✖


Jump to content

Вирусная эволюция

(Перенаправлено с Эволюция вируса )

Вирусная эволюция — это раздел эволюционной биологии и вирусологии занимается эволюцией вирусов , который конкретно . [ 1 ] [ 2 ] Вирусы имеют короткое время генерации, и многие из них, в частности РНК-вирусы , имеют относительно высокую частоту мутаций (порядка одной точечной мутации или более на геном за раунд репликации). Хотя большинство вирусных мутаций не приносят никакой пользы и часто даже оказываются вредными для вирусов, высокая скорость вирусных мутаций в сочетании с естественным отбором позволяет вирусам быстро адаптироваться к изменениям в среде их хозяина. Кроме того, поскольку вирусы обычно производят множество копий у инфицированного хозяина, мутировавшие гены могут быстро передаваться множеству потомков. Хотя вероятность мутаций и эволюции может меняться в зависимости от типа вируса (например, двухцепочечная ДНК, двухцепочечная РНК, одноцепочечная ДНК), вирусы в целом имеют высокую вероятность мутаций.

Эволюция вируса является важным аспектом эпидемиологии вирусных заболеваний, таких как грипп ( вирус гриппа ), СПИД ( ВИЧ ) и гепатит (например, ВГС ). Быстрота вирусной мутации также создает проблемы при разработке успешных вакцин и противовирусных препаратов , поскольку устойчивые мутации часто появляются в течение недель или месяцев после начала лечения. Одной из основных теоретических моделей, применяемых к эволюции вирусов, является модель квазивидов , которая определяет квазивиды вируса как группу близкородственных вирусных штаммов, конкурирующих в окружающей среде.

Происхождение

[ редактировать ]

Три классические гипотезы

[ редактировать ]

Вирусы древние. Исследования на молекулярном уровне выявили взаимосвязь между вирусами, заражающими организмы из каждой из трех областей жизни , предполагая, что вирусные белки возникли еще до дивергенции жизни и, таким образом, заразили последнего универсального общего предка . [ 3 ] Это указывает на то, что некоторые вирусы возникли на ранних этапах эволюции жизни. [ 4 ] и что они, вероятно, возникали неоднократно. [ 5 ] Было высказано предположение, что новые группы вирусов неоднократно возникали на всех этапах эволюции, часто за счет смещения предковых структурных генов и генов репликации генома. [ 6 ]

Существуют три классические гипотезы происхождения вирусов и их эволюции: Существуют три основные гипотезы, призванные объяснить происхождение вирусов: [ 7 ]

Регрессивная гипотеза
Вирусы, возможно, когда-то представляли собой маленькие клетки, паразитирующие на более крупных клетках. Со временем гены, не необходимые для их паразитизма, были утрачены. Бактерии риккетсии и хламидии представляют собой живые клетки, которые, как и вирусы, могут размножаться только внутри клеток-хозяев. Они поддерживают эту гипотезу, поскольку их зависимость от паразитизма, вероятно, привела к потере генов, которые позволили им выжить вне клетки. Это еще называют «гипотезой вырождения». [ 8 ] : 16  [ 9 ] : 11  или «гипотеза редукции». [ 10 ] : 24 
Гипотеза клеточного происхождения
Некоторые вирусы могли возникнуть из фрагментов ДНК или РНК, «ускользнувших» от генов более крупного организма. Ускользнувшая ДНК могла произойти из плазмид (кусков обнаженной ДНК, которые могут перемещаться между клетками) или транспозонов (молекул ДНК, которые реплицируются и перемещаются в разные положения внутри генов клетки). [ 11 ] : 810  Транспозоны, которые когда-то называли «прыгающими генами», являются примерами мобильных генетических элементов и могут быть источником некоторых вирусов. Они были обнаружены в кукурузе Барбарой МакКлинток в 1950 году. [ 12 ] Иногда это называют «гипотезой бродяжничества». [ 8 ] : 16  [ 9 ] : 11–12  или «гипотеза побега». [ 10 ] : 24 
Гипотеза коэволюции
Это также называется «гипотезой первоочередного вируса». [ 10 ] : 24  и предполагает, что вирусы могли развиться из сложных молекул белка и нуклеиновой кислоты в то же время, когда клетки впервые появились на Земле, и зависели от клеточной жизни в течение миллиардов лет. Вироиды — это молекулы РНК, которые не классифицируются как вирусы, поскольку у них отсутствует белковая оболочка. Они имеют характеристики, общие для нескольких вирусов, и их часто называют субвирусными агентами . [ 8 ] : 55  Вироиды – важные патогены растений. [ 11 ] : 791  Они не кодируют белки, но взаимодействуют с клеткой-хозяином и используют механизмы хозяина для своей репликации. [ 13 ] Вирус гепатита дельта человека имеет геном РНК, сходный с геномом вироидов, но имеет белковую оболочку, полученную из вируса гепатита В, и не может производить собственную. Следовательно, это дефектный вирус. Хотя геном вируса гепатита дельта может реплицироваться независимо внутри клетки-хозяина, ему требуется помощь вируса гепатита В, чтобы обеспечить белковую оболочку, чтобы его можно было передать новым клеткам. [ 11 ] : 460  Аналогичным образом вирофаг-спутник зависит от мимивируса , который заражает простейших Acanthamoeba castellanii . [ 14 ] Эти вирусы, существование которых зависит от присутствия других видов вирусов в клетке-хозяине, называются « сателлитами » и могут представлять собой эволюционные промежуточные продукты вироидов и вирусов. [ 9 ] : 777  [ 8 ] : 55–57 

Более поздние гипотезы

[ редактировать ]
  • Гипотеза химерного происхождения: на основе анализа эволюции репликативных и структурных модулей вирусов в 2019 году был предложен химерный сценарий происхождения вирусов. [ 6 ] Согласно этой гипотезе, модули репликации вирусов произошли из первичного генетического пула, хотя длительный путь их последующей эволюции включал в себя множество вытеснений репликативными генами из клеток-хозяев. Напротив, гены, кодирующие основные структурные белки, произошли от функционально разнообразных белков-хозяев на протяжении всей эволюции виросферы. [ 6 ] Этот сценарий отличается от каждого из трех традиционных сценариев, но сочетает в себе черты гипотез «Сначала вирус» и «Побег».

Одной из проблем изучения происхождения и эволюции вирусов является высокая скорость вирусных мутаций, особенно в случае РНК-ретровирусов, таких как ВИЧ/СПИД. Однако недавнее исследование, основанное на сравнении структур сворачивания вирусных белков, предлагает некоторые новые доказательства. Складные суперсемейства (FSF) — это белки, которые демонстрируют сходные структуры сворачивания независимо от фактической последовательности аминокислот и, как было обнаружено, демонстрируют признаки вирусной филогении . Протеом , вируса, вирусный протеом все еще содержит следы древней эволюционной истории, которые можно изучать сегодня. Изучение белковых FSF позволяет предположить существование древних клеточных линий, общих как для клеток, так и для вирусов, до появления «последнего универсального клеточного предка», давшего начало современным клеткам. Эволюционное давление, направленное на уменьшение генома и размера частиц, возможно, в конечном итоге превратило виро-клетки в современные вирусы, тогда как другие сосуществующие клеточные линии в конечном итоге превратились в современные клетки. [ 15 ] Более того, большое генетическое расстояние между FSF РНК и ДНК предполагает, что гипотеза мира РНК может иметь новые экспериментальные доказательства с длительным промежуточным периодом в эволюции клеточной жизни.

Окончательное исключение гипотезы о происхождении вирусов на Земле сложно сделать, учитывая повсеместное взаимодействие вирусов и клеток, а также отсутствие достаточно старых пород, чтобы обнаружить следы самых ранних вирусов на планете. Поэтому с астробиологической точки зрения было предложено активно искать на небесных телах, таких как Марс, не только клетки, но и следы бывших вирионов или вироидов: возможные обнаружения следов вирионов при кажущемся отсутствии клеток могли бы служить подтверждением гипотеза «вирус прежде всего». [ 16 ]

Эволюция

[ редактировать ]
Хронология палеовирусов в человеческой линии [ 17 ]

Вирусы не образуют окаменелостей в традиционном понимании, поскольку они гораздо меньше тончайших коллоидных фрагментов, образующих осадочные породы, окаменелости растений и животных. Однако геномы многих организмов содержат эндогенные вирусные элементы (ЭВЭ). Эти последовательности ДНК являются остатками древних вирусных генов и геномов, которые наследственно «вторглись» в хозяина зародышевую линию . Например, геномы большинства видов позвоночных содержат от сотен до тысяч последовательностей, происходящих от древних ретровирусов . Эти последовательности являются ценным источником ретроспективных данных об истории эволюции вирусов и породили науку палеовирусологию . [ 17 ]

Эволюционную историю вирусов можно в некоторой степени сделать на основе анализа современных вирусных геномов. Скорость мутаций для многих вирусов была измерена, а применение молекулярных часов позволяет определить даты расхождения. [ 18 ]

Вирусы развиваются посредством изменений в их РНК (или ДНК), причем некоторые из них довольно быстро, и наиболее адаптированные мутанты быстро превосходят численностью своих менее приспособленных собратьев. В этом смысле их эволюция является дарвиновской . [ 19 ] Способ размножения вирусов в клетках-хозяевах делает их особенно восприимчивыми к генетическим изменениям, которые помогают стимулировать их эволюцию. [ 20 ] РНК -вирусы особенно склонны к мутациям. [ 21 ] В клетках-хозяевах существуют механизмы исправления ошибок при репликации ДНК, и они срабатывают всякий раз, когда клетки делятся. [ 21 ] Эти важные механизмы предотвращают передачу потенциально смертельных мутаций потомству. Но эти механизмы не работают для РНК, и когда РНК-вирус реплицируется в клетке-хозяине, в его генах иногда вносятся ошибочные изменения, некоторые из которых являются летальными. Одна вирусная частица может произвести миллионы вирусов-потомков всего за один цикл репликации, поэтому производство нескольких «неудачных» вирусов не является проблемой. Большинство мутаций «тихие» и не приводят к каким-либо очевидным изменениям в потомстве вирусов, но другие дают преимущества, которые повышают приспособленность вирусов к окружающей среде. Это могут быть изменения в вирусных частицах, которые маскируют их, чтобы они не были идентифицированы клетками иммунной системы , или изменения, которые делают противовирусные препараты менее эффективными. Оба эти изменения часто происходят при ВИЧ . [ 22 ]

Филогенетическое дерево, показывающее взаимоотношения морбилливирусов разных видов. [ 23 ]

Многие вирусы (например, вирус гриппа А) могут «перетасовывать» свои гены с другими вирусами, когда два схожих штамма заражают одну и ту же клетку. Это явление называется генетическим сдвигом и часто является причиной появления новых, более вирулентных штаммов. Другие вирусы изменяются медленнее, поскольку мутации в их генах постепенно накапливаются с течением времени — процесс, известный как антигенный дрейф . [ 24 ]

Благодаря этим механизмам постоянно появляются новые вирусы, которые представляют собой постоянную проблему в попытках борьбы с болезнями, которые они вызывают. [ 25 ] [ 26 ] Сейчас известно, что большинство видов вирусов имеют общих предков, и хотя гипотеза «вирус прежде всего» еще не получила полного признания, мало кто сомневается в том, что тысячи видов современных вирусов произошли от менее многочисленных древних. [ 27 ] Морбилливирусы , например, представляют собой группу близкородственных, но различных вирусов, которые заражают широкий круг животных. В группу входят вирус кори , поражающий человека и приматов; вирус собачьей чумы , поражающий многих животных, включая собак, кошек, медведей, ласк и гиен; чума крупного рогатого скота , заразившая крупный рогатый скот и буйволов; и другие вирусы тюленей, морских свиней и дельфинов. [ 28 ] Хотя невозможно доказать, какой из этих быстро развивающихся вирусов является самым ранним, обнаружение такой близкородственной группы вирусов у столь разных хозяев предполагает возможность того, что их общий предок был древним. [ 29 ]

Бактериофаг

[ редактировать ]

Вирус эшерихии Т4 (фаг Т4) — разновидность бактериофага , инфицирующего бактерии Escherichia coli . Это вирус с двухцепочечной ДНК семейства Myoviridae . Фаг Т4 является облигатным внутриклеточным паразитом, который размножается внутри бактериальной клетки-хозяина, и его потомство высвобождается при разрушении хозяина в результате лизиса . Полная последовательность генома фага Т4 кодирует около 300 генных продуктов . [ 30 ] Эти вирулентные вирусы относятся к числу крупнейших и наиболее сложных известных вирусов и являются одними из наиболее изученных модельных организмов . Они сыграли ключевую роль в развитии вирусологии и молекулярной биологии . Количество зарегистрированных генетических гомологий между фагом Т4 и бактериями , а также между фагом Т4 и эукариотами одинаково, что позволяет предположить, что фаг Т4 имеет общее происхождение как с бактериями, так и с эукариотами и имеет примерно одинаковое сходство с каждым из них. [ 31 ] Фаг Т4 мог эволюционно отделиться от общего предка бактерий и эукариот или от раннего эволюционировавшего члена любой из линий. Большинство фаговых генов, гомологичных с бактериями и эукариотами, кодируют ферменты, участвующие в повсеместных процессах репликации ДНК , репарации ДНК , рекомбинации и синтеза нуклеотидов . [ 31 ] Эти процессы, вероятно, развились очень рано. Адаптивные свойства ферментов, катализирующих эти ранние процессы, возможно, сохранялись в фагах Т4, бактериальных и эукариотических линиях, поскольку к моменту дивергенции этих линий они представляли собой хорошо проверенные решения основных функциональных проблем.

Передача инфекции

[ редактировать ]

В результате эволюции вирусы смогли продолжить свое инфекционное существование. Быстрая скорость мутаций и естественный отбор дали вирусам преимущество в дальнейшем распространении. Одним из способов распространения вирусов является эволюция передачи вируса . Вирус может найти нового хозяина через: [ 32 ]

  • Капельная передача – передается через жидкости организма (при чихании).
    • Примером является вирус гриппа. [ 33 ]
  • Воздушно-капельная передача – передается по воздуху (заносится с дыханием).
    • Примером может служить способ передачи вирусного менингита. [ 34 ]
  • Векторная передача - подхватывается оператором связи и переносится на новый хост.
    • Пример: вирусный энцефалит. [ 35 ]
  • Передача через воду – выход из хозяина, заражение воды и попадание в нового хозяина.
    • Полиовирус является тому примером. [ 36 ]
  • Передача «сиди и жди» — вирус живет вне хозяина в течение длительных периодов времени.
    • Вирус оспы также является примером этого. [ 36 ]

Вирулентность , или вред, который вирус наносит своему хозяину, зависит от различных факторов. В частности, способ передачи имеет тенденцию влиять на то, как уровень вирулентности будет меняться с течением времени. Вирусы, которые передаются посредством вертикальной передачи (передача потомству хозяина), будут развиваться и иметь более низкий уровень вирулентности. Вирусы, которые передаются посредством горизонтальной передачи (передача между представителями одного и того же вида, не имеющими отношений между родителями и детьми), обычно развиваются и приобретают более высокую вирулентность. [ 37 ]

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]

[ 9 ] [ 8 ] [ 38 ] [ 11 ]

  1. ^ Mahy & Van Regenmortel 2009 , с. 24
  2. ^ Вильярреал LP (2005). Вирусы и эволюция жизни . АСМ Пресс. дои : 10.1128/9781555817626 . ISBN  978-1-55581-309-3 . OCLC   755638822 .
  3. ^ Mahy & Van Regenmortel 2009 , с. 25
  4. ^ Mahy & Van Regenmortel 2009 , с. 26
  5. ^ Леппард, Диммок и Истон 2007 , стр. 16
  6. ^ Jump up to: а б с Крупович М., Доля В.В., Кунин Е.В. (июль 2019 г.). «Происхождение вирусов: первичные репликаторы, рекрутирующие капсиды от хозяев». Обзоры природы. Микробиология . 17 (7): 449–458. дои : 10.1038/s41579-019-0205-6 . ПМИД   31142823 . S2CID   169035711 .
  7. ^ Крупович М., Доля В.В., Кунин Е.В. (июль 2019 г.). «Происхождение вирусов: первичные репликаторы, рекрутирующие капсиды от хозяев» (PDF) . Обзоры природы. Микробиология . 17 (7): 449–58. дои : 10.1038/s41579-019-0205-6 . ПМИД   31142823 . S2CID   256744818 .
  8. ^ Jump up to: а б с д и Диммок, Нью-Джерси, Истон А.Дж., Леппард К. (2007). Введение в современную вирусологию (6-е изд.). Издательство Блэквелл. ISBN  978-1-4051-3645-7 .
  9. ^ Jump up to: а б с д Коллиер Л., Балоуз А., Сассман М. (1998). Мэхи Б., Коллиер Л.А. (ред.). Микробиология и микробные инфекции Топли и Уилсона . Вирусология. Том. 1 (9-е изд.). ISBN  0-340-66316-2 .
  10. ^ Jump up to: а б с Мэхи У.Дж., Регенмортель М.Х., ред. (2009). Настольная энциклопедия общей вирусологии . Оксфорд: Академическая пресса. ISBN  978-0-12-375146-1 .
  11. ^ Jump up to: а б с д Шорс Т (2017). Понимание вирусов . Издательство Джонс и Бартлетт. ISBN  978-1-284-02592-7 .
  12. ^ МакКлинток Б. (июнь 1950 г.). «Происхождение и поведение мутабельных локусов кукурузы» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 36 (6): 344–55. Бибкод : 1950ПНАС...36..344М . дои : 10.1073/pnas.36.6.344 . ПМЦ   1063197 . ПМИД   15430309 .
  13. ^ Цагрис Э.М., Мартинес де Альба А.Е., Гозманова М., Калантидис К. (ноябрь 2008 г.). «Вироиды» . Клеточная микробиология . 10 (11): 2168–79. дои : 10.1111/j.1462-5822.2008.01231.x . ПМИД   18764915 . S2CID   221581424 .
  14. ^ Ла Скола Б., Десню С., Панье И., Робер С., Баррасси Л., Фурнус Г. и др. (сентябрь 2008 г.). «Вирофаг как уникальный паразит гигантского мимивируса». Природы . 455 (7209): 100–04. Бибкод : 2008Natur.455..100L . дои : 10.1038/nature07218 . ПМИД   18690211 . S2CID   4422249 .
  15. ^ Насир А., Каэтано-Аноллес Дж. (сентябрь 2015 г.). «Филогеномное исследование происхождения и эволюции вирусов, основанное на филогеномных данных» . Достижения науки . 1 (8): e1500527. Бибкод : 2015SciA....1E0527N . дои : 10.1126/sciadv.1500527 . ПМЦ   4643759 . ПМИД   26601271 .
  16. ^ Янич А. (декабрь 2018 г.). «Необходимость включения методов обнаружения вирусов в будущие миссии на Марс» . Астробиология . 18 (12): 1611–1614. Бибкод : 2018AsBio..18.1611J . дои : 10.1089/ast.2018.1851 . ISSN   1531-1074 . S2CID   105299840 .
  17. ^ Jump up to: а б Эмерман М., Малик Х.С. (февраль 2010 г.). Virgin SW (ред.). «Палеовирусология – современные последствия древних вирусов» . ПЛОС Биология . 8 (2): e1000301. дои : 10.1371/journal.pbio.1000301 . ПМЦ   2817711 . ПМИД   20161719 .
  18. ^ Лам Т.Т., Достопочтенный CC, Тан Дж.В. (февраль 2010 г.). «Использование филогенетики в молекулярной эпидемиологии и эволюционных исследованиях вирусных инфекций». Критические обзоры клинических лабораторных наук . 47 (1): 5–49. дои : 10.3109/10408361003633318 . ПМИД   20367503 . S2CID   35371362 .
  19. ^ Леппард, Диммок и Истон 2007 , стр. 273
  20. ^ Леппард, Диммок и Истон 2007 , стр. 272
  21. ^ Jump up to: а б Доминго Э., Эскармис С., Севилья Н., Моя А., Елена С.Ф., Кер Дж. и др. (июнь 1996 г.). «Основные понятия эволюции РНК-вирусов» . Журнал ФАСЭБ . 10 (8): 859–864. дои : 10.1096/fasebj.10.8.8666162 . ПМИД   8666162 . S2CID   20865732 .
  22. ^ Бутвелл К.Л., Роллан М.М., Хербек Дж.Т., Маллинз Дж.И., Аллен Т.М. (октябрь 2010 г.). «Эволюция вируса и побег во время острой инфекции ВИЧ-1» . Журнал инфекционных болезней . 202 (Приложение 2): S309–S314. дои : 10.1086/655653 . ПМЦ   2945609 . ПМИД   20846038 .
  23. ^ Барретт, Пасторет и Тейлор 2006 , с. 24
  24. ^ Чен Дж, Дэн ЮМ (март 2009 г.). «Антигенные вариации вируса гриппа, производство антител хозяина и новый подход к борьбе с эпидемиями» . Вирусологический журнал . 6:30 . дои : 10.1186/1743-422X-6-30 . ПМЦ   2666653 . ПМИД   19284639 .
  25. ^ Фрайле А, Гарсиа-Ареналь Ф (2010). «Коэволюция растений и вирусов». Коэволюция растений и вирусов: устойчивость и патогенность . Достижения в области исследования вирусов. Том. 76. стр. 1–32. дои : 10.1016/S0065-3527(10)76001-2 . ISBN  978-0-12-374525-5 . ПМИД   20965070 .
  26. ^ Тан Дж.В., Шетти Н., Лам Т.Т., Хон К.Л. (сентябрь 2010 г.). «Новые, новые и известные инфекции вируса гриппа у людей» . Клиники инфекционных заболеваний Северной Америки . 24 (3): 603–617. дои : 10.1016/j.idc.2010.04.001 . ПМЦ   7127320 . ПМИД   20674794 .
  27. ^ Mahy & Van Regenmortel 2009 , стр. 70–80.
  28. ^ Барретт, Пасторет и Тейлор 2006 , с. 16
  29. ^ Барретт, Пасторет и Тейлор, 2006 , стр. 24–25.
  30. ^ Миллер Э.С., Каттер Э., Мосиг Г., Арисака Ф., Кунисава Т., Рюгер В. (март 2003 г.). «Геном бактериофага Т4» . Обзоры микробиологии и молекулярной биологии . 67 (1): 86–156, оглавление. дои : 10.1128/ММБР.67.1.86-156.2003 . ПМК   150520 . ПМИД   12626685 .
  31. ^ Jump up to: а б Бернштейн Х., Бернштейн С. (май 1989 г.). «Генетическая гомология бактериофага Т4 с бактериями и эукариотами» . Журнал бактериологии . 171 (5): 2265–2270. дои : 10.1128/jb.171.5.2265-2270.1989 . ПМК   209897 . ПМИД   2651395 .
  32. ^ «Эволюция с точки зрения вируса» . Evolution.berkeley.edu . Декабрь 2007 года . Проверено 27 ноября 2017 г.
  33. ^ «Основные факты о гриппе» . Сезонный грипп (грипп) . Центры по контролю и профилактике заболеваний США. 16 октября 2017 г. Проверено 5 декабря 2017 г.
  34. ^ «Менингит вирусный» . Центры по контролю и профилактике заболеваний США. 04.12.2017 . Проверено 5 декабря 2017 г.
  35. ^ «Энцефалит» . ПабМед Здоровье . Национальная медицинская библиотека . Проверено 5 декабря 2017 г.
  36. ^ Jump up to: а б «Оспа» . Центры по контролю и профилактике заболеваний США. 13 июля 2017 г. Проверено 5 декабря 2017 г.
  37. ^ Фрис I, Камазин С (2001). «Последствия горизонтальной и вертикальной передачи патогенов для эпидемиологии медоносных пчел» . Апидология . 32 (3): 199–214. дои : 10.1051/apido:2001122 . hal-00891679.
  38. ^ Краснер Р. (2014). Микробная проблема: взгляд на общественное здравоохранение . Берлингтон, Массачусетс: Jones & Bartlett Learning. ISBN  978-1-4496-7375-8 . OCLC   794228026 .

Библиография

[ редактировать ]

Дальнейшее чтение

[ редактировать ]
[ редактировать ]
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Viral_evolution&oldid=1234030253"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 14b8a89e2262cbfdacd099bbf9a606af__1720754880
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/14/af/14b8a89e2262cbfdacd099bbf9a606af.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Viral evolution - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)