✖


Jump to content

Обратная транскриптаза

Обратная транскриптаза
(РНК-зависимая ДНК-полимераза)
Кристаллографическая структура обратной транскриптазы ВИЧ -1, где две субъединицы p51 и p66 окрашены, а активные центры полимеразы и нуклеазы выделены. [1]
Идентификаторы
Символ РВТ_1
Пфам PF00078
Пфам Клан CL0027
ИнтерПро IPR000477
PROSITE ПС50878
СКОП2 1хмв / СКОПе / СУПФАМ
CDD cd00304
Доступные белковые структуры:
Pfam  structures / ECOD  
PDBRCSB PDB; PDBe; PDBj
PDBsumstructure summary
РНК-направленная ДНК-полимераза
Идентификаторы
Номер ЕС. 2.7.7.49
Номер CAS. 9068-38-6
Базы данных
ИнтЭнк вид IntEnz
БРЕНДА БРЕНДА запись
Экспаси Просмотр NiceZyme
КЕГГ КЕГГ запись
МетаЦик метаболический путь
ПРЯМОЙ профиль
PDB Структуры RCSB PDB PDBe PDBsum
Генная онтология АмиГО / QuickGO
Поиск
PMCarticles
PubMedarticles
NCBIproteins

( Обратная транскриптаза RT ) – это фермент , используемый для преобразования генома РНК в ДНК . Этот процесс называется обратной транскрипцией . Обратные транскриптазы используются вирусами , такими как ВИЧ и гепатит B , для репликации своих геномов, мобильными генетическими элементами ретротранспозонов для пролиферации в геноме хозяина и эукариотическими клетками для удлинения теломер на концах их линейных хромосом . Вопреки широко распространенному мнению, этот процесс не нарушает потоки генетической информации, описанные классической центральной догмой , поскольку передача информации от РНК к ДНК явно считается возможной. [2] [3] [4]

Ретровирусная RT обладает тремя последовательными биохимическими видами активности: активностью РНК-зависимой ДНК-полимеразы , активностью рибонуклеазы H (РНКаза H) и активностью ДНК-зависимой ДНК-полимеразы. В совокупности эти действия позволяют ферменту превращать одноцепочечную РНК в двухцепочечную кДНК. В ретровирусах и ретротранспозонах эта кДНК может затем интегрироваться в геном хозяина, из которого могут быть созданы новые копии РНК посредством транскрипции клетки-хозяина . Та же самая последовательность реакций широко используется в лаборатории для преобразования РНК в ДНК для использования в молекулярном клонировании , секвенировании РНК , полимеразной цепной реакции (ПЦР) или анализе генома .

История [ править ]

Обратные транскриптазы были обнаружены Говардом Темином из Университета Висконсин-Мэдисон в саркомы Рауса . вирионах [5] и независимо выделен Дэвидом Балтимором в 1970 году в Массачусетском технологическом институте из двух РНК-опухолевых вирусов: вируса мышиного лейкоза и снова вируса саркомы Рауса . [6] За свои достижения они разделили Нобелевскую премию по физиологии и медицине 1975 года (с Ренато Дульбекко ).

Хорошо изученные обратные транскриптазы включают:

Функция в вирусах [ править ]

Обратная транскриптаза показана на участках пальца, ладони и большого пальца. Каталитические аминокислоты активного центра РНКазы H и активного центра полимеразы показаны в форме шара и палочки.

Ферменты кодируются и используются вирусами, которые используют обратную транскрипцию в качестве этапа процесса репликации. с обратной транскрипцией РНК-вирусы , такие как ретровирусы , используют фермент для обратной транскрипции своих РНК- геномов в ДНК, которая затем интегрируется в геном хозяина и реплицируется вместе с ним. с обратной транскрипцией ДНК-вирусы , такие как гепаднавирусы , могут позволить РНК служить матрицей при сборке и создании цепей ДНК. ВИЧ заражает человека с помощью этого фермента. Без обратной транскриптазы вирусный геном не смог бы внедриться в клетку-хозяина, что привело бы к невозможности репликации. [ нужна ссылка ]

Процесс обратной ретротранскрипции или транскрипции

Обратная транскриптаза создает двухцепочечную ДНК из матрицы РНК.

У видов вирусов с обратной транскриптазой, лишенной ДНК-зависимой активности ДНК-полимеразы, создание двухцепочечной ДНК может осуществляться с помощью ДНК-полимеразы δ , кодируемой хозяином, принимая вирусную ДНК-РНК за праймер и синтезируя двухцепочечную ДНК с помощью механизм аналогичен механизму удаления праймера , когда вновь синтезированная ДНК заменяет исходную матрицу РНК. [ нужна ссылка ]

Процесс обратной транскрипции, также называемый ретротранскрипцией или ретротрас, чрезвычайно подвержен ошибкам, и именно на этом этапе могут возникать мутации. Такие мутации могут вызвать устойчивость к лекарствам .

транскрипция Ретровирусная обратная ​

Механизм обратной транскрипции при ВИЧ. Номера шагов не совпадают.

Ретровирусы , также называемые вирусами оцРНК-RT класса VI , представляют собой вирусы с обратной транскрипцией РНК с промежуточной ДНК. Их геномы состоят из двух молекул с положительным смыслом одноцепочечной РНК с 5'-кэпом и 3'-полиаденилированным хвостом . Примеры ретровирусов включают вирус иммунодефицита человека ( ВИЧ ) и Т-лимфотропный вирус человека ( HTLV ). Образование двухцепочечной ДНК происходит в цитозоле. [10] в виде серии следующих шагов:

  1. Лизил- тРНК действует как праймер и гибридизуется с комплементарной частью генома вирусной РНК, называемой сайтом связывания праймера или PBS.
  2. Затем обратная транскриптаза добавляет нуклеотиды ДНК к 3'-концу праймера, синтезируя ДНК, комплементарную U5 (некодирующей области) и области R (прямому повтору, обнаруженному на обоих концах молекулы РНК) вирусной РНК.
  3. Домен фермента обратной транскриптазы, называемый РНКазой H, разрушает области U5 и R на 5'-конце РНК.
  4. Затем праймер тРНК «перепрыгивает» на 3'-конец вирусного генома, и вновь синтезированные цепи ДНК гибридизуются с комплементарной областью R на РНК.
  5. Комплементарная ДНК (кДНК), добавленная в (2), дополнительно удлиняется.
  6. Большая часть вирусной РНК разрушается РНКазой H, остается только последовательность PP.
  7. Начинается синтез второй цепи ДНК, используя в качестве праймера оставшийся PP-фрагмент вирусной РНК.
  8. Праймер тРНК уходит и происходит «прыжок». PBS второй цепи гибридизуется с комплементарным PBS первой цепи.
  9. Обе цепи удлиняются, образуя полную двухцепочечную ДНК-копию исходного генома вирусной РНК, которая затем может быть включена в геном хозяина с помощью фермента интегразы .

Создание двухцепочечной ДНК также включает перенос цепи , при котором происходит транслокация продукта короткой ДНК из начального РНК-зависимого синтеза ДНК в области акцепторной матрицы на другом конце генома, которые позже достигаются и обрабатываются обратной транскриптазой. из-за его ДНК-зависимой активности ДНК. [11]

Ретровирусная РНК расположена от 5'-конца до 3'-конца. Место, где праймер отжигается с вирусной РНК, называется сайтом связывания праймера (PBS). 5'-конец РНК сайта PBS называется U5, а 3'-конец РНК сайта PBS называется лидером. Праймер тРНК раскручивается между 14 и 22 нуклеотидами и образует дуплекс пар оснований с вирусной РНК в PBS. Тот факт, что PBS расположен вблизи 5'-конца вирусной РНК, необычен, поскольку обратная транскриптаза синтезирует ДНК с 3'-конца праймера в направлении от 5' к 3' (относительно вновь синтезированной цепи ДНК). Следовательно, праймер и обратная транскриптаза должны быть перемещены на 3'-конец вирусной РНК. Чтобы осуществить это изменение положения, несколько этапов и различные ферменты, включая ДНК-полимеразу , рибонуклеазу H (РНКаза H) и раскручивание полинуклеотида. необходимы [12] [13]

Обратная транскриптаза ВИЧ также обладает рибонуклеазной активностью, которая разрушает вирусную РНК во время синтеза кДНК, а также ДНК-зависимой активностью ДНК-полимеразы, которая копирует смысловую цепь кДНК в антисмысловую ДНК с образованием двухцепочечного промежуточного продукта вирусной ДНК (вДНК). . [14] Структурные элементы вирусной РНК ВИЧ регулируют ход обратной транскрипции. [15]

В клеточной жизни [ править ]

Самореплицирующиеся участки эукариотических геномов, известные как ретротранспозоны, используют обратную транскриптазу для перемещения из одного положения генома в другое через промежуточную РНК. Они в изобилии встречаются в геномах растений и животных. Теломераза — еще одна обратная транскриптаза, обнаруженная у многих эукариот, включая человека, которая несет собственную РНК матрицу ; эта РНК используется в качестве матрицы для репликации ДНК . [16]

Первые сообщения об обратной транскриптазе у прокариот появились еще в 1971 г. во Франции ( Белянский и др., 1971а, 1972) и несколькими годами позже в СССР (Ромащенко, 1977). [17] ). С тех пор они были широко описаны как часть бактериальных ретронов , отдельных последовательностей, которые кодируют обратную транскриптазу и используются в синтезе мсДНК . Чтобы инициировать синтез ДНК, необходим праймер. У бактерий праймер синтезируется во время репликации. [18]

Валериан Доля из штата Орегон утверждает, что вирусы благодаря своему разнообразию сыграли эволюционную роль в развитии клеточной жизни, при этом обратная транскриптаза играет центральную роль. [19]

Структура [ править ]

Обратная транскриптаза использует «правую» структуру, аналогичную той, которая обнаружена в других полимеразах вирусных нуклеиновых кислот . [20] [21] Помимо функции транскрипции, ретровирусные обратные транскриптазы имеют домен, принадлежащий семейству РНКазы H , который жизненно важен для их репликации. Разрушая матрицу РНК, он позволяет синтезировать другую цепь ДНК. [22] Некоторые фрагменты, полученные в результате переваривания, также служат праймером для ДНК-полимеразы (того же фермента или белка-хозяина), ответственной за создание другой (плюсовой) цепи. [20]

Точность репликации [ править ]

В течение жизненного цикла ретровируса существуют три различные системы репликации. Первый процесс — это обратный транскриптазный синтез вирусной ДНК из вирусной РНК, которая затем образует новые комплементарные цепи ДНК. Второй процесс репликации происходит, когда клеточная ДНК-полимераза хозяина реплицирует интегрированную вирусную ДНК. Наконец, РНК-полимераза II транскрибирует провирусную ДНК в РНК, которая упаковывается в вирионы. Мутация может произойти во время одного или всех этих этапов репликации. [23]

Обратная транскриптаза имеет высокий уровень ошибок при транскрипции РНК в ДНК, поскольку, в отличие от большинства других ДНК-полимераз , она не обладает способностью к корректуре . Такая высокая частота ошибок позволяет мутациям накапливаться с большей скоростью по сравнению с корректурными формами репликации. В руководствах компании указано, что коммерчески доступные обратные транскриптазы, производимые Promega, имеют частоту ошибок в диапазоне 1 на 17 000 оснований для AMV и 1 на 30 000 оснований для M-MLV. [24]

Было показано, что помимо создания однонуклеотидных полиморфизмов обратные транскриптазы участвуют в таких процессах, как слияние транскриптов , перестановка экзонов и создание искусственных антисмысловых транскриптов. [25] [26] Было высказано предположение, что эта активность обратной транскриптазы по переключению матрицы , которую можно полностью продемонстрировать in vivo , могла быть одной из причин обнаружения нескольких тысяч неаннотированных транскриптаз в геномах модельных организмов. [27]

Переключение шаблонов [ править ]

В каждую ретровирусную частицу упакованы два РНК генома , но после заражения каждый вирус генерирует только один провирус . [28] После заражения обратная транскрипция сопровождается переключением матрицы между двумя копиями генома (рекомбинация выбора копии). [28] Есть две модели, объясняющие, почему РНК-транскриптаза переключает шаблоны. Первая, модель принудительного выбора копии, предполагает, что обратная транскриптаза изменяет матрицу РНК, когда она встречает разрыв, подразумевая, что рекомбинация обязательна для поддержания целостности генома вируса. Вторая, модель динамического выбора, предполагает, что обратная транскриптаза меняет шаблоны, когда функция РНКазы и функция полимеразы не синхронизированы по скорости, подразумевая, что рекомбинация происходит случайным образом, а не в ответ на повреждение генома. Исследование Rawson et al. поддержал обе модели рекомбинации. [28] В каждом цикле репликации происходит от 5 до 14 событий рекомбинации на геном. [29] Переключение шаблонов (рекомбинация), по-видимому, необходимо для поддержания целостности генома и как механизм восстановления поврежденных геномов. [30] [28]

Приложения [ править ]

Молекулярная структура зидовудина (АЗТ), препарата, используемого для ингибирования обратной транскриптазы.

Противовирусные препараты [ править ]

Дополнительная информация: Ингибитор обратной транскриптазы.

Поскольку ВИЧ использует обратную транскриптазу для копирования своего генетического материала и создания новых вирусов (часть круга распространения ретровирусов), были разработаны специальные лекарства, чтобы нарушить этот процесс и тем самым подавить его рост. В совокупности эти препараты известны как ингибиторы обратной транскриптазы и включают нуклеозидные и нуклеотидные аналоги зидовудин (торговое название Ретровир), ламивудин (Эпивир) и тенофовир (Виреад), а также ненуклеозидные ингибиторы, такие как невирапин (Вирамун). [ нужна ссылка ]

биология Молекулярная ​ ​

Дополнительная информация: Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией.

Обратная транскриптаза обычно используется в исследованиях по применению метода полимеразной цепной реакции к РНК в методе, называемом полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Классический метод ПЦР можно применять только к цепям ДНК , но с помощью обратной транскриптазы РНК можно транскрибировать в ДНК, что делает возможным ПЦР- анализ молекул РНК. Обратная транскриптаза используется также для создания библиотек кДНК из мРНК . Коммерческая доступность обратной транскриптазы значительно улучшила знания в области молекулярной биологии, поскольку, наряду с другими ферментами , она позволила ученым клонировать, секвенировать и характеризовать РНК.

См. также [ править ]

Ссылки [ править ]

  1. ^ PDB : 3KLF ; Ту X, Дас К, Хан Кью, Бауман Дж.Д., Кларк А.Д., Хоу X, Френкель Ю.В., Гаффни Б.Л., Джонс Р.А., Бойер П.Л., Хьюз С.Х., Сарафианос С.Г., Арнольд Э. (октябрь 2010 г.). «Структурные основы устойчивости ВИЧ-1 к АЗТ путем иссечения» . Структурная и молекулярная биология природы . 17 (10): 1202–9. дои : 10.1038/nsmb.1908 . ПМЦ   2987654 . ПМИД   20852643 .
  2. ^ Крик Ф. (август 1970 г.). «Центральная догма молекулярной биологии». Природа . 227 (5258): 561–3. Бибкод : 1970Natur.227..561C . дои : 10.1038/227561a0 . ПМИД   4913914 . S2CID   4164029 .
  3. ^ Саркар С (1996). Философия и история молекулярной биологии: новые перспективы . Дордрехт: Kluwer Academic Publishers. стр. 187–232.
  4. ^ Данчин Э, Пошевиль А, Рей О, Пужоль Б, Бланше С (2019). «Эпигенетически облегченная мутационная ассимиляция: эпигенетика как центр инклюзивного эволюционного синтеза» . Биологические обзоры . 94 (1): 259–282. дои : 10.1111/brv.12453 . ПМК   6378602 . S2CID   67861162 .
  5. ^ Темин Х.М., Мизутани С. (июнь 1970 г.). «РНК-зависимая ДНК-полимераза в вирионах вируса саркомы Рауса». Природа . 226 (5252): 1211–3. дои : 10.1038/2261211a0 . ПМИД   4316301 . S2CID   4187764 .
  6. ^ Балтимор Д. (июнь 1970 г.). «РНК-зависимая ДНК-полимераза в вирионах РНК-опухолевых вирусов». Природа . 226 (5252): 1209–11. дои : 10.1038/2261209a0 . ПМИД   4316300 . S2CID   4222378 .
  7. ^ Феррис А.Л., Хизи А., Шоуолтер С.Д., Пичуантес С., Бэйб Л., Крейк К.С., Хьюз С.Х. (апрель 1990 г.). «Иммунологический и протеолитический анализ структуры обратной транскриптазы ВИЧ-1» (PDF) . Вирусология . 175 (2): 456–64. дои : 10.1016/0042-6822(90)90430-у . ПМИД   1691562 .
  8. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Кониси А., Ясукава К., Иноуе К. (июль 2012 г.). «Улучшение термической стабильности альфа-субъединицы обратной транскриптазы вируса миелобластоза птиц путем сайт-направленного мутагенеза» (PDF) . Биотехнологические письма . 34 (7): 1209–15. дои : 10.1007/s10529-012-0904-9 . hdl : 2433/157247 . ПМИД   22426840 . S2CID   207096569 .
  9. ^ Отексье С., Лю Н.Ф. (июнь 2006 г.). «Структура и функция обратной транскриптазы теломеразы». Ежегодный обзор биохимии . 75 (1): 493–517. doi : 10.1146/annurev.biochem.75.103004.142412 . ПМИД   16756500 .
  10. ^ Bio-Medicine.org - Ретровирус , получено 17 февраля 2009 г.
  11. ^ Телесницкий А, Гофф С.П. (1993). «Сильная остановка переноса цепи во время обратной транскрипции». В Скалка М.А., Гофф С.П. (ред.). Обратная транскриптаза (1-е изд.). Нью-Йорк: Колд-Спринг-Харбор. п. 49. ИСБН  978-0-87969-382-4 .
  12. ^ Бернштейн А., Вайс Р., Туз Дж. (1985). «РНК-опухолевые вирусы». Молекулярная биология опухолевых вирусов (2-е изд.). Колд-Спринг-Харбор, Нью-Йорк: Лаборатория Колд-Спринг-Харбор.
  13. ^ Моеллинг К., Брокер Ф. (апрель 2015 г.). «Обратная транскриптаза-РНКаза H: от вирусов к противовирусной защите». Анналы Нью-Йоркской академии наук . 1341 (1): 126–35. Бибкод : 2015NYASA1341..126M . дои : 10.1111/nyas.12668 . ПМИД   25703292 . S2CID   42378727 .
  14. ^ Кайзер Г.Е. (январь 2008 г.). «Жизненный цикл ВИЧ» . Домашняя страница доктора Кайзера по микробиологии . Общественный колледж графства Балтимор. Архивировано из оригинала 26 июля 2010 г.
  15. ^ Крупкин М., Джексон Л.Н., Ха Б., Пуглиси Е.В. (декабрь 2020 г.). «Достижения в понимании инициации обратной транскрипции ВИЧ-1» . Curr Opin Struct Biol . 65 : 175–183. дои : 10.1016/j.sbi.2020.07.005 . ПМЦ   9973426 . ПМИД   32916568 . S2CID   221636459 .
  16. ^ Кригер М., Скотт М.П., ​​Мацудайра П.Т., Лодиш Х.Ф., Дарнелл Дж.Э., Зипурски Л., Кайзер С., Берк А. (2004). Молекулярно-клеточная биология . Нью-Йорк: WH Freeman and CO. ISBN  978-0-7167-4366-8 .
  17. ^ Romashchenko AG, et al. (1977). "Otdelenie ot preparatov DNK-polimeraz I RNK-zavisimoy DNK-polimeraz; oshistka i svoystva fermenta". Proceedings of the USSR Academy of Sciences . 233 : 734–737.
  18. ^ Гурвиц Дж., Лейс Дж. П. (январь 1972 г.). «РНК-зависимая ДНК-полимеразная активность РНК-опухолевых вирусов. I. Направляющее влияние ДНК в реакции» . Журнал вирусологии . 9 (1): 116–29. doi : 10.1128/JVI.9.1.116-129.1972 . ПМК   356270 . ПМИД   4333538 .
  19. ^ Арнольд С. (17 июля 2014 г.). «Могут ли гигантские вирусы стать источником жизни на Земле?» . Нэшнл Географик . Архивировано из оригинала 18 июля 2014 года . Проверено 29 мая 2016 г.
  20. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Сарафианос С.Г., Маршан Б., Дас К., Химмель Д.М., Парняк М.А., Хьюз Ш.Х., Арнольд Э. (январь 2009 г.). «Структура и функция обратной транскриптазы ВИЧ-1: молекулярные механизмы полимеризации и ингибирования» . Журнал молекулярной биологии . 385 (3): 693–713. дои : 10.1016/j.jmb.2008.10.071 . ПМЦ   2881421 . ПМИД   19022262 .
  21. ^ Хансен Дж.Л., Лонг А.М., Шульц С.К. (август 1997 г.). «Структура РНК-зависимой РНК-полимеразы полиовируса» . Структура . 5 (8): 1109–22. дои : 10.1016/S0969-2126(97)00261-X . ПМИД   9309225 .
  22. ^ Шульц С.Дж., Шампу Ж.Дж. (июнь 2008 г.). «Активность РНКазы H: структура, специфичность и функция в обратной транскрипции» . Вирусные исследования . 134 (1–2): 86–103. doi : 10.1016/j.virusres.2007.12.007 . ПМЦ   2464458 . ПМИД   18261820 .
  23. ^ Ббенек К., Кункель А.Т. (1993). «Верность ретровирусных обратных транскриптаз». В Скалка М.А., Гофф П.С. (ред.). Обратная транскриптаза . Нью-Йорк: Лабораторное издательство Колд-Спринг-Харбор. п. 85. ИСБН  978-0-87969-382-4 .
  24. ^ «Руководство по эксплуатации комплекта Promega» (PDF) . 1999. Архивировано из оригинала (PDF) 21 ноября 2006 г.
  25. ^ Хаусли Дж., Толлерви Д. (август 2010 г.). «Очевидный неканонический транс-сплайсинг генерируется обратной транскриптазой in vitro» . ПЛОС ОДИН . 5 (8): e12271. Бибкод : 2010PLoSO...512271H . дои : 10.1371/journal.pone.0012271 . ПМЦ   2923612 . ПМИД   20805885 .
  26. ^ Цзэн XC, Ван SX (июнь 2002 г.). «Доказательства того, что кДНК BmTXK бета-BmKCT китайского скорпиона Buthus martensii Karsch является артефактом, возникающим в процессе обратной транскрипции» . Письма ФЭБС . 520 (1–3): 183–4, ответ автора 185. doi : 10.1016/S0014-5793(02)02812-0 . ПМИД   12044895 . S2CID   24619868 .
  27. ^ ван Бакель Х., Нислоу С., Бленкоу Б.Дж., Хьюз Т.Р. (2011). «Ответ на «Реальность повсеместной транскрипции» » . ПЛОС Биология . 9 (7): e1001102. дои : 10.1371/journal.pbio.1001102 . ПМК   3134445 .
  28. ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б с д Роусон Дж.М., Николаичик О.А., Кил Б.Ф., Патак В.К., Ху В.С. (ноябрь 2018 г.). «Рекомбинация необходима для эффективной репликации ВИЧ-1 и поддержания целостности вирусного генома» . Исследования нуклеиновых кислот . 46 (20): 10535–10545. дои : 10.1093/nar/gky910 . ПМК   6237782 . ПМИД   30307534 .
  29. ^ Кромер Д., Гримм А.Дж., Шлуб Т.Э., Мак Дж., Давенпорт, член парламента (январь 2016 г.). «Оценка скорости переключения и рекомбинации матрицы ВИЧ in vivo» . СПИД . 30 (2): 185–92. дои : 10.1097/QAD.0000000000000936 . ПМИД   26691546 . S2CID   20086739 .
  30. ^ Ху В.С., Темин Х.М. (ноябрь 1990 г.). «Ретровирусная рекомбинация и обратная транскрипция». Наука . 250 (4985). Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: 1227–33. Бибкод : 1990Sci...250.1227H . дои : 10.1126/science.1700865 . ПМИД   1700865 .

Внешние ссылки [ править ]

Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Reverse_transcriptase&oldid=1231758787"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 7ef43cc533333cb11d9f69ced3a20e91__1719706560
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/7e/91/7ef43cc533333cb11d9f69ced3a20e91.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Reverse transcriptase - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)