α-кетоизокапроновая кислота

α-кетоизокапроновая кислота
Имена
	Имя IUPAC 4-метил-2-оксопентановая кислота
	Систематическое имя IUPAC 4-метил-2-оксопентановая кислота
	Другие имена 4-метил-2-оксовальная кислота ; 2-кетоизокапроновая кислота ; 2-оксо-4-метилпентановая кислота ; 2-оксо-4-метилвалерская кислота ; 2-оксоизокапроновая кислота ; 2-оксолецин ; Изобутилглиоксиловая кислота ; Кетолецин ; α-кетоизокапроновая кислота ; α-оксоазокапроновая кислота
Идентификаторы
Номер CAS	816-66-0 ;
3D model ( JSmol )	Интерактивное изображение ; Интерактивное изображение ;
3dmet	B00066 ;
Бейльштейн ссылка	1701823
Чеби	Чеби: 48430 ;
Химический	Chembl445647 ;
Chemspider	69 ;
Наркоман	DB03229 ;
Echa Infocard	100.011.304
ЕС номер	212-435-5 ;
Iuphar/bps	4656 ;
Кегг	C00233 ;
Сетка	Альфа-кетоизокапроический+кислота
PubChem CID	70 ;
НЕКОТОРЫЙ	4guj8ah400 ;
Номер	3265
Comptox Dashboard ( EPA )	DTXSID6061157 ;
	показывать Дюймы
	показывать Улыбается
Характеристики
Химическая формула	C 6 H 10 O 3
Молярная масса	130.143 g·mol −1
Плотность	1,055 г см −3 (и 20 ° C)
Точка плавления	От 8 до 10 ° C (от 46 до 50 ° F; 281 до 283 K)
Точка кипения	85 ° C (185 ° F; 358 K) при 13 мм рт.
log p	0.133
Кислотность (p k a )	2.651
Основность (P K B )	11.346
Опасности
	GHS Маркировка :
Пиктограммы
Сигнальное слово	Опасность
Заявления об опасности	H314
МЕРЫ ОФИНАЯ заявления	P260 , P264 , P280 , P301+P330+P331 , P303+P361+P353 , P304+P340 , P305+P351+P338 , P310 , P321 , P363 , P405 , P501
	За исключением случаев, когда отмечены, данные приведены для материалов в их стандартном состоянии (при 25 ° C [77 ° F], 100 кПа). Проверьте ( что есть ?) Infobox ссылки

α-кетоизокапроевая кислота ( α-KIC ), также известная как 4-метил-2-оксовалловая кислота , а ее конъюгатное основание и карбоксилат , α-кетоизокапроат , являются метаболическими промежуточными звенами в метаболическом пути для L -лейцина . ^{[ 2 ]} Лейкин является незаменимой аминокислотой , и ее деградация имеет решающее значение для многих биологических обязанностей. ^{[ 3 ]} α-KIC продуцируется на одном из первых этапов пути аминокислотной аминотрансферой разветвленной цепи путем переноса амина на L-Leacine на альфа-кетоглутарат и заменив этот амин на кетон . Разрушение L-Leacine в мышцах производить аминокислоты аланина и глутамата . в этом соединении позволяет также В печени α-KIC может быть преобразован в огромное количество соединений в зависимости от присутствующих ферментов и кофакторов , включая холестерин , ацетил-КоА , изовалерил-КоА и другие биологические молекулы. Isovaleryl-CoA является основным соединением, синтезированным от KIC. ^{[ 4 ]}^{[ 5 ]}^{[ 6 ]} α-KIC является ключевым метаболитом, присутствующим в моче людей с болезнью мочи кленового сиропа , наряду с другими аминокислотами разветвленной цепи . ^{[ 7 ]} Производные α-KIC были изучены у людей на предмет их способности улучшать физическую работоспособность во время анаэробных упражнений в качестве дополнительного моста между краткосрочными и долгосрочными упражнениями. Эти исследования показывают, что α-KIC не достигает этой цели без других эргогенных добавок. ^{[ 8 ]} Также наблюдалось также, что α-KIC уменьшает повреждение скелетных мышц после эксцентрически предвзятых упражнений с сопротивлением у людей, которые обычно не выполняют эти упражнения. ^{[ 9 ]}

Биологическая активность

Добавки

α-KIC изучался в качестве пищевой добавки , чтобы помочь в эффективности напряженной физической активности. Исследования показали, что принятие KIC и его производных до острой физической активности привели к увеличению мышечной работы на 10%, а также к снижению мышечной усталости во время ранней фазы физической активности. ^{[ 8 ]} При взятии с другими добавками в течение двухнедельного периода, таких как бета-гидрокси бета-метилбутират (HMB), участники сообщили о отложенном начале мышечной болезненности , а также другие положительные эффекты, такие как увеличение мышечного обхвата. ^{[ 9 ]} Важно отметить, что исследования также предполагают, что в одиночку, взятое в одиночку, не оказали какого-либо значительного положительного воздействия на физическую работоспособность, поэтому их следует принимать в сочетании с другими эргогенными веществами. ^{[ 10 ]} ɑ-KIC не доступен в качестве добавки самостоятельно, но его декарбоксилированная форма HMB доступна в капсулах кальциевой соли или порошка. ^{[ 4 ]}

Приложения

Биохимические последствия α-KIC в значительной степени связаны с другими биохимическими путями . Было отмечено, что синтез белка скелетных мышц , регенерация и протеолиз скелетных мышц все изменяется, когда принимается. Существует не так много исследований конкретных механизмов, принимающих участие в этих процессах, но существует заметная корреляция между проглатыванием KIC и повышенным синтезом белка скелетных мышц, регенерации и протеолиза. ^{[ 4 ]}

Токсичность

Многочисленные исследования показали, что не было никаких побочных эффектов на людей, а также животных, которые проглатывали α-KIC или HMB. ^{[ 11 ]}^{[ 12 ]}

У пациентов с болезнью мочи кленового сиропа , которые не могут метаболизировать разветвленную цепь альфа-кетокислоты, α-KIC считается одним из ключевых медиаторов нейротоксичности. ^{[ 13 ]}

Медицинское использование

Альфа-кето кислоты разветвленной цепи, такие как α-KIC, обнаружены в высоких концентрациях в моче людей, страдающих от заболевания мочи кленового сиропа. Это заболевание вызвано частичной дефицитом дегидрогеназы в альфа-кето-кето-кето , что приводит к накоплению альфа-кето кислот разветвленной цепь, включая α-KIC и HMB. ^{[ 14 ]} Эти кетокиды накапливаются в печени , ^{[ 4 ]}^{[ 5 ]}^{[ 6 ]} И поскольку может быть получена ограниченная изовалерил-COA, эти кетокислоты должны быть выделены в моче в виде α-KIC, HMB и многих других подобных кето-кислот . Рассказы у людей, имеющих такое состояние, вызваны плохой питанием. ^{[ 7 ]} Симптомы заболевания мочи кленового сиропа включают сладкую пахнущую мочу, раздражительность , летаргию , а в серьезных случаях отек мозга, апноэ , комы или дыхательной недостаточности . ^{[ 14 ]}^{[ 7 ]} Лечение включает в себя снижение потребления лейцина и специализированную диету, чтобы компенсировать отсутствие проглатывания лейцина. ^{[ 7 ]}

Лейциновый метаболизм

Метаболизм лейцина у людей

L -Leucine

Разветвленная цепь амино
кислотная аминотрансфераза

Мышца : α-кетоизокапроат (α-KIC)

Печень : α-кетоизокапроат (α-KIC)

Α-кетоцид разветвленной цепи
дегидрогеназа ( митохондрия )

Кик-диоксигеназа
( Cytosol )

Isovaleryl-coa

β-гидрокси
β-метилбутират
( HMB )

Выводится
в моче
(10–40%)

HMB-COA

β-гидрокси β-метилглютарил-CoA
(HMG-COA)

β-метилкротонил-КоА
(MC-COA)

β-метилглютаконил-КоА
(MG-CO)

( печень )
HMG-COA
Лайаз

Enoyl-CoA гидратаза

Isovaleryl-coa
дегидрогеназа

β-гидроксибутират
дегидрогеназа

Неизвестный
фермент

Человеческий метаболический путь для HMB и Isovaleryl -COA относительно L -лейцина . ^{[ 2 ]}^{[ 15 ]}^{[ 16 ]} Из двух основных путей L -лейцин в основном метаболизируется в изовалерил -COA, в то время как только около 5% метаболизируется в HMB. ^{[ 2 ]}^{[ 15 ]}^{[ 16 ]}

Ссылки

^ CID 70 из Pubchem
^ Jump up to: ^а ^{беременный} ^в Уилсон Дж. М., Фитшен П.Дж., Кэмпбелл Б., Уилсон Г.Дж., Занчи Н., Тейлор Л., Уилборн С., Калман Д.С., Стаут Дж.Р., Хоффман младший, Зигенфусс Т.Н., Лопес Х.Л., Крейдер Р.Б., Смит-Райан А.Е., Антонио Дж. (Февраль 2013). «Стенд международного общества спортивного питания: бета-гидрокси-бета-метилбутират (HMB)» . Журнал Международного общества спортивного питания . 10 (1): 6. doi : 10.1186/1550-2783-10-6 . PMC 3568064 . PMID 23374455 .
^ «Лейкин» .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} Уилсон, Джейкоб М.; Fitchen, Peter J.; Кэмпбелл, Билл; Уилсон, Габриэль Дж.; Занчи, Нело; Тейлор, Лем; Уилборн, Колин; Калман, Дуглас С.; Стаут, Джеффри Р.; Хоффман, Джей Р.; Ziegenfuss, Tim N.; Лопес, Гектор Л.; Крейдер, Ричард Б.; Смит-Райан, Эбби Э.; Антонио, Хосе (2 февраля 2013 г.). «Стенд международного общества спортивного питания: бета-гидрокси-бета-метилбутират (HMB)» . Журнал Международного общества спортивного питания . 10 (1): 6. doi : 10.1186/1550-2783-10-6 . PMC 3568064 . PMID 23374455 .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} Занчи, Нело Эйди; Герлингер-Ромеро, Фредерико; Гимарас-Феррейра, Лукас; Де Сикейра Филхо, Марио Алвес; Фелитти, Витор; Лира, Фабио Сантос; Seelaender, Marília; Лэнк, Антонио Герберт (апрель 2011 г.). «Дополнение HMB: клинические и спортивные эффекты, связанные с эффективностью и механизмы действия» . Амино несчастные случаи . 40 (4): 1015–1025. Doi : 10.1007/s00726-010-0678-0 . PMID 20607321 . S2CID 11120110 .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} Kohlmeier, M (май 2015). «Лейкин». Метаболизм питательных веществ: структуры, функции и гены (2 -е изд.). Академическая пресса. С. 385–388. ISBN 978-0-12-387784-0 .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} Штраус, Кевин А; Puffenberger, Erik G; Карсон, Винсент Дж. (1993). «Болезнь мочи кленового сиропа» . GenereViews . Университет Вашингтона, Сиэтл.
^ Jump up to: ^а ^{беременный} Стивенс, Брюс Р. (2013). «Обзор глицин-аргинин-альфа-кетоизокапроновой кислоты (GAKIC) в спортивном питании». Питание и улучшение спортивных результатов . С. 433–438. doi : 10.1016/b978-0-12-396454-0.00044-8 . ISBN 978-0-12-396454-0 .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} Сомерен, Кен А. Ван; Эдвардс, Адам Дж.; Хотсон, Глин (1 августа 2005 г.). «Добавка с β-гидрокси-β-метилбутиратом (HMB) и α-кетоизокаповой кислотой (KIC) снижает признаки и симптомы повреждения мышц, вызванного физическими упражнениями у человека». Международный журнал спортивного питания и метаболизма физических упражнений . 15 (4): 413–424. doi : 10.1123/ijsnem.15.4.413 . PMID 16286672 .
^ Ярроу, Джошуа Ф; Парр, Джеффри Дж; Белый, Лесли Дж; Борса, Пол А; Стивенс, Брюс Р. (декабрь 2007 г.). «Влияние кратковременного добавления альфа-кетоизокапроновой кислоты на производительность физических упражнений: рандомизированное контролируемое исследование» . Журнал Международного общества спортивного питания . 4 (1): 2. DOI : 10.1186/1550-2783-4-2 . PMC 2042499 . PMID 17908285 .
^ Nissen, S.; Острый, RL; Panton, L.; Vukovich, M.; Trappe, S.; Фуллер, JC (1 августа 2000 г.). «Приложение β-гидрокси-β-метилбутирата (HMB) у людей безопасно и может снизить сердечно-сосудистые факторы риска» . Журнал питания . 130 (8): 1937–1945. doi : 10.1093/jn/130.8.1937 . PMID 10917905 .
^ Бакстер, JH; Карлос, JL; Thurmond, J.; Рехани, Рн; Bultman, J.; Фрост, Д. (декабрь 2005 г.). «Пищевая токсичность кальциевого β-гидрокси-β-метилотирата (CAHMB)». Пищевая и химическая токсикология . 43 (12): 1731–1741. doi : 10.1016/j.fct.2005.05.016 . PMID 16006030 .
^ Зиннанти, Уильям Дж.; Лазович, Елена (2012). «Прерывание механизмов травмы головного мозга в модели энцефалопатии мочи кленового сиропа» . Журнал наследственного метаболического заболевания . 35 (1): 71–79. doi : 10.1007/s10545-011-9333-5 . PMID 21541722 . S2CID 1253267 .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} Штраус, Кевин А.; Уордли, Бриджит; Робинсон, Донна; Хендриксон, Кристина; Райдер, Николас Л.; Pufupenberger, Erik G.; Шелмер, Диана; Moser, Ann B.; Мортон, Д. Холмс (апрель 2010 г.). «Классический кленовый сироп болезнь мочи и развитие мозга: принципы управления и конструкции формул» . Молекулярная генетика и метаболизм . 99 (4): 333–345. doi : 10.1016/j.ymgme.2009.12.007 . PMC 3671925 . PMID 20061171 .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} Занчи Н.Е., Герлингер-Ромеро Ф., Гимарас-Феррейра Л., Де Сикера Филхо М.А., Фелитти В., Лира Ф.С., Силадер М., Ланча А.Х. (апрель 2011 г.). «Дополнение HMB: клинические и спортивные эффекты, связанные с эффективностью и механизмы действия» . Аминокислоты . 40 (4): 1015–1025. doi : 10.1007/s00726-010-0678-0 . PMID 20607321 . S2CID 11120110 . HMB является метаболитом аминокислотного лейцина (Van Koverin and Nissen 1992), незаменимой аминокислоты. Первым шагом в метаболизме HMB является обратимое трансамирование лейцина к [α-KIC], которое происходит в основном внеагипатически (Block and Buse 1990). После этой ферментативной реакции [α-KIC] может следовать одним из двух путей. Во-первых, HMB продуцируется из [α-KIC] цитозольным ферментом диоксигеназы KIC (Sabourin and Bieber 1983). Цитозольная диоксигеназа была широко охарактеризована и отличается от митохондриальной формы тем, что фермент диоксигеназы является цитозольным ферментом, тогда как фермент дегидрогеназы обнаруживается исключительно в митохондрионе (Sabourin and Bieber 1981, 1983). Важно отметить, что этот путь формации HMB является прямым и полностью зависимым от диоксигеназы печени. После этого пути HMB в цитозоле сначала превращается в цитозольный β-гидрокси-β-метилглютарил-CoA (HMG-COA), который затем может быть направлен на синтез холестерина (Rudney 1957) (рис. 1). Фактически, многочисленные биохимические исследования показали, что HMB является предшественником холестерина (Zabin and Bloch 1951; Nissen et al. 2000).
^ Jump up to: ^а ^{беременный} Kohlmeier M (май 2015). «Лейкин» . Метаболизм питательных веществ: структуры, функции и гены (2 -е изд.). Академическая пресса. С. 385–388. ISBN 978-0-12-387784-0 Полем Получено 6 июня 2016 года . Энергетическое топливо: в конце концов, большая часть LEU разбивается, обеспечивая около 6,0 ккал/г. Около 60% употреблений в проглоте
Рисунок 8.57: Метаболизм L -лейцина

[1] CID 70 из Pubchem

[ISSN_position_stand_2013-2] Jump up to: ^а ^{беременный} ^в Уилсон Дж. М., Фитшен П.Дж., Кэмпбелл Б., Уилсон Г.Дж., Занчи Н., Тейлор Л., Уилборн С., Калман Д.С., Стаут Дж.Р., Хоффман младший, Зигенфусс Т.Н., Лопес Х.Л., Крейдер Р.Б., Смит-Райан А.Е., Антонио Дж. (Февраль 2013). «Стенд международного общества спортивного питания: бета-гидрокси-бета-метилбутират (HMB)» . Журнал Международного общества спортивного питания . 10 (1): 6. doi : 10.1186/1550-2783-10-6 . PMC 3568064 . PMID 23374455 .

[3] «Лейкин» .

[Wilson1-4] Jump up to: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} Уилсон, Джейкоб М.; Fitchen, Peter J.; Кэмпбелл, Билл; Уилсон, Габриэль Дж.; Занчи, Нело; Тейлор, Лем; Уилборн, Колин; Калман, Дуглас С.; Стаут, Джеффри Р.; Хоффман, Джей Р.; Ziegenfuss, Tim N.; Лопес, Гектор Л.; Крейдер, Ричард Б.; Смит-Райан, Эбби Э.; Антонио, Хосе (2 февраля 2013 г.). «Стенд международного общества спортивного питания: бета-гидрокси-бета-метилбутират (HMB)» . Журнал Международного общества спортивного питания . 10 (1): 6. doi : 10.1186/1550-2783-10-6 . PMC 3568064 . PMID 23374455 .

[Zanchi1-5] Jump up to: ^а ^{беременный} Занчи, Нело Эйди; Герлингер-Ромеро, Фредерико; Гимарас-Феррейра, Лукас; Де Сикейра Филхо, Марио Алвес; Фелитти, Витор; Лира, Фабио Сантос; Seelaender, Marília; Лэнк, Антонио Герберт (апрель 2011 г.). «Дополнение HMB: клинические и спортивные эффекты, связанные с эффективностью и механизмы действия» . Амино несчастные случаи . 40 (4): 1015–1025. Doi : 10.1007/s00726-010-0678-0 . PMID 20607321 . S2CID 11120110 .

[Kohlmeier1-6] Jump up to: ^а ^{беременный} Kohlmeier, M (май 2015). «Лейкин». Метаболизм питательных веществ: структуры, функции и гены (2 -е изд.). Академическая пресса. С. 385–388. ISBN 978-0-12-387784-0 .

[NBK1319-7] Jump up to: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} Штраус, Кевин А; Puffenberger, Erik G; Карсон, Винсент Дж. (1993). «Болезнь мочи кленового сиропа» . GenereViews . Университет Вашингтона, Сиэтл.

[Stevens1-8] Jump up to: ^а ^{беременный} Стивенс, Брюс Р. (2013). «Обзор глицин-аргинин-альфа-кетоизокапроновой кислоты (GAKIC) в спортивном питании». Питание и улучшение спортивных результатов . С. 433–438. doi : 10.1016/b978-0-12-396454-0.00044-8 . ISBN 978-0-12-396454-0 .

[Van1-9] Jump up to: ^а ^{беременный} Сомерен, Кен А. Ван; Эдвардс, Адам Дж.; Хотсон, Глин (1 августа 2005 г.). «Добавка с β-гидрокси-β-метилбутиратом (HMB) и α-кетоизокаповой кислотой (KIC) снижает признаки и симптомы повреждения мышц, вызванного физическими упражнениями у человека». Международный журнал спортивного питания и метаболизма физических упражнений . 15 (4): 413–424. doi : 10.1123/ijsnem.15.4.413 . PMID 16286672 .

[10] Ярроу, Джошуа Ф; Парр, Джеффри Дж; Белый, Лесли Дж; Борса, Пол А; Стивенс, Брюс Р. (декабрь 2007 г.). «Влияние кратковременного добавления альфа-кетоизокапроновой кислоты на производительность физических упражнений: рандомизированное контролируемое исследование» . Журнал Международного общества спортивного питания . 4 (1): 2. DOI : 10.1186/1550-2783-4-2 . PMC 2042499 . PMID 17908285 .

[11] Nissen, S.; Острый, RL; Panton, L.; Vukovich, M.; Trappe, S.; Фуллер, JC (1 августа 2000 г.). «Приложение β-гидрокси-β-метилбутирата (HMB) у людей безопасно и может снизить сердечно-сосудистые факторы риска» . Журнал питания . 130 (8): 1937–1945. doi : 10.1093/jn/130.8.1937 . PMID 10917905 .

[12] Бакстер, JH; Карлос, JL; Thurmond, J.; Рехани, Рн; Bultman, J.; Фрост, Д. (декабрь 2005 г.). «Пищевая токсичность кальциевого β-гидрокси-β-метилотирата (CAHMB)». Пищевая и химическая токсикология . 43 (12): 1731–1741. doi : 10.1016/j.fct.2005.05.016 . PMID 16006030 .

[13] Зиннанти, Уильям Дж.; Лазович, Елена (2012). «Прерывание механизмов травмы головного мозга в модели энцефалопатии мочи кленового сиропа» . Журнал наследственного метаболического заболевания . 35 (1): 71–79. doi : 10.1007/s10545-011-9333-5 . PMID 21541722 . S2CID 1253267 .

[Strauss1-14] Jump up to: ^а ^{беременный} Штраус, Кевин А.; Уордли, Бриджит; Робинсон, Донна; Хендриксон, Кристина; Райдер, Николас Л.; Pufupenberger, Erik G.; Шелмер, Диана; Moser, Ann B.; Мортон, Д. Холмс (апрель 2010 г.). «Классический кленовый сироп болезнь мочи и развитие мозга: принципы управления и конструкции формул» . Молекулярная генетика и метаболизм . 99 (4): 333–345. doi : 10.1016/j.ymgme.2009.12.007 . PMC 3671925 . PMID 20061171 .

[HMB_athletic_performance-related_effects_2011_reviewb-15] Jump up to: ^а ^{беременный} Занчи Н.Е., Герлингер-Ромеро Ф., Гимарас-Феррейра Л., Де Сикера Филхо М.А., Фелитти В., Лира Ф.С., Силадер М., Ланча А.Х. (апрель 2011 г.). «Дополнение HMB: клинические и спортивные эффекты, связанные с эффективностью и механизмы действия» . Аминокислоты . 40 (4): 1015–1025. doi : 10.1007/s00726-010-0678-0 . PMID 20607321 . S2CID 11120110 . HMB является метаболитом аминокислотного лейцина (Van Koverin and Nissen 1992), незаменимой аминокислоты. Первым шагом в метаболизме HMB является обратимое трансамирование лейцина к [α-KIC], которое происходит в основном внеагипатически (Block and Buse 1990). После этой ферментативной реакции [α-KIC] может следовать одним из двух путей. Во-первых, HMB продуцируется из [α-KIC] цитозольным ферментом диоксигеназы KIC (Sabourin and Bieber 1983). Цитозольная диоксигеназа была широко охарактеризована и отличается от митохондриальной формы тем, что фермент диоксигеназы является цитозольным ферментом, тогда как фермент дегидрогеназы обнаруживается исключительно в митохондрионе (Sabourin and Bieber 1981, 1983). Важно отметить, что этот путь формации HMB является прямым и полностью зависимым от диоксигеназы печени. После этого пути HMB в цитозоле сначала превращается в цитозольный β-гидрокси-β-метилглютарил-CoA (HMG-COA), который затем может быть направлен на синтез холестерина (Rudney 1957) (рис. 1). Фактически, многочисленные биохимические исследования показали, что HMB является предшественником холестерина (Zabin and Bloch 1951; Nissen et al. 2000).

[Leucine_metabolism-16] Jump up to: ^а ^{беременный} Kohlmeier M (май 2015). «Лейкин» . Метаболизм питательных веществ: структуры, функции и гены (2 -е изд.). Академическая пресса. С. 385–388. ISBN 978-0-12-387784-0 Полем Получено 6 июня 2016 года . Энергетическое топливо: в конце концов, большая часть LEU разбивается, обеспечивая около 6,0 ккал/г. Около 60% употреблений в проглоте
Рисунок 8.57: Метаболизм L -лейцина

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]

[ 7 ]

[ 8 ]

[ 9 ]

[ 10 ]

[ 11 ]

[ 12 ]

[ 13 ]

[ 14 ]

[ 15 ]

[ 16 ]