциноме, которая может возникнуть в результате инфекции ВПЧ . [14]

Блокада как лечение аутоиммунитета

[ редактировать ]

Можно выполнить блокаду корецептора CD4 с помощью антител , чтобы снизить активацию Т-клеток и противодействовать аутоиммунным заболеваниям . [15] Эта блокада, по-видимому, вызывает «доминантный» эффект, то есть после блокировки Т-клетки не восстанавливают свою способность становиться активными. Этот эффект затем распространяется на нативные Т-клетки, которые затем переключаются на регуляторный фенотип CD4+CD25+GITR+FoxP3+ T. [15]

Текущие области исследований

[ редактировать ]

В настоящее время двумя наиболее важными областями исследований корецепторов являются исследования ВИЧ и рака. Исследования ВИЧ сосредоточены на адаптации штаммов ВИЧ к различным корецепторам хозяина. Исследования рака в основном сосредоточены на усилении иммунного ответа на опухолевые клетки, хотя некоторые исследования также включают изучение рецепторов, экспрессируемых самими раковыми клетками.

ВИЧ

[ редактировать ]

Большинство исследований корецепторов ВИЧ сосредоточено на корецепторе CCR5. Большинство штаммов ВИЧ используют рецептор CCR5. [16] Штаммы ВИЧ-2 также могут использовать рецептор CXCR4. [17] хотя рецептор CCR5 является более целенаправленным из двух. Корецепторы CCR5 и CXCR4 представляют собой семь трансмембранных (7TM) G-белков-связанных рецепторов . [18] Различные штаммы ВИЧ воздействуют на разные корецепторы, хотя вирус может переключаться на использование других корецепторов. [16] Например, рецепторы R5X4 могут стать доминирующей мишенью корецептора ВИЧ в основных штаммах. ВИЧ-1 и ВИЧ-2 могут использовать CCR8 . корецептор [17] Пересечение мишеней корецепторов для разных штаммов и способность штаммов переключаться с доминирующего корецептора могут препятствовать клиническому лечению ВИЧ. Такие методы лечения, как моноклональные антитела WR321, могут ингибировать некоторые штаммы CCR5 ВИЧ-1, предотвращая инфицирование клеток. [18] mAb вызывает высвобождение b-хемокинов, ингибирующих ВИЧ-1, предотвращая инфицирование других клеток.

Рак

[ редактировать ]

Исследования корецепторов, связанных с раком, включают исследование факторами роста корецепторов, активируемых трансформирующего фактора роста ( TGF-β , таких как корецепторы ). Экспрессия корецептора эндоглина , который экспрессируется на поверхности опухолевых клеток, коррелирует с пластичностью клеток и развитием опухолей. [19] Другим корецептором TGF-β является CD8. [20] Хотя точный механизм до сих пор неизвестен, было показано, что корецепторы CD8 усиливают активацию Т-клеток и опосредованную TGF-β иммунную супрессию. Было показано, что TGF-β влияет на пластичность клеток посредством интегрина и киназы фокальной адгезии. [19] Корецепторы опухолевых клеток и их взаимодействие с Т-клетками играют важную роль в иммунотерапии опухолей . Недавние исследования корецепторов р75 , таких как корецептор сортилина, показали, что сортилин связан с нейротрофинами , типом фактора роста нервов. [21] Было обнаружено, что рецептор p75 и корецепторы влияют на агрессивность опухолей, в частности, за счет способности нейротрофинов спасать клетки от определенных форм клеточной гибели. [22] Сортилин, корецептор р75, был обнаружен в естественных клетках-киллерах , но с низким уровнем рецептора нейротрофина. [23] Считается, что корецептор сортилина работает с гомологом нейротрофина, который также может заставлять нейротрофин изменять иммунный ответ.

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Перейти обратно: а б Гомпертс, Б.Д.; Крамер, ИМ. Тэтэм, ПЕР. (2002). Трансдукция сигнала. Академическая пресса. ISBN   0-12-289631-9 ISBN.
  2. ^ Перейти обратно: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п д Киркбридж, К.К., Рэй, Б.Н., Блоуб, Г.К. (2005). «Корецепторы клеточной поверхности: новая роль в передаче сигналов и заболеваниях человека». Тенденции биохимии. наук. 30 (11): 611–21. дои : 10.1016/j.tibs.2005.09.003 . ПМИД   16185874 .
  3. ^ Перейти обратно: а б с Го Д., Цзя Ц. и др. (1995). «Фактор роста эндотелиальных клеток сосудов способствует фосфорилированию тирозина медиаторов сигнальной трансдукции, которые содержат домены SH2, и ассоциации с пролиферацией эндотелиальных клеток». J Biol Chem 270 (12): 6729–6733.
  4. ^ Боббитт, К.Р., Джастимент, Л.Б. 2000. Регуляция передачи сигнала MHC класса II корецепторами B-клеток CD19 и CD22.
  5. ^ Перейти обратно: а б Ван Дж., Мейхерс Р., Сюн Ю., Луи Дж., Сакихама Т., Чжан Р., Йоахимиак А., Рейнхерц Э.Л. 2001. Кристаллическая структура второго N-конца CD4 человека. Фрагмент -домена в комплексе с молекулой MHC класса II. Учеб. Национальная академия наук США: Том. 98, № 19, стр. 10799-10804.
  6. ^ Перейти обратно: а б с Бёме С.А., Чжэн Л., Ленардо М.Дж. 1995. Анализ корецептора CD4 и индуцированных активацией костимулирующих молекул при антиген-опосредованной гибели зрелых Т-лимфоцитов. Журнал иммунологии. 155:1703-1712.
  7. ^ Перейти обратно: а б с д и ж Берсон Дж. Ф., Домс Р. В. 1998. Структурно-функциональные исследования корецепторов ВИЧ-1. Семинары по иммунологии, Vol. 10 стр. 237–248.
  8. ^ Перейти обратно: а б Блеул, С.С., Ву, Л., Хокси, Дж.А., Спрингер, Т.А., Маккей, С.Р. 1996. Рецепторы ВИЧ CXCR4 и CCR5 по-разному экспрессируются и регулируются на Т-клетках человека. Учеб. Натл. акад. наук. США. Том. 94, стр. 1925–1930.
  9. ^ Саваками, К., Роблинг, А.Г., Ай, М., Питнер, Н.Д., Лю, Д., Уорден, С.Дж., Ли, Дж., Мэй, П., Роу, Д.В., Дункан, Р.Л., Уорман, М.Л., Тернер, CH (2006). «Корецептор Wnt LRP5 необходим для скелетной механотрансдукции, но не для анаболического ответа костей на лечение паратироидным гормоном». Ж. Биол. хим. 281 (33): 23698–711. дои : 10.1074/jbc.M601000200 . ПМИД   16790443 .
  10. ^ Перейти обратно: а б Нувион, А.Л., Убаха, М., Леблан, С., Дэвис, Э.К., Ястроу, Х., Каммерер, Р., Бретон, В., Турбид, К., Эргун, С., Граттон, Дж.П., Бошемин, Н. (2010). «CEACAM1: ключевой регулятор проницаемости сосудов». Дж. Клеточная наука. 123(24):4221–30. два : 10.1242/jcs.073635 . ПМИД   21081647 .
  11. ^ Перейти обратно: а б Бизе А.А., Лю К., Тран-Хан Н., Саксена А., Ворстенбош Дж., Финнсон К.В., Бушманн М.Д., Филип А. (2011). «Корецептор TGF-β, CD109, способствует интернализации и деградации рецепторов TGF-β». Биохим. Биофиз. Акта. Epub перед печатью опубликован в феврале 2011 года. дои : 10.1016/j.bbamcr.2011.01.028 . ПМИД   21295082 .
  12. ^ Перейти обратно: а б Мариани С.А., Виченци Э., Поли Г. (2011). «Асимметричное использование и репликация корецептора ВИЧ-1 в CD4 (+) Т-лимфоцитах». Дж. Перевод. Мед. 9 (1): С8. два : 10.1186/1479-5876-9-S1-S8 . ПМИД   21284907 .
  13. ^ Перейти обратно: а б Чикала, К., Артос, Дж., Фаучи, А.С. (2011). «Оболочка ВИЧ-1, интегрины и использование корецепторов при передаче ВИЧ через слизистые оболочки». Дж. Перевод. Мед. 9 (1): С2. дои : 10.1186/1479-5876-9-S1-S2 . ПМИД   21284901 .
  14. ^ Перейти обратно: а б Эванс, М.Дж., фон Хан, Т., Черн, Д.М., Сайдер, А.Дж., Панис, М., Вельк, Б., Хациоанну, Т., МакКитинг, Дж.А., Биениас, П.Д. , Райс, К.М. (2007). «Клаудин-1 — это корецептор вируса гепатита С, необходимый на позднем этапе проникновения». Природа. 446 (7137): 801–5. дои : 10.1038/nature05654 . ПМИД   17325668 .
  15. ^ Перейти обратно: а б Вальдманн Х., Адамс Э., Кобболд С. (2008). «Перепрограммирование иммунной системы: блокада корецепторов как парадигма использования механизмов толерантности». Иммунол. Откр. 223: 361–70. два : 10.1111/j.1600-065X.2008.00632.x . ПМИД   18613847 .
  16. ^ Перейти обратно: а б Кутцер М., Неделлек Р., Сильерс Т., Мейерс Т., Моррис Л., Мозье Д.Э. (2011). Для переключения корецепторов при ВИЧ-1 подтипа C необходима экстремальная генетическая дивергенция. Журнал синдромов приобретенного иммунодефицита, 56, 9-15.
  17. ^ Перейти обратно: а б Каладо, М., Матосо, П., Сантос-Коста, К., Эспириту-Санто, М., Мачадо, Ж., Росадо, Л., Антунес, Ф., Мансиньо, К., Лопес, М.М., Мальтес, Ф., Сантос-Феррейра, Миссури, Азеведо-Перейра, Ж.М. (2010). Использование корецепторов первичными изолятами ВИЧ-1 и ВИЧ-2: актуальность хемокинового рецептора CCR8 в качестве альтернативного корецептора. Вирусология, 408, 174–182.
  18. ^ Перейти обратно: а б Матьяс, Г.Р., Вечорек, Л., Бансал, Д., Шенин, А., Сандерс-Бьюэлл, Э., Тованабутра, С., Ким, Дж. Х., Полонис, В., Алвинг, CR (2010). Ингибирование ВИЧ-1-инфекции мононуклеарных клеток периферической крови моноклональным антителом, которое связывается с фосфоинозитидами и индуцирует секрецию бета-хемокинов. Биохимические и биофизические исследования, 402, 808-812.
  19. ^ Перейти обратно: а б Пардали, Э. ван дер Шафт, Д.В.Дж., Верчинска, Э., Гортер, А., Хогендорн, PCW, Гриффиоен, А.В., тен Дейке, П. (2011). Критическая роль эндоглина в пластичности опухолевых клеток саркомы Юинга и меланомы. . Онкоген, 30, 334–345.
  20. ^ Злоза, А., Ягода, MC, Лайонс, GE, Грейвс, MC, Кольхапп, Ф.Дж., О'Салливан, Дж.А., Ласек, AT, Нисимура, Мичиган, Гевара-Патино, JA (2011). Корецептор CD8 способствует чувствительности CD8(+) Т-клеток к подавлению, опосредованному трансформирующим фактором роста-бета (TGF-бета). Иммунология рака, иммунотерапия, 60, 291–297.
  21. ^ Бартковска, К., Турлейски, К., Джавадян, Р.Л. (2010). Нейротрофины и их рецепторы в раннем развитии нервной системы млекопитающих. Acta Neurobiologiae Experimentalis (Варшава), 70, 454-467.
  22. ^ Бассили М., Бирман Э., Шор Н.Ф., Сарагови ХУ (2010). Дифференциальная роль рецепторов нейротрофинов Trk и p75 в онкогенезе и химиорезистентности ex vivo и in vivo. Химиотерапия и фармакология рака, 65, 1047–1056.
  23. ^ Роджерс, М., Бейли, С., Матусика, Д., Николсон, И., Мейдерман, Х., Пагадала, ПК, Нит, К.Э., Зола, Х., Макардл, П., Раш, РА (2010) . ProNGF опосредует гибель клеток естественных киллеров посредством активации комплекса p75NTR-сортилин. Журнал нейроиммунологии, 226, 93-103.
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Co-receptor&oldid=1226875120"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: c84b1cbfaf46422e1104bdcde1d766c0__1717311780
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/c8/c0/c84b1cbfaf46422e1104bdcde1d766c0.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Co-receptor - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)