Jump to content

Элюирование антител

Элюирование антител удаляет связанные антитела с поверхности эритроцитов, что облегчает процесс идентификации антител.

Элюирование антител — это клиническая лабораторная диагностическая процедура, которая удаляет сенсибилизированные антитела из эритроцитов , чтобы определить антиген системы группы крови, на который нацелены антитела. [1] Элюирование антител считается необходимым, когда обнаруживаются антитела класса иммуноглобулинов G (IgG), сенсибилизированные (связанные) с периферическими эритроцитами, собранными у реципиента, перелившего продукты крови. [2] Антитела IgG выявляются с помощью анализа, известного как прямой антиглобулиновый тест . [3]

Элюции антител – это специализированные тесты, используемые в клинических банках крови . Примеры рутинных тестов включают ABO/Rh , скрининг на антитела, идентификацию антител и тестирование на антиглобулин . Примеры других специализированных тестов, используемых в банках крови, включают: обработку тиоловым реагентом, анализ монослоя моноцитов , обработку ферментами и адсорбцию. [2]

Эта процедура помогает выявить антитела, которые трудно идентифицировать, отличить реакции на переливание крови , гемолитическую болезнь плода и новорожденного , а также выявить теплые аутоантитела. [4]

Системы групп крови

[ редактировать ]

Мембраны эритроцитов состоят из фосфолипидного бислоя, усеянного белками , липидами , углеводами и комбинациями этих веществ. [5] Эти вещества называются антигенами , поскольку они стимулируют иммунный ответ , когда человек подвергается воздействию этого вещества, но подвергшийся воздействию человек не несет и не экспрессирует гены, кодирующие указанные антигены. [6] Каждый человек имеет уникальный генетический и фенотипический состав антигенов, очень похожий на дерматоглифику отпечатков пальцев человека .

По состоянию на 2023 год существует 44 системы групп крови, каждая из которых содержит несколько антигенов эритроцитов, всего 354, определяемых примерно 49 отдельными генами. [7] Из этих антигенов лишь немногие считаются клинически значимыми, а это означает, что они могут стимулировать выработку антител, способных вызывать гемолиз эритроцитов . Это особенно важно для переливания эритроцитов и других клеточных продуктов крови. Примеры систем групп крови, которые содержат антигены, способные индуцировать клинически значимые аллоантитела (антитела против чужеродных антигенов), включают, помимо прочего, ABO , Rh , Kell , Duffy , Kidd и MNS . системы групп крови [8]

Идентификация антител

[ редактировать ]

потенциального реципиента Антитела к антигенам системы групп крови и их характеристики должны быть идентифицированы при обнаружении таких антител в сыворотке или плазме . [9] Специфичность антитела помогает медицинскому лаборанту определить, является ли антитело клинически значимым. Идентификация антител – очень трудоемкий процесс. [1]

Характеристики клинически значимых антител включают: реактивность при температуре тела (37°C), иммуноглобулин (Ig) класса G , IgM , реагирующий при температуре тела, способность проникать через плаценту , способность вызывать разрушение эритроцитов и/или направленность антител. против общеизвестных клинически значимых антигенов эритроцитов. [10] Например, если человек подвергается воздействию антигена эритроцитов (при переливании крови, беременности, трансплантации стволовых клеток), которым он по своей природе не обладает, у него может образоваться клинически значимое антитело, направленное против этого антигена. Если пациенту переливают эритроциты, содержащие антиген Kell (большой К или просто К), они могут образовывать антитела, называемые анти-К (анти-большой К). Последующие переливания К-положительных эритроцитов могут вызвать немедленную гемолитическую трансфузионную реакцию . Антитело K реагирует при 37°C, представляет собой IgG, способное проникать через плаценту и вызывающее немедленное разрушение эритроцитов.

Присутствие аутоантител, направленных против собственных антигенов эритроцитов, может усложнить процесс идентификации антител. Аутоантитела к эритроцитам, как правило, специфичны к антигенам эритроцитов, которые часто встречаются в популяции. Элюирование антител может помочь в идентификации клинически значимых аллоантител , когда аутоантитела мешают процессу идентификации антител. [11]

Методы элюирования антител

[ редактировать ]

В клиническом банке крови используется несколько методов элюирования антител. Некоторые из этих методов включают манипулирование температурой, манипулирование pH , использование органических растворителей и хлорохина . [2] Каждый из этих методов имеет преимущества и недостатки, а метод элюирования будет варьироваться в зависимости от клинической применимости. Одним из наиболее часто используемых методов является кислотное элюирование, поскольку оно быстрое, дешевое и относительно простое в исполнении. [3] [12]

Принцип кислотного элюирования

[ редактировать ]

Основные этапы кислотного элюирования включают в себя: [3] [2]

  1. Отделите и тщательно промойте эритроциты из периферически собранной с ЭДТА пробирки для сбора крови с помощью центрифугирования .
  2. Смешайте отмытые эритроциты пациента, положительные на фазу IgG прямого антиглобулинового теста , с глициновой кислотой (рН 3,0).
  3. Центрифугируйте смесь и сразу же удалите надосадочную жидкость из разрушенных эритроцитов.
  4. Добавьте буфер, чтобы вернуть смеси нейтральный pH. Этот шаг имеет решающее значение для дальнейшего тестирования идентификации антител, поскольку антитела не будут реагировать при pH менее 7,0.
  5. Для осветления раствора может потребоваться дополнительное центрифугирование.
  6. Полученный раствор известен как элюат. Затем этот элюат тестируют на панели эритроцитов с известными антигенными профилями. Эта процедура идентификации антител поможет определить специфичность антитела.
На этой инфографике показан принцип элюирования кислотных антител.

Определение того, когда следует выполнять элюирование антител

[ редактировать ]

Антиглобулиновое тестирование

[ редактировать ]

эритроцитов Основным методом обнаружения антител и антигенов, используемым в клинической лаборатории, является агглютинация . [1] Большинство антител IgM легче обнаружить, поскольку они крупнее и реагируют при комнатной температуре (20°C). [13] [14] Именно эта концепция делает тестирование ABO/Rh таким быстрым и простым в проведении. Однако большинство клинически значимых антител, не относящихся к АВО, реагируют при температуре тела (37°C) и не приводят к агглютинации без добавления нескольких этапов: инкубации, промывания и добавления реагента против человеческого глобулина (AHG). [15]

Античеловеческий глобулин представляет собой антитело, направленное против антител IgG человека. [16] Когда меньшее антитело IgG прикрепляется к эритроцитам, более крупные антитела AHG создают перекрестную связь между сенсибилизированными IgG эритроцитами, образуя визуальную агглютинацию. Когда наблюдается такая агглютинация, антиглобулиновый тест считается положительным для обнаружения присутствующих антител и/или антигена(ов). [2]

Существует два основных типа тестирования на антиглобулин: непрямой и прямой. [17] [18] Непрямой антиглобулиновый тест используется для обнаружения антител в плазме / сыворотке , тогда как прямой антиглобулиновый тест используется для обнаружения антител, связанных с эритроцитами. Если прямой тест на антиглобулин дает положительный результат, мы должны выполнить элюирование антитела, чтобы удалить антитело для идентификации и определить клиническую значимость антитела. [3]

См. также

[ редактировать ]
  1. ^ Перейти обратно: а б с Современные методы хранения крови и переливания крови . Дениз Харменинг (Седьмое изд.). Филадельфия, Пенсильвания. 2019. ISBN  978-0-8036-9462-0 . OCLC   1048659017 . {{cite book}}: CS1 maint: отсутствует местоположение издателя ( ссылка ) CS1 maint: другие ( ссылка )
  2. ^ Перейти обратно: а б с д и Техническое руководство . Калудия С. Кон, Меган Делани, Сьюзан Т. Джонсон, Луи М. Кац, Американская ассоциация банков крови (20-е изд.). Бетесда, Мэриленд. 2020. ISBN  978-1-56395-370-5 . OCLC   1163631267 . {{cite book}}: CS1 maint: отсутствует местоположение издателя ( ссылка ) CS1 maint: другие ( ссылка )
  3. ^ Перейти обратно: а б с д Джадд, В. Джон (2021). Методы Джадда в иммуногематологии . Сьюзан Т. Джонсон, Джилл Сторри, В. Джон Джадд, Американская ассоциация банков крови (Четвертое изд.). Бетесда, доктор медицины. ISBN  978-1-56395-435-1 . OCLC   1336509285 . {{cite book}}: CS1 maint: отсутствует местоположение издателя ( ссылка )
  4. ^ «Глоссарий: Элюция - Глоссарий парня из банка крови» . Парень из банка крови . Проверено 17 апреля 2023 г.
  5. ^ Ли, Он; Ликотрафитис, Джордж (5 августа 2014 г.). «Модель мембраны эритроцитов с явным описанием липидного бислоя и спектриновой сети» . Биофизический журнал . 107 (3): 642–653. Бибкод : 2014BpJ...107..642L . дои : 10.1016/j.bpj.2014.06.031 . ISSN   1542-0086 . ПМК   4129483 . ПМИД   25099803 .
  6. ^ Миллер, Линда Э. (2021). Клиническая иммунология и серология: лабораторная перспектива . Кристин Доррестейн Стивенс (Пятое изд.). Филадельфия, Пенсильвания. ISBN  978-0-8036-9440-8 . OCLC   1200832451 . {{cite book}}: CS1 maint: отсутствует местоположение издателя ( ссылка )
  7. ^ ИСБТ. «Иммуногенетика эритроцитов и терминология групп крови | Рабочая группа ISBT» . www.isbtweb.org . Проверено 10 апреля 2023 г.
  8. ^ «Клинически значимые антитела к эритроцитам» . Кровавый завод Северо-Запад . Проверено 10 апреля 2023 г.
  9. ^ КУИНЛИ, ЕВА Д. (2020). ИММУНОГЕМАТОЛОГИЯ: принципы и практика . [Sl]: ДЖОНС И БАРТЛЕТТ УЧАТСЯ. ISBN  978-1-284-22137-4 . OCLC   1162875932 .
  10. ^ Уайт, Дж. (февраль 2017 г.). «Антитела к эритроцитам – клиническое значение или просто шум?» . Научная серия ISBT . 12 (1): 19–24. дои : 10.1111/voxs.12325 . S2CID   78254504 .
  11. ^ «Глоссарий: аутоантитела — глоссарий парня из банка крови» . Парень из банка крови . Проверено 17 апреля 2023 г.
  12. ^ «Глоссарий: Элюция - Глоссарий парня из банка крови» . Парень из банка крови . Проверено 17 апреля 2023 г.
  13. ^ «Глоссарий: IgM» . Парень из банка крови . Проверено 20 апреля 2023 г.
  14. ^ «Глоссарий: IgG» . Парень из банка крови . Проверено 20 апреля 2023 г.
  15. ^ Блейни, Кэти Д. (2013). Основные и прикладные концепции банков крови и практики переливания крови . Паула Р. Ховард, Кэти Д. Блейни (3-е изд.). Сент-Луис, Миссури: Мосби. ISBN  978-0-323-08663-9 . OCLC   817741300 .
  16. ^ «Глоссарий: Фаза AHG - Глоссарий парня из банка крови» . Парень из банка крови . Проверено 20 апреля 2023 г.
  17. ^ «Глоссарий: прямой тест на антиглобулин — глоссарий специалиста из банка крови» . Парень из банка крови . Проверено 20 апреля 2023 г.
  18. ^ «Глоссарий: непрямой антиглобулиновый тест» . Парень из банка крови . Проверено 20 апреля 2023 г.
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 3daeafbcf6445f3f6cef3331929e891b__1694721480
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/3d/1b/3daeafbcf6445f3f6cef3331929e891b.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Antibody elution - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)