✖


Jump to content

Тест на совместимость крови

Тест на совместимость крови
О положительная группа крови определяется пробирочным методом. Слева направо: эритроциты пациента не агглютинируют с реагентами анти-А и анти-В, но агглютинируют с реагентом анти-D. Плазма пациента агглютинирует эритроциты типа А1 и В.
Цель Выявление несовместимости между группами крови
Тест Эритроциты ; плазма крови
МедлайнПлюс 003345
электронная медицина 1731198
ЛОИНК 34532-2 , 883–9 , 10331-7

Тестирование на совместимость крови проводится в медицинской лаборатории для выявления потенциальной несовместимости между системами групп крови при переливании крови . Его также используют для диагностики и предотвращения некоторых осложнений беременности , которые могут возникнуть, если у ребенка другая группа крови, чем у матери. Тестирование на совместимость крови включает определение группы крови , при котором обнаруживаются антигены в эритроцитах , определяющие группу крови человека; тестирование на неожиданные антитела к антигенам группы крови ( скрининг и идентификация антител ); реципиента и, в случае переливания крови, смешивание плазмы с эритроцитами донора для выявления несовместимости ( перекрестное сопоставление ). Обычное определение группы крови включает определение группы АВО и RhD (резус-фактора), [примечание 1] и включает как идентификацию антигенов АВО на эритроцитах (прямая группировка), так и идентификацию антител АВО в плазме (обратная группировка). Другие антигены группы крови могут быть проверены в конкретных клинических ситуациях.

В тесте на совместимость крови используются реакции между антигенами группы крови и антителами , в частности, способность антител вызывать слипание эритроцитов, когда они связываются с антигенами на поверхности клетки, явление, называемое агглютинацией . Методы, основанные на реакциях антиген-антитело, называются серологическими методами, и доступно несколько таких методов: от ручного тестирования с использованием пробирок или предметных стекол до полностью автоматизированных систем. Группы крови также можно определить с помощью генетического тестирования , которое используется, когда присутствуют условия, мешающие серологическому тестированию, или когда требуется высокая степень точности идентификации антигена.

Некоторые условия могут привести к ложным или неубедительным результатам теста на совместимость крови. Когда эти проблемы влияют на типизацию ABO, их называют несоответствиями ABO . Расхождения в АВО должны быть исследованы и устранены до того, как будет сообщена группа крови человека. Другие источники ошибок включают феномен « слабого D », при котором люди с положительным результатом на антиген RhD демонстрируют слабые или отрицательные реакции при тестировании на RhD, а также наличие антител иммуноглобулина G в эритроцитах, что может мешать скринингу антител. , перекрестное сопоставление и типирование некоторых антигенов группы крови.

Медицинское использование

[ редактировать ]

Тест на совместимость крови обычно проводится перед переливанием крови . Полный процесс тестирования совместимости включает ABO и RhD типирование (резус-фактор); скрининг на антитела к другим системам групп крови ; и перекрестное сопоставление реципиента , которое включает тестирование плазмы крови на эритроциты донора в качестве окончательной проверки на несовместимость. Если обнаружено неожиданное антитело группы крови, необходимо дальнейшее тестирование для идентификации антитела. [3] : 740  и убедиться, что донорская кровь не содержит соответствующего антигена. [1] : 261  Серологическое перекрестное сопоставление можно не проводить, если скрининг на антитела у реципиента отрицательный, в анамнезе нет клинически значимых антител и их тип ABO/Rh подтвержден на основе исторических записей или на основании второго образца крови; а в чрезвычайных ситуациях кровь может быть перелита до того, как будут получены результаты испытаний на совместимость. [1] : 262–3 

Тестирование на совместимость крови часто проводят беременным женщинам и пуповинной крови новорожденных, поскольку несовместимость подвергает ребенка риску развития гемолитической болезни новорожденного. [4] [5] Его также используют перед трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток , поскольку несовместимость групп крови может быть причиной некоторых случаев острой реакции «трансплантат против хозяина» . [6]

Принципы

[ редактировать ]
Дополнительная информация: Группа крови.
АВО-антигены и антитела

Группы крови определяются по наличию или отсутствию специфических антигенов на поверхности эритроцитов. Важнейшими из них в медицине являются антигены АВО и RhD. [7] : 585  однако существует множество других систем групп крови, которые в некоторых ситуациях могут иметь клиническое значение. По состоянию на 2021 год официально признано 43 группы крови. [8]

Люди, у которых отсутствуют определенные антигены группы крови в эритроцитах, могут образовывать антитела против этих антигенов. Например, у человека с кровью группы А будут вырабатываться антитела против антигена В. Антитела группы крови АВО встречаются в природе, а это означает, что они обнаруживаются у людей, которые не подвергались воздействию несовместимой крови. [7] : 585–92  Антитела к большинству антигенов других групп крови, включая RhD, развиваются после того, как люди подвергаются воздействию антигенов в результате переливания крови или беременности. [1] : 62  Некоторые из этих антител могут связываться с несовместимыми эритроцитами и вызывать их разрушение , что приводит к трансфузионным реакциям и другим осложнениям. [9] : 210–11 

Серологические методы тестирования совместимости крови используют эти реакции антитело-антиген . При определении группы крови используются реагенты , содержащие антитела к группам крови, называемые антисыворотками . [7] : 586  добавляются к суспензиям клеток крови. (слипание) эритроцитов Если соответствующий антиген присутствует, антитела в реагенте вызовут агглютинацию , что можно определить визуально. [1] : 65  При скрининге антител плазма человека тестируется на набор эритроцитов с известными антигенными профилями; если плазма агглютинирует один из эритроцитов на панели, это указывает на то, что у человека есть антитела против одного из антигенов, присутствующих в клетках. При перекрестном сопоставлении плазму предполагаемого реципиента переливания добавляют к донорским эритроцитам и наблюдают за агглютинацией (или гемолизом) для обнаружения антител, которые могут вызвать трансфузионную реакцию. [3] : 722–5 

Антитела группы крови встречаются в двух основных формах: иммуноглобулина М (IgM) и иммуноглобулина G (IgG). Антитела, которые преимущественно представляют собой IgM, такие как антитела АВО, обычно вызывают немедленную агглютинацию эритроцитов при комнатной температуре. Таким образом, группу крови человека по системе АВО можно определить, просто добавив эритроциты в реагент и центрифугировав или смешав образец. [1] : 122  а при перекрестном сопоставлении несовместимость между типами АВО может быть обнаружена сразу после центрифугирования. [3] : 725  При типировании RhD также обычно используются реагенты IgM. [10] : 477  хотя анти-RhD обычно встречается в организме в виде IgG. [1] : 161  Антитела, которые преимущественно представляют собой IgG, например, направленные к антигенам систем Даффи и Кидда , [1] : 198–200  обычно не вызывают немедленной агглютинации, поскольку небольшой размер антитела IgG предотвращает образование решетчатой ​​структуры. Таким образом, типирование крови с использованием антисыворотки IgG и обнаружение антител IgG требует использования непрямого антиглобулинового теста , чтобы продемонстрировать связывание IgG с эритроцитами. [1] : 104 

При непрямом антиглобулиновом тесте смесь антисыворотки или плазмы и эритроцитов инкубируется при температуре 37 °C (99 °F), идеальной температуре для реактивности антител IgG. После инкубации эритроциты промывают физиологическим раствором для удаления несвязавшихся антител и добавляют реагент против человеческого глобулина. Если антитела IgG связались с антигенами на поверхности клетки, античеловеческий глобулин будет связываться с этими антителами, вызывая агглютинацию эритроцитов после центрифугирования. Если реакция отрицательная, добавляются «проверочные клетки» — клетки-реагенты, покрытые IgG, чтобы убедиться, что тест работает правильно. Если результат теста действительно отрицательный, контрольные клетки должны прореагировать с несвязанным античеловеческим глобулином и продемонстрировать агглютинацию. [3] : 716–9 

Группа крови

[ редактировать ]

АВО и резус-типирование

[ редактировать ]

При АВО- и Rh-типировании к суспензиям клеток крови добавляют реагенты, содержащие антитела к антигенам А, В и RhD. Если соответствующий антиген присутствует, эритроциты будут демонстрировать видимую агглютинацию (слипание). [1] : 65  Помимо идентификации антигенов АВО, что называется прямой группировкой, рутинное определение группы крови АВО также включает идентификацию антител АВО в плазме человека. Это называется обратной группировкой. [1] : 120  и это делается для подтверждения группы крови АВО. При обратной группировке плазма человека добавляется к типа A 1 эритроцитам и типа B. Плазма должна агглютинировать клетки, экспрессирующие антигены, которых нет у человека, но не агглютинировать клетки, экспрессирующие те же антигены, что и пациент. Например, плазма человека с кровью группы А должна реагировать с эритроцитами типа В, но не с клетками А1 . Если ожидаемые результаты не получены, необходимо дальнейшее тестирование. [7] : 595  Агглютинация оценивается по шкале от 1+ до 4+ в зависимости от силы реакции. При типировании АВО балл 3+ или 4+ указывает на положительную реакцию, тогда как балл 1+ или 2+ является неубедительным и требует дальнейшего исследования. [1] : 236 

Другие системы групп крови

[ редактировать ]
Типирование крови по RhC/c, RhE/e и K. антигенам

Перед переливанием крови людей проверяют на наличие антител против антигенов систем групп крови , не относящихся к системе АВО . [5] Антигены групп крови, помимо ABO и RhD, которые имеют важное значение в трансфузионной медицине, включают антигены RhC/c и E/e, а также антигены систем Даффи , Келла , Кидда и MNS . [1] : 158–173  При выявлении клинически значимого антитела реципиенту необходимо перелить кровь, отрицательную на соответствующий антиген, чтобы предотвратить трансфузионную реакцию. Для этого необходимо, чтобы донорские единицы были типированы по соответствующему антигену. [1] : 261  Реципиент также может быть типирован по антигену, чтобы подтвердить идентичность антитела, поскольку только люди, отрицательные по антигену группы крови, должны вырабатывать антитела против него. [7] : 603 

В Европе женщинам, которым требуется переливание крови, часто проводят типирование по Kell- и расширенному резус-антигенам, чтобы предотвратить сенсибилизацию к этим антигенам, которая может подвергнуть их риску развития гемолитической болезни новорожденных во время беременности. [11] Американское общество гематологии рекомендует людям с серповидно-клеточной анемией перед переливанием определить группу крови на антигены RhC/c, RhE/e, Келла, Даффи, Кидда и MNS. [12] : 130–1  поскольку им часто требуется переливание крови, и они могут стать сенсибилизированными к этим антигенам при переливании несовместимой крови. [13] Расширенное фенотипирование эритроцитов также рекомендуется людям с бета-талассемией . [14] Системы групп крови, отличные от ABO и Rh, имеют относительно небольшой риск осложнений при смешивании крови, поэтому в чрезвычайных ситуациях, таких как сильное кровотечение , срочность переливания может превышать необходимость тестирования совместимости с другими системами групп крови (и, возможно, также с Rh). ). [15]

Скрининг и идентификация антител

[ редактировать ]

Антитела к большинству антигенов групп крови, помимо антигенов системы АВО, развиваются после контакта с несовместимой кровью. [1] : 62  Такие «неожиданные» антитела группы крови обнаруживаются лишь у 0,8–2% людей; однако реципиенты переливания крови должны быть проверены на наличие этих антител, чтобы предотвратить трансфузионные реакции. Скрининг на антитела также проводится в рамках дородового ухода , поскольку антитела против RhD и антигенов других групп крови могут вызвать гемолитическую болезнь новорожденного, а также потому, что резус-отрицательные матери, у которых выработались антитела против RhD, не имеют права на получение Rho(D). ) иммуноглобулин (Рогам). [1] : 233 

В процедуре скрининга антител плазма человека добавляется к панели из двух или трех наборов эритроцитов, которые были выбраны для экспрессии наиболее клинически значимых антигенов группы крови. При скрининге антител используются только клетки группы О, так как в противном случае клетки будут реагировать с естественными антителами группы крови АВО. Смесь плазмы и эритроцитов инкубируют при 37°С и тестируют с помощью непрямого антиглобулинового теста. Некоторые протоколы скрининга и идентификации антител включают этап тестирования после инкубации при комнатной температуре, но его часто опускают, поскольку большинство неожиданных антител, которые реагируют при комнатной температуре, клинически незначимы. [3] : 722–4 

Агглютинация скрининговых клеток плазмой с добавлением или без добавления античеловеческого глобулина указывает на присутствие антитела неожиданной группы крови. Если это произойдет, для идентификации антитела необходимо дальнейшее тестирование с использованием большего количества клеток (обычно 10–11). Изучая профили антигенов эритроцитов, с которыми реагирует плазма человека, можно определить идентичность антитела. «Аутоконтроль», при котором плазма человека тестируется на его собственные эритроциты, включен, чтобы определить, вызвана ли агглютинация аллоантителом ( антителом против чужеродного антигена), аутоантителом (антителом против собственных антигенов) или аутоантителом (антителом против собственных антигенов). или другое мешающее вещество. [3] : 722–4 

На изображении выше показана интерпретация панели антител, используемой в серологии для обнаружения антител к наиболее важным антигенам группы крови. Каждая строка представляет «эталонные» или «контрольные» эритроциты доноров, которые имеют известный антигенный состав и относятся к группе О АВО . А+ означает, что антиген присутствует в эталонных эритроцитах, а 0 означает его отсутствие; nt означает «не проверено». В столбце «Результат» справа отображается реактивность при смешивании эталонных эритроцитов с плазмой пациента в 3 различных фазах: комнатная температура, 37°C и AHG (с античеловеческим глобулином, по непрямому антиглобулиновому тесту ). [16]

  • Шаг 1 ; Помечено синим цветом: начало исключения антигенов без реакции на всех 3 фазах; глядя на первую строку эталонных клеток без реакции (0 в столбце справа, в данном случае донор клеток 2) и исключая (здесь отмеченный X) каждый присутствующий антиген, где другая пара либо практически не существует (например, для DT) или 0 (наличие гомозиготно, в данном случае гомозиготно c).
    Когда обе пары имеют + (гетерозиготные случаи), они обе исключаются (здесь отмечены X), за исключением антигенов C/c, E/e, Duffy, Kidd и MNS (когда антитела пациента все еще могут реагировать на клетки крови с гомозиготная экспрессия антигена, поскольку гомозиготная экспрессия приводит к более высокой дозировке антигена). [17] Таким образом, в данном случае в этой строке не исключается E/e, а K/k, как и Js б (независимо от того, что Js а показал бы). [примечание 2]
  • Шаг 2 : Помечено коричневым цветом: переход к следующей строке эталонных клеток с отрицательной реакцией (в данном случае донор клеток 4) и повторение для каждого типа антигена, который еще не исключен.
  • Шаг 3 : Помечено фиолетовым цветом. Повторяя то же самое для каждой строки контрольной ячейки с отрицательной реакцией.
  • Шаг 4 : Исключение антигенов, отсутствовавших во всех или почти во всех реактивных случаях (здесь они отмечены знаком \). Часто это антигены с низкой распространенностью, и, хотя существует вероятность образования таких антител, они, как правило, не относятся к тому типу, который отвечает за имеющуюся реактивность.
  • Шаг 5 : Сравнение оставшихся возможных антигенов для наиболее вероятного виновника (в данном случае Fy а ) и выборочное исключение значимых дифференциальных антигенов, например, с показанным дополнительным типом донорских клеток, который, как известно, не содержит Fy. а но содержит C и Jk а .

В этом случае панель антител показывает, что анти-Fy а антитела присутствуют. Это указывает на то, что донорская кровь имеет отрицательную группу Fy. а необходимо использовать антиген. Тем не менее, если последующее перекрестное сопоставление показывает реактивность, следует провести дополнительное тестирование на ранее исключенные антигены (в этом случае потенциально E, K, Kp а и/или Лу а ). [16]

Ингибирование гемагглютинации [17]
Нейтрализующее вещество Антиген отменен
PП1
Слюна Х, Леа
Грудное молоко я
Моча морской свинки Сд а

При наличии нескольких антител или когда антитело направлено против высокочастотного антигена, обычная процедура панели антител может не обеспечить окончательную идентификацию. В этих случаях ингибирование гемагглютинации можно использовать , при котором нейтрализующее вещество нейтрализует специфический антиген. [17] Альтернативно, плазму можно инкубировать с клетками известного антигенного профиля для удаления специфического антитела (процесс, называемый адсорбцией ); или клетки можно обработать ферментами, такими как фикаин или папаин, которые ингибируют реактивность одних антител групп крови и усиливают другие. [3] : 723–9  Влияние фикаина и папаина на основные системы групп крови следующее: [18] [19]

Люди, у которых в прошлом был положительный результат теста на антитела к неожиданной группе крови, могут не продемонстрировать положительную реакцию при последующем тестировании; однако, если антитела клинически значимы, их необходимо перелить антиген-отрицательной кровью в любом случае. [20]

перекрестное сопоставление

[ редактировать ]
Основная статья: Перекрестное сопоставление

Перекрестное сопоставление, которое обычно проводится перед переливанием крови, включает добавление плазмы крови реципиента к образцу эритроцитов донора. Если кровь несовместима, антитела в плазме реципиента связываются с антигенами эритроцитов донора. Эту реакцию антитело-антиген можно обнаружить по видимому скоплению или разрушению эритроцитов или по реакции с античеловеческим глобулином после центрифугирования. [7] : 600–3 

Если у реципиента переливания тест на антитела отрицательный и в анамнезе нет антител, часто проводится перекрестная проверка «немедленного вращения»: эритроциты и плазма центрифугируются сразу после смешивания в качестве окончательной проверки на несовместимость между типами крови АВО. Если обнаружено клинически значимое антитело (или было обнаружено в прошлом) или если немедленное перекрестное сопоставление демонстрирует несовместимость, проводится «полное» или «перекрестное сопоставление IgG», при котором используется непрямой антиглобулиновый тест для выявления несовместимости по группам крови, вызванной IgG. антитела. Процедура перекрестного сопоставления IgG более длительна, чем немедленная перекрестная перекрестная проверка, и в некоторых случаях может занять более двух часов. [20]

Лица, у которых отрицательный результат скрининга на антитела и отсутствие антител в анамнезе, также могут пройти «электронную перекрестную проверку» при условии, что их тип ABO и Rh был определен на основе текущего образца крови и что результаты другого типа ABO/Rh зарегистрированы. В этом случае группу крови реципиента просто сравнивают с группой крови донора без необходимости серологического тестирования. [7] : 600–3  В чрезвычайных ситуациях кровь может быть сдана до завершения перекрестного сопоставления. [1] : 262–3 

Методы

[ редактировать ]

Методы пробирок и слайдов

[ редактировать ]
Человек в перчатках размазывает кровь по карте группы крови
Карта группы крови, показывающая агглютинацию эритроцитов с анти-А и анти-D и отрицательный результат с анти-В, что указывает на положительную группу крови А.
Группа крови методом слайдов: группа А положительная.

Определение группы крови можно выполнить с использованием пробирок, микропланшетов или предметных стекол для определения группы крови. Метод пробирки предполагает смешивание суспензии эритроцитов с антисывороткой (или плазмой для обратной группировки) в пробирке. Смесь центрифугируют для отделения клеток от реагента, а затем ресуспендируют, осторожно встряхивая пробирку. Если интересующий антиген присутствует, эритроциты агглютинируют, образуя в пробирке твердый комок. Если его нет, эритроциты при смешивании снова переходят во взвешенное состояние. [7] : 611–12  [9] : 214  Метод микропланшетов аналогичен методу пробирок, за исключением того, что определение группы крови проводится не в отдельных пробирках, а в планшете, содержащем десятки лунок, что позволяет проводить несколько тестов одновременно. Реакции агглютинации считывают после центрифугирования планшета. [21] : 201 

Скрининг и идентификация антител также может осуществляться пробирочным методом. В этой процедуре плазма и эритроциты смешиваются в пробирке, содержащей среду, усиливающую реакции агглютинации, например физиологический раствор с низкой ионной силой (LISS). Пробирки инкубируют при температуре тела в течение определенного периода времени, затем центрифугируют и исследуют на агглютинацию или гемолиз; сначала сразу после инкубационного периода, а затем после промывки и добавления реагента против человеческого глобулина. [3] : 722  Аналогично перекрестное сопоставление может быть выполнено методом пробирки; реакции считывают сразу после центрифугирования при немедленном перекрестном сопоставлении или после инкубации и добавления AHG в процедуре полного перекрестного сопоставления. [3] : 725 

Метод слайдов для определения группы крови предполагает смешивание капли крови с каплей антисыворотки на предметном стекле. Предметное стекло наклоняют, чтобы смешать клетки и реагенты, а затем наблюдают за агглютинацией, что указывает на положительный результат. Этот метод обычно используется в районах с ограниченными ресурсами или в чрезвычайных ситуациях; в противном случае предпочтительны альтернативные методы. [9] : 214  [10] : 476 

Колоночная агглютинация

[ редактировать ]
Определение группы крови методом колоночной агглютинации: группа О положительная.

Методы колоночной агглютинации для тестирования совместимости крови (иногда называемые «гель-тестом») используют карты, содержащие колонки декстран - полиакриламидного геля . Карты, предназначенные для определения группы крови, содержат предварительно распределенные реагенты для определения группы крови для прямой группировки, а лунки, содержащие только буферный раствор , к которому добавляются реагенты эритроциты и плазма, для обратной группировки. Скрининг антител и перекрестное сопоставление также можно проводить путем агглютинации на колонке, и в этом случае используются карты, содержащие реагент против человеческого глобулина. Гелевые карты центрифугируются (иногда после инкубации, в зависимости от теста), во время чего агглютинаты эритроцитов задерживаются в верхней части колонки, поскольку они слишком велики, чтобы мигрировать через гель. Неагглютинированные клетки собираются на дне. Таким образом, линия эритроцитов в верхней части столбца указывает на положительный результат. Сила положительных реакций оценивается от 1+ до 4+ в зависимости от того, насколько далеко клетки прошли через гель. Гель-тест имеет преимущества перед ручными методами в том, что он устраняет вариабельность, связанную с повторным суспендированием клеток вручную, и позволяет сохранять карты для записи теста. [1] : 269–71  Метод колоночной агглютинации используется некоторыми автоматическими анализаторами для автоматического определения группы крови. [7] : 590  Эти анализаторы пипетируют эритроциты и плазму на гелевые карты, центрифугируют их, сканируют и считывают реакции агглютинации для определения группы крови. [1] : 270–1 

Твердофазный анализ

[ редактировать ]

В твердофазных анализах (иногда называемых методом «захвата антигена») используются реагентные антигены или антитела, прикрепленные к поверхности (обычно микропланшету). [9] : 214  Лунки микропланшета, покрытые реагентами против A, -B и -D, используются для прямой группировки. Добавляют тестируемый образец и микропланшет центрифугируют; при положительной реакции эритроциты прилипают к поверхности лунки. [7] : 590  [10] : 477  Некоторые автоматические анализаторы используют твердофазные анализы для определения группы крови. [1] : 275–6 

Генотипирование

[ редактировать ]

Генетическое тестирование может использоваться для определения группы крови человека в определенных ситуациях, когда серологического тестирования недостаточно. Например, если человеку перелили большие объемы донорской крови, результаты серологического тестирования будут отражать антигены в донорских клетках, а не фактическую группу крови человека. [11] Лица, вырабатывающие антитела против собственных эритроцитов. [21] : 202  или у тех, кто лечится определенными лекарствами, при серологическом тестировании могут проявляться ложные реакции агглютинации, поэтому для точного определения группы крови может потребоваться генотипирование. [1] : 261  Генетическое тестирование необходимо для типирования антигенов эритроцитов, для которых нет коммерческих антисывороток. [11]

AABB которые рекомендует генотипирование антигена RhD для женщин со слабыми серологическими фенотипами D, могут иметь детей. Это связано с тем, что некоторые люди со слабыми фенотипами D могут вырабатывать антитела против антигена RhD, который может вызвать гемолитическую болезнь новорожденного, а другие - нет. Генотипирование может идентифицировать конкретный тип слабого антигена D, который определяет потенциальную способность человека вырабатывать антитела, что позволяет избежать ненужного лечения иммуноглобулином Rho(D) . [22] [23] Генотипирование предпочтительнее серологического тестирования для людей с серповидноклеточной анемией, поскольку оно более точно в отношении определенных антигенов и позволяет идентифицировать антигены, которые не могут быть обнаружены серологическими методами. [13]

Генотипирование также используется при пренатальном тестировании на гемолитическую болезнь новорожденных. Если у беременной женщины есть антитела к группе крови, которые могут вызывать ГБН, можно типировать плод на соответствующий антиген, чтобы определить, подвержен ли он риску развития заболевания. Поскольку брать кровь у плода нецелесообразно, группу крови определяют с использованием образца амниоцентеза или бесклеточной ДНК плода, выделенной из крови матери. [21] : 202  [22] Отцу также можно провести генотипирование, чтобы предсказать риск гемолитической болезни новорожденного, поскольку, если отец гомозиготен по соответствующему антигену (что означает наличие двух копий гена), ребенок будет положительным по антигену и, следовательно, будет подвержен риску развития болезнь. Если отец гетерозиготен (имеет только одну копию), вероятность того, что ребенок окажется положительным на антиген, составляет только 50%. [11]

Ограничения

[ редактировать ]

Расхождения в АВО

[ редактировать ]

При АВО-типировании результаты прямой и обратной группировки всегда должны соответствовать друг другу. Неожиданная разница между двумя результатами называется несоответствием АВО и должна быть устранена до того, как будет сообщена группа крови человека. [1] : 136 

Прямая группировка

[ редактировать ]

Слабые реакции в прямой группе могут возникать у людей, принадлежащих к определенным подгруппам АВО — вариантам групп крови, характеризующимся снижением экспрессии антигенов А или В или изменением их структуры. Ослабленная экспрессия антигенов АВО может также наблюдаться при лейкемии и лимфоме Ходжкина . Слабые реакции в прямой группе можно усилить, инкубируя смесь крови и реагентов при комнатной температуре или 4 ° C (39 ° F), или используя определенные ферменты для усиления реакций антиген-антитело. [1] : 139 

Иногда после реакции с антисывороткой для определения группы крови обнаруживаются две популяции эритроцитов. Некоторые эритроциты агглютинируются, а другие нет, что затрудняет интерпретацию результата. Это называется реакцией смешанного поля , и это может произойти, если кто-то недавно получил переливание крови с другой группой крови (как у пациента с группой А, получающего кровь типа О), если он получил трансплантат костного мозга или стволовых клеток от у кого-то с другой группой крови или у пациентов с определенными подгруппами АВО, такими как А 3 . Исследование истории болезни человека может уточнить причину реакции смешанного поля. [1] : 138  [24] : 314 

Люди с болезнью холодовых агглютининов вырабатывают антитела против собственных эритроцитов, которые заставляют их спонтанно агглютинировать при комнатной температуре, что приводит к ложноположительным реакциям в прямой группе. Холодные агглютинины обычно можно деактивировать, нагрев образец до 37 °C (99 °F) и промыв эритроциты физиологическим раствором. Если это неэффективно, дитиотреитол . для разрушения антител можно использовать [1] : 141 

Образцы пуповинной крови могут быть загрязнены вартоновым желе — вязким веществом, которое может вызывать слипание эритроцитов, имитируя агглютинацию. Уортонов студень можно удалить, тщательно промыв эритроциты. [1] : 141 

При редком явлении, известном как «приобретенный антиген B», пациент, у которого истинная группа крови A, может показать слабый положительный результат на B в передней группе. Это состояние, которое связано с желудочно-кишечными заболеваниями, такими как рак толстой кишки. [1] : 139  и кишечная непроходимость , [24] : 126  возникает в результате превращения антигена А в структуру, имитирующую антиген В, под действием бактериальных ферментов. [10] : 477  В отличие от истинного антигена B, приобретенный антиген B не реагирует с реагентами в определенном диапазоне pH. [1] : 139 

Обратная группировка

[ редактировать ]

У младенцев в возрасте от 3 до 6 месяцев реакции отсутствуют или слабы в обратной группе, поскольку они производят очень низкие уровни антител АВО. [1] : 136  Поэтому обратная группировка для этой возрастной группы обычно не проводится. [10] : 486  У пожилых людей также может наблюдаться снижение выработки антител, как и у людей с гипогаммаглобулинемией . Слабые реакции можно усилить, если дать плазме и эритроцитам инкубироваться при комнатной температуре в течение 15–30 минут, а если это неэффективно, их можно инкубировать при 4 °C (39 °F). [1] : 137–8 

Примерно 20% людей с группой крови А или АВ принадлежат к подгруппе А, называемой А2 , тогда как более распространенная подгруппа, охватывающая примерно 80% людей, называется А1 . Из-за небольших различий в структуре антигенов А1 и А2 некоторые индивидуумы подгруппы А2 могут вырабатывать антитела против А1 . Таким образом, эти люди будут иметь тип A или AB в прямой группе, но проявят неожиданную положительную реакцию на эритроциты типа A 1 в обратной группе. Несоответствие можно устранить, проверив эритроциты человека реагентом анти-А 1 , что даст отрицательный результат, если пациент принадлежит к подгруппе А 2 . Антитела против A 1 считаются клинически незначимыми, если только они не реагируют при температуре 37 °C (99 °F). Существуют и другие подгруппы А, а также подгруппы Б, но они встречаются редко. [1] : 127–32 

Если высокий уровень белка в плазме человека присутствует явление, известное как «руло» , при добавлении его плазмы к клеткам-реагентам может возникнуть . Руло заставляет эритроциты слипаться вместе, что может имитировать агглютинацию, вызывая ложноположительный результат при обратной группировке. Этого можно избежать, удалив плазму, заменив ее физиологическим раствором и повторно центрифугировав пробирку. Руло исчезнет после замены плазмы физиологическим раствором, но истинная агглютинация сохранится. [1] : 140–1 

Антитела к антигенам групп крови, отличным от А и В, могут реагировать с клетками-реагентами, используемыми при обратной группировке. Если присутствуют аутоантитела, реагирующие на холод , ложноположительный результат можно устранить, нагрев образец до 37 °C (99 °F). Если результат вызван аллоантителами, можно провести скрининг на антитела для идентификации антитела. [7] : 141–2  и обратную группировку можно выполнить с использованием образцов, в которых отсутствует соответствующий антиген. [10] : 477 

Слабый фенотип D

[ редактировать ]
Дополнительная информация: Слабый D.

Примерно от 0,2 до 1% людей имеют фенотип «слабый D». [25] это означает, что они положительны по антигену RhD, но проявляют слабые или отрицательные реакции с некоторыми анти-RhD-реагентами из-за снижения экспрессии антигена или атипичных вариантов структуры антигена. Если рутинное серологическое тестирование на RhD дает результат 2+ или меньше, для подтверждения наличия RhD можно использовать антиглобулиновый тест. [1] : 159  Слабое D-тестирование также проводится донорам крови, которые изначально имеют резус-отрицательный тип. [22] Исторически сложилось так, что доноров крови со слабым D считали резус-положительными, а пациентов со слабым D - резус-отрицательными, чтобы избежать потенциального воздействия несовместимой крови. Генотипирование все чаще используется для определения молекулярной основы фенотипов со слабым D, поскольку оно определяет, могут ли люди со слабым D производить антитела против RhD или повышать чувствительность других к антигену RhD. [25]

Сенсибилизация антител к эритроцитам

[ редактировать ]

Непрямой антиглобулиновый тест , который используется для слабого D-теста и типирования некоторых антигенов эритроцитов, обнаруживает связывание IgG с эритроцитами. Если IgG связывается с эритроцитами in vivo , что может произойти при аутоиммунной гемолитической анемии , гемолитической болезни новорожденных и трансфузионных реакциях, [10] : 260  непрямой антиглобулиновый тест всегда даст положительный результат, независимо от наличия соответствующего антигена. [10] : 477–8  Можно провести прямой антиглобулиновый тест , чтобы продемонстрировать, что положительная реакция обусловлена ​​сенсибилизацией эритроцитов. [26] : 289 

Другие предтрансфузионные тесты

[ редактировать ]
Дополнительная информация: Переливание крови.

Некоторые группы людей имеют особые потребности в переливании крови. Плоды, младенцы с очень низкой массой тела при рождении и люди с ослабленным иммунитетом подвергаются риску развития тяжелой инфекции, вызванной цитомегаловирусом (ЦМВ) – условно-патогенным микроорганизмом , на который примерно 50% доноров крови имеют положительный результат – и им можно переливать ЦМВ-отрицательную кровь предотвратить заражение. [3] : 749  [27] Те, кто подвержен риску развития реакции «трансплантат против хозяина» , например, реципиенты трансплантата костного мозга , получают кровь, подвергнутую облучению для инактивации Т-лимфоцитов , ответственных за эту реакцию. Людям, у которых в прошлом были серьезные аллергические реакции на переливание крови, можно переливать кровь, «промытую» для удаления плазмы. [1] : 342–5  Также изучается анамнез пациента, чтобы определить, были ли у него ранее выявлены антитела и какие-либо другие серологические аномалии.

прямой антиглобулиновый тест ( тест Кумбса ). В рамках исследования на антитела также проводится [28]

Донорскую кровь обычно проверяют на наличие инфекций, передающихся при переливании крови, таких как ВИЧ . По состоянию на 2018 год Всемирная организация здравоохранения сообщила, что почти 100% донорской крови в странах с высоким и выше среднего уровнем дохода прошли скрининг на инфекционные заболевания, но цифры для стран с уровнем дохода ниже среднего и низким уровнем дохода составили 82% и 80,3. % соответственно. [29]

История

[ редактировать ]

В 1901 году Карл Ландштейнер опубликовал результаты эксперимента, в котором он смешал сыворотку и эритроциты пяти разных доноров-людей. Он заметил, что сыворотка человека никогда не агглютинирует его собственные эритроциты, но может агглютинировать чужие, и на основании реакций агглютинации эритроциты можно разделить на три группы: группа А, группа В и группа С. Группа С. которая состояла из эритроцитов, не вступавших в реакцию с плазмой человека, позже будет известна как группа О. [30] : 5  Четвертая группа, известная теперь как AB, была описана коллегами Ландштейнера в 1902 году. [30] : 7  Этот эксперимент стал первым примером определения группы крови. [1] : 120 

В 1945 году Робин Кумбс , А.Э. Мурант и Р.Р. Рэйс опубликовали описание антиглобулинового теста (также известного как тест Кумбса). Предыдущие исследования антител группы крови документально подтвердили наличие так называемых «блокирующих» или «неполных» антител: антител, которые занимают участки антигена, предотвращая связывание других антител, но не вызывая агглютинации эритроцитов. Кумбс и его коллеги разработали метод, позволяющий легко продемонстрировать наличие этих антител. Они вводили кроликам человеческие иммуноглобулины , в результате чего они вырабатывали антитела против человеческого глобулина . Античеловеческий глобулин может связываться с антителами, уже прикрепленными к эритроцитам, и вызывать их агглютинацию. Изобретение антиглобулинового теста привело к открытию многих других антигенов групп крови. К началу 1950-х годов компании начали производить коммерческие антисыворотки для специального тестирования на антигены. [30] : 62–72 

Примечания

[ редактировать ]
  1. ^ есть несколько других антигенов Антиген RhD широко известен как «резус-фактор», хотя в системе антигенов Rh . [1] : 150  [2] : 26 
  2. ^ Помимо C/c, E/e, Duffy, Kidd и MNS, клинически значимые эффекты дозировки редки, но не невозможны для других антигенов, что, таким образом, все еще можно учитывать, если последующее перекрестное сопоставление окажется реактивным.

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Перейти обратно: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п д р с т в v В х и С аа аб и объявление но из в ах есть Дениз М. Харменинг (30 ноября 2018 г.). Современные методы хранения крови и переливания крови . Ф.А. Дэвис. ISBN  978-0-8036-9462-0 .
  2. ^ Деннис Флаэрти (25 июня 2014 г.). Иммунология для фармации . Elsevier Науки о здоровье. ISBN  978-0-323-29111-8 .
  3. ^ Перейти обратно: а б с д и ж г час я дж Макферсон, РА; Пинкус, MR (2017). Клиническая диагностика и лечение Генри с помощью лабораторных методов (23-е изд.). Elsevier Науки о здоровье. ISBN  978-0-323-41315-2 .
  4. ^ Американская ассоциация клинической химии (15 ноября 2019 г.). «Группирование крови» . Лабораторные тесты онлайн . Проверено 27 января 2020 г. .
  5. ^ Перейти обратно: а б Гонсорчик, ВК (7 августа 2018 г.). «Группировка АВО: обзор, клинические показания/применение, результаты испытаний» . Медскейп . Проверено 2 марта 2020 г.
  6. ^ Бачигалупо, А.; Ван Линт, Монтана; М. Марджокко, Д. Оккини; Феррари, Г.; Питталуга, Пенсильвания; Фрассони, Ф.; Перальво, Дж.; Леркари, Г.; Карубия, Ф.; Мармонт, AM (1988). «Або-совместимость и острая реакция «трансплантат против хозяина» после аллогенной трансплантации костного мозга» . Трансплантация . 45 (6): 1091–1093. дои : 10.1097/00007890-198806000-00018 . ISSN   0041-1337 . ПМИД   3289150 . S2CID   39707395 .
  7. ^ Перейти обратно: а б с д и ж г час я дж к Турджен, МЛ (2016). Клиническая лабораторная наука Линне и Рингсруд: концепции, процедуры и клиническое применение (7-е изд.). Эльзевир Мосби. ISBN  978-0-323-22545-8 .
  8. ^ «Иммуногенетика эритроцитов и терминология групп крови» . Международное общество переливания крови . 2021. Архивировано из оригинала 2 февраля 2022 года . Проверено 11 февраля 2022 г.
  9. ^ Перейти обратно: а б с д Джеффри Маккалоу (27 сентября 2016 г.). Трансфузиологическая медицина . Уайли. ISBN  978-1-119-23652-8 .
  10. ^ Перейти обратно: а б с д и ж г час Бейн, Би Джей; Бейтс, я; Лаффан, Массачусетс (11 августа 2016 г.). Электронная книга Дэйси и Льюиса по практической гематологии . Elsevier Науки о здоровье. ISBN  978-0-7020-6925-3 .
  11. ^ Перейти обратно: а б с д Вестхофф, Конни М. (2019). «Генотипирование группы крови» . Кровь . 133 (17): 1814–1820. дои : 10.1182/blood-2018-11-833954 . ISSN   0006-4971 . ПМИД   30808639 .
  12. ^ Каллум, Дж.Л.; Пинкертон, штат Пенсильвания; Лима, А (2016). Bloody Easy 4: Переливание крови, альтернативы крови и трансфузионные реакции (PDF) . Региональная координационная сеть по крови Онтарио. ISBN  978-0-9869176-2-2 .
  13. ^ Перейти обратно: а б Чоу, Стелла Т.; Альсавас, Муаз; Фазано, Росс М.; Филд, Джошуа Дж.; Хендриксон, Жанна Э.; Ховард, Джо; Камека, Мишель; Квятковски, Джанет Л.; Пиренн, Франция; Ши, Патрисия А.; Стоуэлл, Шон Р.; Тейн, Суи Лэй; Вестхофф, Конни М.; Вонг, Триша Э.; Акл, Эли А. (2020). «Руководство Американского гематологического общества 2020 года по серповидно-клеточной анемии: трансфузионная поддержка» . Кровь продвигается . 4 (2): 327–355. дои : 10.1182/bloodadvances.2019001143 . ISSN   2473-9529 . ПМК   6988392 . ПМИД   31985807 .
  14. ^ Компернолле, Верле; Чоу, Стелла Т.; Танаэль, Сусано; Сэвидж, Уильям; Ховард, Джо; Джозефсон, Кассандра Д.; Одаме, Исаак; Хоган, Кристофер; Деномм, Грегори; Шехата, Надин (2018). «Характеристики эритроцитов для пациентов с гемоглобинопатиями: систематический обзор и рекомендации». Переливание . 58 (6): 1555–1566. дои : 10.1111/trf.14611 . ISSN   0041-1132 . ПМИД   29697146 . S2CID   21650658 .
  15. ^ Гуделл, Памела П.; Уль, Линн; Мохаммед, Моник; Пауэрс, Эми А. (2010). «Риск гемолитических трансфузионных реакций после экстренного переливания эритроцитов» . Американский журнал клинической патологии . 134 (2): 202–206. дои : 10.1309/AJCP9OFJN7FLTXDB . ISSN   0002-9173 . ПМИД   20660321 .
  16. ^ Перейти обратно: а б Джастин Р. Рис, MS, MLS (ASCP) CM, SBBCM. «Введение в идентификацию антител» (PDF) . Университет Юты, медицинские лабораторные науки . Проверено 18 декабря 2020 г. {{cite web}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  17. ^ Перейти обратно: а б с Мейс, Дэниел (2014). Краткий сборник клинической патологии . США: Издательство Американского общества клинической патологии. ISBN  978-0-89189-615-9 . OCLC   895712380 .
  18. ^ Хилл, Бен С.; Ханна, Кортни А.; Адамски, Джилл; Фам, Хай П.; Маркес, Мариса Б.; Уильямс, Лэнс А. (2017). «Обработанные фицином эритроциты помогают идентифицировать клинически значимые аллоантитела, замаскированные под реакции неопределенной специфичности в гелевых микропробирках» . Лабораторная медицина . 48 (1): 24–28. doi : 10.1093/labmed/lmw062 . ISSN   0007-5027 . ПМИД   28007780 .
  19. ^ Эрик Чинг. «Вопросы и ответы о протеолитических ферментах, используемых в серологии групп крови» . Канадское общество трансфузионной медицины . Проверено 28 января 2021 г.
  20. ^ Перейти обратно: а б Уль, Л. (11 января 2021 г.). «Предтрансфузионное тестирование при переливании эритроцитов» . До настоящего времени . Проверено 27 января 2021 г.
  21. ^ Перейти обратно: а б с А. Виктор Хоффбранд; Дуглас Р. Хиггс; Дэвид М. Килинг; Атул Б. Мехта (28 октября 2015 г.). Последипломное образование по гематологии . Уайли. ISBN  978-1-118-85447-1 .
  22. ^ Перейти обратно: а б с Сэндлер, С. Джеральд; Флегель, Вилли А.; Вестхофф, Конни М.; Деномм, Грегори А.; Делани, Меган; Келлер, Маргарет А.; Джонсон, Сьюзен Т.; Кац, Луи; Куинэн, Джон Т.; Вассалло, Ральф Р.; Саймон, Клейтон Д. (2015). «Пришло время перейти к генотипированию RHD для пациентов со слабым серологическим фенотипом D» . Переливание . 55 (3): 680–689. дои : 10.1111/trf.12941 . ISSN   0041-1132 . ПМЦ   4357540 . ПМИД   25438646 .
  23. ^ Американская ассоциация банков крови. «Совместное заявление о поэтапном внедрении генотипирования RHD для беременных женщин и других женщин детородного потенциала с серологически слабым D-фенотипом» . Американская ассоциация банков крови – Заявления . Проверено 26 февраля 2020 г.
  24. ^ Перейти обратно: а б Харви Г. Кляйн; Дэвид Дж. Ансти (3 февраля 2014 г.). Переливание крови Моллисона в клинической медицине . Джон Уайли и сыновья. ISBN  978-1-4051-9940-7 .
  25. ^ Перейти обратно: а б Сэндлер, С. Джеральд; Чен, Леонард Н.; Флегель, Вилли А. (2017). «Серологические слабые фенотипы D: обзор и рекомендации по интерпретации группы крови RhD с использованием генотипа RHD» . Британский журнал гематологии . 179 (1): 10–19. дои : 10.1111/bjh.14757 . ISSN   0007-1048 . ПМЦ   5612847 . ПМИД   28508413 .
  26. ^ Салли В. Рудманн (18 февраля 2005 г.). Учебник по банкам крови и трансфузиологии . Elsevier Науки о здоровье. ISBN  0-7216-0384-Х .
  27. ^ Хеддл, Нэнси М.; Бек, Майкл; Гроссман, Бренда; Джейкобсон, Джессика; Кляйнман, Стивен; Тобиан, Аарон А.Р.; и др. (2016). «Отчет комитета AABB: снижение цитомегаловирусных инфекций, передающихся при переливании крови». Переливание . 56 (6 пт 2): 1581–1587. дои : 10.1111/trf.13503 . ISSN   0041-1132 . ПМИД   26968400 . S2CID   3633835 .
  28. ^ Харменинг, Д. (1999). Современные практики хранения крови и переливания крови (4-е изд.). Филадельфия: Ф.А. Дэвис. ISBN  978-0-8036-0419-3 .
  29. ^ «Безопасность и доступность крови» . Всемирная организация здравоохранения . 2018. Архивировано из оригинала 22 апреля 2021 года . Проверено 5 июня 2021 г.
  30. ^ Перейти обратно: а б с Мэрион Э. Рид; Ян Шайн (2012). Открытие и значение групп крови . Книги СББ. ISBN  978-1-59572-422-9 .
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Blood_compatibility_testing&oldid=1218256287"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 6b21165b5c4f0b76b0ecc2872251a199__1712758140
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/6b/99/6b21165b5c4f0b76b0ecc2872251a199.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Blood compatibility testing - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)