✖


Jump to content

Нацеливание на белок

(Перенаправлено из Белковый транспорт )

Нацеливание на белки или сортировка белков — это биологический механизм , с помощью которого белки транспортируются к соответствующим местам назначения внутри или за пределами клетки. [1] [2] [примечание 1] Белки могут быть направлены во внутреннее пространство органеллы , различные внутриклеточные мембраны , плазматическую мембрану или наружу клетки посредством секреции . [1] [2] Информация, содержащаяся в самом белке, управляет процессом доставки. [2] [3] Правильная сортировка имеет решающее значение для клетки; ошибки или дисфункции при сортировке связаны с многочисленными заболеваниями. [2] [4] [5]

История

[ редактировать ]
Гюнтер Блобель получил Нобелевскую премию по физиологии 1999 года за открытие того, что белки содержат внутренние сигнальные последовательности.

В 1970 году Гюнтер Блобель провел эксперименты по транслокации белков через мембраны . Блобель, тогда доцент Рокфеллеровского университета , опирался на работу своего коллеги Джорджа Паладе . [6] Ранее Паладе продемонстрировал, что несекретируемые белки транслируются свободными рибосомами в цитозоле, тогда как секретируемые белки (и целевые белки в целом) транслируются рибосомами, связанными с эндоплазматическим ретикулумом . [6] Кандидатские объяснения в то время постулировали разницу в обработке свободных и связанных с ER рибосомами, но Блобель предположил, что нацеливание на белок зависит от характеристик, присущих белкам, а не от различий в рибосомах. В подтверждение своей гипотезы Блобель обнаружил, что многие белки имеют на одном конце короткую аминокислотную последовательность , которая действует как почтовый индекс, указывающий внутриклеточное или внеклеточное место назначения. [3] Он описал эти короткие последовательности (обычно от 13 до 36 аминокислотных остатков). [1] в качестве сигнальных пептидов или сигнальных последовательностей и был удостоен Нобелевской премии по физиологии 1999 года. за это [7]

Сигнальные пептиды

[ редактировать ]
Основная статья: Сигнальный пептид

Сигнальные пептиды служат сигналами-мишенями, позволяя механизму клеточного транспорта направлять белки в определенные внутриклеточные или внеклеточные места. Хотя консенсусной последовательности , многие из них, тем не менее, обладают характерной трехсторонней структурой: для сигнальных пептидов не выявлено [1]

  1. Положительно заряженная гидрофильная область вблизи N-конца.
  2. Диапазон от 10 до 15 гидрофобных аминокислот вблизи середины сигнального пептида.
  3. Слегка полярная область вблизи С-конца, обычно отдающая предпочтение аминокислотам с меньшими боковыми цепями в положениях, приближающихся к месту расщепления.

После того, как белок достиг места назначения, сигнальный пептид обычно расщепляется сигнальной пептидазой . [1] Следовательно, большинство зрелых белков не содержат сигнальных пептидов. Хотя большинство сигнальных пептидов расположены на N-конце, в пероксисомах направляющая последовательность расположена на С-концевом участке. [8] В отличие от сигнальных пептидов, сигнальные участки состоят из аминокислотных остатков, которые прерывисты в первичной последовательности , но становятся функциональными, когда сворачивание объединяет их на поверхности белка. [9] В отличие от большинства сигнальных последовательностей, сигнальные участки не расщепляются после завершения сортировки. [10] Помимо внутренних сигнальных последовательностей, модификации белков , такие как гликозилирование, также могут индуцировать нацеливание на определенные внутриклеточные или внеклеточные области.

Транслокация белка

[ редактировать ]
Дополнительная информация: транслокон

Поскольку трансляция мРНК , белки в белок с помощью рибосомы происходит внутри цитозоля , предназначенные для секреции или конкретной органеллы, должны быть транслоцированы. [11] Этот процесс может происходить во время трансляции (котрансляционная транслокация) или после завершения трансляции (посттрансляционная транслокация). [12]

Котрансляционная транслокация

[ редактировать ]
Обобщенный обзор нацеливания на белки, который иллюстрирует котрансляционную транслокацию в эндоплазматический ретикулум и посттрансляционную транслокацию в указанные места. Если нацеливающая последовательность отсутствует, то синтезированный белок останется в цитозоле.

Большинство секреторных и мембраносвязанных белков транслоцируются котрансляционно. Белки, которые находятся в эндоплазматическом ретикулуме (ЭР), аппарате Гольджи или эндосомах, также используют путь котрансляционной транслокации. Этот процесс начинается во время синтеза белка на рибосоме, когда частица распознавания сигнала (SRP) распознает N-концевой сигнальный пептид образующегося белка. [13] Связывание SRP временно приостанавливает синтез, в то время как рибосомно-белковый комплекс переносится на рецептор SRP на ЭР у эукариот и на плазматическую мембрану у прокариот . [14] Там возникающий белок вставляется в транслокон , мембраносвязанный белок-проводящий канал, состоящий из транслокационного комплекса Sec61 у эукариот и гомологичного комплекса SecYEG у прокариот. [15] типа I В секреторных белках и трансмембранных белках сигнальная последовательность немедленно отщепляется от образующегося полипептида, как только он транслоцируется в мембрану ЭР (эукариоты) или плазматическую мембрану (прокариоты) с помощью сигнальной пептидазы . Сигнальная последовательность мембранных белков типа II и некоторых политопных мембранных белков не отщепляется и поэтому называется сигнальными якорными последовательностями. Внутри ЭР белок сначала покрывается белком-шапероном, чтобы защитить его от высокой концентрации других белков в ЭР, давая ему время правильно свернуться . После сворачивания белок модифицируется по мере необходимости (например, путем гликозилирования ), затем транспортируется в аппарат Гольджи для дальнейшей обработки и направляется к органеллам-мишеням или удерживается в ЭР с помощью различных механизмов удержания в ЭР .

Аминокислотная цепь трансмембранных белков , которые часто являются трансмембранными рецепторами , проходит через мембрану один или несколько раз. Эти белки встраиваются в мембрану путем транслокации до тех пор, пока процесс не будет прерван последовательностью остановки-переноса, также называемой мембранным якорем или последовательностью сигнального якоря. [16] Эти сложные мембранные белки в настоящее время характеризуются с использованием той же модели нацеливания, которая была разработана для секреторных белков. Однако многие сложные мультитрансмембранные белки содержат структурные аспекты, которые не соответствуют этой модели. Семь трансмембранных G-белковых рецепторов (которые составляют около 5% генов человека) в большинстве случаев не имеют аминоконцевой сигнальной последовательности. В отличие от секреторных белков, первый трансмембранный домен действует как первая сигнальная последовательность, которая направляет их на мембрану ЭР. Это также приводит к транслокации аминоконца белка в просвет мембраны ЭР. Эта транслокация, которая была продемонстрирована с опсином в экспериментах in vitro, [17] [18] нарушает обычный паттерн «котрансляционной» транслокации, который всегда существовал для белков млекопитающих, нацеленных на ER. Большая часть механики трансмембранной топологии и сворачивания еще предстоит выяснить.

Посттрансляционная транслокация

[ редактировать ]

Несмотря на то, что большинство секреторных белков транслоцируются котрансляционно, некоторые из них транслируются в цитозоле и позже транспортируются к ЭР/плазматической мембране с помощью посттрансляционной системы. У прокариот этот процесс требует определенных кофакторов, таких как SecA и SecB, и ему способствуют Sec62 и Sec63, два мембраносвязанных белка. [19] Комплекс Sec63, встроенный в мембрану ЭР, вызывает гидролиз АТФ, позволяя белкам-шаперонам связываться с открытой пептидной цепью и перемещать полипептид в просвет ЭР. Попав в просвет, полипептидная цепь может правильно свернуться. Этот процесс происходит только в развернутых белках, расположенных в цитозоле. [20]

Кроме того, белки, нацеленные на другие клеточные направления, такие как митохондрии , хлоропласты или пероксисомы , используют специализированные посттрансляционные пути. Белки, нацеленные на ядро, также транслоцируются посттрансляционно за счет добавления сигнала ядерной локализации (NLS) , который способствует прохождению через ядерную оболочку через ядерные поры . [21]

Сортировка белков

[ редактировать ]

Митохондрии

[ редактировать ]
Обзор основных путей импорта белка в митохондрии.
Путь переноса белков, направленных на внутреннюю мембрану митохондрий.

Хотя некоторые белки в митохондриях происходят из митохондриальной ДНК внутри органеллы, большинство митохондриальных белков синтезируются как цитозольные предшественники, содержащие сигналы поглощения пептидов . [22] [23] [24] [25] Развернутые белки, связанные цитозольным шапероном hsp70 , нацеленным на митохондрии, могут быть локализованы в четырех различных областях в зависимости от их последовательностей. [2] [25] [26] Они могут быть нацелены на митохондриальный матрикс , внешнюю мембрану, межмембранное пространство или внутреннюю мембрану. Дефекты в любом из этих процессов связаны со здоровьем и болезнями. [27]

Митохондриальный матрикс

[ редактировать ]

Белки, предназначенные для митохондриального матрикса, имеют в начале (N-конце) специфические сигнальные последовательности, состоящие из цепочки из 20–50 аминокислот. Эти последовательности предназначены для взаимодействия с рецепторами, которые направляют белки к их правильному местоположению внутри митохондрий. Последовательности имеют уникальную структуру с кластерами водолюбивых (гидрофильных) и водоизбегающих (гидрофобных) аминокислот, что придает им двойную природу, известную как амфипатическая. Эти амфипатические последовательности обычно образуют спиральную форму (альфа-спираль) с заряженными аминокислотами на одной стороне и гидрофобными на противоположной стороне. Эта структурная особенность важна для правильного функционирования последовательности при направлении белков к матриксу. Если происходят мутации, которые нарушают эту двойственную природу, белок часто не достигает намеченного пункта назначения, хотя не все изменения в последовательности имеют такой эффект. Это указывает на важность амфипатического свойства белка для правильного нацеливания на митохондриальный матрикс. [28]

Путь пре-последовательности во внутреннюю мембрану митохондрий (ВМ) и митохондриальный матрикс.

Белки, нацеленные на митохондриальный матрикс, сначала включают взаимодействия между последовательностью нацеливания на матрикс, расположенной на N-конце, и комплексом рецепторов импорта внешней мембраны TOM20/22. [2] [23] [29] Помимо стыковки внутренних последовательностей и цитозольных шаперонов с TOM70. [2] [23] [29] Где ТОМ — аббревиатура транслоказы внешней мембраны. Связывание матричной нацеливающей последовательности с рецептором импорта запускает передачу полипептида в ядро ​​общего импорта (GIP), известное как TOM40. [2] [23] [29] Затем общее импортное ядро ​​(TOM40) передает полипептидную цепь через межмембранное пространство в другой транслоказный комплекс TIM17/23/44, расположенный на внутренней митохондриальной мембране. [2] [24] [25] [30] Это сопровождается необходимым высвобождением цитозольных шаперонов , которые поддерживают развернутое состояние до входа в митохондрии. Когда полипептид попадает в матрицу, сигнальная последовательность расщепляется процессинговой пептидазой , а оставшиеся последовательности связываются митохондриальными шаперонами в ожидании правильного сворачивания и активности. [25] [26] Выталкивание полипептида из цитозоля в межмембранное пространство, а затем в матрикс достигается за счет электрохимического градиента , который устанавливается митохондриями во время окислительного фосфорилирования . [1] [24] [25] [26] При этом митохондрия, активная в метаболизме, генерирует отрицательный потенциал внутри матрикса и положительный потенциал в межмембранном пространстве. [25] [31] Именно этот отрицательный потенциал внутри матрицы направляет положительно заряженные области целевой последовательности в желаемое место.

Внутренняя мембрана митохондрий

[ редактировать ]

Нацеливание митохондриальных белков на внутреннюю мембрану может происходить тремя различными путями в зависимости от их общих последовательностей, однако проникновение с внешней мембраны остается тем же, с использованием комплекса рецепторов импорта TOM20/22 и общего импортного ядра TOM40. [2] [24] Первый путь белков, нацеленных на внутреннюю мембрану, следует тем же этапам, что и пути, назначенные для матрикса, где он содержит последовательность, нацеленную на матрикс, которая направляет полипептид к комплексу внутренней мембраны, содержащему ранее упомянутый комплекс транслоказы TIM17/23/44. [2] [24] [25] Однако разница состоит в том, что пептиды, предназначенные для внутренней мембраны, а не для матрикса, содержат расположенную выше последовательность, называемую последовательностью остановки-переноса-якоря. [2] Эта последовательность остановки-переноса-якоря представляет собой гидрофобную область, которая встраивается в фосфолипидный бислой внутренней мембраны и предотвращает транслокацию дальше в митохондрии. [24] [25] Второй путь белков, нацеленных на внутреннюю мембрану, полностью следует пути матриксной локализации. Однако вместо последовательности остановки-переноса-якоря он содержит другую последовательность, которая взаимодействует с белком внутренней мембраны, называемым Oxa-1, однажды внутри матрикса, который встраивает его во внутреннюю мембрану. [2] [24] [25] Третий путь митохондриальных белков, нацеленных на внутреннюю мембрану, следует тому же входу, что и другие, во внешнюю мембрану, однако этот путь использует комплекс транслоказы TIM22/54, которому помогает комплекс TIM9/10 в межмембранном пространстве для закрепления входящего пептида в мембрана. [2] [24] [25] Пептиды для этого последнего пути не содержат матричной нацеливающей последовательности, а вместо этого содержат несколько внутренних нацеливающих последовательностей.

Митохондриальное межмембранное пространство

[ редактировать ]

Если вместо этого белок-предшественник попадает в межмембранное пространство митохондрии, это может происходить двумя путями в зависимости от распознаваемых последовательностей. Первый путь в межмембранное пространство повторяет те же этапы, что и белок, нацеленный на внутреннюю мембрану. Однако после связывания с внутренней мембраной С-конец закрепленного белка расщепляется с помощью пептидазы, которая высвобождает пребелок в межмембранное пространство, чтобы он мог свернуться в свое активное состояние. [2] [25] Одним из ярких примеров белка, следующего по этому пути, является цитохром b2 , который после расщепления взаимодействует с кофактором гема и становится активным. [2] [32] Второй путь в межмембранном пространстве не использует какие-либо внутренние мембранные комплексы и, следовательно, не содержит сигнала, направляющего на матрикс. Вместо этого он проникает через общее импортное ядро ​​TOM40 и далее модифицируется в межмембранном пространстве для достижения своей активной конформации. TIM9/10 является примером белка, который следует по этому пути, чтобы оказаться в том месте, где он должен находиться, чтобы способствовать нацеливанию на внутреннюю мембрану. [2] [25] [33]

Наружная мембрана митохондрий

[ редактировать ]

Нацеливание на внешнюю мембрану просто включает взаимодействие белков-предшественников с транслоказными комплексами внешней мембраны, которые встраивают его в мембрану посредством последовательностей внутреннего нацеливания, которые должны образовывать гидрофобные альфа-спирали или бета-цилиндры , охватывающие фосфолипидный бислой. [2] [24] [25] Это может происходить двумя разными путями в зависимости от внутренних последовательностей пребелка. Если препротеин содержит внутренние гидрофобные области, способные образовывать альфа-спирали, то пребелок будет использовать митохондриальный импортный комплекс (MIM) и переноситься латерально на мембрану. [24] [25] Что касается пребелков, содержащих гидрофобные внутренние последовательности, которые коррелируют с белками, образующими бета-цилиндры, они будут импортированы из вышеупомянутого комплекса внешней мембраны TOM20/22 в межмембранное пространство. В котором они будут взаимодействовать с белковым комплексом межмембранного пространства TIM9/10, который передает их механизму сортировки и сборки (SAM), присутствующему во внешней мембране, который латерально смещает целевой белок в виде бета-цилиндра. [24] [25]

Хлоропласты

[ редактировать ]

Хлоропласты похожи на митохондрии тем, что содержат собственную ДНК для производства некоторых своих компонентов. Однако большинство их белков получены посредством посттрансляционной транслокации и возникают из ядерных генов. Белки могут быть направлены на несколько участков хлоропласта в зависимости от их последовательностей, таких как внешняя оболочка, внутренняя оболочка, строма, просвет тилакоида или тилакоидная мембрана. [2] Белки направляются к тилакоидам с помощью механизмов, связанных с транслокацией бактериальных белков. [28] Белки, нацеленные на оболочку хлоропластов, обычно не имеют расщепляемой сортировочной последовательности и смещаются латерально через мембранные сортировочные комплексы. Общий импорт большинства пребелков требует транслокации из цитозоля через комплексы Toc и Tic, расположенные внутри оболочки хлоропласта. Где Toc — это аббревиатура транслоказы внешней оболочки хлоропласта, а Tic — транслоказа внутренней оболочки хлоропласта. Существует минимум три белка, которые выполняют функцию комплекса Toc. Два из них, называемые Toc159 и Toc34, отвечают за стыковку стромальных импортируемых последовательностей и оба содержат активность ГТФазы . Третий, известный как Toc 75, представляет собой фактический канал транслокации, который доставляет распознанный пребелок с помощью Toc159/34 в хлоропласт. [34]

Строма

[ редактировать ]

Нацеливание на строму требует, чтобы препротеин имел последовательность импорта в строму, которая распознается комплексом Tic внутренней оболочки после транслокации из внешней оболочки комплексом Toc. Комплекс Tic состоит как минимум из пяти различных белков Tic, которые необходимы для формирования канала транслокации через внутреннюю оболочку. [35] После доставки в строму последовательность импорта в строму отщепляется с помощью сигнальной пептидазы. В настоящее время известно, что этот процесс доставки в строму осуществляется гидролизом АТФ через стромальные шапероны HSP , а не трансмембранным электрохимическим градиентом , который устанавливается в митохондриях для управления импортом белка. [34] Дальнейшая внутрихлоропластная сортировка зависит от дополнительных целевых последовательностей, например, тех, которые предназначены для тилакоидной мембраны или просвета тилакоида .

Просвет тилакоида

[ редактировать ]

Если белок должен быть направлен в просвет тилакоида, это может происходить четырьмя различными известными путями, которые очень напоминают механизмы транспорта бактериальных белков. Выбор пути зависит от того, находится ли белок в строме в развернутом или связанном с металлом свернутом состоянии. Оба из них по-прежнему будут содержать последовательность, нацеленную на тилакоиды, которая также расщепляется при входе в просвет. Хотя импорт белка в строму осуществляется АТФ, было показано, что путь металлосвязанных белков в свернутом состоянии в просвет тилакоида определяется градиентом pH.

Пути проникновения белков к тилакоидной мембране хлоропластов.

Тилакоидная мембрана

[ редактировать ]

Белки, связывающиеся с мембраной тилакоида, будут следовать четырьмя известными путями, которые показаны на соответствующем рисунке. Они могут следовать котрансляционному пути вставки, который использует стромальные рибосомы и трансмембранный комплекс SecY/E, SRP-зависимому пути, пути спонтанной вставки или пути GET. Последние из трех являются посттрансляционными путями, происходящими от ядерных генов, и поэтому составляют большинство белков, нацеленных на тилакоидную мембрану. Согласно недавним обзорным статьям в журнале биохимии и молекулярной биологии, точные механизмы еще не до конца изучены.

И хлоропласты, и митохондрии

[ редактировать ]

Многие белки необходимы как в митохондриях , так и в хлоропластах . [36] В общем, пептид двойного действия имеет промежуточный характер по отношению к двум специфическим. Нацеливающие пептиды этих белков имеют высокое содержание основных и гидрофобных аминокислот , низкое содержание отрицательно заряженных аминокислот . Они имеют более низкое содержание аланина и более высокое содержание лейцина и фенилаланина. Белки с двойной мишенью имеют более гидрофобный нацеливающий пептид, чем митохондриальные и хлоропластические белки. характеристик утомительно Однако предсказать, является ли пептид двойной мишенью или нет, на основе его физико-химических .

Ядро

[ редактировать ]

Ядро клетки окружено ядерной оболочкой, состоящей из двух слоев, причем внутренний слой обеспечивает структурную поддержку и фиксацию хромосом и ядерной пластинки. [16] Внешний слой похож на мембрану эндоплазматического ретикулума (ЭР). Эта оболочка содержит ядерные поры, которые представляют собой сложные структуры, состоящие примерно из 30 различных белков. [16] Эти поры действуют как селективные ворота, контролирующие поток молекул в ядро ​​и из него.

В то время как небольшие молекулы могут без проблем проходить через эти поры, более крупные молекулы, такие как РНК и белки, предназначенные для ядра, должны иметь определенные сигналы, чтобы пройти через них. [20] Эти сигналы известны как сигналы ядерной локализации и обычно включают короткие последовательности, богатые положительно заряженными аминокислотами, такими как лизин или аргинин. [16]

Белки, называемые рецепторами ядерного импорта, распознают эти сигналы и проводят большие молекулы через ядерные поры, взаимодействуя с неупорядоченными сетчатообразными белками, которые заполняют поры. [16] Процесс является динамическим: рецептор перемещает молекулу через сеть, пока она не достигнет ядра. [20]

Оказавшись внутри, фермент ГТФаза под названием Ran, который может существовать в двух разных формах (одна связана с GTP, а другая с GDP), облегчает высвобождение груза внутри ядра и возвращает рецептор обратно в цитозоль. [16] [20] Энергия для этого транспорта поступает в результате гидролиза GTP под действием Ran. Точно так же рецепторы ядерного экспорта помогают выводить белки и РНК из ядра, используя другой сигнал, а также используя преобразование энергии Рана. [16]

В целом комплекс ядерных пор работает эффективно, транспортируя макромолекулы с высокой скоростью, позволяя белкам перемещаться в свернутом состоянии, а рибосомальным компонентам - как полноценным частицам, что отличается от того, как белки транспортируются в большинство других органелл. [16]

Эндоплазматическая сеть

[ редактировать ]

Эндоплазматическая сеть (ЭР) играет ключевую роль в синтезе и распределении белка в эукариотических клетках. Это обширная сеть мембран, в которых белки обрабатываются и сортируются по различным направлениям, включая саму ЭР, поверхность клетки и другие органеллы, такие как аппарат Гольджи, эндосомы и лизосомы. [16] В отличие от других белков, нацеленных на органеллы, те, которые направляются в ЭР, начинают переноситься через его мембрану, пока они еще производятся. [20] [16]

Синтез и сортировка белков

[ редактировать ]

Существует два типа белков, которые перемещаются в ЭР: водорастворимые белки, которые полностью проникают в просвет ЭР, и трансмембранные белки, которые частично пересекают и внедряются в мембрану ЭР. [20] Эти белки попадают в ЭР с помощью сигнальной последовательности ЭР, короткого участка гидрофобных аминокислот. [16]

Белки, поступающие в ЭР, синтезируются рибосомами. В клетке есть два набора рибосом: те, которые связаны с ЭР (что делает его «грубым»), и те, которые свободно плавают в цитозоле. Оба набора идентичны, но различаются белками, которые они синтезируют в данный момент. [16] [20] Рибосомы, которые производят белки с сигнальной последовательностью ЭР, прикрепляются к мембране ЭР и запускают процесс транслокации. Этот процесс является энергоэффективным, поскольку растущая белковая цепь сама по мере своего удлинения проходит через мембрану ЭР. [16]

Когда мРНК транслируется в белок, к ней могут прикрепиться несколько рибосом, создавая структуру, называемую полирибосомой. [16] Если мРНК кодирует белок с сигнальной последовательностью ЭР, полирибосома прикрепляется к мембране ЭР, и белок начинает проникать в ЭР, пока он еще синтезируется. [20] [16]

Направленное поступление растворимых белков
[ редактировать ]

В процессе синтеза белков внутри эукариотических клеток растворимые белки, предназначенные для эндоплазматической сети (ЭР) или для секреции из клетки, направляются в ЭР с помощью двухкомпонентной системы. Во-первых, частица распознавания сигнала (SRP) в цитозоле прикрепляется к сигнальной последовательности ER возникающего белка и самой рибосоме. [16] Во-вторых, рецептор SRP, расположенный в мембране ЭР, распознает SRP и связывается с ним. Это взаимодействие временно замедляет синтез белка до тех пор, пока комплекс SRP и ребер не свяжется с рецептором SRP на ER. [16] [20]

Как только это связывание происходит, SRP высвобождается, и рибосома переносится к белковому транслокатору в мембране ЭР, позволяя продолжить синтез белка. [16] [20] Полипептидная цепь белка затем проходит через канал транслокатора в просвет ЭР. Сигнальная последовательность белка, обычно находящаяся в начале (N-конце) полипептидной цепи, играет двойную роль. Он не только нацеливает рибосому на ЭР, но также запускает открытие транслокатора. [16] Когда белок проходит через транслокатор, сигнальная последовательность остается прикрепленной, позволяя остальной части белка перемещаться по петле. Сигнальная пептидаза внутри ЭР затем отсекает сигнальную последовательность, которая впоследствии отбрасывается в липидный бислой мембраны ЭР и разрушается. [16] [20]

Наконец, как только последняя часть белка (С-конец) проходит через транслокатор, весь растворимый белок высвобождается в просвет ЭР, где он затем может сворачиваться и подвергаться дальнейшим модификациям или транспортироваться к конечному пункту назначения. [16] [20]

Механизмы трансмембранной интеграции белков
[ редактировать ]

Трансмембранные белки, которые частично интегрируются в мембрану ЭР, а не высвобождаются в просвет ЭР, имеют сложный процесс сборки. [16] [20] Начальные стадии аналогичны растворимым белкам: сигнальная последовательность запускает вставку в мембрану ЭР. Однако этот процесс прерывается последовательностью остановки-переноса — цепочкой гидрофобных аминокислот, — которая заставляет транслокатор останавливаться и высвобождать белок латерально в мембрану. [16] [20] Это приводит к образованию однопроходного трансмембранного белка, один конец которого находится внутри просвета ЭР, а другой - в цитозоле, и эта ориентация является постоянной. [16]

Некоторые трансмембранные белки используют внутренний сигнал (последовательность запуска-переноса) вместо сигнала на N-конце, и в отличие от исходной сигнальной последовательности эта последовательность начала-переноса не удаляется. [16] [20] Он начинает процесс переноса, который продолжается до тех пор, пока не встретится последовательность остановки-переноса, после чего обе последовательности закрепляются в мембране в виде альфа-спиральных сегментов. [16]

В более сложных белках, которые многократно пересекают мембрану, используются дополнительные пары последовательностей старт- и стоп-переноса для вплетения белка в мембрану способом, похожим на швейную машину. Каждая пара позволяет новому сегменту пересекать мембрану и дополняет структуру белка, обеспечивая его правильное внедрение с правильным расположением сегментов внутри и снаружи мембраны ЭР. [16]

Пероксисомы

[ редактировать ]
Обобщенное нацеливание белка на пероксисомальный матрикс

Пероксисомы содержат единственный бислой фосфолипидов, который окружает пероксисомальный матрикс, содержащий широкий спектр белков и ферментов, которые участвуют в анаболизме и катаболизме. Пероксисомы — это специализированные клеточные органеллы, которые осуществляют специфические окислительные реакции с использованием молекулярного кислорода. Их основная функция — удаление атомов водорода из органических молекул — процесс, в результате которого образуется перекись водорода ( Н 2 О 2 ). [37] [20] фермент каталаза В пероксисомах решающую роль играет . Он использует перекись водорода, образующуюся в предыдущей реакции, для окисления различных других веществ, включая фенолы , муравьиную кислоту , формальдегид и спирт. [37] [20] Это известно как «пероксидативная» реакция. [20]

Пероксисомы особенно важны в клетках печени и почек для детоксикации вредных веществ, попадающих в кровоток. Например, они ответственны за окисление около 25% этанола потребляемого нами в ацетальдегид . [37] Кроме того, каталаза в пероксисомах может расщеплять избыток перекиси водорода на воду и кислород, тем самым предотвращая потенциальный ущерб от накопления перекиси водорода. Н 2 О 2 . [37] [20] Поскольку он не содержит внутренней ДНК, такой как ДНК митохондрий или хлоропластов, все пероксисомальные белки кодируются ядерными генами. [38] На сегодняшний день известно два типа сигналов нацеливания на пероксисомы (PTS):

  1. Сигнал 1 нацеливания на пероксисому (PTS1) : C-концевой трипептид с консенсусной последовательностью (S/A/C)-(K/R/H)-(L/A). Наиболее распространенным PTS1 является серин - лизин - лейцин (SKL). [37] Первоначальные исследования, которые привели к открытию этого консенсуса, показали, что когда люцифераза светлячков экспрессировалась в культивируемых клетках насекомых, она была нацелена на пероксисому. Путем тестирования различных мутаций в гене, кодирующем экспрессируемую люциферазу , затем была определена консенсусная последовательность. [39] Также было обнаружено, что при добавлении этой С-концевой последовательности SKL к цитозольному белку она становится мишенью для транспорта в пероксисому. Большинство белков пероксисомального матрикса обладают сигналом типа PTS1.
  2. Сигнал нацеливания на пероксисому 2 (PTS2) : нонапептид, расположенный вблизи N-конца, с консенсусной последовательностью (R/K)-(L/V/I)-XXXXX-(H/Q)-(L/A/F) ( где X может быть любой аминокислотой). [37]

Существуют также белки, которые не обладают ни одним из этих сигналов. Их транспорт может быть основан на так называемом «контейнерном» механизме: такие белки связываются с белками матрикса, содержащими PTS1, и вместе с ними транслоцируются в пероксисомальный матрикс. [40]

В случае цитозольных белков, которые продуцируются с помощью С-концевой последовательности PTS1, их путь к пероксисомальному матриксу зависит от связывания с другим цитозольным белком, называемым pex5 (пероксин 5). [41] После связывания pex5 взаимодействует с пероксисомальным мембранным белком pex14, образуя комплекс. Когда белок pex5 со связанным грузом взаимодействует с мембранным белком pex14, комплекс индуцирует высвобождение целевого белка в матрикс. После высвобождения белка-груза в матрикс диссоциация pex5 от pex14 происходит посредством убиквитинилирования с помощью мембранного комплекса, включающего pex2, pex12 и pex10 , с последующим АТФ-зависимым удалением с участием цитозольного белкового комплекса pex1 и pex6 . [42] Цикл опосредованного pex5 импорта в пероксисомальный матрикс восстанавливается после АТФ-зависимого удаления убиквитина и может свободно связываться с другим белком, содержащим последовательность PTS1. [41] Белки, содержащие последовательность, нацеленную на PTS2, опосредуются другим цитозольным белком, но, как полагают, действуют по тому же механизму, что и белки, содержащие последовательность PTS1. [37]

Болезни

[ редактировать ]

Транспорт белков нарушен при следующих генетических заболеваниях:

У бактерий и архей

[ редактировать ]

Как обсуждалось выше (см. Транслокация белков ), большинство прокариотических мембраносвязанных и секреторных белков направляются к плазматической мембране либо путем котрансляции, который использует бактериальный SRP, либо путем посттрансляции, который требует SecA и SecB. На плазматической мембране эти два пути доставляют белки к транслокону SecYEG для транслокации. Бактерии могут иметь одну плазматическую мембрану ( грамположительные бактерии ) или внутреннюю мембрану плюс внешнюю мембрану, разделенную периплазмой ( грамотрицательные бактерии ). Помимо плазматической мембраны, у большинства прокариот отсутствуют мембраносвязанные органеллы, как у эукариот, но они могут собирать белки на различных типах включений, таких как газовые везикулы и запасающие гранулы.

Грамотрицательные бактерии

[ редактировать ]
Основная статья: Секреция грамотрицательных бактерий

У грамотрицательных бактерий белки могут быть включены в плазматическую мембрану, внешнюю мембрану, периплазму или секретироваться в окружающую среду. Системы секреции белков через внешнюю мембрану бактерий могут быть весьма сложными и играть ключевую роль в патогенезе. Эти системы можно охарактеризовать как секрецию типа I, секрецию типа II и т. д.

Грамположительные бактерии

[ редактировать ]
Основная статья: Секреция грамположительных бактерий

У большинства грамположительных бактерий определенные белки предназначены для экспорта через плазматическую мембрану и последующего ковалентного прикрепления к клеточной стенке бактерий. Специализированный фермент сортаза расщепляет целевой белок в характерном сайте узнавания рядом с С-концом белка, таком как мотив LPXTG (где X может быть любой аминокислотой), а затем переносит белок на клеточную стенку. Обнаружено несколько аналогичных систем, которые также имеют характерный мотив на внецитоплазматической стороне, С-концевой трансмембранный домен и кластер основных остатков на цитозольной стороне на крайнем С-конце белка. Система PEP-CTERM/ экзосортаза , обнаруженная у многих грамотрицательных бактерий, по-видимому, связана с продукцией внеклеточных полимерных веществ . Система PGF-CTERM/археосортаза А у архей связана с производством S-слоя . Система GlyGly-CTERM/ромбосортаза, обнаруженная у Shewanella, Vibrio и некоторых других родов, по-видимому, участвует в высвобождении протеаз, нуклеаз и других ферментов.

Биоинформатические инструменты

[ редактировать ]
  • Minimotif Miner — это биоинформатический инструмент, который ищет по запросам белковые последовательности известные мотивы последовательностей, нацеленных на белки.
  • Фобиус предсказывает сигнальные пептиды на основе предоставленной первичной последовательности.
  • SignalP предсказывает сайты расщепления сигнального пептида.
  • LOCtree предсказывает субклеточную локализацию белков.

Примечания

[ редактировать ]
  1. ^ В этой статье рассматривается нацеливание на белки у эукариот, если не указано иное.

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Jump up to: а б с д и ж Нельсон Д.Л. (январь 2017 г.). Ленингерские принципы биохимии . Кокс, Майкл М., Ленинджер, Альберт Л. (Седьмое изд.). Нью-Йорк, штат Нью-Йорк. ISBN  978-1-4641-2611-6 . OCLC   986827885 . {{cite book}}: CS1 maint: отсутствует местоположение издателя ( ссылка )
  2. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п д р с Лодиш, Берк, Кайзер, Кригер, Бретшер, Пло, Мартин, Яффе, Амон (2021). Молекулярно-клеточная биология (9-е изд.). Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: WH Freeman and Company. ISBN  978-1-319-20852-3 . {{cite book}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  3. ^ Jump up to: а б Блобель Г., Добберштейн Б. (декабрь 1975 г.). «Перенос белков через мембраны. I. Наличие протеолитически процессированных и непроцессированных легких цепей иммуноглобулина на мембраносвязанных рибосомах мышиной миеломы» . Журнал клеточной биологии . 67 (3): 835–51. дои : 10.1083/jcb.67.3.835 . ПМК   2111658 . ПМИД   811671 .
  4. ^ Jump up to: а б Шмидт В., Уиллноу Т.Э. (февраль 2016 г.). «Сортировка белков пошла не так: рецепторы домена VPS10P при сердечно-сосудистых и метаболических заболеваниях» . Атеросклероз . 245 : 194–9. doi : 10.1016/j.atherosclerosis.2015.11.027 . ПМИД   26724530 .
  5. ^ Го Ю, Сиркис Д.В., Шекман Р. (11 октября 2014 г.). «Сортировка белков в сети транс-Гольджи». Ежегодный обзор клеточной биологии и биологии развития . 30 (1): 169–206. doi : 10.1146/annurev-cellbio-100913-013012 . ПМИД   25150009 .
  6. ^ Jump up to: а б Лесли М. (август 2005 г.). «Трудности перевода: сигнальная гипотеза» . Журнал клеточной биологии . 170 (3): 338. doi : 10.1083/jcb1703fta1 . ПМК   2254867 . ПМИД   16167405 .
  7. ^ «Нобелевская премия по физиологии и медицине 1999 года» . NobelPrize.org . Проверено 19 сентября 2020 г.
  8. ^ Вандерс Р.Дж. (май 2004 г.). «Метаболические и молекулярные основы пероксисомальных расстройств: обзор». Американский журнал медицинской генетики. Часть А. 126А (4): 355–75. дои : 10.1002/ajmg.a.20661 . ПМИД   15098234 . S2CID   24025032 .
  9. ^ Морейра И.С., Фернандес П.А., Рамос М.Дж. (сентябрь 2007 г.). «Горячие точки - обзор аминокислотных остатков, определяющих интерфейс белок-белок» . Белки . 68 (4): 803–12. дои : 10.1002/прот.21396 . ПМИД   17546660 . S2CID   18578313 .
  10. ^ Сюзанна Р. Пфеффер ; Джеймс Э. Ротман (1 января 1987 г.). «Биосинтетический транспорт белков и сортировка эндоплазматической сетью и аппаратом Гольджи». Ежегодный обзор биохимии . 56 : 829–852. doi : 10.1146/ANNUREV.BI.56.070187.004145 . ISSN   0066-4154 . ПМИД   3304148 . Викиданные   Q39664981 .
  11. ^ Зоммер М.С., Шляйфф Э. (август 2014 г.). «Нацеливание и транспорт белков как необходимое следствие увеличения клеточной сложности» . Перспективы Колд-Спринг-Харбор в биологии . 6 (8): а016055. doi : 10.1101/cshperspect.a016055 . ПМК   4107987 . ПМИД   25085907 .
  12. ^ Уолтер П., Ибрагими И., Блобель Дж. (ноябрь 1981 г.). «Транслокация белков через эндоплазматический ретикулум. I. Белок распознавания сигнала (SRP) связывается с полисомами, собранными in vitro, синтезирующими секреторный белок» . Журнал клеточной биологии . 91 (2 ч. 1): 545–50. дои : 10.1083/jcb.91.2.545 . ПМК   2111968 . ПМИД   7309795 .
  13. ^ Вурхис Р.М., Хегде Р.С. (август 2016 г.). «К структурному пониманию котрансляционной транслокации белков». Современное мнение в области клеточной биологии . 41 : 91–9. дои : 10.1016/j.ceb.2016.04.009 . ПМИД   27155805 .
  14. ^ Ньяти Ю., Уилкинсон Б.М., Пул М.Р. (ноябрь 2013 г.). «Котрансляционное нацеливание и транслокация белков в эндоплазматический ретикулум» . Biochimica et Biophysical Acta (BBA) - Исследования молекулярных клеток . 1833 (11): 2392–402. дои : 10.1016/j.bbamcr.2013.02.021 . ПМИД   23481039 .
  15. ^ Мэндон Э.К., Труман С.Ф., Гилмор Р. (август 2009 г.). «Транслокация белков по каналам Sec61 и SecYEG» . Современное мнение в области клеточной биологии . 21 (4): 501–7. дои : 10.1016/j.ceb.2009.04.010 . ПМЦ   2916700 . ПМИД   19450960 .
  16. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п д р с т в v В х и С аа Альбертс (ноябрь 2018 г.). Основная клеточная биология (Пятое изд.). Нью-Йорк. ISBN  978-0-393-67953-3 . OCLC   1048014962 . {{cite book}}: CS1 maint: отсутствует местоположение издателя ( ссылка )
  17. ^ Каннер Э.М., Фридлендер М., Саймон С.М. (2003). «Котрансляционное нацеливание и транслокация аминоконца опсина через эндоплазматическую мембрану требует GTP, но не АТФ». Ж. Биол. хим. 278 (10): 7920–7926. дои : 10.1074/jbc.M207462200 . ПМИД   12486130 .
  18. ^ Каннер Э.М., Кляйн И.К. и др. (2002). «Аминоконец опсина транслоцируется «посттрансляционно» так же эффективно, как и котрансляционно». Биохимия 41 (24): 7707–7715. дои : 10.1021/bi0256882 . ПМИД   12056902 .
  19. ^ Рапопорт Т.А. (ноябрь 2007 г.). «Транлокация белков через эукариотический эндоплазматический ретикулум и бактериальные плазматические мембраны». Природа . 450 (7170): 663–9. Бибкод : 2007Natur.450..663R . дои : 10.1038/nature06384 . ПМИД   18046402 . S2CID   2497138 .
  20. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к л м н тот п д р с Лодиш Х., Берк А., Кайзер С., Кригер М., Бретшер А., Плох Х., Амон А., Мартин К. (2008). Молекулярно-клеточная биология (8-е изд.). Нью-Йорк: WH Freeman and Company. стр. 591–592. ISBN  978-1-4641-8339-3 .
  21. ^ Ланге А., Миллс Р.Э., Ланге С.Дж., Стюарт М., Девайн С.Е., Корбетт А.Х. (февраль 2007 г.). «Классические сигналы ядерной локализации: определение, функции и взаимодействие с импортином альфа» . Журнал биологической химии . 282 (8): 5101–5. дои : 10.1074/jbc.R600026200 . ПМК   4502416 . ПМИД   17170104 .
  22. ^ Кокс М., Дудна Дж., О'Доннел М. (2015). Принципы и практика молекулярной биологии (2-е изд.). Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: WH Freeman and Company. ISBN  978-1-319-15413-4 . {{cite book}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  23. ^ Jump up to: а б с д Арайсо Ю, Эндо Т (2022). «Структурный обзор транслоказы комплекса наружной мембраны митохондрий» . Биофиз Физикобиол . 19 : e190022. doi : 10.2142/biophysical.bppb-v19.0022 . ПМК   9260164 . ПМИД   35859989 .
  24. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к Иглсфилд Р., Токатлидис К. (2021). «Нацеливание и внедрение мембранных белков в митохондрии» . Границы клеточной биологии и биологии развития . 9 : 803205. doi : 10.3389/fcell.2021.803205 . ПМК   8740019 . PMID   35004695 – через Frontiers.
  25. ^ Jump up to: а б с д и ж г час я дж к л м н тот Видеманн Н., Пфаннер Н. (2017). «Митохондриальные механизмы для импорта и сборки белка» . Ежегодный обзор биохимии . 86 : 685–714. doi : 10.1146/annurev-biochem-060815-014352 . PMID   28301740 – через Ann Rev Biochem Online.
  26. ^ Jump up to: а б с Траскотт К., Пфаннер Н., Воос В. (2001). «Транспорт белков в митохондрии». Обзоры физиологии, биохимии и фармакологии . 143 : 81–136. дои : 10.1007/BFb0115593 . ISBN  978-3-540-41474-2 . ПМИД   11428265 . {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  27. ^ Кан Ю, Филден Л, Стояновски Д (2018). «Транспорт митохондриального белка в здоровье и болезни». Семинары по клеточной биологии и биологии развития . 76 : 142–153. дои : 10.1016/j.semcdb.2017.07.028 . ПМИД   28765093 . {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  28. ^ Jump up to: а б Лодиш, Харви; Берк, Арнольд; Кайзер, Крис А; Кригер, Монти; Бретшер, Энтони; Плоэ, Хидде; Амон, Анжелика; Скотт, Мэтью П. (2016). Молекулярно-клеточная биология (8-е изд.). Нью-Йорк, США: WH Freeman and Company. стр. 609–610. ISBN  978-1-4641-8339-3 .
  29. ^ Jump up to: а б с Пфаннер Н., Гейсслер А. (2001). «Универсальность механизма импорта митохондриального белка» . Nature Reviews Молекулярно-клеточная биология . 2 (5): 339–349. дои : 10.1038/35073006 . ПМИД   11331908 . S2CID   21011113 – через Nature.
  30. ^ Jump up to: а б Бауэр М., Хофманн С., Нойперт В., Бруннер М. (2000). «Транслокация белков в митохондрии: роль ТИМ-комплексов». Тенденции в клеточной биологии . 10 (1): 25–31. дои : 10.1016/S0962-8924(99)01684-0 . PMID   10603473 – через Elsevier Science Direct. {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  31. ^ Нельсон Д., Кокс М. (2017). Принципы биохимии (7-е изд.). Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: WH Freeman and Company. ISBN  978-1-4641-2611-6 .
  32. ^ Шварц Э., Зейтер Т., Гуард Б., Нойперт В. (1993). «Нацеливание цитохрома b2 в межмембранное пространство митохондрий: специфическое распознавание сортировочного сигнала». ЭМБО Дж . 12 – через PubMed. {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  33. ^ Курц М., Мартин Х., Рассов Дж., Пфаннер Н., Райан М. (2017). «Биогенез белков Тима пути импорта митохондриального носителя: механизмы дифференциального нацеливания и пересечение с основным путем импорта» . Молекулярная биология клетки . 10 (7): 2461–2474. дои : 10.1091/mbc.10.7.2461 . ПМК   25469 . ПМИД   10397776 . {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  34. ^ Jump up to: а б Солл Дж., Шляйфф Э. (2004). «Импорт белка в хлоропласты» . Nature Reviews Молекулярно-клеточная биология . 5 (3): 198–208. дои : 10.1038/nrm1333 . ПМИД   14991000 . S2CID   32453554 – через Nature.
  35. ^ Гутенсон М., Фан Э., Фрилингсдорф С., Ханнер П., Хоу Б., Хуст Б., Клосген Р. (2005). «Ток, Тик, Тат и др.: Структура и функции механизмов транспорта белков в хлоропластах» . Журнал физиологии растений . 163 (3): 333–347. дои : 10.1016/j.jplph.2005.11.009 . PMID   16386331 – через PubMed. {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  36. ^ Шарма М., Бенневиц Б., Клёсген Р.Б. (декабрь 2018 г.). «Скорее правило, чем исключение? Как оценить актуальность двойного нацеливания белков на митохондрии и хлоропласты». Исследования фотосинтеза . 138 (3): 335–343. Бибкод : 2018PhoRe.138..335S . дои : 10.1007/s11120-018-0543-7 . ПМИД   29946965 . S2CID   49427254 .
  37. ^ Jump up to: а б с д и ж г час Альбертс Б., Джонсон А., Льюис Дж. (2002). Молекулярная биология клетки (4-е изд.). Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Garland Science. {{cite book}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  38. ^ Энциклопедия биологической химии . Леннарц, Уильям Дж., Лейн, М. Дэниел (второе изд.). Лондон. 8 января 2013 г. ISBN.  978-0-12-378631-9 . OCLC   828743403 . {{cite book}}: CS1 maint: отсутствует местоположение издателя ( ссылка ) CS1 maint: другие ( ссылка )
  39. ^ Келлер Г., Гулд С., Делука М., Субрамани С. (1987). «Люцифераза светлячка нацелена на пероксисомы в клетках млекопитающих» . Труды Национальной академии наук . 84 (10): 3264–3268. Бибкод : 1987PNAS...84.3264K . дои : 10.1073/pnas.84.10.3264 . ПМК   304849 . ПМИД   3554235 . {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  40. ^ Сарий Н.А., Хатчинсон Дж.Д., Аль-Хеджадж М.Ю., Седельникова С., Бейкер П., Хеттема Э.Х. (февраль 2017 г.). «Совместный импорт Pnc1 в пероксисомы основан на гомодимеризации Gpd1» . Научные отчеты . 7 (1): 42579. Бибкод : 2017NatSR...742579S . дои : 10.1038/srep42579 . ПМЦ   5314374 . ПМИД   28209961 .
  41. ^ Jump up to: а б Бейкер А., Хогг Т., Уорринер С. (2016). «Импорт пероксисомального белка: сложный путь» . Труды Биохимического общества . 44 (3): 783–789. дои : 10.1042/BST20160036 . ПМЦ   4900764 . ПМИД   27284042 . {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  42. ^ Гулд С., Коллинз С. (2002). «Импорт пероксисомальных белков: действительно ли это так сложно?» . Природа преподобный мол. Клеточная Биол . 3 (5): 382–389. дои : 10.1038/nrm807 . ПМИД   11988772 . S2CID   2522184 .
  43. ^ Маклауд Д.А., Ринн Х., Кувахара Т., Золин А., Ди Паоло Г., Маккейб Б.Д. и др. (февраль 2013 г.). «RAB7L1 взаимодействует с LRRK2, изменяя сортировку внутринейрональных белков и повышая риск болезни Паркинсона» . Нейрон . 77 (3): 425–39. дои : 10.1016/j.neuron.2012.11.033 . ПМЦ   3646583 . ПМИД   23395371 .
[ редактировать ]
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Protein_targeting&oldid=1214468047"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 4761248b29a76bc6614359be66d6e786__1710809280
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/47/86/4761248b29a76bc6614359be66d6e786.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Protein targeting - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)