Pwo ДНК-полимераза

показывать Искать
Structures	Swiss-model
Domains	InterPro

ДНК-полимераза
ДНК-полимераза
Идентификаторы
Организм	Пирококк woesei
Символ	pol
ЮниПрот	P61876
Structures
показывать Искать
Structures	Swiss-model
Domains	InterPro

Pwo-полимераза представляет собой термостабильную ДНК-полимеразу, используемую для полимеразной цепной реакции . Аббревиатура расшифровывается как Pyrococcus woesei , термофильный архей, из которого была выделена эта полимераза. Эта полимераза разрывается при достижении ошибочного урацила в ДНК от удлинения цепи, и благодаря этой функции опережающего считывания синтезируется меньше дефектных клонов ДНК. Он используется гораздо реже, чем обычные полимеразы Taq или Pfu. ^[1] Эта ДНК-полимераза, подобно другим ДНК-полимеразам архебактерий, чувствительна к остаткам урацила в ДНК и сильно ингибируется dUTP или остатками урацила в ДНК. Другими полимеразами этого класса являются Pfu , Vent, Deep Vent и Pfx. ^[2] Ингибирование этого класса термостабильных ДНК-полимераз ограничивает их использование в некоторых применениях ПЦР, т.е. использование dUTP для предотвращения загрязнения переносом, а также применение праймеров, содержащих dU, таких как методы клонирования без лигазы или сайт-направленный мутагенез с использованием UNG. ^[3]

Ссылки

^ Гасеми А., Салманян А.Х., Садегифард Н., Салариан А.А., Голи М.К. (сентябрь 2011 г.). «Клонирование, экспрессия и очистка полимеразы Pwo из Pyrococcus woesei» . Иранский журнал микробиологии . 3 (3): 118–22. ПМЦ 3279813 . ПМИД 22347593 .
^ Ласкен Р.С., Шустер Д.М., Ращян А. (июль 1996 г.). «ДНК-полимеразы архебактерий прочно связывают урацилсодержащую ДНК» . Журнал биологической химии . 271 (30): 17692–6. дои : 10.1074/jbc.271.30.17692 . ПМИД 8663453 .
^ Ращян А., Торнтон К.Г., Хайдекер Г. (ноябрь 1992 г.). «Новый метод сайт-направленного мутагенеза с использованием ПЦР и урацил-ДНК-гликозилазы» . Методы и приложения ПЦР . 2 (2): 124–30. дои : 10.1101/гр.2.2.124 . ПМИД 1477668 .

[1] Гасеми А., Салманян А.Х., Садегифард Н., Салариан А.А., Голи М.К. (сентябрь 2011 г.). «Клонирование, экспрессия и очистка полимеразы Pwo из Pyrococcus woesei» . Иранский журнал микробиологии . 3 (3): 118–22. ПМЦ 3279813 . ПМИД 22347593 .

[pmid8663453-2] Ласкен Р.С., Шустер Д.М., Ращян А. (июль 1996 г.). «ДНК-полимеразы архебактерий прочно связывают урацилсодержащую ДНК» . Журнал биологической химии . 271 (30): 17692–6. дои : 10.1074/jbc.271.30.17692 . ПМИД 8663453 .

[pmid1477668-3] Ращян А., Торнтон К.Г., Хайдекер Г. (ноябрь 1992 г.). «Новый метод сайт-направленного мутагенеза с использованием ПЦР и урацил-ДНК-гликозилазы» . Методы и приложения ПЦР . 2 (2): 124–30. дои : 10.1101/гр.2.2.124 . ПМИД 1477668 .

[1]

[2]

[3]

v т и полимеразной цепной реакции Методы
Procedure	Initialization Cycle Denaturation Annealing Elongation Final elongation Final hold
Polymerase	Klenow T4 and T7 Taq Tth Pfu Vent Pwo Tli Tfu
Optimization and variants	Quantitative polymerase chain reaction (qPCR) Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) Inverse polymerase chain reaction (inverse PCR) Nested polymerase chain reaction (nested PCR) Touchdown polymerase chain reaction Hot start PCR Overlap extension polymerase chain reaction (OE-PCR) Multiplex polymerase chain reaction (multiplex PCR) Multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) Co-amplification at lower denaturation temperature PCR (COLD-PCR) Random amplification of polymorphic DNA (RAPD)
History and people	Kary Mullis Kjell Kleppe Alice Chien