Рецептор интерлейкина-13

рецептор интерлейкина 13, альфа 2
рецептор интерлейкина 13, альфа 2
Идентификаторы
Символ	Ил13РА2
Альт. символы	IL-13R, IL13BP, CD213a2
ген NCBI	3598
HGNC	5975
МОЙ БОГ	300130
RefSeq	НМ_000640
ЮниПрот	Q14627
Другие данные
Локус	X q13.1-q28
Structures
показывать Искать
Structures	Swiss-model
Domains	InterPro

показывать Искать
Structures	Swiss-model
Domains	InterPro

рецептор интерлейкина 13, альфа 1
рецептор интерлейкина 13, альфа 1
Идентификаторы
Символ	Ил13РА1
Альт. символы	IL-13Ra, NR4, CD213a1
ген NCBI	3597
HGNC	5974
МОЙ БОГ	300119
RefSeq	НМ_001560
ЮниПрот	P78552
Другие данные
Локус	Хр. Х q24
Structures
показывать Искать
Structures	Swiss-model
Domains	InterPro

рецептор интерлейкина 4

Идентификаторы

Символ

ИЛ4Р

Альт. символы

ИЛ4РА; CD124

Другие данные

Хр. 16 п12.1-11.2

Искать
Structures	Swiss-model
Domains	InterPro

Рецептор интерлейкина-13 представляет собой рецептор цитокина I типа , связывающий интерлейкин-13 . Он состоит из двух субъединиц, кодируемых IL13RA1 и IL4R соответственно. ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]} Эти два гена кодируют белки IL-13Rα1 и IL-4Rα. Они образуют димер, в котором IL-13 связывается с цепью IL-13Rα1, а IL-4Rα стабилизирует это взаимодействие. Этот рецептор IL-13 также может инициировать передачу сигналов IL-4 . В обоих случаях это происходит посредством активации пути Янус-киназы преобразователя сигнала и активатора транскрипции ( STAT ), что приводит к фосфорилированию STAT6 (JAK) / . Фосфорилированный STAT6 димеризуется и действует как фактор транскрипции, активируя многие гены, такие как эотаксин . ^{[ нужна ссылка ]}

Существует также еще один рецептор, способный связывать IL-13: IL-13Rα2, кодируемый геном IL13RA2 . Это связывает IL-13 с очень высоким сродством (и, следовательно, может его изолировать), но не позволяет связываться IL-4. Он действует как негативный регулятор как IL-13, так и IL-4, однако механизм этого до сих пор не определен. ^{[ 3 ]}

Функция

Интерлейкин 13 (IL-13) представляет собой эффекторный цитокин, частично разделяющий сигнальные пути с IL-4 за счет использования общей рецепторной системы (рецептор IL-4 типа II). «Частная» рецепторная система, специфически связывающая IL-13 с высоким сродством, по-видимому, использует разные сигнальные пути и все чаще изучается на предмет ее потенциала в качестве нового прогностического фактора, биомаркера или терапевтической мишени при различных типах рака. ^{[ 4 ]}^{[ 5 ]}^{[ 6 ]}^{[ 7 ]}

«Общий» рецептор IL-4/IL-13

IL-13 использует рецептор IL-4 типа II (IL-4RII), комплекс, образованный цепью IL-4Rα и цепью IL-13Rα1. Первоначально лиганд (IL-4 или IL-13) связывается с цепью IL-4Rα и IL-13Rα1 соответственно; после этого вторичная цепь (IL-13Rα1 и IL-4Rα соответственно) также связывается, образуя полный IL-4RII. Однако комплекс IL-4/IL-4Rα может также связываться с другой вторичной цепью, IL-2Rγc, образуя рецептор IL-4 типа I (IL-4RI). ^{[ 8 ]} В негематопоэтических клетках IL-2Rγc экспрессируется слабо; с другой стороны, IL-13Rα1 слабо экспрессируется в лимфоцитах, но обильно экспрессируется во всех некроветворных клетках; миелоидные клетки в определенной степени экспрессируют оба из них. Это различное распределение вторичных цепей объясняет разницу в распределении завершенных рецепторов: IL-4RI преимущественно экспрессируется в лимфоцитах, а IL-4RII преимущественно экспрессируется в негематопоэтических клетках. Следовательно, только IL-4 через IL-4R1 способен модулировать функцию лимфоцитов, индуцируя поляризацию Th2 и переключение класса IgG1/IgE В-клеток, тогда как IL-13 действует преимущественно на миелоидные клетки и негематопоэтические клетки, оказывая сильное влияние на выработку слизи, сокращение гладких мышц, проницаемость эпителия (например, аллергическая астма). ^{[ 9 ]} После полной сборки конформационные изменения в хвостах IL-4RI или IL-4RII приводят к внутриклеточной передаче сигналов, начиная с ауто- и перекрестного фосфорилирования связанных Jak-киназ (Jak3 для IL-2Rγc, Jak1 для IL-4Rα, Jak2 и Jak2). Tyk2 для IL-13Rα1), ^{[ 10 ]} с последующим фосфорилированием внутриклеточных доменов IL-4Rα в критических остатках Y, которые, таким образом, активируются с образованием сайтов стыковки для нижестоящих сигнальных молекул, наделенных SH-доменами. ^{[ 8 ]} В то время как сайты стыковки в IL-4R1 (и, следовательно, в IL-4) способны эффективно активировать как сигнальные молекулы STAT6, так и IRS2, IL-4RII (и, следовательно, IL-13) эффективно активирует только STAT6. ^{[ 11 ]} Активированные молекулы STAT6 образуют димеры, которые перемещаются в ядро для связывания чувствительных элементов (например, промотор CD23 в В-клетках, ^{[ 12 ]} Усилитель аргиназы 1 в макрофагах ^{[ 13 ]} ) Сродство связывания IL-4 с IL-4Rα намного выше, чем IL-13 с IL-13Rα1, следовательно, IL-4 будет конкурировать с IL-13 за доступность рецептора в IL4R2 при равной концентрации. ^{[ 14 ]}

«Частный» рецептор IL-13.

Помимо цепи IL-13Rα1 (которая работает совместно с IL-4Rα, IL-13 может связываться с гораздо более высоким сродством к IL-13Rα2. IL-13Rα2 имеет 35% гомологию с IL-13Rα1 и экспрессируется главным образом в структурных клетках (но также был идентифицирован в фибробластах и только у мышей в растворимой форме). Он обладает исключительным сродством к IL-13, но не образует комплексов с какой-либо вторичной цепью. ^{[ 14 ]} Из-за очевидного отсутствия сигнального домена и короткого хвоста первоначально считалось, что он не обладает какой-либо сигнальной активностью и рассматривается как рецептор-ловушка, то есть его функция будет заключаться просто в конкуренции за связывание IL-13 и нейтрализации его эффект. Действительно, было показано, что IL-13Rα2 блокирует управляемую IL-13 передачу сигналов STAT6 путем связывания IL-13 с высоким сродством, однако частичная блокировка также распространяется на управляемую IL-4 передачу сигналов STAT6, предположительно из-за того, что цитоплазматический домен мешает сборка IL-4/IL-4Rα со вторичной цепью. ^{[ 15 ]}^{[ 16 ]} Однако накапливается все больше доказательств того, что IL-13Rα2 — это нечто большее, чем «приманка». Передача сигналов IL-13 через IL-13Rα2 и продукцию TGF-β, управляемую AP1, первоначально была зарегистрирована в моноцитах, а затем подтверждена на мышиных моделях. ^{[ 17 ]}^{[ 18 ]} Согласно этим исследованиям, IL-13 посредством сверхэкспрессии (индуцированной TNF-α) IL-13Rα2 может активировать передачу сигналов AP-1 и выработку TGF-β, вызывая профиброзные эффекты. Некоторые недавние работы показывают, как этот рецептор может фактически активировать широкий спектр сигналов (например, WNT/β-катенин, MAPK/ERK, AKT/PKB, Src/FAK, PIP3K) в нормальной или патологической среде. Как IL-13Rα2 может преодолеть ограничение короткого хвоста из 17 аминокислот, лишенного какого-либо сигнального мотива, пока неясно, но было показано, что, по крайней мере, в некоторых случаях, ассоциация с другими рецепторами или сигнальными адаптерами может помочь. ^{[ 19 ]}^{[ 20 ]}

Ссылки

^ Мурата Т., Обири Н.И., Пури Р.К. (март 1998 г.). «Структура и передача сигнала через рецепторы интерлейкина-4 и интерлейкина-13 (обзор)». Международный журнал молекулярной медицины . 1 (3): 551–7. дои : 10.3892/ijmm.1.3.551 . ПМИД 9852261 .
^ Чомарат П., Баншеро Дж. (1998). «Интерлейкин-4 и интерлейкин-13: их сходства и различия». Международные обзоры иммунологии . 17 (1–4): 1–52. дои : 10.3109/08830189809084486 . ПМИД 9914942 .
^ Сейфизаде Н., Сейфизаде Н., Гариби Т., Бабалоо З. (декабрь 2015 г.). «Интерлейкин-13 как важный цитокин: обзор его роли в некоторых заболеваниях человека» (PDF) . Acta Microbiologica et Immunologica Hungarica . 62 (4): 341–78. дои : 10.1556/030.62.2015.4.2 . ПМИД 26689873 .
^ Тачи Б., Браун С.Э., Бинелло Э., Вербанет К., Сампат П., Сенгупта С. (октябрь 2014 г.). «Значение терапии глиобластомы, нацеленной на рецептор интерлейкина-13 альфа-2» . Нейроонкология . 16 (10): 1304–12. дои : 10.1093/neuonc/nou045 . ПМК 4165413 . ПМИД 24723564 .
^ Сузуки А., Леланд П., Джоши Б.Х., Пури Р.К. (сентябрь 2015 г.). «Нацеливание на рецепторы IL-4 и IL-13 для терапии рака». Цитокин . 75 (1): 79–88. дои : 10.1016/j.cyto.2015.05.026 . ПМИД 26088753 .
^ Се М, Ву XJ, Чжан JJ, Хэ CS (октябрь 2015 г.). «Рецептор IL-13 α2 является отрицательным прогностическим фактором рака легких человека и стимулирует рост рака легких у мышей» . Онкотаргет . 6 (32): 32902–13. дои : 10.18632/oncotarget.5361 . ПМЦ 4741738 . ПМИД 26418721 .
^ Линь С, Лю Х, Чжан Х, Хэ Х, Ли Х, Шэнь З, Цинь Дж, Цинь Икс, Сюй Дж, Сунь Ю (август 2016 г.). «Рецептор интерлейкина-13 α2 связан с плохим прогнозом у пациентов с раком желудка после гастрэктомии» . Онкотаргет . 7 (31): 49281–49288. дои : 10.18632/oncotarget.10297 . ПМК 5226507 . ПМИД 27351230 .
^ Jump up to: ^а ^б Нелмс К., Киган А.Д., Саморано Дж., Райан Дж.Дж., Пол В.Е. (1999). «Рецептор IL-4: сигнальные механизмы и биологические функции» . обзор. Ежегодный обзор иммунологии . 17 : 701–38. doi : 10.1146/annurev.immunol.17.1.701 . ПМИД 10358772 .
^ Уиллс-Карп М., Луйимбази Дж., Сюй X, Шофилд Б., Небен Т.Ю., Карп К.Л., Дональдсон Д.Д. (декабрь 1998 г.). «Интерлейкин-13: центральный медиатор аллергической астмы» . начальный. Наука . 282 (5397): 2258–61. Бибкод : 1998Sci...282.2258W . дои : 10.1126/science.282.5397.2258 . ПМИД 9856949 .
^ Юнттила И.С. (2018). «Настройка ответов цитокинов: обновленная информация о рецепторных комплексах интерлейкина (IL)-4 и IL-13» . Границы в иммунологии . 9 : 888. дои : 10.3389/fimmu.2018.00888 . ПМК 6001902 . ПМИД 29930549 .
^ Хеллер Н.М., Ци Икс, Юнттила И.С., Ширей К.А., Фогель С.Н., Пол В.Е., Киган А.Д. (декабрь 2008 г.). «IL-4R типа I избирательно активируют IRS-2, вызывая экспрессию целевого гена в макрофагах» . Научная сигнализация . 1 (51): ра17. дои : 10.1126/scisignal.1164795 . ПМЦ 2739727 . ПМИД 19109239 .
^ Киган А.Д., Конрад Д.Х. Мышиный лимфоцитовый рецептор IgE. V. Биосинтез, транспорт и созревание рецептора Fc-эпсилон В-клеток. Дж. Иммунол (1987) 139:1199–205.
^ Пауло А.Л., Ручман Р., Ланг Р., Пернис А., Ватович С.С., Мюррей П.Дж. (июнь 2004 г.). «Опосредованный энхансером контроль экспрессии аргиназы I, специфичной для макрофагов» . Журнал иммунологии . 172 (12): 7565–73. дои : 10.4049/jimmunol.172.12.7565 . ПМИД 15187136 .
^ Jump up to: ^а ^б Маккормик С.М., Хеллер Н.М. (сентябрь 2015 г.). «Комментарий: рецепторы IL-4 и IL-13 и передача сигналов» . Цитокин . 75 (1): 38–50. дои : 10.1016/j.cyto.2015.05.023 . ПМЦ 4546937 . ПМИД 26187331 .
^ Чандриани С., ДеПианто Д.Д., Н'Диай Э.Н., Аббас А.Р., Джекман Дж., Беверс Дж. и др. (июль 2014 г.). «Эндогенно экспрессируемый IL-13Rα2 ослабляет реакции, опосредованные IL-13, но не активирует передачу сигналов в фибробластах легких человека» . Журнал иммунологии . 193 (1): 111–9. doi : 10.4049/jimmunol.1301761 . ПМИД 24879793 .
^ Чжэн Т., Лю В., О С.И., Чжу З., Ху Б., Гомер Р.Дж., Кон Л., Грусби М.Дж., Элиас Дж.А. (январь 2008 г.). «Рецептор IL-13 альфа2 избирательно ингибирует IL-13-индуцированные реакции в легких мыши» . Журнал иммунологии . 180 (1): 522–9. дои : 10.4049/jimmunol.180.1.522 . ПМИД 18097054 .
^ Фихтнер-Фейгль С., Стробер В., Каваками К., Пури Р.К., Китани А. (январь 2006 г.). «Передача сигналов IL-13 через рецептор IL-13альфа2 участвует в индукции продукции TGF-бета1 и фиброзе». Природная медицина . 12 (1): 99–106. дои : 10.1038/nm1332 . ПМИД 16327802 . S2CID 38397076 .
^ Бруннер С.М., Шихль Г., Кессельринг Р., Мартин М., Балам С., Шлитт Х.Дж., Гейсслер Е.К., Фихтнер-Фейгль С. (октябрь 2013 г.). «Передача сигналов IL-13 через IL-13Rα2 запускает TGF-β1-зависимый фиброз аллотрансплантата» . Трансплантационные исследования . 2 (1): 16. дои : 10.1186/2047-1440-2-16 . ПМК 4016099 . ПМИД 24143891 .
^ Бартоломе Р.А., Гарсиа-Пальмеро И., Торрес С., Лопес-Лусендо М., Балясникова И.В., Касаль Дж.И. (июнь 2015 г.). «Передача сигналов рецептора IL13 α2 требует каркасного белка FAM120A для активации путей FAK и PI3K при метастазах рака толстой кишки» . Исследования рака . 75 (12): 2434–44. дои : 10.1158/0008-5472.CAN-14-3650 . hdl : 10261/123035 . ПМИД 25896327 .
^ Хе CH, Ли CG, Дела Круз CS, Ли CM, Чжоу Ю, Ахангари Ф, Ма Б, Херцог ЭЛ, Розенберг С.А., Ли Ю, Нур AM, Парих ЧР, Шмидт И, Модис Ю, Кэнтли Л, Элиас Дж.А. (август 2013). «Хитиназа 3-подобная 1 регулирует клеточные и тканевые реакции через рецептор IL-13 α2» . Отчеты по ячейкам . 4 (4): 830–41. дои : 10.1016/j.celrep.2013.07.032 . ПМЦ 3988532 . ПМИД 23972995 .

Внешние ссылки

Рецепторы + интерлейкин-13 в Национальной медицинской библиотеке США по медицинским предметным рубрикам (MeSH)

[pmid9852261-1] Мурата Т., Обири Н.И., Пури Р.К. (март 1998 г.). «Структура и передача сигнала через рецепторы интерлейкина-4 и интерлейкина-13 (обзор)». Международный журнал молекулярной медицины . 1 (3): 551–7. дои : 10.3892/ijmm.1.3.551 . ПМИД 9852261 .

[pmid9914942-2] Чомарат П., Баншеро Дж. (1998). «Интерлейкин-4 и интерлейкин-13: их сходства и различия». Международные обзоры иммунологии . 17 (1–4): 1–52. дои : 10.3109/08830189809084486 . ПМИД 9914942 .

[pmid26689873-3] Сейфизаде Н., Сейфизаде Н., Гариби Т., Бабалоо З. (декабрь 2015 г.). «Интерлейкин-13 как важный цитокин: обзор его роли в некоторых заболеваниях человека» (PDF) . Acta Microbiologica et Immunologica Hungarica . 62 (4): 341–78. дои : 10.1556/030.62.2015.4.2 . ПМИД 26689873 .

[pmid24723564-4] Тачи Б., Браун С.Э., Бинелло Э., Вербанет К., Сампат П., Сенгупта С. (октябрь 2014 г.). «Значение терапии глиобластомы, нацеленной на рецептор интерлейкина-13 альфа-2» . Нейроонкология . 16 (10): 1304–12. дои : 10.1093/neuonc/nou045 . ПМК 4165413 . ПМИД 24723564 .

[pmid26088753-5] Сузуки А., Леланд П., Джоши Б.Х., Пури Р.К. (сентябрь 2015 г.). «Нацеливание на рецепторы IL-4 и IL-13 для терапии рака». Цитокин . 75 (1): 79–88. дои : 10.1016/j.cyto.2015.05.026 . ПМИД 26088753 .

[pmid26418721-6] Се М, Ву XJ, Чжан JJ, Хэ CS (октябрь 2015 г.). «Рецептор IL-13 α2 является отрицательным прогностическим фактором рака легких человека и стимулирует рост рака легких у мышей» . Онкотаргет . 6 (32): 32902–13. дои : 10.18632/oncotarget.5361 . ПМЦ 4741738 . ПМИД 26418721 .

[pmid27351230-7] Линь С, Лю Х, Чжан Х, Хэ Х, Ли Х, Шэнь З, Цинь Дж, Цинь Икс, Сюй Дж, Сунь Ю (август 2016 г.). «Рецептор интерлейкина-13 α2 связан с плохим прогнозом у пациентов с раком желудка после гастрэктомии» . Онкотаргет . 7 (31): 49281–49288. дои : 10.18632/oncotarget.10297 . ПМК 5226507 . ПМИД 27351230 .

[Nelms_1999-8] Jump up to: ^а ^б Нелмс К., Киган А.Д., Саморано Дж., Райан Дж.Дж., Пол В.Е. (1999). «Рецептор IL-4: сигнальные механизмы и биологические функции» . обзор. Ежегодный обзор иммунологии . 17 : 701–38. doi : 10.1146/annurev.immunol.17.1.701 . ПМИД 10358772 .

[pmid9856949-9] Уиллс-Карп М., Луйимбази Дж., Сюй X, Шофилд Б., Небен Т.Ю., Карп К.Л., Дональдсон Д.Д. (декабрь 1998 г.). «Интерлейкин-13: центральный медиатор аллергической астмы» . начальный. Наука . 282 (5397): 2258–61. Бибкод : 1998Sci...282.2258W . дои : 10.1126/science.282.5397.2258 . ПМИД 9856949 .

[pmid29930549-10] Юнттила И.С. (2018). «Настройка ответов цитокинов: обновленная информация о рецепторных комплексах интерлейкина (IL)-4 и IL-13» . Границы в иммунологии . 9 : 888. дои : 10.3389/fimmu.2018.00888 . ПМК 6001902 . ПМИД 29930549 .

[pmid19109239-11] Хеллер Н.М., Ци Икс, Юнттила И.С., Ширей К.А., Фогель С.Н., Пол В.Е., Киган А.Д. (декабрь 2008 г.). «IL-4R типа I избирательно активируют IRS-2, вызывая экспрессию целевого гена в макрофагах» . Научная сигнализация . 1 (51): ра17. дои : 10.1126/scisignal.1164795 . ПМЦ 2739727 . ПМИД 19109239 .

[12] Киган А.Д., Конрад Д.Х. Мышиный лимфоцитовый рецептор IgE. V. Биосинтез, транспорт и созревание рецептора Fc-эпсилон В-клеток. Дж. Иммунол (1987) 139:1199–205.

[pmid15187136-13] Пауло А.Л., Ручман Р., Ланг Р., Пернис А., Ватович С.С., Мюррей П.Дж. (июнь 2004 г.). «Опосредованный энхансером контроль экспрессии аргиназы I, специфичной для макрофагов» . Журнал иммунологии . 172 (12): 7565–73. дои : 10.4049/jimmunol.172.12.7565 . ПМИД 15187136 .

[McCormick_2015-14] Jump up to: ^а ^б Маккормик С.М., Хеллер Н.М. (сентябрь 2015 г.). «Комментарий: рецепторы IL-4 и IL-13 и передача сигналов» . Цитокин . 75 (1): 38–50. дои : 10.1016/j.cyto.2015.05.023 . ПМЦ 4546937 . ПМИД 26187331 .

[pmid24879793-15] Чандриани С., ДеПианто Д.Д., Н'Диай Э.Н., Аббас А.Р., Джекман Дж., Беверс Дж. и др. (июль 2014 г.). «Эндогенно экспрессируемый IL-13Rα2 ослабляет реакции, опосредованные IL-13, но не активирует передачу сигналов в фибробластах легких человека» . Журнал иммунологии . 193 (1): 111–9. doi : 10.4049/jimmunol.1301761 . ПМИД 24879793 .

[pmid18097054-16] Чжэн Т., Лю В., О С.И., Чжу З., Ху Б., Гомер Р.Дж., Кон Л., Грусби М.Дж., Элиас Дж.А. (январь 2008 г.). «Рецептор IL-13 альфа2 избирательно ингибирует IL-13-индуцированные реакции в легких мыши» . Журнал иммунологии . 180 (1): 522–9. дои : 10.4049/jimmunol.180.1.522 . ПМИД 18097054 .

[pmid16327802-17] Фихтнер-Фейгль С., Стробер В., Каваками К., Пури Р.К., Китани А. (январь 2006 г.). «Передача сигналов IL-13 через рецептор IL-13альфа2 участвует в индукции продукции TGF-бета1 и фиброзе». Природная медицина . 12 (1): 99–106. дои : 10.1038/nm1332 . ПМИД 16327802 . S2CID 38397076 .

[pmid24143891-18] Бруннер С.М., Шихль Г., Кессельринг Р., Мартин М., Балам С., Шлитт Х.Дж., Гейсслер Е.К., Фихтнер-Фейгль С. (октябрь 2013 г.). «Передача сигналов IL-13 через IL-13Rα2 запускает TGF-β1-зависимый фиброз аллотрансплантата» . Трансплантационные исследования . 2 (1): 16. дои : 10.1186/2047-1440-2-16 . ПМК 4016099 . ПМИД 24143891 .

[pmid25896327-19] Бартоломе Р.А., Гарсиа-Пальмеро И., Торрес С., Лопес-Лусендо М., Балясникова И.В., Касаль Дж.И. (июнь 2015 г.). «Передача сигналов рецептора IL13 α2 требует каркасного белка FAM120A для активации путей FAK и PI3K при метастазах рака толстой кишки» . Исследования рака . 75 (12): 2434–44. дои : 10.1158/0008-5472.CAN-14-3650 . hdl : 10261/123035 . ПМИД 25896327 .

[pmid23972995-20] Хе CH, Ли CG, Дела Круз CS, Ли CM, Чжоу Ю, Ахангари Ф, Ма Б, Херцог ЭЛ, Розенберг С.А., Ли Ю, Нур AM, Парих ЧР, Шмидт И, Модис Ю, Кэнтли Л, Элиас Дж.А. (август 2013). «Хитиназа 3-подобная 1 регулирует клеточные и тканевые реакции через рецептор IL-13 α2» . Отчеты по ячейкам . 4 (4): 830–41. дои : 10.1016/j.celrep.2013.07.032 . ПМЦ 3988532 . ПМИД 23972995 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]

[ 7 ]

[ 8 ]

[ 9 ]

[ 10 ]

[ 11 ]

[ 12 ]

[ 13 ]

[ 14 ]

[ 15 ]

[ 16 ]

[ 17 ]

[ 18 ]

[ 19 ]

[ 20 ]