✖


Jump to content

QPNC-СТРАНИЦА

    Add links

    QPNC-PAGE , или количественный препаративный непрерывный биохимии в полиакриламидном электрофорез геле , представляет собой биоаналитический , одномерный , высокоточный и высокоточный метод электрофореза , применяемый в и элюирования бионеорганической химии для разделения белков количественного по изоэлектрической точке и путем непрерывного . из геля столбец. [1]

    Этот гибридный вариант нативного аналитического гель-электрофореза и препаративного полиакриламидного гель-электрофореза используется биологами для разделения макромолекул в растворе с высоким выходом, например, в активные или нативные металлопротеины в биологических образцах или в правильно и неправильно свернутые белки, содержащие металл -кофактор , или в изоформы белка в сложных белковых смесях . [2]

    Введение

    [ редактировать ]

    несколько функций Белки выполняют в живых организмах , включая каталитические реакции и транспорт молекул или ионов внутри клеток , органов или всего тела . Понимание процессов в организме человека, которые в основном обусловлены биохимическими реакциями и белок-белковыми взаимодействиями , в значительной степени зависит от способности выделять активные белки в биологические образцы для более детального изучения химического строения и физиологических функций . Эта важная информация может служить важным показателем состояния здоровья пациента. [3]

    Поскольку около 30–40% всех известных белков содержат один или несколько кофакторов ионов металлов (например, церулоплазмин , ферритин , белок-предшественник бета-амилоида , матриксную металлопротеиназу или металлошапероны ), особенно нативные и денатурированные металлопротеины необходимо выделить, идентифицировать и количественно оценить. после жидкой биопсии . Многие из этих кофакторов (например, железо , медь или цинк ) играют ключевую роль в жизненно важных ферментативно- каталитических процессах или стабилизируют молекулы глобулярных белков . [4] Таким образом, высокоточный гель-электрофорез и сопоставимые методы разделения очень актуальны в качестве начального этапа белков и микроэлементов анализа состава , за которым впоследствии следуют современные масс-спектрометрические и магнитно-резонансные методы для количественного определения и идентификации представляющих интерес растворимых белков. [5]

    Метод

    [ редактировать ]

    Механизмы разделения и буферизации

    [ редактировать ]
    Оборудование для биоаналитического гель-электрофореза с непрерывным элюированием : камера для электрофореза, перистальтический насос , коллектор фракций, насос для рециркуляции буфера и УФ-детектор (в холодильнике), источник питания и регистратор (на столе). [6]

    В гель-электрофорезе белки обычно разделяются по заряду , размеру или форме . [7] целью изоэлектрического фокусирования Например, pH . (ИЭФ) является разделение белков в соответствии с их изоэлектрической точкой (pI), то есть в соответствии с их зарядом при различных значениях [8] Здесь аналогичный механизм реализуется в имеющейся в продаже камере электрофореза (см. рис. Оборудование ) для разделения заряженных биомолекул , например, супероксиддисмутазы (СОД). [9] или аллергены , [10] в условиях постоянного pH и различных скоростей миграции цвиттер в зависимости от разных изоэлектрических точек -ионов . Отделенные (металлические) белки элюируются последовательно, начиная с самого низкого (pI > 2–4) и заканчивая самым высоким pI (pI < 10,0) растворенных белковых молекул, подлежащих анализу. [11]

    Благодаря специфическим свойствам приготовленного геля и буферного раствора для электрофореза , который является основным и содержит трис - HCl и NaN 3 , [6] большинство белков биологической системы (например, Helicobacter pylori [12] ) заряжены отрицательно в растворе и будут мигрировать от катода к аноду под действием электрического поля . В целом уравнение реакции (1) показывает, что карбоксильная боковая группа протеиногенной аминокислоты заряжена отрицательно, уравнение (2) — что боковые аминогруппы электрически нейтральны в этих условиях:

    (1) R-СООН + ОН − → R-COO − + Н 2 О

    (2) Р-НХ 3 + + ОН − → R-NH 2 + H 2 O

    На аноде электрохимически генерируемые . ионы водорода реагируют с молекулами Трис с образованием одновалентных ионов Трис (3) Положительно заряженные ионы Трис мигрируют через гель к катоду, где нейтрализуют ионы гидроксида с образованием молекул Трис и воды (4):

    (3) (НОСН 2 ) 3 CNH 2 + Н + → [(НОСН 2 ) 3 CNH 3 ] +

    (4) [(НОСН 2 ) 3 CNH 3 ] + + ОН − → (HOCH 2 ) 3 CNH 2 + H 2 O

    Таким образом, механизм буферизации на основе Триса обеспечивает постоянный уровень pH в непрерывной буферной системе с высокой буферной емкостью . [13]

    При 25 °C Трис-буфер имеет эффективный диапазон pH от 7,5 до 9,0. В приведенных здесь условиях (с учетом концентрации буферных компонентов, механизма буферизации, pH и температуры) эффективный pH смещается в диапазоне примерно от 10,0 до 10,5. Все нативные буферные системы имеют низкую проводимость и диапазон pH от 3,8 до 10,2. Таким образом, непрерывные нативные буферные системы используются для разделения белков в соответствии с их pI. [14]

    Хотя значение pH (10,00) буфера для электрофореза не соответствует физиологическому значению pH внутри типа клеток или тканей , разделенные кольцевые белковые полосы непрерывно элюируются в физиологический буферный раствор (pH 8,00) и выделяются в различных фракциях. (ср. рис. Электрофореграмма ). [6] При условии, что необратимая денатурация не может быть продемонстрирована независимой процедурой, большинство белковых молекул стабильны в водном растворе при значениях pH от 3 до 10 и температуре ниже 50 °C. [15] Поскольку Джоулево тепло и температура, образующиеся во время электрофореза, могут превышать 50 °C, [16] и, таким образом, оказывать негативное влияние на стабильность и миграцию белков в геле, система разделения, состоящая из камеры электрофореза, коллектора фракций и других устройств, охлаждается в холодильнике до 4 °C, что значительно снижает риск возникновения теплоконвекционных потоков . [17] Перегреву геля препятствует внутренний контур охлаждения колонки геля как неотъемлемой части камеры электрофореза, а также создание постоянной мощности с помощью источника питания (см. рис. Оборудование ). [18]

    Свойства геля и время полимеризации

    [ редактировать ]

    Наилучшие условия полимеризации акриламидных гелей достигаются при температуре 25–30 °C. [19] полимеризация, по-видимому, прекращается через 20–30 мин реакции, хотя остаточные мономеры (10–30%). после этого времени обнаруживаются [20] Сополимеризация мономера акриламида (АА) и N,N'-метиленбисакриламида сшивающего агента (Бис-АА), инициируемая реакциями персульфата аммония (APS)/ тетраметилэтилендиамина (TEMED), наиболее эффективна при щелочном pH раствора акриламида. Таким образом, акриламидные цепи создаются и сшиваются одновременно. Благодаря свойствам буфера для электрофореза гель-полимеризация проводится при pH 10,00, обеспечивая эффективное использование TEMED и APS в качестве катализаторов реакции полимеризации и одновременно подавляя конкурентный гидролиз образующейся сетки акриламидного полимера . Полимерные сети представляют собой трехмерно связанные полимерные цепи. В противном случае белки можно было бы модифицировать путем реакции с неполимеризованными мономерами акриламида, образуя продукты ковалентного акриламида присоединения , что может привести к образованию нескольких полос. [21]

    Кроме того, время полимеризации геля может напрямую влиять на время элюирования пиков разделенных металлопротеинов на электрофореграмме из-за сжатия и расширения гелей и их пор, если время инкубации реакционной смеси (раствора геля), используемой для приготовления гель не оптимизированы (см. рис. Электрофореграмма , см. раздел Воспроизводимость и восстановление). Чтобы обеспечить максимальную воспроизводимость размера пор геля и получить полностью полимеризованный и не ограничивающий гель с большими порами для проведения PAGE, полиакриламидный гель полимеризуют в течение 69 часов при комнатной температуре (RT) в гелевой колонке. находится на литейном стенде. [18] Экзотермическое тепло , выделяемое в процессе полимеризации, постоянно рассеивается , при этом температура может быстро подняться до более чем 75 °C в первые минуты, после чего она медленно падает. [22] Через 69 часов гель достигает комнатной температуры и находится в самом низкоэнергетическом состоянии , поскольку основные химические реакции и гелеобразование завершены. [18] Гелеобразование означает, что растворитель (вода) иммобилизуется внутри полимерной сетки посредством водородных связей , а также сил Ван-дер-Ваальса . В результате приготовленный гель является однородным (с точки зрения равномерного распределения поперечных связей по образцу геля). [23] ), по своей природе стабильный и не содержит мономеров и радикалов . Свежие полиакриламидные гели также гидрофильны , электрически нейтральны и не связывают белки. [24] По тем же причинам можно исключить эффекты просеивания, вызванные гравитационным сжатием геля. Таким образом, в среде без свойств молекулярного сита можно ожидать высокого разрешения. [25]

    Перед началом электрофореза подготовленный гель, содержащий 4% Т (общее содержание полимера (Т)), 2,67% С (концентрация сшивающего агента (С)) предварительно прогоняется для его уравновешивания . [6] По существу, он не требует просеивания и оптимален для электрофореза белков с молекулярной массой, превышающей или равной 200 k u . Белки мигрируют в нем в большей или меньшей степени на основе своей свободной подвижности. [26] По этим причинам взаимодействие геля с биомолекулами пренебрежимо мало, и, таким образом, белки разделяются чисто и предсказуемо при времени полимеризации 69 часов (см. рис. Электрофореграмма ). Отделенные металлопротеины, включая биомолекулы размером от примерно <1 ku до более 30 ku (например, металлические шапероны , прионы металлов , белки-переносчики , амилоиды , металлоферменты , металлопептиды , металлотионеин , фитохелатины ), не диссоциируются на апопротеины и кофакторы металлов. [27]

    Воспроизводимость и восстановление

    [ редактировать ]
    Электрофореграмма, показывающая четыре серии PAGE высокомолекулярного растительного белка (≈ 200 кДа ) в зависимости от времени полимеризации геля. Метод обнаружения для определения концентрации кофактора Cd (в мкг/л): GF-AAS . [6]

    Биоактивные структуры (нативная или трехмерная конформация или форма) изолированных белковых молекул не претерпевают каких-либо существенных конформационных изменений . Таким образом, белки, содержащие кофактор активного металла, могут быть воспроизводимо изолированы в одних и тех же фракциях после проведения PAGE. [11] Смещение пика на соответствующей электрофореграмме указывает на то, что стандартизированное время полимеризации в геле (69 часов, RT) не применяется в эксперименте PAGE . Более низкое отклонение стандартизированного времени полимеризации (<69 часов) означает неполную полимеризацию и, следовательно, внутреннюю нестабильность из-за размягчения геля во время сшивки полимеров, когда материал достигает равновесия набухания. [28] тогда как превышение этого срока (> 69 часов) является показателем старения геля (см. рис. Электрофореграмма ). [29] Явление старения геля тесно связано с долговременным снижением вязкости водных растворов полиакриламида. [30] и повышенное набухание гидрогелей. [31]

    В стандартных условиях металлопротеины с различным диапазоном молекулярных масс и изоэлектрических точек были извлечены в биологически активную форму с количественным выходом более 95%. [18] С помощью препаративного SDS-PAGE стандартные белки ( цитохром с , альдолаза , овальбумин и бычий сывороточный альбумин ) с молекулярной массой 14–66 ку могут быть восстановлены со средним выходом около 73,6%. [32] Препаративный изотахофорез (ИТП) применяют для выделения палладийсодержащих белков с молекулярной массой 362 ку (выход: 67%) и 158 ку (выход: 97%). [33]

    Количественная оценка и идентификация

    [ редактировать ]

    Физиологические концентрации ( в диапазоне частей на миллиард ) Fe, Cu, Zn, Ni , Mo , Pd, Co , Mn , Pt , Cr , Cd и других металлических кофакторов могут быть идентифицированы и абсолютно количественно определены в аликвоте фракции с помощью массы индуктивно связанной плазмы. спектрометрия (ИСП-МС) [34] или рентгеновская флуоресценция полного отражения (TXRF), [35] например. В случае ИСП-МС структурная информация связанных металлобиомолекул необратимо теряется из-за ионизации образца плазмой . [36] [37] Еще одним признанным высокочувствительным методом определения микроэлементов в биологических образцах является атомно-абсорбционная спектрометрия в графитовой печи (ГФ-ААС) (см. рис. Электроферограмма ). [38] Благодаря высокой чистоте и оптимизированной концентрации разделенных металлопротеинов , например, терапевтических рекомбинантных фармацевтических препаратов растительного происхождения, таких как медный шаперон для супероксиддисмутазы (CCS) из лекарственных растений , в нескольких конкретных фракциях ПААГ родственные структуры этих биоактивных аналитов могут быть выяснена количественно с помощью раствора ЯМР-спектроскопии в неденатурирующих условиях. [39]

    Приложения

    [ редактировать ]

    Неправильно свернутые металлические белки, например, CCS или Cu-Zn-супероксиддисмутаза (SOD1), присутствующие в мозге , крови или других клинических образцах, указывают на нейродегенеративные заболевания , такие как болезнь Альцгеймера (БА) или боковой амиотрофический склероз (БАС). [40] Активные молекулы CCS или SOD способствуют внутриклеточному гомеостатическому контролю основных видов ионов металлов (например, Cu 1+/2+ , Зн 2+ , Фе 2+/3+ , Мн 2+ , Является 3+ ) в организмах, и, таким образом, эти биомолекулы могут балансировать прооксидативные и антиоксидантные процессы в цитоплазме . [41] В противном случае свободные или слабосвязанные ионы переходных металлов участвуют в реакциях типа Фентона, в которых образуется вредный гидроксильный радикал , который, если его не сдерживать, будет разрушительным для белков. [42] Потеря активного CCS увеличивает выработку бета-амилоида в нейронах , что, в свою очередь, является основным патологическим признаком AD. [43] Таким образом, медный шаперон супероксиддисмутазы предлагается рассматривать как один из наиболее перспективных биомаркеров меди токсичности при этих заболеваниях. [44] CCS следует анализировать в первую очередь в крови, поскольку метаанализ данных сыворотки показал, что пациенты с АД имеют более высокие уровни Cu в сыворотке, чем здоровые люди из контрольной группы . [45]

    Персоны

    [ редактировать ]

    QPNC-PAGE, первоначально называвшийся «PNC-PAGE», был изобретен и разработан в конце 1990-х годов Берндом Кастенхольцем. [46] и значительное влияние оказала новаторская работа Дэвида Э. Гарфина . [47]

    См. также

    [ редактировать ]

    Ссылки

    [ редактировать ]
    1. ^ Зелерт Х., Краузе Ф. (2008). «Препаратное выделение белковых комплексов и других биочастиц путем элюирования из полиакриламидных гелей». Электрофорез . 29 (12): 2617–36. дои : 10.1002/elps.200800061 . ПМИД   18494038 . S2CID   35874355 .
    2. ^ Кастенхольц Б (2007). «Новая надежда на диагностику и терапию болезни Альцгеймера». Буквы о белках и пептидах . 14 (4): 389–93. дои : 10.2174/092986607780363970 . ПМИД   17504097 .
    3. ^ Сварт С., Якубовски Н. (2016). «Обновленная информация о состоянии метрологии металлопротеинов» . Журнал аналитической атомной спектрометрии . 31 (9): 1756–65. дои : 10.1039/C6JA00181E .
    4. ^ Финни Лос-Анджелес, О'Халлоран ТВ (2003). «Видование переходных металлов в клетке: идеи химии рецепторов ионов металлов». Наука . 300 (5621): 931–6. Бибкод : 2003Sci...300..931F . дои : 10.1126/science.1085049 . ПМИД   12738850 . S2CID   14863354 .
    5. ^ Черкьяро Дж., Маньери Т.М., Бертучи Ф.Р. (2013). «Аналитические методы количественного определения меди, цинка и железа в клетках млекопитающих» . Металломика . 5 (10): 1336–45. дои : 10.1039/c3mt00136a . ПМИД   23925479 .
    6. ^ Jump up to: а б с д и Кастенхольц Б., Гарфин Д.Е. (2010). «Выделение кислых, основных и нейтральных металлопротеинов с помощью QPNC-PAGE» (PDF) . Предшественники природы : 1–4. дои : 10.1038/npre.2010.4617.1 .
    7. ^ Гарфин Д.Е. (1995). «Глава 2 – Электрофоретические методы» . Введение в биофизические методы исследования белков и нуклеиновых кислот : 53–109. дои : 10.1016/B978-012286230-4/50003-1 .
    8. ^ Гарфин Д.Е. (1990). «[35] Изоэлектрическая фокусировка». Изоэлектрическая фокусировка . Методы энзимологии. Том. 182. стр. 459–77. дои : 10.1016/0076-6879(90)82037-3 . ISBN  9780121820831 . ПМИД   2314254 .
    9. ^ Юн Х.Д., Ким Э.Дж., Роу Дж.Х., Ха Ю.К., Кан СО (1996). «Новая никельсодержащая супероксиддисмутаза из Streptomyces spp» . Биохимический журнал . 318 (Часть 3): 889–96. дои : 10.1042/bj3180889 . ПМЦ   1217701 . ПМИД   8836134 .
    10. ^ Сак Р., Петерсен А., Вебер Б., Фибиг Х., Кромвель О. (2004). «Аналитический и препаративный электрофорез в нативном полиакриламидном геле: исследование рекомбинантного и природного основного аллергена пыльцы трав Phl p 2». Электрофорез . 25 (1): 14–9. дои : 10.1002/elps.200305697 . ПМИД   14730563 . S2CID   20585733 .
    11. ^ Jump up to: а б Кастенхольц, Б (2004). «Препаративный непрерывный электрофорез в нативном полиакриламидном геле (PNC-PAGE): эффективный метод выделения кофакторов кадмия в биологических системах». Аналитические письма . 37 (4). Информа Великобритания Лимитед: 657–665. дои : 10.1081/al-120029742 . ISSN   0003-2719 . S2CID   97636537 .
    12. ^ Бэ С.Х., Харрис А.Г., Хейнс П.Г., Чен Х., Гарфин Д.Е., Хейзелл С.Л., Пайк Ю.К., Уолш Б.Дж., Кордвелл С.Дж. (2003). «Стратегии обогащения и идентификации основных белков в протеомных проектах» . Протеомика . 3 (5): 569–79. дои : 10.1002/pmic.200300392 . ПМИД   12748937 . S2CID   26482563 .
    13. ^ Кастенхольц Б (2006). «Сравнение электрохимического поведения высокомолекулярных белков кадмия в Arabidopsis thaliana и овощных растениях при использовании препаративного нативного непрерывного электрофореза в полиакриламидном геле (PNC-PAGE)». Электроанализ . 18 (1): 103–6. дои : 10.1002/elan.200403344 .
    14. ^ Маклеллан Т. (1982). «Буферы для электрофореза для полиакриламидных гелей при различных pH». Аналитическая биохимия . 126 (1): 94–9. дои : 10.1016/0003-2697(82)90113-0 . ПМИД   7181120 .
    15. ^ Гордон А.Х. (1969). Лабораторные методы в биохимии и молекулярной биологии: электрофорез белков в полиакриламидных и крахмальных гелях (Часть I, Глава 2 Акриламидный гель, 34–45) . Эльзевир. дои : 10.1016/S0075-7535(08)70324-3 . ISBN  9780444533418 .
    16. ^ Вулли П. (1987). «Термическая нестабильность гелей для электрофореза». Электрофорез . 8 (8): 339–45. дои : 10.1002/elps.1150080802 . S2CID   97116687 .
    17. ^ Тиселиус А (1937). «Новый аппарат для электрофоретического анализа коллоидных смесей». Труды Фарадеевского общества . 33 : 524–534. дои : 10.1039/TF9373300524 .
    18. ^ Jump up to: а б с д Кастенхольц Б (2006). «Важный вклад новой количественной препаративной процедуры непрерывного электрофореза в нативном полиакриламидном геле (QPNC-PAGE) для выяснения метаболизма металлических кофакторов при заболеваниях, связанных с неправильным сворачиванием белков - теория». Буквы о белках и пептидах . 13 (5): 503–8. дои : 10.2174/092986606776819637 . ПМИД   16800806 .
    19. ^ Гельфи С., Ригетти П.Г. (1981). «Кинетика полимеризации полиакриламидных гелей II. Влияние температуры». Электрофорез . 2 (4): 220–28. дои : 10.1002/elps.1150020405 . S2CID   93109120 .
    20. ^ Чен Б., Крамбах А. (1979). «Оценка эффективности полимеризации при формировании полиакриламидного геля с использованием непрерывного оптического сканирования в процессе полимеризации». Журнал биохимических и биофизических методов . 1 (2): 105–16. дои : 10.1016/0165-022X(79)90017-4 . ПМИД   551105 .
    21. ^ Бонавентура С., Бонавентура Дж., Стивенс Р., Миллингтон Д. (1994). «Акриламид в полиакриламидных гелях может модифицировать белки во время электрофореза». Аналитическая биохимия . 222 (1): 44–8. дои : 10.1006/abio.1994.1451 . ПМИД   7856869 .
    22. ^ Уитли М.А., Филлипс Ч.Р. (1983). «Температурные эффекты при полимеризации полиакриламидных гелей, используемых для иммобилизации бактериальных клеток» . Биотехнология и биоинженерия . 25 (2): 623–6. дои : 10.1002/бит.260250228 . ПМИД   18548679 .
    23. ^ Кизилай МОЙ, Окей О (2003). «Влияние гидролиза на пространственную неоднородность в поли(акриламидных) гелях различной плотности сшивки». Полимер . 44 (18): 5239–50. дои : 10.1016/S0032-3861(03)00494-4 .
    24. ^ Гарфин Д.Е. (2009). «25-е ежегодное собрание Американского общества электрофореза» . Экспертное обозрение по протеомике . 6 (3): 239–41. дои : 10.1586/апр.09.18 . ПМИД   19489696 . S2CID   24490398 .
    25. ^ Хертен С (1963). « Молекулярно-ситовый электрофорез в сшитых полиакриламидных гелях». Журнал хроматографии А. 11 : 66–70. дои : 10.1016/S0021-9673(01)80870-0 . ПМИД   13954823 .
    26. ^ Гарфин Д.Е. (2009) [1990]. «Глава 29 одномерный гель-электрофорез» . Руководство по очистке белков, 2-е издание . Методы энзимологии. Том. 463. стр. 497–513. дои : 10.1016/S0076-6879(09)63029-9 . ISBN  978-0-12-374536-1 . ПМИД   19892189 .
    27. ^ Фитри Н, Кастенхольц Б, Бухари Б, Амран МБ, Варганегара FM (2008). «Видование молибдена в сыром соке флоэмы клещевины». Аналитические письма . 41 (10): 1773–84. дои : 10.1080/00032710802162442 . S2CID   95715133 .
    28. ^ Дамлянович В., Лагерхольм Б.К., Якобсон К. (2005). «Объемная и микроструктурная конъюгация белков внеклеточного матрикса с охарактеризованными полиакриламидными субстратами для анализов клеточной механотрансдукции» . БиоТехники . 39 (6): 847–51. дои : 10.2144/000112026 . ПМИД   16382902 .
    29. ^ Стейскал Дж., Гордон М., Торкингтон Дж.А. (1980). «Коллапс полиакриламидных гелей». Полимерный вестник . 3 (11): 621–5. дои : 10.1007/BF01135333 . S2CID   98565268 .
    30. ^ Кулицке В.М., Кневске Р., Кляйн Дж. (1982). «Получение, характеристика, свойства раствора и реологическое поведение полиакриламида». Прогресс в науке о полимерах . 8 (4): 373–468. дои : 10.1016/0079-6700(82)90004-1 .
    31. ^ Юн Дж., Цай С., Суо З., Хейворд Р.К. (2010). «Кинетика пороупругого набухания тонких слоев гидрогеля: сравнение теории и эксперимента». Мягкая материя . 6 (23): 6004–12. Бибкод : 2010SMat....6.6004Y . дои : 10.1039/C0SM00434K . S2CID   2867196 .
    32. ^ Охаши Т., Моритани С., Андох Х., Сато С., Омори С., Лотспейх Ф., Икеда М. (1991). «Препаративная высокопроизводительная электроэлюция белков после разделения электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и ее применение для анализа аминокислотных последовательностей и получения антител» . Журнал хроматографии . 585 (1): 153–9. дои : 10.1016/0021-9673(91)85069-р . ПМИД   1666109 .
    33. ^ Вебер Г., Мессершмидт Дж., фон Болен А., Кастенхольц Б., Гюнтер К. (2004). «Улучшенное разделение палладия в биологических матрицах с помощью сочетания гель-проникающей хроматографии и изотахофореза». Электрофорез . 25 (12): 1758–64. дои : 10.1002/elps.200305833 . ПМИД   15213973 . S2CID   22292130 .
    34. ^ Рашовский П (2011). «Использование колоночного гель-электрофореза для онлайн-подключения к ИСП-МС для металлопротеомики» . Архив диссертаций Масариковского университета, Брно.
    35. ^ Пессанья С., Карвалью М.Л., Беккер М., фон Болен А. (2010). «Количественное определение тяжелых металлов на разных стадиях производства вина методами рентгеновской флуоресценции полного отражения и энергодисперсионной рентгеновской флуоресценции: сравнение на двух виноградниках». Spectrochimica Acta Часть B: Атомная спектроскопия . 65 (6): 504–7. Бибкод : 2010AcSpB..65..504P . дои : 10.1016/j.sab.2010.04.003 .
    36. ^ Якубовский Н., Лобински Р., Моенс Л. (2004). «Металлобиомолекулы. Основа жизни, задача атомной спектроскопии» . Журнал аналитической атомной спектрометрии . 19 (1): 1–4. дои : 10.1039/B313299B .
    37. ^ Мунику С., Шпунар Дж., Лобински Р. (2009). «Металломика: понятие и методология». Обзоры химического общества . 38 (4): 1119–38. дои : 10.1039/B713633C . ПМИД   19421584 .
    38. ^ Линь Т.В., Хуан С.Д. (2001). «Прямое и одновременное определение меди, хрома, алюминия и марганца в моче с помощью многоэлементного атомно-абсорбционного спектрометра с графитовой печью». Аналитическая химия . 73 (17): 4319–25. дои : 10.1021/ac010319h . ПМИД   11569826 .
    39. ^ Кастенхольц Б., Гарфин Д.Е. (2009). «Лекарственные растения: природный источник шаперонов для лечения неврологических расстройств». Буквы о белках и пептидах . 16 (2): 116–20. дои : 10.2174/092986609787316234 . ПМИД   19200033 .
    40. ^ Шюман К., Классен Х.Г., Дитер Х.Х., Кениг Дж., Мультауп Г., Рюкгауэр М., Саммер К.Х., Бернхардт Дж., Бисальски Х.К. (2002). «Семинар по консенсусу в Хоэнхайме: медь» . Европейский журнал клинического питания . 56 (6): 469–83. дои : 10.1038/sj.ejcn.1601315 . ПМИД   12032645 .
    41. ^ Кастенхольц Б. , Гарфин Д.Е. , Хорст Дж., Нагель К.А. (2009). «Металлические шапероны растений: новый взгляд на терапию деменции». Амилоид . 16 (2): 81–83. дои : 10.1080/13506120902879392 . ПМИД   20536399 . S2CID   37490474 .
    42. ^ Робинсон, Нью-Джерси, Виндж ДР (2010). «Медные металлочапероны» . Ежегодный обзор биохимии . 79 : 537–62. doi : 10.1146/annurev-biochem-030409-143539 . ПМЦ   3986808 . ПМИД   20205585 .
    43. ^ Грей Э.Х., Де Вос К.Дж., Дингуолл С., Перкинтон М.С., Миллер CC (2010). «Дефицит медного шаперона супероксиддисмутазы увеличивает выработку бета-амилоида» . Журнал болезни Альцгеймера . 21 (4): 1101–5. дои : 10.3233/JAD-2010-100717 . ПМК   3023902 . ПМИД   20693630 .
    44. ^ Пал А (2014). «Токсичность меди, вызванная гепатоцеребральными и нейродегенеративными заболеваниями: острая необходимость в прогностических биомаркерах». Нейротоксикология . 40 : 97–101. Бибкод : 2014NeuTx..40...97P . дои : 10.1016/j.neuro.2013.12.001 . ПМИД   24342654 .
    45. ^ Букосси С., Вентриглия М., Панетта В., Салустри С., Паскуалетти П., Мариани С., Сиотто М., Россини П.М., Сквитти Р. (2011). «Медь при болезни Альцгеймера: метаанализ исследований сыворотки, плазмы и спинномозговой жидкости» . Журнал болезни Альцгеймера . 24 (1): 175–85. дои : 10.3233/JAD-2010-101473 . ПМИД   21187586 . S2CID   33194620 .
    46. ^ «Метод выделения кофакторов металлов из биологических органических систем с использованием препаративного непрерывного гель-электрофореза в нативном полиакриламиде (PNC-PAGE)» . Гугл Патенты . Проверено 15 июля 2024 г.
    47. ^ Финщенко Ю., Саламанзаде А., Давалос Р. (2014). «AES 2013: Ежегодное собрание общества электрофореза AES». Американская лаборатория . 46 (6).

    Дальнейшее чтение

    [ редактировать ]
    [ редактировать ]
    Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=QPNC-PAGE&oldid=1238742764"
    Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
    Arc.Ask3.Ru
    Номер скриншота №: 196dd7faf84b146f8ee5768e4bd77c28__1722852180
    URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/19/28/196dd7faf84b146f8ee5768e4bd77c28.html
    Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
    QPNC-PAGE - Wikipedia
    Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)