✖


Jump to content

Дифференциал лейкоцитов

Это хорошая статья. Нажмите здесь для получения дополнительной информации.

Дифференциал лейкоцитов
Нейтрофилы (слева) и лимфоциты (справа) под микроскопом в мазке крови.
Нейтрофилы (слева) и лимфоциты (справа) под микроскопом в мазке крови.
Синонимы Дифференциальный подсчет лейкоцитов, [ 1 ] лейкограмма, [ 2 ] автодифференциал, [ 3 ] ручной дифференциал [ 1 ]
Цель Описание популяций лейкоцитов в периферической крови.
Медлайн Плюс 003657
электронная медицина 2085133
ЛОИНК 33255-1 , 24318-8 , 69738-3

Дифференциальный анализ лейкоцитов — это медицинский лабораторный тест, который предоставляет информацию о типах и количестве лейкоцитов в крови человека. Тест, который обычно назначается в рамках общего анализа крови (ОАК), измеряет количество пяти нормальных типов лейкоцитов – нейтрофилов , лимфоцитов , моноцитов , эозинофилов и базофилов – а также аномальных типов клеток, если они присутствуют. . Эти результаты представлены в процентах и ​​абсолютных значениях и сравниваются с референтными диапазонами, чтобы определить, являются ли значения нормальными, низкими или высокими. Изменения количества лейкоцитов могут помочь в диагностике многих заболеваний, включая вирусные , бактериальные и паразитарные инфекции, а также заболевания крови , такие как лейкемия .

Дифференциал лейкоцитов может быть выполнен с помощью автоматического анализатора – машины, предназначенной для проведения лабораторных тестов – или вручную, путем исследования мазков крови под микроскопом. Тест проводился вручную до тех пор, пока в 1970-х годах не были представлены дифференциальные анализаторы лейкоцитов, что сделало возможным автоматизированный дифференциальный анализ . При автоматизированном дифференциальном анализаторе образец крови загружается в анализатор, который отбирает небольшой объем крови и измеряет различные свойства лейкоцитов для получения дифференциального подсчета. Ручная дифференциальная диагностика , при которой лейкоциты подсчитываются на окрашенном предметном стекле микроскопа, теперь выполняется для исследования аномальных результатов автоматической дифференциальной диагностики или по запросу поставщика медицинских услуг. Ручная дифференциация позволяет идентифицировать типы клеток, которые не подсчитываются автоматизированными методами, и обнаружить клинически значимые изменения внешнего вида лейкоцитов.

В 1674 году Антони ван Левенгук опубликовал первые микроскопические наблюдения клеток крови. Усовершенствования в технологии микроскопа на протяжении 18 и 19 веков позволили идентифицировать и подсчитать три клеточных компонента крови. В 1870-х годах Пауль Эрлих изобрел технику окрашивания, позволяющую различать каждый тип лейкоцитов. Дмитрий Леонидович Романовский позже модифицировал окраску Эрлиха, чтобы получить более широкий диапазон цветов, создав окраску Романовского , которая до сих пор используется для окрашивания мазков крови для ручных дифференциальных исследований.

Автоматизация дифференциального анализа лейкоцитов началась с изобретения счетчика Коултера , первого автоматического гематологического анализатора , в начале 1950-х годов. Эта машина использовала измерения электрического импеданса для подсчета клеток и определения их размеров, что позволило подсчитать белые и красные кровяные тельца. В 1970-х годах были разработаны два метода автоматического дифференциального подсчета: цифровая обработка изображений предметных стекол и методы проточной цитометрии с использованием светорассеяния и окрашивания клеток. Эти методы по-прежнему используются в современных гематологических анализаторах.

Пример дифференциальных эталонных диапазонов WBC [ 4 ]
Тип ячейки Взрослый
эталонный диапазон
(× 10 9 /Л) 		Взрослый
эталонный диапазон
(в процентах)
Нейтрофилы 1.7–7.5 50–70
Лимфоциты 1.0–3.2 18–42
Моноциты 0.1–1.3 2–11
Эозинофилы 0.0–0.3 1–3
Базофилы 0.0–0.2 0–2

Дифференциальный анализ лейкоцитов — это общий анализ крови, который часто назначают вместе с общим анализом крови . Тест может быть проведен в рамках планового медицинского осмотра ; исследовать определенные симптомы, особенно те, которые указывают на инфекцию или гематологические нарушения ; [ 5 ] [ 6 ] или для мониторинга существующих состояний, таких как заболевания крови и воспалительные заболевания. [ 7 ]

В крови обычно обнаруживаются пять типов лейкоцитов: нейтрофилы , лимфоциты , моноциты , эозинофилы и базофилы . [ 8 ] Заметные изменения в пропорциях этих типов клеток, измеренные с помощью автоматического или ручного дифференциала, могут указывать на различные состояния здоровья. [ 9 ] типы клеток, которые обычно не встречаются в крови, например бластные клетки Кроме того, с помощью ручного дифференциала можно идентифицировать . Эти типы клеток могут быть обнаружены при заболеваниях крови и других патологических состояниях. [ 10 ] [ 11 ] Ручной дифференциал также может выявить изменения во внешнем виде лейкоцитов, таких как реактивные лимфоциты , [ 12 ] или такие особенности, как токсическая грануляция и вакуолизация нейтрофилов. [ 13 ] Результаты дифференциального анализа лейкоцитов представлены в процентах и ​​абсолютных значениях. Абсолютное количество обычно выражается в единицах клеток на микролитр (мкл) или 10. 9 клеток на литр (л). [ 6 ] Затем результаты сравниваются с референсными диапазонами , которые определяются отдельными лабораториями и могут варьироваться в зависимости от разных групп пациентов и методов тестирования. [ 14 ]

Общий анализ крови и дифференциальное тестирование обычно проводятся на венозной или капиллярной крови. Забор капиллярной крови обычно используется у младенцев и людей, у которых доступ к венам затруднен. [ 15 ] Чтобы предотвратить образование тромбов , образец помещают в пробирку, содержащую антикоагулянтное соединение этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА). [ 16 ] , что означает кровь, которая не была центрифугирована . [ 17 ]

Типы

[ редактировать ]

Ручной дифференциал

[ редактировать ]
Реактивные лимфоциты при инфекционном мононуклеозе
Ручной дифференциальный метод позволяет классифицировать клетки на основе незначительных изменений внешнего вида, например, реактивных лимфоцитов, наблюдаемых у человека с инфекционным мононуклеозом .

При ручном дифференциальном методе окрашенный мазок крови исследуют под микроскопом, подсчитывают и классифицируют лейкоциты по их внешнему виду. Ручная дифференциация обычно выполняется, когда автоматическая дифференциация помечена для проверки или когда поставщик медицинских услуг запрашивает ее. [ 1 ] [ 9 ] Если ручная дифференциальная диагностика показывает результаты, указывающие на определенные серьезные заболевания, такие как лейкемия, мазок крови направляется к врачу (обычно гематологу или патологоанатому ) для подтверждения. [ 1 ]

Процедура

[ редактировать ]
Крупный план оперённого края мазка крови.
Крупный план оперённого края мазка крови.

Мазок крови готовят, помещая каплю крови на предметное стекло микроскопа и используя второе предметное стекло, удерживаемое под углом, чтобы распределить кровь и протянуть ее по предметному стеклу, образуя «растушеванный край», состоящий из одного слоя клеток на конец мазка. [ 18 ] Это можно сделать вручную или с помощью автоматического устройства для изготовления слайдов, соединенного с гематологическим анализатором. Препарат обрабатывают краской Романовского, обычно краской Райта или Райта-Гимзы, и исследуют под микроскопом. Мазок исследуют систематически, сканируя из стороны в сторону в пределах размытого края и последовательно подсчитывая клетки. Дифференциал обычно проводится при 400- или 500-кратном увеличении , но при наличии аномальных клеток можно использовать 1000-кратное увеличение. [ 19 ] Клетки идентифицируются на основе их морфологических особенностей, таких как размер и структура ядра, цвет и текстура цитоплазмы. Это позволяет идентифицировать аномальные типы клеток и изменения внешнего вида клеток. [ 8 ] В большинстве случаев микроскопист подсчитывает 100 лейкоцитов, но для лучшего представления можно подсчитать и 200, если количество лейкоцитов высокое. [ 20 ] Ручной дифференциальный подсчет дает процентное содержание каждого типа клеток, которое можно умножить на общее количество лейкоцитов, полученное анализатором, для получения абсолютных значений. [ 21 ]

Ручной дифференциал может быть частично автоматизирован с помощью программного обеспечения для цифровой микроскопии. [ 22 ] которая использует искусственный интеллект для классификации лейкоцитов по микрофотографиям мазков крови. [ 23 ] Однако этот метод требует подтверждения путем проверки вручную. [ 24 ] [ 25 ]

Ограничения

[ редактировать ]

Поскольку при ручном дифференциальном методе подсчитывается относительно небольшое количество клеток, вариабельность выше, чем при автоматизированных методах, особенно когда клетки присутствуют в небольших количествах. [ 26 ] Например, в образце, содержащем 5 процентов моноцитов, результаты ручного дифференциального анализа могут составлять от 1 до 10 процентов из-за различий в выборке . [ 27 ] Кроме того, идентификация клеток является субъективной, и точность зависит от навыков человека, читающего слайд. [ 26 ] [ 28 ] Плохая подготовка мазка крови может вызвать неравномерное распределение лейкоцитов, что приведет к неточным подсчетам. [ 29 ] а неправильное окрашивание может затруднить идентификацию клеток. [ 30 ] В целом, при ручном дифференциальном подсчете коэффициенты вариации (CV) варьируются от 5 до 10 процентов, тогда как при автоматическом дифференциальном подсчете нормальных нейтрофилов и лимфоцитов коэффициент вариации составляет около 3 процентов. [ 30 ]

При лейкозах и других гематологических злокачественных новообразованиях происхождение и генетические характеристики лейкоцитов имеют важное значение для лечения и прогноза, а микроскопический вид клеток часто недостаточен для точной классификации. [ 31 ] [ 14 ] другие методы, такие как иммунофенотипирование с помощью проточной цитометрии или специальное окрашивание. В этих случаях для окончательной идентификации клеток можно использовать [ 32 ]

Автоматизированный дифференциал

[ редактировать ]
Дифференциальная скаттерграмма лейкоцитов
Пример дифференциальной диаграммы рассеяния лейкоцитов: кластеры разного цвета указывают на разные популяции клеток.

Большинство гематологических анализаторов обеспечивают дифференциальный анализ из пяти частей, подсчитывая нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы и базофилы. Некоторые приборы могут также подсчитывать незрелые гранулоциты и ядросодержащие эритроциты . [ 33 ] Если указан дифференциал из шести частей, категория IG или незрелых гранулоцитов состоит из промиелоцитов, миелоцитов и метамиелоцитов. [ 34 ] Гематологические анализаторы измеряют различные свойства лейкоцитов, такие как импеданс, параметры светорассеяния и реакции окрашивания. Эти данные анализируются и наносятся на диаграмму рассеяния , образующую отдельные кластеры, соответствующие типам лейкоцитов. [ 35 ] Анализатор считает гораздо больше клеток, чем при ручном дифференциальном анализе, что приводит к повышению точности. [ 26 ] Если присутствуют аномальные особенности или популяции клеток, которые анализатор не может идентифицировать, прибор может пометить результаты для ручного анализа мазка крови. [ 33 ] [ 35 ]

Процедура

[ редактировать ]
Автоматический гематологический анализатор (Sysmex XT-4000i)
Автоматический гематологический анализатор (Sysmex XT-4000i)

Общие методы, используемые гематологическими анализаторами для идентификации клеток, включают светорассеяние, подсчет Коултера и методы цитохимического окрашивания. Некоторые анализаторы также используют радиочастотный анализ и мечение моноклональными антителами для идентификации клеток. [ 26 ] [ 36 ] Методы окрашивания, используемые в дифференциальных анализаторах, включают окрашивание миелопероксидазой , [ 30 ] фермент, обнаруженный в клетках миелоидного ряда, [ 37 ] и нуклеиновые кислоты , которые обнаруживаются в более высоких концентрациях в незрелых клетках. [ 38 ]

Небольшой объем крови (всего 150 микролитров) аспирируется в анализатор, где реагенты применяются для лизиса эритроцитов и сохранения лейкоцитов. Образец разбавляется и передается в проточную ячейку, которая использует гидродинамическую фокусировку для выделения отдельных клеток для точного анализа их свойств. Различные клеточные параметры, такие как размер, сложность и реакции окрашивания, измеряются и анализируются для идентификации клеточных популяций. Базофилы часто определяют количественно с помощью реагента, который лизирует цитоплазму других лейкоцитов, но оставляет базофилы нетронутыми. [ 30 ] Образцы с аномальными результатами [ 1 ] или предположительно содержат аномальные клетки, помечаются анализатором для ручного анализа мазка крови. [ 35 ]

Чтобы гарантировать правильность результатов автоматического анализатора, пробы для контроля качества отбираются не реже одного раза в день. Это образцы с известными результатами, которые чаще всего предоставляются производителем прибора. Лаборатории сравнивают свои дифференциальные результаты с известными значениями, чтобы убедиться в правильной работе прибора. Также можно использовать измерение скользящего среднего, при котором средние результаты для образцов пациентов измеряются через определенные интервалы времени. Если предположить, что характеристики популяции пациентов остаются примерно одинаковыми с течением времени, среднее значение должно оставаться постоянным. Большие сдвиги среднего значения могут указывать на проблемы с прибором. [ 39 ] [ 40 ]

Ограничения

[ редактировать ]

При наличии незрелых или аномальных лейкоцитов автоматические дифференциальные результаты могут быть неверными, что требует ручного анализа мазка крови. В целом от 10 до 25 процентов образцов анализа крови помечаются анализатором для ручной проверки. [ 41 ] Хотя большинство аномальных образцов помечаются автоматически, некоторые из них могут быть пропущены; [ 42 ] и наоборот, анализаторы могут генерировать ложноположительные сигналы, когда аномальные клетки отсутствуют. [ 41 ] Гематологические лаборатории компенсируют эти проблемы, требуя проверки мазка, когда результаты дифференциального анализа или общего анализа крови выходят за пределы определенных числовых порогов, независимо от наличия флажков анализатора. [ 1 ] Чувствительность и специфичность маркировки анализатора можно определить путем сравнения флажков анализатора с дифференциальными результатами, полученными вручную. [ 40 ]

Автоматический подсчет базофилов , как известно, ненадежен. [ 11 ] [ 30 ] часто недооценивают количество базофилии и дают ложно завышенные результаты при наличии аномальных клеток. [ 43 ] Поэтому ручной дифференциал считается эталонным методом для этих ячеек. [ 11 ] [ 44 ]

Анализаторы могут считать ядросодержащие эритроциты, гигантские и слипшиеся тромбоциты, а также эритроциты, содержащие аномальный гемоглобин (например, гемоглобин S при серповидно-клеточной анемии ) как лейкоциты, что приводит к ошибочным дифференциальным результатам. Автоматический дифференциальный подсчет старых образцов может быть неправильным из-за клеточной дегенерации. [ 45 ]

Типы клеток и интерпретация результатов

[ редактировать ]
нейтрофил
нейтрофил
Нейтрофилы являются наиболее распространенными лейкоцитами в нормальной крови взрослого человека. При окраске красителем Романовского они обнаруживают многодольчатое ядро ​​и розовую цитоплазму , содержащую мелкие пурпурные гранулы. [ 46 ] [ 47 ]

Количество нейтрофилов обычно выше у новорожденных и беременных женщин, чем в других группах. [ 48 ] Вне этих условий повышенное количество нейтрофилов ( нейтрофилия ) связано с бактериальной инфекцией , воспалением и различными формами физиологического стресса. [ 49 ] Количество нейтрофилов может стать чрезвычайно высоким в ответ на некоторые инфекции и воспалительные состояния, что называется лейкемоидной реакцией, поскольку высокое количество лейкоцитов имитирует лейкемию. [ 50 ] Нейтрофилия может также возникать при миелопролиферативных заболеваниях . [ 49 ]
Нейтропения , то есть низкое количество нейтрофилов, может возникнуть в ответ на медикаментозное лечение (особенно химиотерапию). [ 51 ] или при некоторых инфекциях, таких как туберкулез и грамотрицательный сепсис . Нейтропения также встречается при многих гематологических заболеваниях, таких как лейкемия и миелодиспластический синдром , а также при различных аутоиммунных и врожденных заболеваниях. [ 52 ] Число нейтрофилов ниже референсного интервала может быть нормальным у лиц определенных национальностей; это называется доброкачественной этнической нейтропенией . [ 53 ] [ 54 ] Очень низкое количество нейтрофилов связано с иммуносупрессией . [ 55 ]

При стимуляции инфекцией или воспалением в цитоплазме нейтрофилов могут развиваться аномальные особенности, такие как токсическая грануляция , токсическая вакуолизация и тельца Дёле . Эти особенности, вызванные выбросом цитокинов , [ 56 ] все вместе известны как токсичные изменения. [ 13 ]

Лимфоцит
Лимфоцит
Лимфоциты , которые являются вторым наиболее распространенным типом лейкоцитов у взрослых, обычно представляют собой маленькие клетки с круглым темным ядром и тонкой полоской бледно-голубой цитоплазмы. Некоторые лимфоциты крупнее и содержат несколько синих гранул. [ 57 ]

Увеличение количества лимфоцитов ( лимфоцитоз ) может быть вызвано вирусными инфекциями. [ 58 ] а также может возникнуть после спленэктомии . У детей количество лимфоцитов выше, чем у взрослых. [ 59 ] Хронический лимфоцитарный лейкоз проявляется повышенным количеством лимфоцитов и аномальной морфологией лимфоцитов, при которой лимфоциты имеют чрезвычайно плотные, слипшиеся ядра. [ 60 ] и некоторые клетки кажутся размазанными на мазке крови. [ 61 ]
Низкое количество лимфоцитов ( лимфопения ) может наблюдаться при таких инфекциях, как ВИЧ/СПИД , грипп и вирусный гепатит , а также при белково-энергетической недостаточности . [ 62 ] острые заболевания и реакции на лекарства. [ 59 ]

В ответ на вирусные инфекции (особенно инфекционный мононуклеоз ) лимфоциты могут значительно увеличиваться в размерах, развивая ядра необычной формы и большое количество темно-синей цитоплазмы. Такие клетки называются реактивными или атипичными лимфоцитами. [ 63 ] и если они присутствуют, их либо комментируют, либо подсчитывают отдельно от нормальных лимфоцитов при ручном дифференциале. [ 14 ]

моноцит
моноцит
Моноциты представляют собой крупные клетки с изогнутым или складчатым ядром и мелкогранулированной серо-голубой цитоплазмой, часто содержащей вакуоли . Моноциты являются третьими по распространенности лейкоцитами после нейтрофилов и лимфоцитов. [ 64 ]

Увеличение количества моноцитов ( моноцитоз ) наблюдается при хронической инфекции и воспалении. Чрезвычайно высокое количество моноцитов, а также незрелые формы моноцитов встречаются при хроническом миеломоноцитарном лейкозе и острых лейкозах моноцитарного происхождения. [ 65 ] Количество моноцитов может быть уменьшено ( моноцитопения ) у людей, получающих химиотерапию, а также у людей с апластической анемией , тяжелыми ожогами и СПИДом. [ 66 ]

Эозинофил
Эозинофил
Эозинофилы имеют крупные оранжевые гранулы в цитоплазме и двудольные ядра. Они обнаруживаются в небольших количествах в нормальной крови. [ 64 ]

Повышенное количество эозинофилов ( эозинофилия ) связано с аллергическими реакциями , паразитарными инфекциями и астмой. [ 67 ] [ 68 ] Количество эозинофилов может снижаться во время беременности и в ответ на физиологический стресс, воспаление или лечение некоторыми лекарствами, такими как стероиды и адреналин . [ 68 ]

Базофил
Базофил
Базофилы имеют большие темно-фиолетовые гранулы, которые часто покрывают ядро ​​клетки. Это самые редкие из пяти нормальных типов клеток. [ 69 ]

Базофилия и эозинофилия могут возникать наряду с другими аномалиями лейкоцитов при хроническом миелолейкозе и других миелопролиферативных заболеваниях. [ 69 ] Увеличение количества базофилов также может наблюдаться при реакциях гиперчувствительности и после спленэктомии. Количество базофилов может уменьшаться во время овуляции , лечения стероидами и в периоды физиологического стресса. [ 70 ]

Группа нейтрофилов
Группа нейтрофилов
Палочкоядерные нейтрофилы — молодые формы нейтрофилов, у которых отсутствует сегментация ядра . Эти клетки, которые идентифицируются путем ручного подсчета, обнаруживаются в небольших количествах в нормальной крови взрослого человека. [ 71 ]

Сдвиг влево , означающий увеличение числа палочкоядерных нейтрофилов или незрелых гранулоцитов, может указывать на инфекцию, воспаление или расстройства костного мозга, хотя это также может быть нормальным явлением при беременности . [ 71 ] [ 72 ] Некоторые лаборатории не отделяют полосы от зрелых нейтрофилов при дифференциальном подсчете, поскольку классификация весьма субъективна и ненадежна. [ 14 ]

Незрелый гранулоцит (миелоцит)
Незрелый гранулоцит
Незрелые гранулоциты — это незрелые формы нейтрофилов и других гранулоцитов (эозинофилов и базофилов). Эта классификация состоит из метамиелоцитов , миелоцитов и промиелоцитов , которые можно перечислять отдельно при ручном дифференциале или сообщать вместе как незрелые гранулоциты (IG) с помощью автоматизированных методов. [ 73 ] Незрелые гранулоциты обычно обнаруживаются в костном мозге , но не в периферической крови. [ 74 ]

Присутствие в крови незрелых гранулоцитов в значительных количествах может указывать на инфекцию и воспаление. [ 11 ] а также миелопролиферативные заболевания , лейкемия и другие состояния, поражающие костный мозг. [ 74 ] Уровень ИГ также может повышаться при использовании стероидов и беременности. [ 11 ] Хронический миелолейкоз часто проявляется высоким количеством незрелых гранулоцитов в периферической крови. [ 75 ] Аномальные промиелоциты с множеством палочек Ауэра , называемые клетками-фаготами , встречаются при остром промиелоцитарном лейкозе . [ 76 ]

Взрывная ячейка
Взрывная ячейка
Бластные клетки — это очень незрелые клетки, которые обычно обнаруживаются в костном мозге, где они развиваются в зрелые клетки ( кроветворение ) перед тем, как попасть в кровь. Их можно идентифицировать по большому общему размеру, темно-синей цитоплазме и большому ядру с тонким хроматином и выступающими ядрышками . [ 10 ]

Бластные клетки, обнаруженные в мазке крови, являются отклонением от нормы и могут указывать на острый лейкоз или другие серьезные заболевания крови. Редко их можно увидеть в тяжелых случаях смещения влево. Присутствие палочек Ауэра внутри бластных клеток указывает на их миелоидное происхождение, что имеет важное значение для лечения лейкемии. [ 10 ] [ 77 ] Другие морфологические особенности могут предоставить информацию о происхождении бластных клеток: например, миелобласты имеют тенденцию быть большими с отчетливыми ядрышками, тогда как лимфобласты могут быть меньше по размеру с более плотным рисунком хроматина. Однако эти признаки не являются диагностическими, и для подтверждения происхождения обычно используется проточная цитометрия или специальное окрашивание. [ 78 ]

лимфомная клетка
Другие ячейки
При определенных условиях в крови могут присутствовать и другие аномальные клетки. Например, в некоторых случаях лимфомы при ручном дифференциальном тесте можно обнаружить клетки лимфомы . [ 79 ] а при тучноклеточном лейкозе тучные клетки , которые обычно ограничены тканями, циркулируют в крови. [ 80 ] Существует очень редкое явление, называемое карциноцитемией , при котором опухолевые клетки обнаруживаются в мазке периферической крови. [ 81 ]

История

[ редактировать ]

До того, как были введены автоматические счетчики клеток, подсчет клеток проводился вручную; белые и эритроциты, а также тромбоциты подсчитывали с помощью микроскопов. [ 82 ] Первым человеком, опубликовавшим микроскопические наблюдения клеток крови, был Антони ван Левенгук . [ 83 ] который сообщил о появлении эритроцитов в письме 1674 года к Трудам Лондонского королевского общества ; [ 84 ] Ян Сваммердам описал эритроциты несколькими годами ранее, но тогда не опубликовал свои открытия. На протяжении XVIII и XIX веков усовершенствования в технологии микроскопов, такие как ахроматические линзы, лейкоциты и тромбоциты позволили подсчитывать в неокрашенных образцах. В 1870-х годах Пауль Эрлих разработал технику окрашивания, позволяющую различать пять типов лейкоцитов. В окраске Эрлиха использовалась комбинация кислотного и основного красителя для одновременного окрашивания белых и эритроцитов. [ 85 ] Дмитрий Леонидович Романовский усовершенствовал эту технику в 1890-х годах, используя смесь эозина и выдержанного метиленового синего , которая давала широкий спектр оттенков, которого не было при использовании любого из красителей отдельно. Это было названо эффектом Романовского и стало основой для окрашивания Романовского — метода, который до сих пор используется для окрашивания мазков крови при ручном дифференциальном исследовании. [ 86 ]

К началу 20-го века дифференциальный анализ лейкоцитов стал обычной практикой в ​​​​Соединенных Штатах, но трудности с интерпретацией результатов ставят под сомнение полезность теста. [ 87 ] В 1906 году [ 88 ] Чарльз Лэнгдон Гибсон представил диаграмму Гибсона, которая сравнивала общее количество лейкоцитов с количеством нейтрофилов, чтобы различать « гноеродные » и «негнойные» состояния и прогнозировать тяжесть инфекций. Примерно в то же время Йозеф Арнет предложил систему классификации нейтрофилов по количеству их ядерных долей – названную «индексом долей» или подсчетом Арнета – и установил набор контрольных диапазонов для дольчатости нейтрофилов. Позже было обнаружено, что анализ сегментации нейтрофилов, проведенный Арнетом, имеет ограниченное клиническое значение, но связь гиперсегментированных нейтрофилов с витамина B12 и дефицитом фолиевой кислоты остается общепринятой. [ 89 ] [ 90 ] [ 91 ] Виктор Шиллинг [ де ] в 1912 году предложил другую классификацию нейтрофилов, разделив их на « миелоциты », «югендличе », «стабкерниге» и «сегменткерниге » — то есть миелоциты, «ювенильные» (метамиелоциты), палочкоядерные нейтрофилы (иногда называемые «столбчатыми») и зрелые, полностью сегментированные нейтрофилы – и отметил клиническую значимость нейтрофильного сдвига влево в сочетании с количеством лейкоцитов и наличием токсических изменений. Монография Шиллинга Das Blutbild und seine klinische Verwertung ( «Картина крови и ее клиническое значение ») была переведена на английский язык в 1926 году, и его система классификации нейтрофилов быстро нашла признание в американских лабораториях. [ 92 ] [ 93 ]

Первый автоматический гематологический анализатор, счетчик Коултера , был изобретен в начале 1950-х годов Уоллесом Х. Коултером . [ 94 ] [ 95 ] Анализатор работал по принципу Коултера, который гласит, что когда клетки подвешиваются в жидкости, несущей электрический ток , и проходят через отверстие, они вызывают уменьшение тока, пропорциональное их объему, из-за их плохой электропроводности . Количество и величину этих уменьшений можно использовать для подсчета клеток крови и расчета их размеров. Счетчик Коултера изначально был разработан для подсчета эритроцитов , но он оказался эффективным и для подсчета лейкоцитов. [ 95 ]

Счетчик модели A Coulter, первый коммерческий гематологический анализатор.
Счетчик модели A Coulter, первый коммерческий гематологический анализатор.

После того, как базовый подсчет клеток был автоматизирован, дифференциация лейкоцитов оставалась сложной задачей. Исследования по автоматизации дифференциального подсчета начались в 1970-х годах и включали два основных подхода: цифровую обработку изображений и проточную цитометрию. Используя технологию, разработанную в 1950-х и 60-х годах для автоматизации считывания мазков Папаниколау , было произведено несколько моделей анализаторов обработки изображений. [ 96 ] Эти инструменты будут сканировать окрашенный мазок крови, чтобы найти ядра клеток, а затем делать снимок клетки с более высоким разрешением для анализа с помощью денситометрии . [ 97 ] Они были дорогими, медленными и мало помогали снизить рабочую нагрузку в лаборатории, поскольку для них по-прежнему требовалось готовить и окрашивать мазки крови, поэтому системы на основе проточной цитометрии стали более популярными. [ 98 ] [ 99 ] а к 1990 году анализаторы цифровых изображений не были коммерчески доступны в США и Западной Европе. [ 100 ] Эти методы возродились в 2000-х годах с появлением более совершенных платформ анализа изображений с использованием искусственных нейронных сетей . [ 24 ] [ 25 ]

Ранние устройства проточной цитометрии направляли лучи света на клетки с определенными длинами волн и измеряли результирующее поглощение, флуоресценцию или рассеяние света, собирая информацию о характеристиках клеток и позволяя клеточное содержимое, такое как ДНК . количественно оценивать [ 101 ] Один из таких инструментов — Rapid Cell Spectrophotometer, разработанный Луисом Каменским в 1965 году для автоматизации цитологии шейки матки, — мог генерировать скаттерграммы клеток крови, используя методы цитохимического окрашивания. Леонард Орнштейн, который помог разработать систему окрашивания на спектрофотометре Rapid Cell, и его коллеги позже создали первый коммерческий проточный цитометрический дифференциальный анализатор лейкоцитов Hemalog D. [ 102 ] [ 103 ] Представленный в 1974 году, [ 104 ] [ 105 ] этот анализатор использовал светорассеяние, поглощение и окрашивание клеток для идентификации пяти нормальных типов лейкоцитов в дополнение к «большим неопознанным клеткам» - классификации, которая обычно состояла из атипичных лимфоцитов или бластных клеток. Hemalog D мог подсчитать 10 000 клеток за один проход, что является заметным улучшением по сравнению с ручным дифференциалом. [ 103 ] [ 106 ] К 1977 году было подсчитано, что во всем мире использовалось «по крайней мере 200» автоматических дифференциальных анализаторов. [ 107 ] В 1981 году компания Technicon объединила Hemalog D с анализатором Hemalog-8, чтобы создать Technicon H6000, первый комбинированный анализатор общего анализа крови и дифференциальный анализатор. Этот анализатор был непопулярен в гематологических лабораториях, поскольку его эксплуатация была трудоемкой, но в конце 1980-х — начале 1990-х годов аналогичные системы широко производились другими производителями, такими как Sysmex , Abbott , Roche и Beckman Coulter . [ 108 ]

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Jump up to: а б с д и ж Гулати, Джин; Сун, Цзиньмин; Дулау Флоря, Алина; Гонг, Джеральд (2013). «Цель и критерии сканирования мазков крови, исследования мазков крови и анализа мазков крови» . Анналы лабораторной медицины . 33 (1): 1–7. дои : 10.3343/alm.2013.33.1.1 . ПМК   3535191 . ПМИД   23301216 .
  2. ^ Колледж ветеринарной медицины Корнеллского университета. «Лейкограмма» . eClinpath . Проверено 9 августа 2019 г.
  3. ^ Лютингер, Ирина (2002). «Как получить максимальную отдачу от лабораторной информационной системы в гематологической лаборатории». Аккредитация и гарантия качества . 7 (11): 494–7. дои : 10.1007/s00769-002-0539-y . ISSN   0949-1775 . S2CID   110787482 .
  4. ^ Кеохейн, Смит и Валенга 2015 , Передняя часть
  5. ^ «Дифференциальная разница в крови: информация о лабораторных анализах MedlinePlus» . МедлайнПлюс . Архивировано из оригинала 13 августа 2019 года . Проверено 12 августа 2019 г.
  6. ^ Jump up to: а б Американская ассоциация клинической химии (1 мая 2019 г.). «Дифференциал WBC» . Лабораторные тесты онлайн . Архивировано из оригинала 14 апреля 2019 года . Проверено 8 июля 2019 г.
  7. ^ Коттке-Марчант и Дэвис 2012 , стр. 33
  8. ^ Jump up to: а б Тургеон 2016 , с. 303
  9. ^ Jump up to: а б Барнс, П.В.; Макфадден, СЛ; Мачин, С.Дж.; Симсон, Э. (2005). «Международная консенсусная группа по обзору гематологии: предлагаемые критерии действий после автоматизированного дифференциального анализа общего анализа крови и лейкоцитов». Лаборатория гематологии . 11 (2): 83–90. дои : 10.1532/LH96.05019 . ISSN   1080-2924 . ПМИД   16024331 .
  10. ^ Jump up to: а б с д'Онофрио и Зини 2014 , с. 289
  11. ^ Jump up to: а б с д и Шабо-Ричардс, Девон С.; Джордж, Трейси И. (2015). «Подсчет лейкоцитов». Клиники лабораторной медицины . 35 (1): 11–24. дои : 10.1016/j.cll.2014.10.007 . ISSN   0272-2712 . ПМИД   25676369 .
  12. ^ Bain, Bates & Laffan 2012 , стр. 95–7.
  13. ^ Jump up to: а б Цесла 2018 , с. 153
  14. ^ Jump up to: а б с д Палмер, Л.; Бриггс, К.; Макфадден, С.; Зини, Г.; Бертем, Дж.; Розенберг, Г.; Пройчева, М.; Мачин, С.Дж. (2015). «Рекомендации ICSH по стандартизации номенклатуры и классификации морфологических особенностей клеток периферической крови» . Международный журнал лабораторной гематологии . 37 (3): 287–303. дои : 10.1111/ijlh.12327 . ISSN   1751-5521 . ПМИД   25728865 . S2CID   4649418 .
  15. ^ Bain, Bates & Laffan 2012 , стр. 2–4.
  16. ^ Смок, К.Дж. в Greer et al. 2018 , гл. 1 § Сбор образцов
  17. ^ Варекойс и Робинсон 2013 , с. 116
  18. ↑ Turgeon 2016 , стр. 346–8.
  19. ^ Ван и Хассерджян 2018 , стр. 10–1
  20. ^ Ван и Хассерджян 2018 , с. 10
  21. ^ Тургеон 2016 , с. 329
  22. ^ Тургеон 2016 , с. 318
  23. ^ Bain, Bates & Laffan 2012 , стр. 44–5.
  24. ^ Jump up to: а б Крац, Александр; Ли, Сю Хи; Зини, Джина; Ридль, Юрген А.; Хур, Мина; Мачин, Сэм (2019). «Цифровые морфологические анализаторы в гематологии: обзор и рекомендации ICSH» . Международный журнал лабораторной гематологии . 41 (4): 437–447. дои : 10.1111/ijlh.13042 . ISSN   1751-5521 . ПМИД   31046197 .
  25. ^ Jump up to: а б Да Коста, Лиди (2015). «Анализ цифровых изображений клеток крови». Клиники лабораторной медицины . 35 (1): 105–122. дои : 10.1016/j.cll.2014.10.005 . ISSN   0272-2712 . ПМИД   25676375 .
  26. ^ Jump up to: а б с д Смок, К.Дж. в работе Greer et al. 2018 , гл. 1 § Подсчет клеток
  27. ^ Рюмке, CL (1978). «Статистически ожидаемая изменчивость дифференциального подсчета лейкоцитов» (PDF) . В Кёпке, Дж. А. (ред.). Дифференциальный подсчет лейкоцитов . Конференция Колледжа американских патологов / Аспен, 1997. Скоки, Иллинойс: Колледж американских патологов .
  28. ^ Макклатчи 2002 , с. 809
  29. ^ Bain, Bates & Laffan 2012 , стр. 30–1.
  30. ^ Jump up to: а б с д и Смок, К.Дж. в работе Greer et al. 2018 , гл. 1 § Дифференциалы лейкоцитов
  31. ^ Харменинг 2009 , с. 336
  32. ^ Ван и Хассерджян 2018 , с. 9
  33. ^ Jump up to: а б Харменинг 2009 , с. 795
  34. ^ Лу Ц, Ли Ю, Ли Т, Хоу Т, Чжао Ю, Фэн С, Ян Икс, Чжу М, Шэнь Ю (март 2022 г.). «Оценка параметров незрелых гранулоцитов в миелоидных новообразованиях с помощью гематологического анализатора Sysmex XN» . Дж Гематоп . 15 (1): 1–6. дои : 10.1007/s12308-022-00484-w . ПМЦ   10869398 . ПМИД   38358601 .
  35. ^ Jump up to: а б с Бэйн, Бейтс и Лаффан, 2012 , с. 43
  36. ^ Harmening 2009 , стр. 795–803.
  37. ^ Наим, Рао и Гроди 2009 , стр. 210.
  38. ^ Арнет, Боррос М.; Менщиковки, Марио (2015). «Технология и новые параметры флуоресцентной проточной цитометрии в гематологических анализаторах» . Журнал клинического лабораторного анализа . 29 (3): 175–183. дои : 10.1002/jcla.21747 . ПМК   6807107 . ПМИД   24797912 .
  39. ^ Коттке-Марчант и Дэвис, 2012 , стр. 697–8.
  40. ^ Jump up to: а б Вис, Дж. Я.; Хейсман, А. (2016). «Поверка и контроль качества рутинных гематологических анализаторов» . Международный журнал лабораторной гематологии . 38 : 100–9. дои : 10.1111/ijlh.12503 . ISSN   1751-5521 . ПМИД   27161194 .
  41. ^ Jump up to: а б Смок, К.Дж. в работе Greer et al. 2018 , гл. 1 § Преимущества и источники ошибок при автоматизированной гематологии
  42. ^ Bain, Bates & Laffan 2012 , стр. 43–4.
  43. ^ Буттарелло, Мауро; Плебани, Марио (2008). «Автоматизированный подсчет клеток крови» . Американский журнал клинической патологии . 130 (1): 104–116. дои : 10.1309/EK3C7CTDKNVPXVTN . ISSN   0002-9173 . ПМИД   18550479 .
  44. ^ Гиббс 2014 , с. 88
  45. ^ Кеохан, Смит и Валенга 2015 , стр. 226
  46. ^ Харменинг 2009 , с. 306
  47. ^ Bain, Bates & Laffan 2012 , стр. 88–93.
  48. ^ Порвит, Маккалоу и Эрбер 2011 , стр. 252
  49. ^ Jump up to: а б Тургеон 2016 , с. 306
  50. ^ Порвит, Маккалоу и Эрбер 2011 , стр. 253
  51. ^ Хоффман и др. 2013 , с. 644
  52. ^ Порвит, Маккалоу и Эрбер, 2011 , стр. 247–52.
  53. ^ Порвит, Маккалоу и Эрбер 2011 , стр. 8
  54. ^ Аталлах-Юнес, Сухейль Альберт; Готова, Одри; Ньюбургер, Питер Э. (2019). «Доброкачественная этническая нейтропения» . Обзоры крови . 37 : 100586. doi : 10.1016/j.blre.2019.06.003 . ПМК   6702066 . PMID   31255364 .
  55. ^ Harmening 2009 , стр. 308–11.
  56. ^ Комитет гематологии и клинической микроскопии 2019 , с. 4
  57. ^ Тургеон 2016 , стр. 308–9.
  58. ^ Тургеон 2016 , с. 309
  59. ^ Jump up to: а б Порвит, Маккалоу и Эрбер 2011 , с. 258–9
  60. ^ Осье, Дэвид; Еще, Моника; Матутес, Эстелла; Морилья, Рикардо; Стреффорд, Джонатан К.; Катовский, Дэниел (2016). «Возврат к морфологии ХЛЛ: клиническое значение пролимфоцитов и корреляции с прогностическими/молекулярными маркерами в исследовании LRF CLL4» . Британский журнал гематологии . 174 (5): 767–775. дои : 10.1111/bjh.14132 . ПМЦ   4995732 . ПМИД   27151266 .
  61. ^ Касеб, Хатем; Танея, Аланкрита; Мастер, Самип (2019). «Рак, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ)» . СтатПерлс . ПМИД   29261864 . Проверено 24 июля 2019 г.
  62. ^ Террито, Мэри (2018). «Лимфоцитопения» . Руководства Merck Профессиональная версия . Архивировано из оригинала 10 октября 2018 года . Проверено 22 июля 2019 г.
  63. ^ Bain, Bates & Laffan 2012 , стр. 95–7.
  64. ^ Jump up to: а б Тургеон 2016 , с. 307
  65. ^ Бейн, Бейтс и Лаффан 2012 , стр. 95
  66. ^ Порвит, Маккалоу и Эрбер 2011 , стр. 258
  67. ^ Бейн, Бейтс и Лаффан 2012 , стр. 94
  68. ^ Jump up to: а б Порвит, Маккалоу и Эрбер 2011 , с. 256
  69. ^ Jump up to: а б Бейн, Бейтс и Лаффан, 2012 г. , стр. 94–5.
  70. ^ Порвит, Маккалоу и Эрбер 2011 , стр. 257
  71. ^ Jump up to: а б Бэйн, Бейтс и Лаффан, 2012 , с. 93
  72. ^ Ciesla 2018 , стр. 153–4.
  73. ^ Бейн, Бейтс и Лаффан 2012 , стр. 44
  74. ^ Jump up to: а б Карри, Чоладда Веджабхути; Старос, Эрик (14 января 2015 г.). «Дифференциальный анализ крови» . Эмедицина . Архивировано из оригинала 12 июля 2019 года . Проверено 17 июля 2019 г.
  75. ^ Эмади, Ашкан; Закон, Дженни (2018). «Хронический миелолейкоз (ХМЛ)» . Руководства Merck Профессиональная версия . Архивировано из оригинала 18 августа 2019 года . Проверено 30 августа 2019 г.
  76. ^ Адамс, Джулия; Нассири, Мехди (2015). «Острый промиелоцитарный лейкоз: обзор и обсуждение вариантов транслокаций» . Архивы патологии и лабораторной медицины . 139 (10): 1308–13. дои : 10.5858/arpa.2013-0345-RS . ISSN   0003-9985 . ПМИД   26414475 .
  77. ^ Glassy 1998 , стр. 6–7.
  78. ^ Комитет гематологии и клинической микроскопии 2019 , стр. 13–22.
  79. ^ Гласси 1998 , с. 228
  80. ^ Гласси 1998 , с. 328
  81. ^ Перейра, Джордж и Арбер, 2011 , с. 185
  82. ^ Кеохейн, Смит и Валенга 2015 , стр. 1–4
  83. ^ Коттке-Марчант и Дэвис 2012 , стр. 1
  84. ^ Wintrobe 1985 , с. 10
  85. ^ Коттке-Марчант и Дэвис, 2012 , стр. 3–4.
  86. ^ Безруков, А.В. (2017). «Окрашивание Романовского, эффект Романовского и мысли по вопросу о научном приоритете». Биотехника и гистохимия . 92 (1): 29–35. дои : 10.1080/10520295.2016.1250285 . ISSN   1052-0295 . ПМИД   28098484 . S2CID   37401579 .
  87. ^ Кёпке 1977 , с. 2
  88. ^ Гибсон, CL (1906). «Значение дифференциального показателя лейкоцитов при острых хирургических заболеваниях» . Анналы хирургии . 43 (4): 485–499. дои : 10.1097/00000658-190604000-00001 . ПМЦ   1426203 . ПМИД   17861781 .
  89. ^ Кёпке 1977 , стр. 2–3
  90. ^ Коттке-Марчант и Дэвис, 2012 , стр. 593–4.
  91. ^ Арнет, Дж (1904). Нейтрофильные лейкоциты при инфекционных заболеваниях (на немецком языке). Рыбак.
  92. ^ Кёпке 1977 , стр. 3–4
  93. ^ Шиллинг, В. (1912). Анализ крови и его клиническая оценка, в том числе при тропических болезнях; Краткие технические, теоретические и практические инструкции по микроскопическому исследованию крови (на немецком языке). Рыбак.
  94. ^ Харменинг 2009 , с. 794
  95. ^ Jump up to: а б Грэм, М. (2003). «Принцип Коултера: основа индустрии» . Журнал Ассоциации автоматизации лабораторий . 8 (6): 72–81. дои : 10.1016/S1535-5535(03)00023-6 . ISSN   1535-5535 . S2CID   113694419 .
  96. ^ Groner 1995 , стр. 12–4.
  97. ^ Льюис, С.М. (1981). «Автоматизированный дифференциальный подсчет лейкоцитов: современное состояние и будущие тенденции». Блут . 43 (1): 1–6. дои : 10.1007/BF00319925 . ISSN   0006-5242 . ПМИД   7260399 . S2CID   31055044 .
  98. ^ Да Коста 2015 , стр. 5.
  99. ^ Groner 1995 , стр. 12–5.
  100. ^ Бентли, ЮАР (1990). «Автоматизированный дифференциальный подсчет лейкоцитов: критическая оценка». Клиническая гематология Байера . 3 (4): 851–69. дои : 10.1016/S0950-3536(05)80138-6 . ISSN   0950-3536 . ПМИД   2271793 .
  101. ^ Меламед 2001 , стр. 5–6.
  102. ^ Шапиро 2003 , стр. 84–5.
  103. ^ Jump up to: а б Меламед 2001 , с. 8
  104. ^ Пико, Жюльен; Герен, Корали Л.; Ле Ван Ким, Кэролайн; Буланже, Шанталь М. (2012). «Проточная цитометрия: ретроспектива, основы и новейшее оборудование» . Цитотехнология . 64 (2): 109–130. дои : 10.1007/s10616-011-9415-0 . ПМЦ   3279584 . ПМИД   22271369 .
  105. ^ Мансберг, HP; Сондерс, Алекс М.; Гронер, В. (1974). «Дифференциальная система лейкоцитов Hemalog D» . Журнал гистохимии и цитохимии . 22 (7): 711–724. дои : 10.1177/22.7.711 . ISSN   0022-1554 . ПМИД   4137312 .
  106. ^ Пьер, Роберт V (2002). «Обзор мазка периферической крови: снижение дифференциала лейкоцитов в глазах». Клиники лабораторной медицины . 22 (1): 279–297. дои : 10.1016/S0272-2712(03)00075-1 . ISSN   0272-2712 . ПМИД   11933579 .
  107. ^ Кёпке 1977 , с. 96
  108. ^ Коттке-Марчант и Дэвис, 2012 , стр. 8–9.

Библиография

[ редактировать ]
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=White_blood_cell_differential&oldid=1239253599"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 421670a5ea17a647085802a726dae66b__1723087680
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/42/6b/421670a5ea17a647085802a726dae66b.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
White blood cell differential - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)