Лизат тромбоцитов
Лизат тромбоцитов человека (или hPL ) является заменителем фетальной бычьей сыворотки (FBS) в экспериментальных и клинических культурах клеток. Это мутная светло-желтая жидкость, которую получают из тромбоцитов человеческой крови после циклов замораживания/оттаивания. тромбоцитов Цикл замораживания/оттаивания приводит к лизису , высвобождая большое количество факторов роста, необходимых для расширения клеток. hPL имеет самую высокую концентрацию факторов роста среди всех добавок сыворотки. [1] Среды для культивирования клеток, не содержащие FBS, например, с лизатом тромбоцитов или химически определенными / не содержащими компонентов животного происхождения, используются для клеточной терапии или регенеративной медицины . Они коммерчески доступны и имеют качество GMP ( надлежащая производственная практика ), что обычно является основой для одобрения регулирующих органов. [2]
Процесс
[ редактировать ]Тромбоциты живут от 5 до 9 дней. По этой причине Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) прекращает срок годности тромбоцитов, пригодных для переливания, через 5 дней после сбора. Обычно hPL получают из тромбоцитов с истекшим сроком годности, которые хранились в замороженных условиях не позднее, чем через 7 дней после сбора.
hPL создается из одиночных или объединенных донорских тромбоцитов, выделенных из цельной крови или путем афереза и распределенных в стандартном пакете для сбора тромбоцитов. Между протоколами производства hPL есть некоторые различия, но все они имеют одну и ту же суть: замораживание при очень низких температурах и оттаивание. Этот процесс можно повторить два или три раза, чтобы вызвать полный лизис тромбоцитов. Полученный hPL затем может пройти различные этапы производства для достижения нескольких степеней hPL.
Наиболее распространенная форма hPL подвергается небольшому количеству этапов обработки, в результате чего из супернатанта после процесса замораживания/оттаивания получается продукт. Включенные факторы свертывания требуют добавления гепарина в среду для культивирования клеток для предотвращения коагуляции во время инкубации.
Другая форма hPL – это форма, которую можно использовать в культуре клеток без необходимости добавления гепарина или какого-либо антикоагулянта. Этот сорт hPL проходит дальнейшие этапы производства, чтобы ингибировать действие факторов свертывания крови.
Многие лаборатории по всему миру создают небольшие количества hPL для удовлетворения своих лабораторных потребностей. Недостатками этого процесса являются: стоимость и последовательность. При создании небольших партий hPL (объединенных одним или несколькими донорами) согласованность hPL от партии к партии становится переменной. Крупномасштабное производство путем объединения многих доноров тромбоцитов является необходимостью смягчить вариабельность от донора к донору. Последовательность является главным приоритетом для экспериментальных планов, чтобы обеспечить воспроизводимые результаты.
Лизат тромбоцитов обычно используется в качестве дополнения к базальной среде в мезенхимальных стволовых клеток культуре . Перед использованием рекомендуется провести процесс инактивации патогена, чтобы предотвратить передачу патогена. [3]
Глобальные продажи
[ редактировать ]Лизат тромбоцитов человека коммерчески доступен через AventaCell BioMedical, Elk Bioscience , Mill Creek Life Sciences, Compass Biomedical, Inc., Sexton Biotechnologies, Macopharma SA, iBiologics, PL BioScience GmbH, Life Science Group Ltd (Великобритания) и Trinova Biochem GmbH под продуктом. линии UltraGRO, PLTMax, PLUS, Stemulate, лизат тромбоцитов человека, XcytePlus, PLSOLUTION, PLMATRIX и добавки к средам CRUX RUFA. Лизат тромбоцитов также производится из материала животного происхождения, не являющегося человеческим, и коммерчески доступен компаниями Agulos Biotech (свинья) и Japan Biomedical (коровьего скота). Некоторые компании предоставляют различные сорта лизата тромбоцитов, включая версии GMP и клинической степени для использования в клинических испытаниях на людях. человеческого происхождения Лизат тромбоцитов представляет собой настоящую платформу рекомбинантных белков . Лизат тромбоцитов был протестирован в различных приложениях на культурах клеток , включая использование в современных биореакторных системах. [4]
См. также
[ редактировать ]Ссылки
[ редактировать ]- ^ Дусе, К. и др. Лизаты тромбоцитов способствуют размножению мезенхимальных стволовых клеток: безопасный заменитель сыворотки животных в клеточной терапии. Журнал клеточной физиологии 205, 228–236 (2005).
- ^ Ланер-Пламбергер и др. Джей Трансл Мед (2015) 13:354
- ^ Иудикон П (январь 2014 г.). «Безпатогенный лизат тромбоцитов с низким содержанием плазмы и размножение мезенхимальных стволовых клеток человека». Джей Трансл Мед . 12:28 . дои : 10.1186/1479-5876-12-28 . ПМЦ 3918216 . ПМИД 24467837 .
- ^ Лизат тромбоцитов, состоящий из естественного восстановительного протеома, поддерживает пролиферацию мезенхимальных стволовых клеток человека и стабильность хромосом.Трансплантация клетокКлеточная трансплантация 2011 19;20(6):797-811. Epub 2010, 19 ноября. http://www.bioprocessintl.com/manufacturing/cell-therapies/expansion-human-mesenchymal-stem-cells-using-microcarriers-human-platelet-lysate/