МТ-НД1

НД1
Идентификаторы
Псевдонимы	ND1 , MTMT-НАДН-дегидрогеназа, субъединица 1 (комплекс I), НАДН-дегидрогеназа субъединица 1
Внешние идентификаторы	Опустить : 516000 ; МГИ : 101787 ; Гомологен : 5011 ; Генные карты : ND1 ; ОМА : ND1 – ортологи
showМестоположение гена ( человек )
Chr.	Mitochondrial DNA (human)
End	4,262 bp
showМестоположение гена ( Мышь )
Chr.	Mitochondrial DNA (mouse)
End	3,707 bp
show экспрессии РНК Характер
	Top expressed in
	subcutaneous adipose tissue; ; right hemisphere of cerebellum; ; right testis; ; right frontal lobe; ; left testis; ; gastrocnemius muscle; ; superior frontal gyrus; ; primary visual cortex; ; olfactory zone of nasal mucosa; ; prefrontal cortex;
	Top expressed in
	tail of embryo; ; striatum of neuraxis; ; olfactory bulb; ; yolk sac; ; cerebellum; ; primary visual cortex; ; hypothalamus; ; genital tubercle; ; superior frontal gyrus; ; right kidney;
	More reference expression data
	n/a
showГенная онтология
Molecular function	NADH dehydrogenase (ubiquinone) activity; oxidoreductase activity; protein binding; NADH dehydrogenase activity;
Cellular component	integral component of membrane; mitochondrial inner membrane; mitochondrial respiratory chain complex I; neuronal cell body; dendrite; respirasome; mitochondrial membranes; mitochondrion; membrane;
Biological process	response to hydroperoxide; response to organic cyclic compound; mitochondrial respiratory chain complex I assembly; mitochondrial electron transport, NADH to ubiquinone; cellular respiration; aerobic respiration;
	Sources:Amigo / QuickGO
hideОртологи
	4535
	17716
	ENSG00000198888
	ENSMUSG00000064341
	P03886
	P03888
	н/д
	н/д
	н/д
	НП_904328
	Викиданные
Просмотр/редактирование человека	Просмотр/редактирование мыши

MT-ND1 представляет собой ген митохондриального генома, кодирующий НАДН-убихиноноксидоредуктазной цепи 1 (ND1) белок . ^[5] Белок ND1 представляет собой субъединицу НАДН-дегидрогеназы , которая расположена во внутренней мембране митохондрий и является крупнейшим из пяти комплексов цепи переноса электронов . ^[6] Варианты человеческого гена MT-ND1 связаны с митохондриальной энцефаломиопатией, лактоацидозом и инсультоподобными эпизодами (MELAS), синдромом Ли (LS), наследственной оптической нейропатией Лебера (LHON) и увеличением ИМТ у взрослых. ^[7]^[8]^[9]

Структура

MT-ND1 расположен в митохондриальной ДНК от пары оснований от 3307 до 4262. ^[5] Ген MT-ND1 производит белок массой 36 кДа, состоящий из 318 аминокислот. ^[10]^[11] MT-ND1 — один из семи митохондриальных генов, кодирующих субъединицы фермента НАДН-дегидрогеназы (убихинон) , вместе с MT-ND2 , MT-ND3 , MT-ND4 , MT-ND4L , MT-ND5 и MT-ND6 . Этот фермент, также известный как Комплекс I , является крупнейшим из дыхательных комплексов. Структура имеет L-образную форму с длинным гидрофобным трансмембранным доменом и гидрофильным доменом периферического плеча, который включает все известные окислительно-восстановительные центры и сайт связывания НАДН. Продукт MT-ND1 и остальные субъединицы, кодируемые митохондриями, являются наиболее гидрофобными из субъединиц Комплекса I и образуют ядро трансмембранной области. ^[6]

Функция

Кодируемая MT-ND1 цепь 1 НАДН-убихиноноксидоредуктазы представляет собой субъединицу комплекса I дыхательной цепи , которая, как предполагается, принадлежит к минимальной сборке основных белков, необходимых для катализа дегидрирования НАДН и переноса электронов на убихинон (коэнзим Q10). ^[12] Первоначально НАДН связывается с Комплексом I и переносит два электрона на изоаллоксазиновое кольцо протезного плеча флавинмононуклеотида (FMN ) с образованием FMNH ₂ . Электроны передаются через серию железо-серных кластеров (Fe-S) в протезной руке и, наконец, к коферменту Q10 (CoQ), который восстанавливается до убихинола (CoQH ₂ ). Поток электронов изменяет окислительно-восстановительное состояние белка, что приводит к конформационному изменению и сдвигу p K ионизируемой боковой цепи, которая выкачивает четыре иона водорода из митохондриального матрикса. ^[6]

Клиническое значение

Известно, что патогенные варианты митохондриального гена MT-ND1 вызывают синдром Лея , связанный с мтДНК , как и варианты MT-ATP6 , MT-TL1 , MT-TK , MT-TW , MT-TV , MT-ND2 , MT-ND3. , MT-ND4 , MT-ND5 , MT-ND6 и MT-CO3 . Нарушения выработки митохондриальной энергии приводят к нейродегенеративным расстройствам, таким как синдром Ли, который характеризуется появлением симптомов в возрасте от 12 месяцев до трех лет. Симптомы часто проявляются после вирусной инфекции и включают двигательные расстройства и периферическую нейропатию, а также гипотонию, спастичность и мозжечковую атаксию. Примерно половина заболевших умирают от дыхательной или сердечной недостаточности к трем годам. Синдром Ли является заболеванием, наследуемым по материнской линии, и его диагноз устанавливается посредством генетического тестирования вышеупомянутых митохондриальных генов, включая MT-ND1. ^[7] Мутация m.4171C>A/MT-ND1 также приводит к фенотипу, подобному Ли, а также к двусторонним поражениям ствола мозга, поражающим вестибулярные ядра, что приводит к потере зрения, рвоте и головокружению. ^[8] Эти комплексные гены I связаны с различными нейродегенеративными заболеваниями, включая наследственную оптическую невропатию Лебера (LHON), митохондриальную энцефаломиопатию с инсультоподобными эпизодами ( MELAS ), перекрытие между LHON и MELAS, ^[13]^[14] и ранее упомянутый синдром Ли .

Митохондриальная дисфункция, возникающая в результате вариантов MT-ND1, MT-ND2 и MT-ND4L, связана с ИМТ у взрослых и участвует в метаболических нарушениях, включая ожирение, диабет и гипертонию. ^[9]

Ссылки

^ Перейти обратно: ^а ^б ^с GRCh38: Версия Ensembl 89: ENSG00000198888 – Ensembl , май 2017 г.
^ Перейти обратно: ^а ^б ^с GRCm38: выпуск Ensembl 89: ENSMUSG00000064341 – Ensembl , май 2017 г.
^ «Ссылка на Human PubMed:» . Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
^ «Ссылка на Mouse PubMed:» . Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
^ Перейти обратно: ^а ^б «Ген Энтрез: субъединица 1 НАДН-дегидрогеназы MT-ND1» .
^ Перейти обратно: ^а ^б ^с Voet DJ, Voet JG, Пратт CW (2013). «Глава 18, Синтез митохондриального АТФ». Основы биохимии (4-е изд.). Хобокен, Нью-Джерси: Уайли. стр. 581–620. ISBN 978-0-47054784-7 .
^ Перейти обратно: ^а ^б Торберн Д.Р., Рахман С. (1993–2015). «Синдром Ли, связанный с митохондриальной ДНК, и НАРП» . В Пагон Р.А., Адам М.П., Ардингер Х.Х., Уоллес С.Е., Амемия А., Бин Л.Дж., Берд Т.Д., Долан Ч.Р., Фонг К.Т., Смит Р.Дж., Стивенс К. (ред.). GeneReviews [Интернет] . Сиэтл (Вашингтон): Вашингтонский университет, Сиэтл. ПМИД 20301352 .
^ Перейти обратно: ^а ^б Ла Морджиа С, Капорали Л, Гандини Ф, Оливьери А, Тони Ф, Нассетти С, Брунетто Д, Стипа С, Скадуто С, Пармеджани А, Тонон С, Лоди Р, Торрони А, Карелли В (май 2014 г.). «Связь мутации мтДНК m.4171C>A/MT-ND1 как с оптической нейропатией, так и с двусторонними поражениями ствола мозга» . БМК Неврология . 14 :116 дои : 10.1186/1471-2377-14-116 . ПМК 4047257 . ПМИД 24884847 .
^ Перейти обратно: ^а ^б Флакер А, Баумбах С, Крибель Дж, Мейтингер Т, Петерс А, Вальденбергер М, Граллерт Х, Штраух К (2014). «Выявлено, что митохондриальные генетические варианты связаны с ИМТ у взрослых» . ПЛОС ОДИН . 9 (8): е105116. Бибкод : 2014PLoSO...9j5116F . дои : 10.1371/journal.pone.0105116 . ПМЦ 4143221 . ПМИД 25153900 .
^ Зонг NC, Ли Х, Ли Х, Лам МП, Хименес Р.К., Ким С.С., Денг Н., Ким АК, Чой Дж.Х., Селайя И., Лием Д., Мейер Д., Одеберг Дж., Фанг С., Лу Х.Дж., Сюй Т., Вайс Дж. , Дуан Х., Улен М., Йейтс-младший, Апвейлер Р., Ге Дж., Хермякоб Х., Пинг П. (октябрь 2013 г.). «Интеграция биологии и медицины сердечного протеома с помощью специализированной базы знаний» . Исследование кровообращения . 113 (9): 1043–53. дои : 10.1161/CIRCRESAHA.113.301151 . ПМК 4076475 . ПМИД 23965338 .
^ «Цепь 1 НАДН-убихиноноксидоредуктазы» . База знаний Атласа органических белков сердца (COPaKB) .
^ «MT-ND1 - НАДН-убихинон оксидоредуктазная цепь 1 - Homo sapiens (Человек)» . UniProt.org: центр информации о белках . Консорциум UniProt.
^ Спруйт Л., Смитс Х.Дж., Хендрикс А., Беттинк-Ремейер М.В., Маат-Киевит А., Шондервурд К.К., Слейтер В., де Ку, И.Ф., Хинтцен Р.К. (июнь 2007 г.). «Мутация ND1, связанная с MELAS, вызывает наследственную нейропатию зрительного нерва Лебера и спастическую дистонию» . Архив неврологии . 64 (6): 890–3. дои : 10.1001/archneur.64.6.890 . ПМИД 17562939 .
^ Блейкли Э.Л., де Сильва Р., Кинг А., Шварцер В., Харроуер Т., Давидек Г., Тернбулл Д.М., Тейлор Р.В. (май 2005 г.). «Синдром перекрытия LHON/MELAS, связанный с мутацией митохондриального гена MTND1» . Европейский журнал генетики человека . 13 (5): 623–7. дои : 10.1038/sj.ejhg.5201363 . ПМИД 15657614 .

Дальнейшее чтение

Торрони А., Ахилли А., Маколей В., Ричардс М., Бандельт Х.Дж. (июнь 2006 г.). «Сбор плодов дерева мтДНК человека». Тенденции в генетике . 22 (6): 339–45. дои : 10.1016/j.tig.2006.04.001 . PMID 16678300 .
Бодентейх А., Митчелл Л.Г., Полимеропулос М.Х., Меррил Ч.Р. (май 1992 г.). «Динуклеотидный повтор в D-петле митохондрий человека». Молекулярная генетика человека . 1 (2): 140. doi : 10.1093/hmg/1.2.140-a . ПМИД 1301157 .
Лу X, Уокер Т., Макманус Дж.П., Селиги В.Л. (июль 1992 г.). «Дифференциация клеток аденокарциномы толстой кишки человека HT-29 коррелирует с повышенной экспрессией митохондриальной РНК: влияние трегалозы на рост и созревание клеток». Исследования рака . 52 (13): 3718–25. ПМИД 1377597 .
Джонс Д.Р., Нойфельд М.Дж., Парк Р.Д. (сентябрь 1992 г.). «Мутация митохондриальной ДНК ND-6, связанная с наследственной оптической невропатией Лебера» . Связь с биохимическими и биофизическими исследованиями . 187 (3): 1551–7. дои : 10.1016/0006-291X(92)90479-5 . ПМИД 1417830 .
Хуопонен К., Вилкки Дж., Аула П., Никоскелайнен Е.К., Савонтаус М.Л. (июнь 1991 г.). «Новая мутация мтДНК, связанная с наследственной оптической нейроретинопатией Лебера» . Американский журнал генетики человека . 48 (6): 1147–53. ПМК 1683111 . ПМИД 1674640 .
Марзуки С., Ноер А.С., Лертрит П., Тьягараджан Д., Капса Р., Уттанафол П., Бирн Э. (декабрь 1991 г.). «Нормальные варианты митохондриальной ДНК человека и продукты трансляции: построение справочной базы данных». Генетика человека . 88 (2): 139–45. дои : 10.1007/bf00206061 . ПМИД 1757091 . S2CID 28048453 .
Джонс Д.Р., Берман Дж. (февраль 1991 г.). «Альтернативный одновременный комплекс I мутаций митохондриальной ДНК при наследственной оптической невропатии Лебера». Связь с биохимическими и биофизическими исследованиями . 174 (3): 1324–30. дои : 10.1016/0006-291X(91)91567-V . ПМИД 1900003 .
Хауэлл Н., Биндофф Л.А., Маккалоу Д.А., Кубака И., Поултон Дж., Макки Д., Тейлор Л., Тернбулл Д.М. (ноябрь 1991 г.). «Наследственная оптическая невропатия Лебера: идентификация одной и той же митохондриальной мутации ND1 в шести родословных» . Американский журнал генетики человека . 49 (5): 939–50. ПМЦ 1683233 . ПМИД 1928099 .
Майандер А., Хуопонен К., Савонтаус М.Л., Никоскелайнен Э., Викстрем М. (ноябрь 1991 г.). «Свойства переноса электронов НАДН:убихинонредуктазы при мутациях ND1/3460 и ND4/11778 наследственной оптической нейроретинопатии Лебера (LHON)» . Письма ФЭБС . 292 (1–2): 289–92. дои : 10.1016/0014-5793(91)80886-8 . ПМИД 1959619 . S2CID 26368887 .
Мораес К.Т., Андреетта Ф., Бонилья Э., Шанске С., ДиМауро С., Шон Э.А. (март 1991 г.). «Репликационно-компетентная митохондриальная ДНК человека, лишенная промоторной области тяжелой цепи» . Молекулярная и клеточная биология . 11 (3): 1631–7. дои : 10.1128/MCB.11.3.1631 . ПМК 369459 . ПМИД 1996112 .
Хауэлл Н., Кубака И., Сюй М., Маккалоу Д.А. (май 1991 г.). «Наследственная оптическая невропатия Лебера: вовлечение митохондриального гена ND1 и свидетельства внутригенной супрессорной мутации» . Американский журнал генетики человека . 48 (5): 935–42. ПМК 1683051 . ПМИД 2018041 .
Аттарди Г., Чомин А., Дулиттл Р.Ф., Мариоттини П., Раган С.И. (1987). «Семь неопознанных рамок считывания митохондриальной ДНК человека кодируют субъединицы НАДН-дегидрогеназы дыхательной цепи». Симпозиумы Колд-Спринг-Харбор по количественной биологии . 51 (1): 103–14. дои : 10.1101/sqb.1986.051.01.013 . ПМИД 3472707 .
Чомин А., Клитер М.В., Рэган С.И., Райли М., Дулиттл Р.Ф., Аттарди Дж. (октябрь 1986 г.). «URF6, последняя неопознанная рамка считывания мтДНК человека, кодирует субъединицу НАДН-дегидрогеназы». Наука . 234 (4776): 614–8. Бибкод : 1986Sci...234..614C . дои : 10.1126/science.3764430 . ПМИД 3764430 .
Чомин А., Мариоттини П., Клитер М.В., Раган С.И., Мацуно-Яги А., Хатефи Ю., Дулиттл Р.Ф., Аттарди Дж. (1985). «Шесть неопознанных рамок считывания митохондриальной ДНК человека кодируют компоненты НАДН-дегидрогеназы дыхательной цепи». Природа . 314 (6012): 592–7. Бибкод : 1985Natur.314..592C . дои : 10.1038/314592a0 . ПМИД 3921850 . S2CID 32964006 .
Сэнгер Ф., Коулсон А.Р., Баррелл Б.Г., Смит А.Дж., Роу Б.А. (октябрь 1980 г.). «Клонирование одноцепочечного бактериофага как средство быстрого секвенирования ДНК». Журнал молекулярной биологии . 143 (2): 161–78. дои : 10.1016/0022-2836(80)90196-5 . ПМИД 6260957 .
Пагани С., Галанте Ю.М. (январь 1983 г.). «Взаимодействие роданезы с митохондриальной НАДН-дегидрогеназой». Biochimica et Biophysical Acta (BBA) - Структура белка и молекулярная энзимология . 742 (2): 278–84. дои : 10.1016/0167-4838(83)90312-6 . ПМИД 6402020 .
Андерсон С., Банкир А.Т., Баррелл Б.Г., де Брёйн М.Х., Коулсон А.Р., Друэн Дж., Эперон И.С., Нирлих Д.П., Роу Б.А., Сэнгер Ф., Шрайер П.Х., Смит А.Дж., Стаден Р., Янг И.Г. (апрель 1981 г.). «Последовательность и организация митохондриального генома человека». Природа . 290 (5806): 457–65. Бибкод : 1981Natur.290..457A . дои : 10.1038/290457a0 . ПМИД 7219534 . S2CID 4355527 .
Монтойя Дж., Охала Д., Аттарди Дж. (апрель 1981 г.). «Отличительные особенности 5'-концевых последовательностей мРНК митохондрий человека». Природа . 290 (5806): 465–70. Бибкод : 1981Natur.290..465M . дои : 10.1038/290465a0 . ПМИД 7219535 . S2CID 4358928 .
Хорай С., Хаясака К., Кондо Р., Цугане К., Такахата Н. (январь 1995 г.). «Недавнее африканское происхождение современных людей, выявленное с помощью полных последовательностей митохондриальных ДНК человекообразных» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 92 (2): 532–6. Бибкод : 1995PNAS...92..532H . дои : 10.1073/pnas.92.2.532 . ПМК 42775 . ПМИД 7530363 .
Накагава Ю, Икегами Х, Ямато Э, Такекава К, Фудзисава Т, Хамада Ю, Уэда Х, Учигата Ю, Мики Т, Кумахара Ю (апрель 1995 г.). «Новая мутация митохондриальной ДНК, связанная с инсулиннезависимым сахарным диабетом». Связь с биохимическими и биофизическими исследованиями . 209 (2): 664–8. дои : 10.1006/bbrc.1995.1550 . ПМИД 7733935 .
Дельмиро А, Ривера Х, Гарсиа-Сильва МТ, Гарсиа-Консуэгра И, Мартин-Эрнандес Э, Кихада-Фрайле П, де Лас Эрас Р.С., Морено-Искьердо А, Мартин Ма, Аренас Х, Мартинес-Асорин Ф (декабрь 2013 г.) . «Секвенирование всего экзома идентифицирует вариант митохондриального гена MT-ND1, связанный с эпилептической энцефалопатией: западный синдром, развивающийся в синдром Леннокса-Гасто» . Человеческая мутация . 34 (12): 1623–7. дои : 10.1002/humu.22445 . ПМИД 24105702 . S2CID 205921964 .
Мусумечи О, Андреу А.Л., Шанске С., Бресолин Н., Коми Г.П., Ротштейн Р., Шон Э.А., ДиМауро С. (июнь 2000 г.). «Внутригенная инверсия мтДНК: новый тип патогенной мутации у пациента с митохондриальной миопатией» . Американский журнал генетики человека . 66 (6): 1900–4. дои : 10.1086/302927 . ПМК 1378040 . ПМИД 10775530 .

Внешние ссылки

Масс-спектрометрическая характеристика MT-ND1 в COPaKB

[refGRCh38Ensembl-1] Перейти обратно: ^а ^б ^с GRCh38: Версия Ensembl 89: ENSG00000198888 – Ensembl , май 2017 г.

[refGRCm38Ensembl-2] Перейти обратно: ^а ^б ^с GRCm38: выпуск Ensembl 89: ENSMUSG00000064341 – Ensembl , май 2017 г.

[3] «Ссылка на Human PubMed:» . Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .

[4] «Ссылка на Mouse PubMed:» . Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .

[EntrezMTND1-5] Перейти обратно: ^а ^б «Ген Энтрез: субъединица 1 НАДН-дегидрогеназы MT-ND1» .

[BioChem-6] Перейти обратно: ^а ^б ^с Voet DJ, Voet JG, Пратт CW (2013). «Глава 18, Синтез митохондриального АТФ». Основы биохимии (4-е изд.). Хобокен, Нью-Джерси: Уайли. стр. 581–620. ISBN 978-0-47054784-7 .

[GeneReviews-7] Перейти обратно: ^а ^б Торберн Д.Р., Рахман С. (1993–2015). «Синдром Ли, связанный с митохондриальной ДНК, и НАРП» . В Пагон Р.А., Адам М.П., Ардингер Х.Х., Уоллес С.Е., Амемия А., Бин Л.Дж., Берд Т.Д., Долан Ч.Р., Фонг К.Т., Смит Р.Дж., Стивенс К. (ред.). GeneReviews [Интернет] . Сиэтл (Вашингтон): Вашингтонский университет, Сиэтл. ПМИД 20301352 .

[MTND1mutation-8] Перейти обратно: ^а ^б Ла Морджиа С, Капорали Л, Гандини Ф, Оливьери А, Тони Ф, Нассетти С, Брунетто Д, Стипа С, Скадуто С, Пармеджани А, Тонон С, Лоди Р, Торрони А, Карелли В (май 2014 г.). «Связь мутации мтДНК m.4171C>A/MT-ND1 как с оптической нейропатией, так и с двусторонними поражениями ствола мозга» . БМК Неврология . 14 :116 дои : 10.1186/1471-2377-14-116 . ПМК 4047257 . ПМИД 24884847 .

[BMI-9] Перейти обратно: ^а ^б Флакер А, Баумбах С, Крибель Дж, Мейтингер Т, Петерс А, Вальденбергер М, Граллерт Х, Штраух К (2014). «Выявлено, что митохондриальные генетические варианты связаны с ИМТ у взрослых» . ПЛОС ОДИН . 9 (8): е105116. Бибкод : 2014PLoSO...9j5116F . дои : 10.1371/journal.pone.0105116 . ПМЦ 4143221 . ПМИД 25153900 .

[COPaKB-10] Зонг NC, Ли Х, Ли Х, Лам МП, Хименес Р.К., Ким С.С., Денг Н., Ким АК, Чой Дж.Х., Селайя И., Лием Д., Мейер Д., Одеберг Дж., Фанг С., Лу Х.Дж., Сюй Т., Вайс Дж. , Дуан Х., Улен М., Йейтс-младший, Апвейлер Р., Ге Дж., Хермякоб Х., Пинг П. (октябрь 2013 г.). «Интеграция биологии и медицины сердечного протеома с помощью специализированной базы знаний» . Исследование кровообращения . 113 (9): 1043–53. дои : 10.1161/CIRCRESAHA.113.301151 . ПМК 4076475 . ПМИД 23965338 .

[url_COPaKB-11] «Цепь 1 НАДН-убихиноноксидоредуктазы» . База знаний Атласа органических белков сердца (COPaKB) .

[12] «MT-ND1 - НАДН-убихинон оксидоредуктазная цепь 1 - Homo sapiens (Человек)» . UniProt.org: центр информации о белках . Консорциум UniProt.

[13] Спруйт Л., Смитс Х.Дж., Хендрикс А., Беттинк-Ремейер М.В., Маат-Киевит А., Шондервурд К.К., Слейтер В., де Ку, И.Ф., Хинтцен Р.К. (июнь 2007 г.). «Мутация ND1, связанная с MELAS, вызывает наследственную нейропатию зрительного нерва Лебера и спастическую дистонию» . Архив неврологии . 64 (6): 890–3. дои : 10.1001/archneur.64.6.890 . ПМИД 17562939 .

[14] Блейкли Э.Л., де Сильва Р., Кинг А., Шварцер В., Харроуер Т., Давидек Г., Тернбулл Д.М., Тейлор Р.В. (май 2005 г.). «Синдром перекрытия LHON/MELAS, связанный с мутацией митохондриального гена MTND1» . Европейский журнал генетики человека . 13 (5): 623–7. дои : 10.1038/sj.ejhg.5201363 . ПМИД 15657614 .

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]

[7]

[8]

[9]

[10]

[11]

[12]

[13]

[14]