Неструктурный белок вируса гепатита С 5а
Неструктурный белок 5A ( NS5A ) представляет собой цинк-связывающий и богатый пролином гидрофильный фосфопротеин , который играет ключевую роль в гепатита С. репликации РНК вируса [ 1 ] [ 2 ] Похоже, это димерная форма без транс -мембранных спиралей. [ 3 ]
Структура
[ редактировать ]NS5A получен из большого полипротеина, который транслируется из генома HCV, и подвергается посттрансляционной обработке Нонтруктурного белка 3 (NS3) . вирусной протеазой [ 4 ] Несмотря на то, что нет присущей ферментативной активности, приписывая NS5A, ее функция опосредована взаимодействием с другими неструктурными (NS) вирусными и клеточными белками. [ 2 ] [ 4 ] NS5A имеет две фосфорилированные формы: P56 и P58, которые различаются по электрофоретической подвижности. [ 3 ] P56 в основном фосфорилируется клеточной протеинкиназой-хозяином в центре и вблизи C-конца, тогда как p58 является формой гиперфосфорилированного NS5A в центре богатой серином области. [ 3 ] Массовая спектрометрия белка идентифицировала несколько фосфорилированных сериновых остатков в этой области, включая серин 225, 229, 232 и 235, ответственные за гиперфосфорилирование NS5A. [ 5 ] Массив фосфорилирования антител подтвердил их фосфорилирование в инфицированных клетках. [ 6 ] [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ] Было предсказано, что N-концевая 30 AA NS5A образует амфипатическую α-спираль с высоко сохранившейся особенностью, которая необходима для модуляции связи между мембраной NS5A и ER . [ 3 ] [ 4 ] Сообщалось, что определяющая область определения IFN (ISDR) на С-конце NS5A выполняет сильные транс -фактивирующие активности, что позволяет предположить, что NS5A, вероятно, функционирует в качестве активатора транскрипции . [ 3 ]
NS5A имеет три структурно разных домена: домен I был продемонстрирован как альтернативная димерная структура по кристаллографии , в то время как домен II и III оставался разворачиваемыми. [ 1 ] Кроме того, конформационная гибкость NS5A играет важную роль в множественных этапах инфекции ВГС. [ 1 ] Также возможно, что NS5A является критическим компонентом во время репликации HCV и субклеточной локализации, что может пролить свет на плохо изученный жизненный цикл HCV. [ 1 ] [ 4 ] Кроме того, было показано, что NS5A модулирует полимеразную активность NS5B , РНК-зависимой РНК-полимеразы (RDRP) . [ 3 ] Интересно, что NS5A может быть РНК -связывающим белком , потому что он способен связываться с 3'UTR плюс и минус РНК HCV цепей HCV. [ 3 ] Кроме того, NS5A является ключевым посредником в регуляции функции клеток -хозяина и активности при инфекции ВГС . [ 4 ] Следовательно, NS5A широко изучался в исследованиях HCV также благодаря его способности регулировать реакцию интерферона (IFN) клеток -хозяев. Поскольку NS5A оказывает функционально существенное влияние на регуляцию репликации вируса, сборки и выхода, он считался потенциальной лекарственной мишенью для противовирусного терапевтического вмешательства. [ 1 ] [ 4 ] Действительно, мелкие молекулярные препараты, эффективно нацеленные на NS5A, демонстрировали гораздо более высокую активность в борьбе с инфекцией ВГС, чем другие лекарства. [ 1 ] Таким образом, исследования NS5A, связанные с NS5A, будут иметь важные последствия для конструкции лекарственного средства для одной молекулы и комбинированной антивирусной (DAA) бесконечной антивирусной (DAA). [ 1 ]
Как цель наркотиков
[ редактировать ]Многие противовирусные препараты нацелены на NS5A, например, для лечения гепатита С ; Они часто описываются как ингибиторы NS5A , и они часто используются в сочетании с ингибиторами NS5B :
- FDA одобрено:
- Ledipasvir , одобренная 10 октября 2014 года в комбинации с фиксированной дозой (FDC) с Sofosbuvir
- Ombitasvir , одобренная 19 декабря 2014 года в FDC с Paritaprevir и Ritonavir, соавтором Dasabuvir
- Даклатасвир , утвержден 24 июля 2015 года
- Эльбасвир , утвержденный 28 января 2016 года в FDC с Grazoprevir
- Velpatasvir , утвержденный 28 июня 2016 года в FDC с Софосбувиром и 17 июля 2017 года в FDC с Софосбувиром и Воксилапревиром
- Pibrentasvir , одобренный 3 августа 2017 года в FDC с Glecaprevir
- Исследовательские препараты:
Внутригенная комплементация
[ редактировать ]Многочисленные копии полипептида, кодируемого геном, часто могут образовывать агрегат, называемый мультимером. Когда мультимер образуется из полипептидов, продуцируемых двумя разными мутантными аллелями определенного гена, смешанный мультимер может проявлять большую функциональную активность, чем несмешиваемые мультимеры, образованные каждым из мутантов. Когда смешанный мультимер демонстрирует повышенную функциональность по сравнению с несмешиваемыми мультимерами, это явление называется внутригенной комплементацией . [ Цитация необходима ]
Белок NS5A является мультимером, в этом случае димер, и внутриагенная комплементация аллелей NS5A, дефектных репликации, была продемонстрирована Fridell et al. [ 10 ] На основаниях парных тестов на комплементацию между различными мутантными аллелями NS5A они идентифицировали три группы комплементации, которые, как считалось, определяют три различные и генетически разделяемые функции NS5A в репликации РНК .
Смотрите также
[ редактировать ]Ссылки
[ редактировать ]- ^ Jump up to: а беременный в дюймовый и фон глин Белда, о; Targett-Adams, P (2012). «Маленькие ингибиторы молекулы белка NS5A, кодированного вирусом гепатита С». Исследование вируса . 170 (1–2): 1–14. doi : 10.1016/j.virusres.2012.09.007 . PMID 23009750 .
- ^ Jump up to: а беременный Хуан, у; Staschke, K; Де Франческо, R; Тан, С.Л. (2007). «Фосфорилирование вируса гепатита С НС5A-белка: новая парадигма для репликации вирусной РНК-зависимой от фосфорилирования?». Вирусология . 364 (1): 1–9. doi : 10.1016/j.virol.2007.01.042 . HDL : 2434/662845 . PMID 17400273 .
- ^ Jump up to: а беременный в дюймовый и фон глин Макдональд, а; Харрис, М. (2004). «Вирус гепатита С NS5A: рассказы о беспорядочном белке» . Журнал общей вирусологии . 85 (Pt 9): 2485–502. doi : 10.1099/vir.0.80204-0 . PMID 15302943 .
- ^ Jump up to: а беременный в дюймовый и фон Привет; Сташке, Ка; Тан, Sl; Тан, С.Л. (2006). «HCV NS5A: многофункциональный регулятор клеточных путей и репликации вирусов». Вирусы гепатита С: геномы и молекулярная биология . Горизонт Биоссаука. ISBN 978-1-904933-20-5 Полем PMID 21250384 . Получено 8 января 2021 года .
- ^ Чонг, Венг Человек; Hsu, Shih-chin; Као, WeiTing; Ло, Чи-Вэнь; Ли, Куань-ий; Шао, Jheng-Syuan; Чен, И-Ханг; Чанг, Джастин; Чен, Стив С.-Л.; Ю, Мин-Джиун (2016-02-19). «Фосфопротеомика выявила сайт фосфорилирования NS5A, участвующий в репликации вируса гепатита С» . Журнал биологической химии . 291 (8): 3918–3931. doi : 10.1074/jbc.m115.675413 . ISSN 1083-351X . PMC 4759171 . PMID 26702051 .
- ^ Hsu, Shih-chin; Ло, Чи-Вэнь; Пан, Тинг-чун; Ли, Куань-ий; Ю, Мин-Джиун (2017-07-15). «Serine 235 является основным сайтом гиперфосфорилирования NS5A, ответственным за репликацию вируса гепатита С» . Журнал вирусологии . 91 (14). doi : 10.1128/jvi.00194-17 . ISSN 1098-5514 . PMC 5487554 . PMID 28446668 .
- ^ Hsu, Shih-chin; Цай, Чиа-Ни; Ли, Куань-ий; Пан, Тинг-чун; Ло, Чи-да; Ю, Мин-Джиун (2018-10-15). «Сексуантрительное фосфорилирование S232/S235/S238 вируса гепатита С нозмурным белком 5а » Журнал вирусологии 92 (20). Doi : 10.1128/ jvi.01295-1 ISSN 1098-5 PMC 6158444 PMID 30089697
- ^ Цай, ЦРУ-Ни; Pan, Ting-Cnn; Чанг, CH-HAN; Ю, Чун-Чиао; Су, Ши-Хан; Ю, Мин-Джин (2019-12-01). Это гиперфорилированные состояния . Журнал вирусологии 93 (23). doi : 10.1128/ jvi.01028-1 ISSN 1098-5514 . PMC 6854479 . PMID 31511391 .
- ^ Чиан, Чо-Хан; Лай, Йен-Линг; Huang, Yu-ren; Ю, Чун-Чиао; Лу, Кристина С.; Ю, Гуан-Йи; Ю, Мин-Джиун (2020-09-15). «Последовательное фосфорилирование вируса гепатита С белка NS5A зависит от NS3-опосредованного автоклеавации между NS3 и NS4A» . Журнал вирусологии . 94 (19). doi : 10.1128/jvi.00420-20 . ISSN 1098-5514 . PMC 7495366 . PMID 32699091 .
- ^ Fridell RA, Valera L, Qiu D, Kirk MJ, Wang C, Gao M. Внутригенная комплементация вируса гепатита C NS5A РНК-дефектные аллели. J Virol. 2013; 87 (4): 2320-2329. doi: 10.1128/jvi.02861-12