✖


Jump to content

Убиквитинлигаза

(Перенаправлено из убиквитин-белковых лигаз )
Убиквитин - протеинлигаза
Убиквитинлигаза E3 Cbl (синий) в комплексе с E2 (голубой) и пептидом-субстратом (зеленый). Запись PDB 4a4c [ 1 ]
Идентификаторы
Номер ЕС. 2.3.2.27
Номер CAS. 74812-49-0
Базы данных
ИнтЭнк вид IntEnz
БРЕНДА БРЕНДА запись
Экспаси Просмотр NiceZyme
КЕГГ КЕГГ запись
МетаЦик метаболический путь
ПРЯМОЙ профиль
PDB Структуры RCSB PDB PDBe PDBsum
Генная онтология АмиГО / QuickGO
Поиск
PMCarticles
PubMedarticles
NCBIproteins
Убиквитинлигаза
Идентификаторы
Символ Убиквитинлигаза
Суперсемейство OPM 471
белок OPM 4v6p
Мембраном 240

Убиквитинлигаза белок (также называемая убиквитинлигазой E3 ) представляет собой , E2 который рекрутирует убиквитин-конъюгирующий фермент , который загружен убиквитином , распознает белковый субстрат и помогает или непосредственно катализирует перенос убиквитина от E2 к белковому субстрату. . Проще говоря, лигаза посредством некоторого механизма обеспечивает перемещение убиквитина от носителя убиквитина к другому белку (субстрату). Убиквитин изопептидной , достигнув места назначения, в конечном итоге присоединяется связью к остатку лизина , который является частью целевого белка. [ 2 ] Лигазы Е3 взаимодействуют как с целевым белком, так и с ферментом Е2 и, таким образом, придают Е2 субстратную специфичность. Обычно E3 полиубиквитинируют свой субстрат с помощью Lys48-связанных цепей убиквитина, нацеливаясь на субстрат для разрушения протеасомой . Однако возможны многие другие типы связей, которые изменяют активность, взаимодействия или локализацию белка. Убиквитинирование лигазами E3 регулирует различные области, такие как транспорт клеток, репарация ДНК и передача сигналов, и имеет огромное значение в клеточной биологии. Лигазы Е3 также играют ключевую роль в контроле клеточного цикла, опосредуя деградацию циклинов , а также белков- ингибиторов циклин-зависимых киназ . [ 3 ] Геном человека кодирует более 600 предполагаемых лигаз E3, что обеспечивает огромное разнообразие субстратов. [ 4 ]

Система убиквитинирования

[ редактировать ]
Принципиальная схема системы убиквитилирования.

Убиквитинлигаза называется Е3 и действует совместно с ферментом, активирующим убиквитин Е1 , и ферментом, конъюгирующим убиквитин Е2 . Существует один основной фермент E1, общий для всех убиквитинлигаз, который использует АТФ для активации убиквитина для конъюгации и переносит его на фермент E2. Фермент Е2 взаимодействует со специфическим партнером Е3 и переносит убиквитин на целевой белок . Е3, который может представлять собой мультибелковый комплекс , в целом отвечает за нацеливание убиквитинирования на специфические белки- субстраты . [ нужна ссылка ]

Реакция убиквитилирования протекает в три или четыре стадии в зависимости от механизма действия убиквитинлигазы Е3. E1 На консервативном первом этапе остаток цистеина атакует АТФ-активированный С-концевой глицин на убиквитине, что приводит к образованию тиоэфирного комплекса Ub-S-E1. Энергия гидролиза АТФ и дифосфата способствует образованию этого реакционноспособного тиоэфира, а последующие этапы термонейтральны. Затем происходит реакция транстиолирования, в которой остаток цистеина Е2 атакует и заменяет Е1. Лигазы типа E3 домена HECT будут иметь еще одну реакцию транстиолирования для переноса молекулы убиквитина на E3, тогда как гораздо более распространенные лигазы типа домена RING Finger переносят убиквитин непосредственно от E2 к субстрату. [ 5 ] Последним этапом первого события убиквитилирования является атака аминогруппы лизина целевого белка, которая удаляет цистеин и образует стабильную изопептидную связь. [ 6 ] Заметным исключением из этого правила является белок p21 , который, по-видимому, убиквитилируется с использованием своего N-концевого амина, образуя таким образом пептидную связь с убиквитином. [ 7 ]

Семейства убиквитинлигаз

[ редактировать ]

По оценкам, у людей имеется 500–1000 лигаз Е3, которые придают субстратную специфичность Е1 и Е2. [ 8 ] Лигазы Е3 подразделяются на четыре семейства: HECT, RING-finger, U-box и PHD-finger. [ 8 ] Лигазы E3 RING-finger являются самым большим семейством и содержат такие лигазы, как комплекс, способствующий анафазе (APC) и комплекс SCF ( белковый комплекс Skp1 - Cullin -F-box). Комплексы SCF состоят из четырех белков: Rbx1, Cul1, Skp1, которые инвариантны среди комплексов SCF, и белка F-box, который варьируется. Идентифицировано около 70 белков F-бокса человека. [ 9 ] Белки F-box содержат F-box, который связывает остальную часть комплекса SCF, и домен, связывающий субстрат, который придает E3 его субстратную специфичность. [ 8 ]

Моно- и полиубиквитилирование

[ редактировать ]
Убиквитин с остатками лизина (красный), N-концевым метионином (синий) и С-концевым глицином (желтый). [ 10 ]

Передача сигналов убиквитина зависит от разнообразия тегов убиквитина, обеспечивающих специфичность его сообщения. Белок может быть помечен одной молекулой убиквитина (моноубиквитилирование) или множеством различных цепей молекул убиквитина (полиубиквитилирование). [ 11 ] Убиквитинлигазы E3 катализируют события полиубиквитинирования во многом так же, как и механизм одиночного убиквитинирования, используя вместо этого остаток лизина из молекулы убиквитина, прикрепленный в настоящее время к белку-субстрату, для атаки С-конца новой молекулы убиквитина. [ 6 ] [ 11 ] Например, обычная метка 4-убиквитина, связанная через лизин в положении 48 (K48), привлекает меченый белок к протеасоме и последующей деградации. [ 11 ] Однако все семь остатков лизина убиквитина (К6, К11, К27, К29, К33, К48 и К63), а также N-концевой метионин используются в цепях in vivo. [ 11 ]

Моноубиквитинирование связано с путями эндоцитоза мембранных белков . Например, фосфорилирование тирозина в положении 1045 в рецепторе эпидермального фактора роста (EGFR) может рекрутировать лигазу E3 c-Cbl типа RING через домен SH2 . C-Cbl моноубиквитилирует EGFR, сигнализируя о его интернализации и транспортировке в лизосому. [ 12 ]

Моноубиквитинирование также может регулировать локализацию цитозольного белка. Например, лигаза E3 MDM2 убиквитилирует p53 либо для деградации (полиубиквитиновая цепь K48), либо для ядерного экспорта (монобиквитилирование). Эти события происходят в зависимости от концентрации, что позволяет предположить, что модуляция концентрации лигазы E3 является стратегией клеточной регуляции для контроля гомеостаза и локализации белка. [ 13 ]

Распознавание субстрата

[ редактировать ]

Убиквитинлигазы являются последним и потенциально наиболее важным фактором, определяющим специфичность при убиквитинировании белков субстратную . [ 14 ] Лигазы должны одновременно отличать свой белковый субстрат от тысяч других белков в клетке , а также от других (неактивных по убиквитинированию) форм того же белка. Этого можно достичь с помощью различных механизмов, большинство из которых включают распознавание дегронов : специфических коротких аминокислотных последовательностей или химических мотивов на субстрате. [ 15 ]

N-дегроны

[ редактировать ]

Протеолитическое расщепление может привести к обнажению остатков на N-конце белка. Согласно правилу N-конца , разные N-концевые аминокислоты (или N-дегроны) распознаются в разной степени соответствующей убиквитинлигазой (N-рекогнин), что влияет на период полураспада белка. [ 16 ] Например, положительно заряженные ( Arg , Lys , His ) и объемистые гидрофобные аминокислоты ( Phe , Trp , Tyr , Leu , Ile ) распознаются преимущественно и, таким образом, считаются дестабилизирующими дегронами , поскольку они способствуют более быстрой деградации их белков. [ 17 ]

Фосфодегроны

[ редактировать ]
Фосфорилированный дегрон (зеленый) стабилизируется за счет водородных связей (желтый) между атомами кислорода его фосфата (красный) и боковыми цепями SCF. FBW7 убиквитинлигаза (синий). Соответствующая часть убиквитинлигазы показана серым цветом. Запись PDB 2овр [ 18 ]

Дегрон может быть преобразован в активную форму путем посттрансляционной модификации. [ 19 ] такое как фосфорилирование остатка тирозина , серина или треонина . [ 20 ] В этом случае убиквитинлигаза распознает исключительно фосфорилированную версию субстрата благодаря стабилизации внутри сайта связывания . Например, FBW7 , F-box блок распознавания подложек SCF. FBW7 убиквитинлигаза стабилизирует фосфорилированный субстрат путем связывания водородом его остатков аргинина с фосфатом, как показано на рисунке справа. В отсутствие фосфата остатки FBW7 отталкивают субстрат. [ 18 ]

Дегроны, зависимые от кислорода и малых молекул

[ редактировать ]

Присутствие кислорода или других небольших молекул может влиять на распознавание дегрона. [ 18 ] индуцируемый гипоксией Например, белок фон Хиппель-Линдау (VHL) (часть распознавания субстрата специфической лигазы E3) распознает альфа (HIF-α) только в нормальных условиях кислорода, когда его пролин гидроксилирован фактор . при гипоксии С другой стороны, HIF-a не гидроксилируется, избегает убиквитинирования и, таким образом, действует в клетке в более высоких концентрациях, которые могут инициировать транскрипционный ответ на гипоксию. [ 21 ] Другим примером низкомолекулярного контроля деградации белка является фитогормон ауксин в растениях. [ 22 ] Ауксин связывается с TIR1 (домен распознавания субстрата SCF). МДП1 убиквитинлигаза), повышая сродство TIR1 к его субстратам ( репрессоры транскрипции : Aux/IAA) и способствуя их деградации.

Неправильно свернутый и сахар разлагается

[ редактировать ]

Помимо распознавания аминокислот, убиквитинлигазы могут также обнаруживать необычные особенности субстратов, которые служат сигналами к их разрушению. [ 14 ] Например, San1 ( антагонист Sir 1 ), контроль качества ядерного белка у дрожжей , имеет неупорядоченный домен связывания субстрата , что позволяет ему связываться с гидрофобными доменами неправильно свернутых белков . [ 14 ] С другой стороны, неправильно свернутые или избыточные несобранные гликопротеины пути ERAD распознаются Fbs1 и Fbs2, белками F-бокса млекопитающих лигазы E3 SCF. Фбс1 и СКФ Фбс2 . [ 23 ] Эти домены распознавания имеют небольшие гидрофобные карманы, позволяющие им связывать высокое содержание маннозы , содержащие гликаны .

Структурные мотивы

[ редактировать ]

Помимо линейных дегронов , лигаза Е3 в некоторых случаях может также распознавать структурные мотивы на субстрате. [ 14 ] В этом случае 3D-мотив может позволить субстрату напрямую связать свою биохимическую функцию с убиквитинированием . Эту связь можно продемонстрировать на примере белка TRF1 человека (регулятор длины теломер ), который распознается соответствующей ему лигазой E3 ( FBXO4 ) посредством межмолекулярного взаимодействия бета-листов . TRF1 не может быть убиквинизирован, пока он связан с теломерами, вероятно, потому, что тот же домен TRF1, который связывается с его лигазой E3, также связывается с теломерами. [ 14 ]

Актуальность заболевания

[ редактировать ]

Убиквитинлигазы E3 регулируют гомеостаз, клеточный цикл и пути восстановления ДНК, и в результате ряд этих белков участвует в различных видах рака, включая известные MDM2, BRCA1 и опухолевый супрессор фон Хиппеля-Линдау . [ 24 ] Например, мутация MDM2 обнаружена при раке желудка . [ 25 ] почечно-клеточный рак , [ 26 ] и рак печени [ 27 ] (среди прочего) для дерегуляции концентрации MDM2 за счет увеличения сродства его промотора к фактору транскрипции Sp1 , вызывая усиление транскрипции мРНК MDM2. [ 25 ] Доступно несколько экспериментальных методов, основанных на протеомике, для идентификации пар E3 убиквитинлигаза-субстрат. [ 28 ] такие как идентификация биотина, зависящая от близости (BioID), захват субстрата убиквитинлигазой и тандемные объекты, связывающие убиквитин (TUBE).

Примеры

[ редактировать ]
  • Домен A RING ( действительно . интересный E3 новый ген ) связывает конъюгазу E2 и, возможно, опосредует ферментативную активность в комплексе E2- [ 29 ]
  • Домен F-box (как в комплексе SCF) связывает убиквитинированный субстрат. (например, Cdc 4, который связывает целевой белок Sic1 ; Grr1, который связывает Cln). [ 30 ]
  • Домен HECT , который участвует в переносе убиквитина с E2 на субстрат.

Отдельные убиквитинлигазы E3

[ редактировать ]

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Доу Х., Бьютоу Л., Хок А., Сиббет Г.Дж., Вусден К.Х., Хуанг Д.Т. (январь 2012 г.). «Структурная основа аутоингибирования и зависимой от фосфорилирования активации c-Cbl» . Структурная и молекулярная биология природы . 19 (2): 184–92. дои : 10.1038/nsmb.2231 . ПМЦ   3880865 . ПМИД   22266821 .
  2. ^ Гершко А, Цехановер А (1998). «Убиквитиновая система». Ежегодный обзор биохимии . 67 : 425–79. doi : 10.1146/annurev.biochem.67.1.425 . ПМИД   9759494 .
  3. ^ Тейшейра Л.К., Рид С.И. (2013). «Убиквитинлигазы и контроль клеточного цикла». Ежегодный обзор биохимии . 82 : 387–414. doi : 10.1146/annurev-biochem-060410-105307 . ПМИД   23495935 .
  4. ^ Ли В., Бенгтсон М.Х., Ульбрих А., Мацуда А., Редди В.А., Орт А., Чанда С.К., Баталов С., Жоазейро К.А. (январь 2008 г.). «Общегеномная и функциональная аннотация убиквитинлигазы E3 человека идентифицирует MULAN, митохондриальный E3, который регулирует динамику органелл и передачу сигналов» . ПЛОС ОДИН . 3 (1): e1487. Бибкод : 2008PLoSO...3.1487L . дои : 10.1371/journal.pone.0001487 . ПМК   2198940 . ПМИД   18213395 .
  5. ^ Мецгер М.Б., Христова В.А., Вайсман А.М. (февраль 2012 г.). «Краткий обзор семейств убиквитинлигаз E3 HECT и RING Finger» . Журнал клеточной науки . 125 (Часть 3): 531–7. дои : 10.1242/jcs.091777 . ПМЦ   3381717 . ПМИД   22389392 .
  6. ^ Jump up to: а б Уолш, Кристофер (2006). Посттрансляционная модификация белков: расширение запасов природы . Энглвуд, Колорадо: Робертс. ISBN  978-0-9747077-3-0 . [ нужна страница ]
  7. ^ Блум Дж., Амадор В., Бартолини Ф., ДеМартино Дж., Пагано М. (октябрь 2003 г.). «Протеасомная деградация р21 посредством N-концевого убиквитинилирования» . Клетка . 115 (1): 71–82. дои : 10.1016/S0092-8674(03)00755-4 . ПМИД   14532004 .
  8. ^ Jump up to: а б с Накаяма К.И., Накаяма К. (май 2006 г.). «Убиквитинлигазы: контроль клеточного цикла и рак». Обзоры природы. Рак . 6 (5): 369–81. дои : 10.1038/nrc1881 . ПМИД   16633365 . S2CID   19594293 .
  9. ^ Джин Дж., Кардозо Т., Ловеринг Р.С., Элледж С.Дж., Пагано М., Харпер Дж.В. (ноябрь 2004 г.). «Систематический анализ и номенклатура белков F-бокса млекопитающих» . Гены и развитие . 18 (21): 2573–80. дои : 10.1101/gad.1255304 . ПМК   525538 . ПМИД   15520277 .
  10. ^ Виджай-Кумар С., Багг CE, Кук WJ (апрель 1987 г.). «Структура убиквитина, уточненная при разрешении 1,8 А». Журнал молекулярной биологии . 194 (3): 531–44. дои : 10.1016/0022-2836(87)90679-6 . ПМИД   3041007 .
  11. ^ Jump up to: а б с д Берендс С., Харпер Дж.В. (май 2011 г.). «Построение и расшифровка нетрадиционных цепей убиквитина». Структурная и молекулярная биология природы . 18 (5): 520–8. дои : 10.1038/nsmb.2066 . ПМИД   21540891 . S2CID   19237120 .
  12. ^ Бонифачино Дж.С., Трауб Л.М. (2003). «Сигналы сортировки трансмембранных белков на эндосомы и лизосомы». Ежегодный обзор биохимии . 72 : 395–447. doi : 10.1146/annurev.biochem.72.121801.161800 . ПМИД   12651740 .
  13. ^ Ли М., Брукс К.Л., Ву-Баер Ф., Чен Д., Баер Р., Гу В. (декабрь 2003 г.). «Моно- и полиубиквитинирование: дифференциальный контроль судьбы p53 с помощью Mdm2». Наука . 302 (5652): 1972–5. Бибкод : 2003Sci...302.1972L . дои : 10.1126/science.1091362 . ПМИД   14671306 . S2CID   43124248 .
  14. ^ Jump up to: а б с д и Чжэн Н., Шабек Н. (июнь 2017 г.). «Убиквитин-лигазы: структура, функции и регуляция». Ежегодный обзор биохимии . 86 (1): 129–157. doi : 10.1146/annurev-biochem-060815-014922 . ПМИД   28375744 .
  15. ^ Равид Т., Хохштрассер М. (сентябрь 2008 г.). «Разнообразие сигналов деградации в системе убиквитин-протеасома» . Nature Reviews Молекулярно-клеточная биология . 9 (9): 679–90. дои : 10.1038/nrm2468 . ПМК   2606094 . ПМИД   18698327 .
  16. ^ Шрирам С.М., Ким БАЙ, Квон Ю.Т. (октябрь 2011 г.). «Путь правила N-конца: новые функции и молекулярные принципы распознавания субстрата». Nature Reviews Молекулярно-клеточная биология . 12 (11): 735–47. дои : 10.1038/nrm3217 . ПМИД   22016057 . S2CID   10555455 .
  17. ^ Тасаки Т., Шрирам С.М., Пак К.С., Квон Ю.Т. (2012). «Путь правила N-конца» . Ежегодный обзор биохимии . 81 : 261–89. doi : 10.1146/annurev-biochem-051710-093308 . ПМЦ   3610525 . ПМИД   22524314 .
  18. ^ Jump up to: а б с Лукас X, Чулли А (июнь 2017 г.). «Распознавание дегронов субстрата с помощью убиквитинлигазы E3 и модуляция с помощью стратегий мимикрии малых молекул» (PDF) . Современное мнение в области структурной биологии . 44 : 101–110. дои : 10.1016/j.sbi.2016.12.015 . ПМИД   28130986 .
  19. ^ Херхаус Л., Дикич I (сентябрь 2015 г.). «Расширение кода убиквитина посредством посттрансляционной модификации» . Отчеты ЭМБО . 16 (9): 1071–83. дои : 10.15252/эмбр.201540891 . ПМЦ   4576978 . ПМИД   26268526 .
  20. ^ Рейнхардт ХК, Яффе МБ (сентябрь 2013 г.). «Фосфо-Ser/Thr-связывающие домены: управление клеточным циклом и реакция на повреждение ДНК». Nature Reviews Молекулярно-клеточная биология . 14 (9): 563–80. дои : 10.1038/nrm3640 . ПМИД   23969844 . S2CID   149598 .
  21. ^ Яаккола П., Моул Д.Р., Тиан Ю.М., Уилсон М.И., Гилберт Дж., Гаскелл С.Дж., фон Кригсхайм А., Хебестрайт Х.Ф., Мукерджи М., Шофилд К.Дж., Максвелл П.Х., Пью К.В., Рэтклифф П.Дж. (апрель 2001 г.). «Нацеливание HIF-альфа на комплекс убиквитилирования фон Хиппель-Линдау посредством O2-регулируемого пролилгидроксилирования» . Наука . 292 (5516): 468–72. Бибкод : 2001Sci...292..468J . дои : 10.1126/science.1059796 . ПМИД   11292861 . S2CID   20914281 .
  22. ^ Шабек Н., Чжэн Н. (апрель 2014 г.). «Растительные убиквитинлигазы как сигнальные центры». Структурная и молекулярная биология природы . 21 (4): 293–6. дои : 10.1038/nsmb.2804 . ПМИД   24699076 . S2CID   41227590 .
  23. ^ Ёсида Ю., Мизушима Т., Танака К. (19 февраля 2019 г.). «Убиквитин-лигазы, распознающие сахар: механизмы действия и физиология» . Границы в физиологии . 10 :104. дои : 10.3389/fphys.2019.00104 . ПМК   6389600 . ПМИД   30837888 .
  24. ^ Липковиц С., Вайсман А.М. (август 2011 г.). «КОЛЬЦА добра и зла: убиквитинлигазы RING-пальцев на перекрестке подавления опухолей и онкогенеза» . Обзоры природы. Рак . 11 (9): 629–43. дои : 10.1038/nrc3120 . ПМЦ   3542975 . ПМИД   21863050 .
  25. ^ Jump up to: а б Хоу Ю.К., Дэн Цзюй (январь 2015 г.). «Роль убиквитинлигазы Е3 при раке желудка» . Всемирный журнал гастроэнтерологии . 21 (3): 786–93. дои : 10.3748/wjg.v21.i3.786 . ПМЦ   4299330 . ПМИД   25624711 .
  26. ^ де Мартино М., Таус К., Вессели И.С., Лукка И., Хофбауэр С.Л., Хайтель А., Шариат С.Ф., Клатте Т. (февраль 2015 г.). «Полиморфизм мышиного гена T309G с двойной минутой 2 является независимым прогностическим фактором для пациентов с почечно-клеточной карциномой». ДНК и клеточная биология . 34 (2): 107–12. дои : 10.1089/dna.2014.2653 . ПМИД   25415135 .
  27. ^ Тан Т, Сун Икс, Ян З, Хуан Л, Ван В, Тан Х (ноябрь 2014 г.). «Связь между мышиным полиморфизмом T309G двойной минуты 2 и риском рака печени». Биология опухолей . 35 (11): 11353–7. дои : 10.1007/s13277-014-2432-9 . ПМИД   25119589 . S2CID   16385927 .
  28. ^ Рейнер С.Л., Морш М., Моллой М.П., ​​Ши Б., Чунг Р., Ли А. (июль 2019 г.). «Использование протеомики для идентификации пар убиквитинлигаза-субстрат: как новые методы могут раскрыть терапевтические цели для нейродегенеративных заболеваний» . Клеточные и молекулярные науки о жизни . 76 (13): 2499–2510. дои : 10.1007/s00018-019-03082-9 . ПМЦ   11105231 . ПМИД   30919022 . S2CID   85527795 .
  29. ^ Ардли ХК, Робинсон П.А. (2005). «Убиквитинлигазы Е3». Очерки по биохимии . 41 : 15–30. дои : 10.1042/EB0410015 . ПМИД   16250895 .
  30. ^ Бай С., Сен П., Хофманн К., Ма Л., Гебл М., Харпер Дж.В., Элледж С.Дж. (июль 1996 г.). «SKP1 соединяет регуляторы клеточного цикла с механизмом протеолиза убиквитина посредством нового мотива, F-box» . Клетка . 86 (2): 263–74. дои : 10.1016/S0092-8674(00)80098-7 . ПМИД   8706131 .
[ редактировать ]
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Ubiquitin_ligase&oldid=1243830269"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: c05270ee11cfca74fbef0bac410ec5d2__1725374460
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/c0/d2/c05270ee11cfca74fbef0bac410ec5d2.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Ubiquitin ligase - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)