Jump to content

Водная токсикология

(Перенаправлено от морского токсиколога )
Фиолетовый морской еж, проведенный на загрязнение с использованием целого метода токсичности.

Водная токсикология - это изучение влияния промышленных химических веществ и других антропогенных и природных материалов и активности на водные организмы на различных уровнях организации, от субклеточных до отдельных организмов до сообществ и экосистем . [ 1 ] Водная токсикология - это междисциплинарная область, которая интегрирует токсикологию , водную экологию и водную химию . [ 1 ]

Эта область исследования включает в себя пресноводную , морскую воду и осадочную среду. Общие тесты включают стандартизированные тесты на острую и хроническую токсичность, длится 24–96 часов (острый тест) до 7 дней или более (хронические тесты). Эти тесты измеряют конечные точки, такие как выживаемость, рост, размножение, которые измеряются при каждой концентрации в градиенте, а также контрольный тест. [ 2 ] Обычно использует выбранные организмы с экологически значимой чувствительностью к токсикантам и хорошо известным литературным фон. Эти организмы могут быть легко приобретены или культивированы в лаборатории, и их легко справиться. [ 3 ]

В то время как базовые исследования в области токсикологии начались в нескольких странах 1800 -х годов, только около 1930 -х годов [ 4 ] Было установлено использование теста на острую токсичность, особенно на рыбе. Из-за широкого использования органохлорного пестицида DDT [L, L, L-трихлор-2,2-бис (P-хлорфенил) этан] и его связь с причинением гибели рыбы, область водной токсикологии росла. Сначала исследования были сосредоточены в основном на устрицах и мидии, поскольку они не могли отойти от токсичной среды. Результаты этих исследований в конечном итоге привели к реализации программ, которые контролируют концентрации водных загрязняющих веществ в устрицах и мидиях, таких как программа мидийных часов Национального управления океанического и атмосферного управления (NOAA). [ 5 ] В течение следующих двух десятилетий влияние химических веществ и отходов на нечеловеческие виды стали более широкой проблемой, и эпоха биоанализа рассол-джара началась с увеличения усилий по стандартизации методов тестирования токсичности. [ 1 ]

В Соединенных Штатах принятие Федерального закона о контроле загрязнения воды 1947 года ознаменовало первое всеобъемлющее законодательство [ 6 ] за контроль за загрязнением воды и последовал Федеральный Закон о контроле загрязнения воды в 1956 году. [ 7 ] В 1962 году общественные и правительственные интересы были возобновлены, в значительной степени из -за публикации Рэйчел Карсон , тихой весны и через три года был принят Закон о качестве воды 1965 года , который поручил штатам разработать стандарты качества воды. [ 1 ] Осведомленность общественности, а также научная и правительственная забота продолжала расти в течение 1970 -х годов, и к концу десятилетия исследования расширились, чтобы включить оценку опасности и анализ рисков . [ 1 ] В последующие десятилетия водная токсикология продолжала расширяться и интернационализироваться, так что в настоящее время существует сильное применение тестирования токсичности для защиты окружающей среды .

Водная токсикология продолжает развиваться, поскольку оценка риска становится все более практикой в ​​этой области. Поле набирает популярность, поскольку она начала связывать влияние загрязняющих веществ на морских животных с людьми, которые едят рыбу и другую морскую жизнь.

Испытания на водную токсичность

[ редактировать ]

Тесты водной токсикологии ( анализы ): тесты на токсичность используются для предоставления качественных и количественных данных о неблагоприятных (вредных) воздействиях на водные организмы от токсиканта . Тесты на токсичность могут быть использованы для оценки потенциала повреждения водной среды и предоставления базы данных, которая может быть использована для оценки риска, связанного в рамках ситуации для специфического токсиканта. Водные токсикологические тесты могут быть выполнены на местах или в лаборатории. Полевые эксперименты, как правило, относятся к воздействию множественных видов, но отдельные виды могут быть в клетке в течение определенной продолжительности, а лабораторные эксперименты обычно относятся к воздействию отдельных видов. Отношение доза -ответ чаще всего используется с сигмоидальной кривой для количественной оценки токсических эффектов при выбранной конечной точке или критериях эффекта (то есть смерти или другого неблагоприятного воздействия на организм). Концентрация находится на оси x, а процентное ингибирование или ответ на оси Y. [ 1 ]

Критерии для эффектов или тестируемые конечные точки, могут включать летальные и сублетальные эффекты (см. Токсикологические эффекты ). [ 1 ]

Существуют различные виды тестов на токсичность, которые могут быть выполнены на различных видах испытаний. Различные виды различаются по своей восприимчивости к химическим веществам, скорее всего, из -за различий в доступности, скорости метаболизма , скорости экскреции , генетических факторов , диетических факторов, возраста, пола, здоровья и уровня стресса организма. Common standard test species are the fathead minnow (Pimephales promelas), daphnids ( Daphnia magna , D. pulex , D. pulicaria , Ceriodaphnia dubia ), midge (Chironomus tentans, C. riparius), rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), sheepshead minnow ( Cyprinodon variegatu), [ 8 ] зебра рыба , [ 9 ] Mysids (Mysidopsis), устрица (Crassotrieas), Scud (Hyalalla azteca), травяные креветки (Palaemonetes ligure) и мидии ( Mytilus galloprovincialis ). [ 10 ] Как определено ASTM International , эти виды обычно выбираются на основе доступности, коммерческого, рекреационного и экологического значения, прошлого успешного использования и нормативного использования. [ 1 ]

Было опубликовано различные приемлемые стандартизированные методы испытаний. Некоторые из наиболее широко принятых агентств для публикации методов: Американская ассоциация общественного здравоохранения США , Агентство по охране окружающей среды (EPA), Международная Международная организация, Международная организация по стандартизации , окружающей среде и изменению климата , и организация по экономическому сотрудничеству и развитию . Стандартизированные тесты предлагают возможность сравнивать результаты между лабораториями. [ 1 ]

Есть много видов тестов на токсичность, широко распространенные в научной литературе и регулирующими органами. Используемый тип теста зависит от многих факторов: конкретное регулирующее агентство, проводящее тест, доступные ресурсы, физические и химические характеристики окружающей среды, тип токсикантов, доступные виды испытаний, лабораторные и полевые испытания, выбор конечной точки, а также время и и время Ресурсы, доступные для проведения анализов, являются одними из наиболее распространенных факторов влияния на дизайн теста. [ 1 ]

Системы экспозиции

[ редактировать ]

Системы экспозиции представляют собой четыре общих метода, которые контролируют и испытывают организмы, подвергаются обращению с обработанной и разбавленной водой или испытательными растворами.

  • Статический. Статический тест обнажает организм в неподвижной воде. Токсикант добавляется в воду, чтобы получить правильные концентрации, которые будут проверены. Контрольные и испытательные организмы помещаются в испытательные растворы, и вода не изменяется в течение всего теста.
  • Рециркуляция. Испытание на рециркуляции обнажает организм токсиканту так же, как и статический тест, за исключением того, что испытательные растворы прокачиваются через аппарат (IE Filter) для поддержания качества воды, но не снижают концентрацию токсиканта в воде. Вода непрерывно циркулируется через испытательную камеру, аналогичную аэрированной рыбной аквариуме. Этот тип теста дорогой, и неясно, влияет ли фильтр или аэратор на токсикант.
  • Обновлять. Тест на обновление также подвергает организм токсиканту аналогично статическому тесту, потому что он находится в неподвижной воде. Однако в тесте на обновление испытательное решение периодически обновляется (постоянные интервалы) путем переноса организма в свежую испытательную камеру с той же концентрацией токсиканта.
  • Проточный. Тест протекания раскрывает организм токсиканту с потоком в испытательные камеры, а затем из тестовых камер. [ 11 ] Определенный поток может быть либо прерывистым, либо непрерывным. Стокольный раствор правильных концентраций загрязнения должен быть ранее подготовлен. Измерители или разбавители будут контролировать поток и объем испытательного раствора, и будут смешиваться правильные пропорции воды и загрязнения. [ 1 ]

Типы тестов

[ редактировать ]

Острые тесты-это краткосрочные тесты на воздействие (14 дней или меньше) [ 12 ] и обычно используйте летальность как конечную точку. При остром воздействии организмы вступают в контакт с более высокими дозами токсиканта в одном событии или во многих событиях в течение короткого периода времени и обычно оказывают непосредственные эффекты, в зависимости от времени поглощения токсиканта. Эти тесты обычно проводятся на организмах в течение определенного периода жизненного цикла организма и считаются частичными тестами жизненного цикла. Острые тесты не являются действительными, если смертность в контрольной выборке превышает 10%. Однако этот критерий приемлемости контроля зависит от вида и продолжительности теста. Результаты сообщаются в EC50 или концентрации, которая повлияет на пятьдесят процентов от размера выборки. [ 1 ]

Хронические тесты-это долгосрочные тесты (недели, месяцы), относительно продолжительности жизни организма тестового организма [ 13 ] (> 10% срока службы) и, как правило, используют сублетальные конечные точки. При хроническом воздействии организмы вступают в контакт с низкими, непрерывными дозами токсиканта. Хроническое воздействие может вызывать эффекты для острой воздействия, но также может привести к эффектам, которые развиваются медленно. Хронические тесты, как правило, считаются полными тестами жизненного цикла и охватывают время всего поколения или репродуктивный жизненный цикл («Яйцо -яйцо»). Хронические тесты не считаются действительными, если смертность в контрольной выборке превышает 20%. Эти результаты обычно сообщаются в NOECS (без наблюдаемых уровней эффектов) и LOECS (самый низкий уровень наблюдаемых эффектов). Тем не менее, NOEC и LOEC становятся реже, так как конечные точки зависят от серии концентраций, выбранных для теста. Эти отчеты начинают становиться темой дебатов в этой области из -за того, как это может изменить результаты тестов. Например, если скорость концентрации NOEC составляет 100, 50, 25, 11,25, 6,25, а токсикология сообщается на 2%, NOEC сообщит о концентрации как 6,25.

Испытания на стадии раннего жизни рассматриваются как субхронические воздействия, которые являются не менее полным репродуктивным жизненным циклом и включают воздействие на ранних чувствительных жизненных этапах организма. Эти воздействия также называются критическими жизненными этапами, эмбрионо-ларвальными или яичными тестами. Испытания на стадии раннего жизни не считаются действительными, если смертность в контрольной выборке превышает 30%. [ 1 ]

Краткосрочные сублетальные тесты используются для оценки токсичности сточных водных организмов. Эти методы разрабатываются EPA и сосредоточены только на самых чувствительных этапах жизни. Конечные точки для этого теста включают изменения в рост, размножение и выживание. NOECS, LOECS и EC50S сообщаются в этих тестах.

Тесты на биоаккумуляцию представляют собой тесты на токсичность, которые можно использовать для гидрофобных химических веществ, которые могут накапливаться в жирной ткани водных организмов. Токсиканты с низкой растворимостью в воде обычно можно хранить в жирной ткани из -за высокого содержания липидов в этой ткани. Хранение этих токсикантов в организме может привести к совокупной токсичности. В тестах на биоаккумуляцию используются факторы биоконцентрации (BCF) для прогнозирования концентраций гидрофобных загрязнений в организмах. BCF - это отношение средней концентрации испытательного химического вещества, накопленного в ткани испытательного организма (в условиях устойчивого состояния) к средней измеренной концентрации в воде.

Испытания пресной воды и тесты соленой воды имеют различные стандартные методы, особенно в соответствии с регулирующими органами. Однако эти тесты обычно включают контрольный (отрицательный и/или положительный), серию геометрического разведения или другие соответствующие серии логарифмических разведений, тестовые камеры и равное количество повторностей и тестовый организм. Точное время экспозиции и продолжительность теста будут зависеть от типа теста (острой и хронической) и типа организма. Температура, параметры качества воды и свет будут зависеть от требований регулятора и типа организма. [ 1 ]

В США многие снятия сточных вод (например, фабрики, электростанции, нефтеперерабатывающие заводы , шахты, муниципальные очистные сооружения) необходимы для проведения периодических испытаний по токсичности целой стоки (WET) в рамках Национальной системы разрешений на устранение загрязняющих веществ (NPDE), в соответствии с Программой разрешений на выполнение, в соответствии с Программой разрешений, выполняемой. к Закону о чистой воде . Для учреждений, переходящих к пресной воде, стоки используются для проведения статических тестов на токсичность с мультиконцентрацией с целериодийной дубией (водяной блох) и Pimephales Promelas (Fathead Minnow), среди других видов. Тестовые организмы подвергаются воздействию в течение 48 часов в статических условиях с пятью концентрациями сточных вод. Основное отклонение в кратковременных тестах на хроническую токсичность на стоках и острые тесты на токсичность на стоках заключается в том, что кратковременный хронический тест длится в течение семи дней, а острый тест длится в течение 48 часов. в морские и устьевые воды используемыми тестовыми видами являются овчарные гольяны ( Cyprinodon variegatus , внутренний серебря серебряный Для сбросов ) и фиолетовый морской еж ( Strongylocentrotus purpuratus ). [ 14 ] [ 15 ]

Испытания наносов

[ редактировать ]

В какой -то момент большинство химических веществ, происходящих как из антропогенных, так и природных источников, накапливаются в отложениях. По этой причине токсичность отложений может играть важную роль в неблагоприятных биологических эффектах, наблюдаемых у водных организмов, особенно в тех, кто населяет бентические среды обитания. Рекомендуемый подход к тестированию наложений заключается в применении триады качества отложений (SQT), которая включает в себя одновременное изучение химии осадков, токсичности, полевых изменений, биоаккумуляции и биодоступности, которые могут использоваться в лабораторной или в поле. Из -за расширения SQT в настоящее время это чаще называют «структурой оценки осадков». Сбор, обработка и хранение отложений могут повлиять на биодоступность, и по этой причине были разработаны стандартные методы в соответствии с этой целью. [ 1 ]

Токсикологические эффекты

[ редактировать ]

Токсичность может быть разбита на две широкие категории прямой и косвенной токсичности. Прямая токсичность возникает в результате токсиканта, действующего на месте действия в организме или на них. Косвенная токсичность происходит с изменением физической, химической или биологической среды.

Летальность является наиболее распространенным эффектом, используемым в токсикологии и используется в качестве конечной точки для тестов на острую токсичность. При проведении тестов на хроническую токсичность Сублетальные эффекты являются конечными точками, которые рассматриваются. Эти конечные точки включают поведенческие, физиологические, биохимические и гистологические изменения. [ 1 ]

Существует ряд эффектов, которые возникают, когда организм одновременно подвергается воздействию двух или более токсикантов. Эти эффекты включают аддитивные эффекты, синергетические эффекты, эффекты потенцирования и антагонистические эффекты. Аддитивный эффект возникает, когда комбинированный эффект равен комбинации или сумме отдельных эффектов. Синергетический эффект возникает, когда комбинация эффектов намного больше, чем два отдельных эффекта, добавленных вместе. Потенциал - это эффект, который возникает, когда индивидуальный химический вещество не оказывает эффекта к токсиканту, а комбинация оказывает больший эффект, чем только токсикант. Наконец, антагонистический эффект возникает, когда комбинация химических веществ имеет меньший эффект, чем сумма их индивидуальных эффектов. [ 1 ]

Важные ресурсы водной токсикологии

[ редактировать ]

Терминология

[ редактировать ]
  • Средняя летальная концентрация ( LC50 ) - химическая концентрация, которая, как ожидается, убивает 50% группы организмов.
  • Средняя эффективная концентрация ( EC50 ) - химическая концентрация, которая, как ожидается, будет иметь одно или несколько указанных эффектов в 50% группы организмов.
  • Критические остатки тела (CBR)-подход, который обычно исследует химические концентрации всего тела подверженного воздействию организма, который связан с неблагоприятным биологическим ответом.
  • Базовая токсичность - относится к наркозе, который является депрессией в биологической активности из -за того, что в организме присутствуют токсиканты.
  • Биомагнификация - процесс, посредством которого концентрация химического вещества в тканях организма увеличивается по мере прохождения нескольких уровней в пищевой сети.
  • Самая низкая наблюдаемая концентрация эффекта (LOEC) - самая низкая тестовая концентрация, которая оказывает статистически значимый эффект в течение определенного времени воздействия.
  • Нет наблюдаемой концентрации эффекта (NOEC) - самая высокая тестовая концентрация, для которой не наблюдается эффекта относительно контроля в определенном времени воздействия.
  • Максимально приемлемая токсикантная концентрация (MATC)-оценочное значение, которое представляет собой самую высокую концентрацию «неэффективного» специфического вещества в диапазоне, включая NOEC и LOEC.
  • Коэффициент применения (AF) [ 22 ] - Эмпирически полученная «безопасная» концентрация химического вещества.
  • Биомониторинг - постоянное использование живых организмов для анализа изменений окружающей среды с течением времени.
  • Стоки - жидкость, промышленные разряды, которые обычно содержат различные химические токсиканты.
  • Количественная структура-активность взаимосвязь (QSAR)-метод моделирования взаимосвязи между биологической активностью и структурой органических химических веществ.
  • Режим действия - набор общих поведенческих или физиологических признаков, которые представляют тип неблагоприятного отклика.
  • Механизм действия - подробные события, которые происходят на молекулярном уровне во время неблагоприятного биологического ответа.
  • K OW - Коэффициент разделения октанол-воды , который представляет соотношение концентрации октанола к концентрации химического вещества в воде.
  • Коэффициент биоконцентрации (BCF)-отношение средней химической концентрации в тканях организма в стационарных условиях к средней химической концентрации, измеренной в воде, на которую подвергаются организмы.

Все термины были получены от Rand. [ 1 ]

Значение в регулирующем контексте

[ редактировать ]

В Соединенных Штатах водная токсикология играет важную роль в программе разрешений на сточные воды NPDES . В то время как большинство ссажи в сточных водах обычно проводят аналитическое химическое тестирование для известных загрязняющих веществ , были стандартизированы стандартизированные тесты на сточные трансляции и регулярно выполняются в качестве инструмента для оценки потенциального вредного воздействия других загрязняющих веществ, не специфичных, не регулируемых в разрешениях на сброс. [ 14 ]

Программа качества воды EPA опубликовала критерии качества воды (для отдельных загрязняющих веществ) и стандартов качества воды (для водоемов), которые были получены из испытаний на водную токсичность. [ 23 ] [ 24 ]

Рекомендации по качеству отложений

[ редактировать ]

Хотя рекомендации по качеству отложений не предназначены для регулирования, они предоставляют способ ранжировать и сравнить качество осадков, разработанное национальным администрацией океанических и атмосферных атмосферных отношений (NOAA). [ 25 ] Эти рекомендации по качеству отложений суммированы в быстрых эталонных таблицах NOAA (Squirt) для многих различных химических веществ. [ 26 ]

Смотрите также

[ редактировать ]
  1. ^ Jump up to: а беременный в дюймовый и фон глин час я Дж k л м не а п Q. ведущий Рэнд, Гэри М.; Петроцелли, Сэм Р. (1985). Основы водной токсикологии: методы и применение . Вашингтон: издательство полушария. ISBN  978-0-89116-382-4 .
  2. ^ Окончательный отчет: исследование межлабораторной изменчивости кратковременных хронических и острой и острой цельной сточной токсичности, том 1 (отчет). Вашингтон, округ Колумбия: Агентство по охране окружающей среды США (EPA). Сентябрь 2001 г. EPA 821-B-01-004.
  3. ^ «Методы измерения острой токсичности сточных вод и приема воды в пресноводные и морские организмы, пятое издание» . Эпэ Октябрь 2002 г. EPA 821-R-02-012.
  4. ^ Эрхирхи, Эрнест Огенесувве; Ihekwereme, Chibueze Peter; Илодигве, Эммануэль Эмека (май 2018 г.). «Достижения в области теста острой токсичности: сильные стороны, слабые стороны и регуляторные признания» . Междисциплинарная токсикология . 11 (1): 5–12. doi : 10.2478/intx-2018-0001 . ISSN   1337-6853 . PMC   6117820 . PMID   30181707 .
  5. ^ Причард, JB (апрель 1993 г.). «Водная токсикология: прошлое, настоящее и перспективы» . Перспективы здоровья окружающей среды . 100 : 249–257. doi : 10.1289/ehp.93100249 . ISSN   0091-6765 . PMC   1519578 . PMID   8354173 .
  6. ^ «История Закона о чистой воде» . EPA Агентство по охране окружающей среды . 22 июня 2023 года.
  7. ^ «История стандартов качества воды» EPA. Получен 2012-06-06 Archived 2012-06-28 на The Wayback Machine
  8. ^ Калоу, Питер П. (2009). Справочник по экотоксикологии . Джон Уайли и сыновья. п. 900. ISBN  978-1444313505 .
  9. ^ Лю, Фу-Джун; Ван, Цзя-Шенг; Теодоракис, Крис В. (май 2006 г.). «Тиротоксичность арсената натрия, перхлората натрия и их смеси в Zebrafishdanio rerio». Экологическая наука и технология . 40 (10): 3429–3436. Bibcode : 2006enst ... 40.3429L . doi : 10.1021/es052538g . ISSN   0013-936X . PMID   16749717 .
  10. ^ Видал-Линан, Летисия; Беллас, Хуан; Кэмпильо, Хуан Антонио; Бейрас, Рикардо (январь 2010 г.). «Интегрированное использование антиоксидантных ферментов у мидий, Mytilus galloprovincialis, для мониторинга загрязнения в высокопродуктивных прибрежных районах Галиции (северо -запад Испания)». Хемосфера . 78 (3): 265–272. BIBCODE : 2010CHMSP..78..265V . doi : 10.1016/j.chemosphere.2009.10.060 . PMID   19954813 .
  11. ^ Valkirs GE, Barton R (сентябрь 1985 г.). «Иммуноконцентрация-новый формат для твердофазных иммуноанализа» . Клиническая химия . 31 (9): 1427–31. doi : 10.1093/clinchem/31.9.1427 . PMID   4028392 .
  12. ^ «Агентство для реестра токсичных веществ и заболеваний» (PDF) . Архивировано (PDF) из оригинала 30 июля 2004 года.
  13. ^ «Хроническая токсичность» . Science Direct . Амстердам: Elsevier . Получено 2023-10-30 .
  14. ^ Jump up to: а беременный в «Разрешение ограничений по сточной токсичности (мокрой)» . Национальная система устранения сброса загрязняющих веществ (NPDES) . Эпэ 2021-10-11.
  15. ^ Jump up to: а беременный «Методы токсичности целых сточных вод» . Эпэ 2020-08-01.
  16. ^ "О нас" . Вест Коншохокен, Пенсильвания: ASTM International . Получено 2024-07-19 .
  17. ^ Браун-Хоуленд, Эллен Бертон; Бакстер, Терри Э.; Липпс, Уильям С., ред. (2023). Стандартные методы для изучения воды и сточных вод (24 -е изд.). Американская ассоциация общественного здравоохранения. ISBN  978-0-87553-299-8 Полем Также доступен на CD-ROM и онлайн по подписке.
  18. ^ «Ecotox KnowledgeBase» . Дулут, Миннесота: EPA. 2024-06-13.
  19. ^ «Общество экологической токсикологии и химии» . Пенсакола, Флорида . Получено 2018-12-24 .
  20. ^ «Об организации экономического сотрудничества и развития» . Париж, Франция . Получено 2018-12-24 .
  21. ^ «Окружающая среда и изменение климата канадского мандата» . Оттава, Онтарио. 2018-12-10.
  22. ^ Barron, Mace G.; Оттер, Райан Р.; Коннорс, Кристин А.; Kienzler, Aude; Эмбри, Мишель Р. (2021-03-05). «Экологические пороги токсикологической проблемы: обзор» . Границы в токсикологии . 3 : 640183. DOI : 10.3389/ftox.2021.640183 . ISSN   2673-3080 . PMC   8915905 . PMID   35295098 .
  23. ^ Рекомендации по получению численных национальных критериев качества воды для защиты водных организмов и их использования (отчет). Эпэ 1985. PB85-227049.
  24. ^ «Критерии водной жизни и методы токсики» . Эпэ 2023-10-02.
  25. ^ «Рекомендации по качеству отложений, разработанные для национальной программы статуса и тенденций», архивировано 12 июня 2013 года, в The Wayback Machine National Status & Trends, 1999
  26. ^ "Squirt" Национальное управление океанических и атмосферных ресурсов, 2008
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: d1b98372539e7f0f9bf80f1ea2e78862__1724175840
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/d1/62/d1b98372539e7f0f9bf80f1ea2e78862.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Aquatic toxicology - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)