✖


Jump to content

Рекомбинантная ДНК

(Перенаправлено с рекомбинантных белков )
Эта статья о молекулах ДНК. Информацию об архитектуре графического процессора см. в разделе RDNA (микроархитектура) .
Конструирование рекомбинантной ДНК, при котором фрагмент чужеродной ДНК встраивают в плазмидный вектор. В этом примере ген, обозначенный белым цветом, инактивируется при вставке чужеродного фрагмента ДНК.
Часть серии о
Генная инженерия
 
Генетически модифицированные организмы
История и регулирование
Процесс
Приложения
Споры

Молекулы рекомбинантной ДНК ( рДНК ) — это молекулы ДНК , образованные лабораторными методами генетической рекомбинации (такими как молекулярное клонирование ), которые объединяют генетический материал из нескольких источников, создавая последовательности , которые иначе не были бы обнаружены в геноме .

Рекомбинантная ДНК — это общее название участка ДНК, созданного путем объединения двух или более фрагментов из разных источников. Рекомбинантная ДНК возможна, поскольку молекулы ДНК всех организмов имеют одинаковую химическую структуру и отличаются только нуклеотидной последовательностью. Молекулы рекомбинантной ДНК иногда называют химерной ДНК , поскольку они могут состоять из материала двух разных видов, как, например, мифическая химера . Технология рДНК использует палиндромные последовательности и приводит к образованию липких и тупых концов .

Последовательности ДНК, используемые при конструировании молекул рекомбинантной ДНК, могут происходить от любого вида . Например, ДНК растений можно соединить с ДНК бактерий, а ДНК человека — с ДНК грибов. можно создать последовательности ДНК, не встречающиеся нигде в природе Кроме того, путем химического синтеза ДНК , и включить их в молекулы рекомбинантной ДНК. Используя технологию рекомбинантной ДНК и синтетическую ДНК, можно создать и внедрить в живые организмы любую последовательность ДНК.

Белки, которые могут возникнуть в результате экспрессии рекомбинантной ДНК в живых клетках, называются рекомбинантными белками . Когда рекомбинантную ДНК, кодирующую белок, вводят в организм хозяина, рекомбинантный белок не обязательно образуется. [1] Экспрессия чужеродных белков требует использования специализированных векторов экспрессии и часто требует значительной реструктуризации путемчужеродные кодирующие последовательности. [2]

Рекомбинантная ДНК отличается от генетической рекомбинации тем, что первая возникает в результате искусственных методов, а вторая представляет собой нормальный биологический процесс, приводящий к ремиксу существующих последовательностей ДНК практически во всех организмах.

Производство

[ редактировать ]
Основная статья: Молекулярное клонирование

Молекулярное клонирование — это лабораторный процесс, используемый для получения рекомбинантной ДНК. [3] [4] [5] [6] Это один из двух наиболее широко используемых методов, наряду с полимеразной цепной реакцией (ПЦР), используемый для управления репликацией любой конкретной последовательности ДНК, выбранной экспериментатором. Между методами есть два принципиальных различия. Во-первых, молекулярное клонирование предполагает репликацию ДНК внутри живой клетки, тогда как ПЦР реплицирует ДНК в пробирке, свободной от живых клеток. Другое отличие состоит в том, что клонирование включает в себя вырезание и вставку последовательностей ДНК, тогда как ПЦР амплифицируется путем копирования существующей последовательности.

Для формирования рекомбинантной ДНК требуется вектор клонирования — молекула ДНК, которая реплицируется внутри живой клетки. Векторы обычно получают из плазмид или вирусов и представляют собой относительно небольшие сегменты ДНК, которые содержат необходимые генетические сигналы для репликации, а также дополнительные элементы для удобства вставки чужеродной ДНК, идентификации клеток, содержащих рекомбинантную ДНК, и, при необходимости, экспрессии чужая ДНК. Выбор вектора для молекулярного клонирования зависит от выбора организма-хозяина, размера клонируемой ДНК, а также от того, будет ли и как экспрессироваться чужеродная ДНК. [7] Сегменты ДНК можно объединить с помощью различных методов, таких как клонирование ферментов рестрикции/лигазы или сборка Гибсона . [ нужна ссылка ]

В стандартных протоколах клонирования клонирование любого фрагмента ДНК по существу включает семь этапов: (1) Выбор организма-хозяина и вектора клонирования, (2) Подготовка векторной ДНК, (3) Подготовка ДНК для клонирования, (4) Создание рекомбинантной ДНК, (5) Введение рекомбинантной ДНК в организм хозяина, (6) Отбор организмов, содержащих рекомбинантную ДНК, и (7) Скрининг клонов с желаемыми вставками ДНК и биологическими свойствами. [6] Эти шаги подробно описаны в соответствующей статье ( молекулярное клонирование ).

экспрессия ДНК

[ редактировать ]
Основная статья: Производство белка

Экспрессия ДНК требует трансфекции подходящих клеток-хозяев. Обычно клетки бактерий, дрожжей, насекомых или млекопитающих (такие как эмбриональные клетки почек человека или клетки CHO ). в качестве клеток-хозяев используют [8]

После трансплантации в организм хозяина чужеродная ДНК, содержащаяся в конструкции рекомбинантной ДНК, может экспрессироваться или не экспрессироваться . То есть ДНК может быть просто реплицирована без экспрессии или может быть транскрибирована и транслирована и получен рекомбинантный белок. Вообще говоря, экспрессия чужеродного гена требует реструктуризации гена, чтобы он включал последовательности, необходимые для производства молекулы мРНК хозяина , которая может использоваться трансляционным аппаратом (например, промотор , сигнал инициации трансляции и терминатор транскрипции ). [9] Для улучшения экспрессии эктопического гена могут быть внесены специфические изменения в организм хозяина. Кроме того, могут потребоваться изменения и в кодирующих последовательностях, чтобы оптимизировать трансляцию, сделать белок растворимым, направить рекомбинантный белок в нужное клеточное или внеклеточное местоположение и стабилизировать белок от деградации. [10] [11] [12]

Свойства организмов, содержащих рекомбинантную ДНК

[ редактировать ]

В большинстве случаев организмы, содержащие рекомбинантную ДНК, имеют очевидно нормальный фенотип . То есть их внешний вид, поведение и метаболизм обычно не изменяются, и единственный способ продемонстрировать наличие рекомбинантных последовательностей — это исследовать саму ДНК, обычно с помощью теста полимеразной цепной реакции (ПЦР). [13] Существуют существенные исключения, которые обсуждаются ниже.

Если последовательности рДНК кодируют экспрессируемый ген, то присутствие РНК и/или белковых продуктов рекомбинантного гена можно обнаружить, обычно используя RT-PCR или вестерн-гибридизации . методы [13] Грубые фенотипические изменения не являются нормой, если только рекомбинантный ген не был выбран и модифицирован таким образом, чтобы вызвать биологическую активность в организме хозяина. [14] Дополнительные встречающиеся фенотипы включают токсичность для организма-хозяина, индуцированную продуктом рекомбинантного гена, особенно если он сверхэкспрессируется или экспрессируется в неподходящих клетках или тканях. [ нужна ссылка ]

В некоторых случаях рекомбинантная ДНК может оказывать вредное воздействие, даже если она не экспрессируется. Одним из механизмов, с помощью которого это происходит, является инсерционная инактивация , при которой рДНК встраивается в ген клетки-хозяина. В некоторых случаях исследователи используют это явление, чтобы « выбить » гены, чтобы определить их биологическую функцию и важность. [15] Другой механизм, с помощью которого вставка рДНК в хромосомную ДНК может влиять на экспрессию генов, заключается в неадекватной активации ранее неэкспрессированных генов клетки-хозяина. Это может произойти, например, когда фрагмент рекомбинантной ДНК, содержащий активный промотор, оказывается рядом с ранее молчащим геном клетки-хозяина или когда ген клетки-хозяина, который функционирует для ограничения экспрессии гена, подвергается инсерционной инактивации рекомбинантной ДНК. [ нужна ссылка ]

Применение рекомбинантной ДНК

[ редактировать ]

Рекомбинантная ДНК широко используется в биотехнологии , медицине и научных исследованиях . Сегодня рекомбинантные белки и другие продукты, полученные в результате использования технологии ДНК, можно найти практически в каждой западной аптеке, врачебном или ветеринарном кабинете, медицинской испытательной лаборатории и лаборатории биологических исследований. Кроме того, организмы, которыми манипулировали с помощью технологии рекомбинантной ДНК, а также продукты, полученные из этих организмов, попали на многие фермы, супермаркеты , домашние аптечки и даже зоомагазины, например те, которые продают GloFish и другие генетически модифицированные продукты. модифицированные животные .

Наиболее распространенное применение рекомбинантной ДНК — фундаментальные исследования, в которых эта технология важна для большинства современных работ в области биологических и биомедицинских наук. [13] Рекомбинантная ДНК используется для идентификации, картирования и секвенирования генов, а также для определения их функции. Зонды рДНК используются для анализа экспрессии генов в отдельных клетках и во всех тканях целых организмов. Рекомбинантные белки широко используются в качестве реагентов в лабораторных экспериментах и ​​для создания зондов антител для изучения синтеза белка в клетках и организмах. [4]

Многие дополнительные практические применения рекомбинантной ДНК находят в промышленности, производстве продуктов питания, медицине и ветеринарии, сельском хозяйстве и биоинженерии. [4] Некоторые конкретные примеры приведены ниже.

Рекомбинантный химозин

[ редактировать ]

, обнаруженный в сычужном ферменте , Химозин является ферментом, ответственным за гидролиз κ - казеина с образованием пара- κ -казеина и гликомакропептида , что является первым шагом в образовании сыра , а затем творога и сыворотки . [16] Это была первая генно-инженерная пищевая добавка, используемая в коммерческих целях. Традиционно переработчики получали химозин из сычужного фермента, препарата, полученного из четвертого желудка телят, вскармливаемых молоком. Ученые создали непатогенный штамм (К-12) бактерий E. coli для крупномасштабного лабораторного производства фермента. Этот рекомбинантный фермент, полученный микробиологическим путем, структурно идентичен ферменту, полученному из телят, стоит дешевле и производится в больших количествах. Сегодня около 60% твердого сыра в США производится из генно-инженерного химозина. В 1990 году FDA присвоило химозину статус « общепризнанного безопасного » (GRAS) на основании данных, показывающих, что фермент безопасен. [17]

Рекомбинантный человеческий инсулин

[ редактировать ]

Рекомбинантный человеческий инсулин почти полностью заменил инсулин, полученный из животных источников (например, свиней и крупного рогатого скота) для лечения диабета 1 типа . Широко используются различные препараты рекомбинантного инсулина. [18] Рекомбинантный инсулин синтезируется путем вставки гена человеческого инсулина в E. coli или дрожжи (Saccharomyces cerevisiae). [19] который затем производит инсулин для использования человеком. [20] Инсулин, продуцируемый E. coli, требует дальнейших посттрансляционных модификаций (например, гликозилирования), тогда как дрожжи способны выполнять эти модификации самостоятельно, поскольку являются более сложными организмами-хозяевами. Преимущество рекомбинантного человеческого инсулина заключается в том, что после его хронического применения у пациентов не вырабатывается иммунная защита против него, подобно тому, как инсулин животного происхождения стимулирует иммунную систему человека. [21]

Рекомбинантный гормон роста человека (ГРЧ, соматотропин)

[ редактировать ]

Назначается пациентам, у которых гипофиз вырабатывает недостаточное количество препарата для поддержания нормального роста и развития. До того, как рекомбинантный гормон роста стал доступен, гормон роста для терапевтического использования получали из гипофизов трупов. Эта небезопасная практика привела к тому, что у некоторых пациентов развилась болезнь Крейтцфельдта-Якоба . Рекомбинантный гормон роста устранил эту проблему и теперь используется в терапевтических целях. [22] Спортсмены и другие люди злоупотребляли им в качестве препарата для повышения работоспособности. [23] [24]

Рекомбинантный фактор свертывания крови VIII

[ редактировать ]

Это рекомбинантная форма фактора VIII , белка свертывания крови, который вводится пациентам с нарушением свертываемости крови гемофилией , которые не способны вырабатывать фактор VIII в количествах, достаточных для поддержания нормального свертывания крови. [25] До разработки рекомбинантного фактора VIII белок получали путем обработки больших количеств человеческой крови от нескольких доноров, что несло очень высокий риск передачи инфекционных заболеваний, передающихся через кровь , например ВИЧ и гепатита В.

Рекомбинантная вакцина против гепатита В

[ редактировать ]

Инфекцию гепатита В можно успешно контролировать с помощью рекомбинантной субъединичной вакцины против гепатита В , которая содержит форму поверхностного антигена вируса гепатита В, вырабатываемую дрожжевыми клетками. Разработка рекомбинантной субъединичной вакцины была важным и необходимым событием, поскольку вирус гепатита В, в отличие от других распространенных вирусов, таких как вирус полиомиелита , нельзя выращивать in vitro . [26]

Рекомбинантные антитела

[ редактировать ]

Рекомбинантные антитела (rAb) получают in vitro с помощью систем экспрессии на основе клеток млекопитающих. Их моноспецифическое связывание со специфическим эпитопом делает rAb пригодными не только для исследовательских целей, но и в качестве вариантов терапии против определенных типов рака, инфекций и аутоиммунных заболеваний. [27]

Диагностика ВИЧ-инфекции

[ редактировать ]

Каждый из трех широко используемых методов диагностики ВИЧ-инфекции разработан с использованием рекомбинантной ДНК. Тест на антитела ( ИФА или вестерн-блоттинг ) использует рекомбинантный белок ВИЧ для проверки наличия антител , которые организм вырабатывает в ответ на ВИЧ-инфекцию. ДНК-тест позволяет выявить наличие генетического материала ВИЧ с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Разработка теста RT-PCR стала возможной благодаря молекулярному клонированию и анализу последовательности геномов ВИЧ. Страница тестирования на ВИЧ от Центров по контролю заболеваний США (CDC)

Золотой рис

[ редактировать ]

Золотой рис — это рекомбинантный сорт риса, созданный для экспрессии ферментов, ответственных за биосинтез β-каротина . [14] Этот сорт риса имеет существенные перспективы для снижения заболеваемости дефицитом витамина А среди населения мира. [28] Золотой рис в настоящее время не используется до решения вопросов регулирования и интеллектуальной собственности. [29]

Устойчивые к гербицидам культуры

[ редактировать ]

Были разработаны коммерческие сорта важных сельскохозяйственных культур (включая сою, кукурузу/кукурузу, сорго, канолу, люцерну и хлопок), которые включают рекомбинантный ген, который приводит к устойчивости к гербициду глифосату (торговое название Раундап ) и упрощает борьбу с сорняками с помощью глифосата. приложение. [30] Эти культуры широко используются в коммерческих целях в нескольких странах.

Устойчивые к насекомым культуры

[ редактировать ]

Bacillus thuringiensis — это бактерия, которая естественным образом производит белок ( токсин Bt ) с инсектицидными свойствами. [28] Бактерия уже много лет применяется к сельскохозяйственным культурам в качестве средства борьбы с насекомыми, и эта практика получила широкое распространение в сельском хозяйстве и садоводстве. Недавно были разработаны растения, экспрессирующие рекомбинантную форму бактериального белка, которая может эффективно контролировать некоторых насекомых-хищников. Экологические проблемы, связанные с использованием этих трансгенных культур, до конца не решены. [31]

История

[ редактировать ]

Идея рекомбинантной ДНК была впервые предложена Питером Лоббаном, аспирантом профессора Дейла Кайзера на кафедре биохимии Медицинской школы Стэнфордского университета. [32] Первые публикации, описывающие успешное производство и внутриклеточную репликацию рекомбинантной ДНК, появились в 1972 и 1973 годах в Стэнфорде и Калифорнийском университете в Сан-Франциско . [33] [34] [35] [36] В 1980 году Пол Берг , профессор кафедры биохимии Стэнфорда и автор одной из первых статей [33] был удостоен Нобелевской премии по химии за работу над нуклеиновыми кислотами, «с особым вниманием к рекомбинантной ДНК». Вернер Арбер , Гамильтон Смит и Дэниел Натанс получили Нобелевскую премию по физиологии и медицине 1978 года за открытие эндонуклеаз рестрикции , которые усовершенствовали методы технологии рДНК. [ нужна ссылка ]

Стэнфордский университет подал заявку на патент США на рекомбинантную ДНК 4 ноября 1974 года, указав изобретателей Герберта В. Бойера (профессора Калифорнийского университета в Сан-Франциско ) и Стэнли Н. Коэна (профессора Стэнфордского университета ); этот патент США 4237224A был выдан 2 декабря 1980 г. [37] [38] Первым лицензированным препаратом, созданным с использованием технологии рекомбинантной ДНК, был человеческий инсулин, разработанный компанией Genentech и лицензированный компанией Eli Lilly and Company . [39]

Споры

[ редактировать ]

Ученые, принимавшие участие в первоначальной разработке методов рекомбинантной ДНК, признали, что организмы, содержащие рекомбинантную ДНК, могут иметь нежелательные или опасные свойства. На Асиломарской конференции 1975 года по рекомбинантной ДНК эти проблемы обсуждались, и был инициирован добровольный мораторий на исследования рекомбинантной ДНК для экспериментов, которые считались особенно рискованными. Этот мораторий широко соблюдался до тех пор, пока Национальные институты здравоохранения (США) не разработали и не выпустили официальные рекомендации по работе с рДНК. Сегодня рекомбинантные молекулы ДНК и рекомбинантные белки обычно не считаются опасными. Однако сохраняются опасения по поводу некоторых организмов, экспрессирующих рекомбинантную ДНК, особенно когда они покидают лабораторию и попадают в окружающую среду или пищевую цепь. Эти проблемы обсуждаются в статьях о генетически модифицированных организмах и спорах о генетически модифицированных продуктах питания . Кроме того, существуют опасения по поводу побочных продуктов биофармацевтического производства, где рекомбинантная ДНК приводит к образованию специфических белковых продуктов. Главный побочный продукт, называемый Белок клетки-хозяина поступает из системы экспрессии хозяина и представляет угрозу для здоровья пациента и окружающей среды в целом. [40] [41]

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Розано, Херман Л.; Чекарелли, Эдуардо А. (17 апреля 2014 г.). «Экспрессия рекомбинантного белка в Escherichia coli: достижения и проблемы» . Границы микробиологии . 5 : 172. дои : 10.3389/fmicb.2014.00172 . ISSN   1664-302X . ПМК   4029002 . ПМИД   24860555 .
  2. ^ «Промоторы, используемые для регулирования экспрессии генов» . www.cambia.org . Архивировано из оригинала 24 сентября 2018 года . Проверено 16 февраля 2018 г.
  3. ^ Кэмпбелл, Нил А. и Рис, Джейн Б. (2002). Биология (6-е изд.) . Сан-Франциско: Эддисон Уэсли. стр. 375–401. ISBN  978-0-201-75054-6 .
  4. ^ Jump up to: а б с Питер Уолтер; Альбертс, Брюс; Джонсон, Александр С.; Льюис, Джулиан; Рафф, Мартин С.; Робертс, Кейт (2008). Молекулярная биология клетки (5-е издание, расширенная версия) . Нью-Йорк: Garland Science. ISBN  978-0-8153-4111-6 . . Четвертое издание доступно онлайн на книжной полке NCBI: ссылка
  5. ^ Берг, Джереми Марк; Тимочко, Джон Л.; Страйер, Люберт (2010). Биохимия, 7-е изд. (Биохимия (Берг)) . WH Freeman & Company. ISBN  978-1-4292-2936-4 . Пятое издание доступно онлайн на книжной полке NCBI: ссылка
  6. ^ Jump up to: а б Уотсон, Джеймс Д. (2007). Рекомбинантная ДНК: гены и геномы: краткий курс . Сан-Франциско: WH Freeman. ISBN  978-0-7167-2866-5 .
  7. ^ Рассел, Дэвид В.; Сэмбрук, Джозеф (2001). Молекулярное клонирование: лабораторное пособие . Колд-Спринг-Харбор, Нью-Йорк: Лаборатория Колд-Спринг-Харбор. ISBN  978-0-87969-576-7 .
  8. ^ Эберле, Кристиан (декабрь 2022 г.). «Технология рекомбинантной ДНК – этапы, методы и примеры» . Проверено 18 июля 2023 г.
  9. ^ Ханниг, Г.; Макридес, С. (1998). «Стратегии оптимизации экспрессии гетерологичных белков в Escherichia coli». Тенденции в биотехнологии . 16 (2): 54–60. дои : 10.1016/S0167-7799(97)01155-4 . ПМИД   9487731 .
  10. ^ Махмуди Гомари, Мохаммед; Сарайгорд-Афшари, Неда; Фарсимадан, Марзие; Ростами, Неда; Агамири, Шахин; Фарахоллахия, Мохаммад М. (1 декабря 2020 г.). «Возможности и проблемы методов очистки белков с помощью меток: применение в фармацевтической промышленности» . Достижения биотехнологии . 45 : 107653. doi : 10.1016/j.biotechadv.2020.107653 . ISSN   0734-9750 . ПМИД   33157154 . S2CID   226276355 .
  11. ^ Брондык, WH (2009). «Глава 11. Выбор подходящего метода экспрессии рекомбинантного белка». Руководство по очистке белков, 2-е издание . Методы энзимологии. Том. 463. стр. 131–147. дои : 10.1016/S0076-6879(09)63011-1 . ISBN  9780123745361 . ПМИД   19892171 .
  12. ^ Ортега, Клаудия; Прието, Даниэль; Абреу, Сесилия; Оппеццо, Пабло Хавьер; Корреа, Агустин (2018). «Набор многокамерных и многохозяинных векторов для экспрессии и очистки рекомбинантных белков» . Границы микробиологии . 9 : 1384. дои : 10.3389/fmicb.2018.01384 . ISSN   1664-302X . ПМК   6030378 . ПМИД   29997597 .
  13. ^ Jump up to: а б с Браун, Терри (2006). Клонирование генов и анализ ДНК: введение . Кембридж, Массачусетс: Паб Blackwell. ISBN  978-1-4051-1121-8 .
  14. ^ Jump up to: а б Йе, Х.; Аль-Бабили, С.; Клёти, А.; Чжан, Дж.; Лукка, П.; Бейер, П.; Потрикус, И. (2000). «Разработка пути биосинтеза провитамина А (бета-каротина) в (без каротиноидов) эндосперма риса». Наука . 287 (5451): 303–305. Бибкод : 2000Sci...287..303Y . дои : 10.1126/science.287.5451.303 . ПМИД   10634784 . S2CID   40258379 .
  15. ^ Коллер, Б.Х.; Смитис, О. (1992). «Изменение генов животных путем нацеливания на гены». Ежегодный обзор иммунологии . 10 : 705–730. дои : 10.1146/annurev.iy.10.040192.003421 . ПМИД   1591000 .
  16. ^ «Химозин - обзор | Темы ScienceDirect» . Архивировано из оригинала 10 декабря 2023 г. Проверено 10 декабря 2023 г. Ссылка на оригинальную публикацию
  17. ^ Донна У. Фогт и Микки Пэриш. (1999) Пищевая биотехнология в Соединенных Штатах: наука, регулирование и проблемы.
  18. ^ Гуаланди-Синьорини, А.; Георгий, Г. (2001). «Составы инсулина - обзор». Европейский обзор медицинских и фармакологических наук . 5 (3): 73–83. ПМИД   12004916 .
  19. ^ #Инсулин аспарт
  20. ^ «Инсулин человеческий» . go.drugbank.com . Проверено 10 декабря 2023 г.
  21. ^ Миллс, Джошуа (16 мая 2022 г.). «Биологическая рекомбинантная технология HSC: Производство инсулина» . Эдцион . Проверено 26 декабря 2022 г.
  22. ^ Фон Фанге, Т.; МакДиармид, Т.; МакКлер, Л.; Золотор, А. (2008). «Клинические исследования: может ли рекомбинантный гормон роста эффективно лечить идиопатическую низкорослость?». Журнал семейной практики . 57 (9): 611–612. ПМИД   18786336 .
  23. ^ Фернандес, М.; Хоузи, Р. (2009). «Стимулирующие препараты заманивают в ловушку и неспортсменов». Журнал семейной практики . 58 (1): 16–23. ПМИД   19141266 .
  24. ^ «Соматотропин» . go.drugbank.com . Проверено 10 декабря 2023 г.
  25. ^ Манко-Джонсон, MJ (2010). «Достижения в области ухода и лечения детей, больных гемофилией». Достижения педиатрии . 57 (1): 287–294. дои : 10.1016/j.yapd.2010.08.007 . ПМИД   21056743 .
  26. ^ «Информация о вакцине против гепатита B от Фонда борьбы с гепатитом B» . 28 июня 2011 г. Архивировано из оригинала 28 июня 2011 г. Проверено 10 декабря 2023 г.
  27. ^ Наранг, Аарти (2022). «Рекомбинантные антитела: новый уровень технологии антител» .
  28. ^ Jump up to: а б Пейн, Дж.А.; Шиптон, Калифорния; Чаггар, С.; Хауэллс, Р.М.; Кеннеди, MJ; Вернон, Г.; Райт, С.Ю.; Хинчлифф, Э.; Адамс, Дж.Л.; Сильверстоун, Алабама; Дрейк, Р. (2005). «Улучшение пищевой ценности золотого риса за счет увеличения содержания провитаминов». Природная биотехнология . 23 (4): 482–487. дои : 10.1038/nbt1082 . ПМИД   15793573 . S2CID   632005 .
  29. ^ ДХНС. «Иностранные группы поддерживают «золотой рис» в Индии» . Декан Вестник . Проверено 10 декабря 2023 г.
  30. ^ Функе, Т.; Хан, Х.; Хили-Фрид, М.; Фишер, М.; Шенбрунн, Э. (2006). «Молекулярная основа устойчивости к гербицидам культур, готовых к Раундапу» . Труды Национальной академии наук . 103 (35): 13010–13015. Бибкод : 2006PNAS..10313010F . дои : 10.1073/pnas.0603638103 . ПМЦ   1559744 . ПМИД   16916934 .
  31. ^ Мендельсон, М.; Коф, Дж.; Вайтузис, З.; Мэтьюз, К. (2003). «Безопасны ли посевы Bt?» . Природная биотехнология . 21 (9): 1003–1009. дои : 10.1038/nbt0903-1003 . ПМИД   12949561 . S2CID   16392889 .
  32. ^ Лир, Дж. (1978). Рекомбинантная ДНК: нерассказанная история . Нью-Йорк: Издательство Crown. п. 43.
  33. ^ Jump up to: а б Джексон, Д.; Саймонс, Р.; Берг, П. (1972). «Биохимический метод внедрения новой генетической информации в ДНК вируса обезьян 40: кольцевые молекулы ДНК SV40, содержащие гены фага лямбда и галактозный оперон Escherichia coli» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 69 (10): 2904–2909. Бибкод : 1972PNAS...69.2904J . дои : 10.1073/pnas.69.10.2904 . ПМК   389671 . ПМИД   4342968 .
  34. ^ Мерц, Дж. Э.; Дэвис, RW (1972). «Расщепление ДНК эндонуклеазой рестрикции R 1 приводит к образованию слипшихся концов» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 69 (11): 3370–4. Бибкод : 1972PNAS...69.3370M . дои : 10.1073/pnas.69.11.3370 . ПМЦ   389773 . ПМИД   4343968 .
  35. ^ Лоббан, П.; Кайзер, А. (1973). «Ферментативное сквозное соединение молекул ДНК». Журнал молекулярной биологии . 78 (3): 453–471. дои : 10.1016/0022-2836(73)90468-3 . ПМИД   4754844 .
  36. ^ Коэн, С.; Чанг, А.; Бойер, Х.; Хеллинг, Р. (1973). «Конструирование биологически функциональных бактериальных плазмид in vitro» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 70 (11): 3240–3244. Бибкод : 1973PNAS...70.3240C . дои : 10.1073/pnas.70.11.3240 . ПМК   427208 . ПМИД   4594039 .
  37. ^ «Процесс производства биологически функциональных молекулярных химер» , получено из патента Google.
  38. ^ Хьюз, С. (2001). «Заработок долларов на ДНК. Первый крупный патент в области биотехнологии и коммерциализация молекулярной биологии, 1974–1980 годы» . Исида; Международный обзор, посвященный истории науки и ее культурному влиянию . 92 (3): 541–575. дои : 10.1086/385281 . hdl : 10161/8125 . ПМИД   11810894 . S2CID   22823711 . Архивировано из оригинала (PDF) 14 февраля 2021 г. Проверено 5 сентября 2019 г.
  39. ^ Джонсон, И.С. (1983). «Человеческий инсулин, полученный с помощью технологии рекомбинантной ДНК». Наука . 219 (4585): 632–637. Бибкод : 1983Sci...219..632J . дои : 10.1126/science.6337396 . ПМИД   6337396 .
  40. ^ Ван, Син; Хантер, Алан К.; Мозье, Нед М. (15 июня 2009 г.). «Белки клеток-хозяев в разработке биологических препаратов: идентификация, количественный анализ и оценка риска» . Биотехнология и биоинженерия . 103 (3): 446–458. дои : 10.1002/бит.22304 . ISSN   0006-3592 . ПМИД   19388135 . S2CID   22707536 .
  41. ^ Брейсвелл, Дэниел Г.; Фрэнсис, Ричард; Смейлс, К. Марк (14 июля 2015 г.). «Будущее идентификации белков клеток-хозяев (HCP) во время разработки процессов и производства связано с риск-ориентированным управлением их контролем» . Биотехнология и биоинженерия . 112 (9): 1727–1737. дои : 10.1002/бит.25628 . ISSN   0006-3592 . ПМЦ   4973824 . ПМИД   25998019 .

Дальнейшее чтение

[ редактировать ]
[ редактировать ]
Ресурсы библиотеки о
Рекомбинантные белки
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Recombinant_DNA&oldid=1223521676"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: e0df077bd2f658226c26bc9a6473f72c__1715526720
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/e0/2c/e0df077bd2f658226c26bc9a6473f72c.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Recombinant DNA - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)